CC BY
12
Всероссийская научно-практическая конференция с международным участием 168 «Комплексные проблемы сердечно-сосудистых заболеваний» (21-22 июня 2021 г.)
БИОДЕГРАДИРУЕМЫЕ СОСУДИСТЫЕ ПРОТЕЗЫ МАЛОГО ДИАМЕТРА, МОДИФИЦИРОВАННЫЕ RGD-ПЕПТИДАМИ Сенокосова Е.А., Кривкина Е.О., Матвеева В.Г., Великанова Е.А., Глушкова Т.В.,
Акентьева Т.Н., Антонова Л.В.
Федеральное государственное бюджетное научное учреждение «Научно-исследовательский институт комплексных проблем сердечно-сосудистых заболеваний», Кемерово, Российская Федерация
Введение. В настоящее время не создан биоде-градируемый сосудистый протез малого диаметра, способный максимально соответствовать предъявляемым требованиям по био-, гемосовместимости и атромбогенности. Один из перспективных путей достижения высоких показателей качественного изделия - модифицирование внутренней поверхности протеза RGD-пептидами. Данные пептиды, будучи сайтами клеточной адгезии естественного внеклеточного матрикса, позволяют создать био-миметичный функционально активный слой, привлекающий и удерживающий именно эндотелиаль-ные клетки, стимулируя быструю эндотелизацию протеза. Однако вопрос выбора наиболее тропного RGD-пептида для эндотелиальных клеток открыт.
Цель. Изучить сосудистые протезы на основе полигидроксибутирата/валерата (ПГБВ) и полика-пролактона (ПКЛ), модифицированные различными RGD-пептидами.
Материалы и методы. Сосудистые ПГБВ/ ПКЛ-протезы изготовлены методом электроспиннинга. Модифицирование внутренней поверхности проводили одним из линкеров - 1,6-гексаметиленди-амином (6 (СН2)) или 4,7,10-триокса-1,13-тридекан-диамином (10 (СН2)) в сочетании с одним из пептидов - RGDK или AhRGD, или c[RGDFK]. После определяли количество прикрепленных линкеров, изучали структуру поверхности, физико-механические характеристики, гемосовместимость, проводили культуральные исследования с использованием эндотелиальных клеток. Группа контроля - ПГБВ/ ПКЛ-протезы без RGD. Сосудистые протезы с и без RGD были имплантированы (п = 84) крысам линии Wistar на 1 и 3 месяца. Эксплантированные протезы изучали гистологическими и иммунофлуоресценты-ми методами.
Результаты. Установлено, что при использовании 6 (СН2)-линкера максимальное количество введенных аминогрупп было достигнуто через 60
минут обработки поверхности (8,9^10-9 моль/см2), а при 10 (СН2)-линкера - через 30 минут (8,6 х 10-9 моль/см2). Структура поверхности осталась неизменной. Модуль Юнга модифицированных протезов находился на уровне ~ 20 МРа. Относительное удлинение протезов с 10 (СН2)-линкером находилось в пределах 100% и не отличалось от протезов без RGD. Модифицирование протезов с 6 (СН2)-ли-кером значимо повлияло на физико-механические параметры изделия. Степень гемолиза эритроцитов после контакта со всеми модифицированными поверхностями не превысила 1%. На поверхности протезов с 10 (СН2)-линкером выявлены тромбоциты II и III типа, с 6 (СН2)-ликером - III и IV типа. Максимальное количество колониеформирующих эндоте-лиальных клеток (более 2500 кл/мм2) обнаружено на 10 (СН2)+c[RGDFK]-поверхности. Согласно гистологическому анализу 6 (СН2)+AhRGD-, 6 (СН2)+ c[RGDFK]-, 10 (СН2)+RGDK-, 10 (СН2)+AhRGD-, 10 (СН2)+c[RGDFK]-протезы были проходимы в 100% случаев через 3 месяца имплантации. Более высокая интенсивность клеточного заселения отмечена в стенках 10 (СН2)+c[RGDFK]-проте-зов. Кальцификация стенок 10 (СН2)+RGDK- и 10 (СН2)+c[RGDFK]-протезов отмечена в 33,3% случаев только через 3 месяца. Спустя 3 месяца на внутренней поверхности 10 (СН2)+ RGDK- и 10 (СН2)+c[RGDFK]-протезов зарегистрирована высокая экспрессия СD31+ и непрерывный монослой клеток.
Заключение. Вид RGD-пептида и сопряженный с ним линкер в совокупности со временем модифицирования влияют на качество и функциональную активность конечного изделия. Модифицирование RGD-пептидами обеспечивает привлечение и удержание циркулирующих в кровотоке прогениторных и близлежащих эндотелиальные клеток к внутренней поверхности биодеградируемого сосудистого протеза с дальнейшей дифференцировкой.
