Биоаналоги ритуксимаба: программа изучения сравнительной специфической активности и постановка метода оценки комплемент-зависимой цитотоксичности Текст научной статьи по специальности «Фундаментальная медицина»

РШШ1ШМ16120161 37

Е.А. ТУТЕР, Федеральное государственное бюджетное учреждение «Научный центр экспертизы средств медицинского применения» Минздрава России, Г.Н. ПОРОШИН, ООО «Международный биотехнологический центр «Генериум», пос. Вольгинский, Владимирская область, Петушинский район, М.А. ДРАНИЦЫНА, А.Н. ВАСИЛЬЕВ, д.биол.н., Р.Р. НИЯЗОВ, к.м.н., Федеральное государственное бюджетное учреждение «Научный центр экспертизы средств медицинского применения» Минздрава России

10.21518/1561-5936-2016-6-37-42

Биоаналоги ритуксимаба:

V V

ПРОГРАММА ИЗУЧЕНИЯ СРАВНИТЕЛЬНОЙ СПЕЦИФИЧЕСКОМ АКТИВНОСТИ И ПОСТАНОВКА МЕТОДА ОЦЕНКИ КОМПЛЕМЕНТ-ЗАВИСИМОЙ ЦИТОТОКСИЧНОСТИ

В статье представлены основные особенности постановки и обработки результатов изучения комплемент-зависимой цитотоксично-сти на примере ритуксимаба, а также предложена возможная программа подтверждения сопоставимости по специфической активности биоаналогов ритуксимаба.

• ВВЕДЕНИЕ

Одним из ключевых параметров биоаналогичности является сопоставимая специфическая активность. Изучение биологической активности позволяет охарактеризовать зависимость между физико-химическими и биологическими свойствами исследуемого биоаналога, определить характер различий, найденных на предыдущих этапах оценки биоаналогичности, оценить структурно-функциональную зависимость и начать обоснование клинической незначимости данных различий, которое будет продолжено на этапе доклинических исследований in vivo и клинических исследований [1, 2]. Отметим, что изучение специфической активности in vitro на доклиническом этапе разработки биоаналога представляет собой то же самое, что и сопоставление биологической активности на этапе подтверждения сопоставимости по качеству.

Нередко разработчики биоаналогов, в т. ч. моноклональных антител (мАТ), сталкиваются с проблемами, связанными с определением объема необходимых исследований, а также организацией их проведения и статистической обработкой результатов. В настоящей статье представлены основные особенности постановки и обработки результатов

Ключевые слова:

биоаналоги ритуксимаба, подтверждение биоаналогичности, доклинические исследования, специфическая активность, комплемент-зависимая цитотоксичность

изучения комплемент-зависимой цито-токсичности (КЗЦ) на примере ритуксимаба, а также представлена возможная программа подтверждения сопоста-

Keywords: biosimilars of rituximab, validation of biosimilarity, preclinical studies, specific activity, complement-dependent cytotoxicity

The article tells about the key specific features of the definition and processing of the results of the study of complement-dependent cytotoxicity on the example of rituximab; a biosimilarity validation scheme based on the specific activity of rituximab biosimilars is suggested.

E.A. TUTER, Scientific center for expertise of medicinal products, Russia's Ministry of Health, G.N. POROSHIN, Generium International Biotechnology Center OOO, Volginsky village, Vladimir region, Petushki district, M.A. DRANIT-SYNA, AN. VASILYEV, D. Biol., R.R. NIYAZOV, PhD in Medicine, Scientific center for expertise of medicinal products, Russia's Ministry of Health. BIOSIMILARS OF RITUXIMAB: PROGRAM COMPARATIVE STUDY OF SPECIFIC ACTIVITY AND PRODUCTION METHOD OF COMPLEMENT-DEPENDENT CYTOTOXICITY EVALUATION.

вимости по специфической активности биоаналогов ритуксимаба. Одним из наиболее востребованных мАТ в настоящее время является ритук-симаб, представляющий собой химерное мАТ, которое связывается с белком CD20, находящимся в основном на поверхности В-клеток иммунной системы. Ритуксимаб способствует разрушению В-клеток и, следовательно, применяется для лечения заболеваний, которые характеризуются чрезмерным количеством В-клеток, гиперактивностью или нарушением функций В-клеток, например лимфом, лейкемий, реакций отторжения трансплантата и аутоиммунных расстройств. Объем продаж оригинального препарата Мабтера (ритуксимаб) в 2013 г. составил 7 млрд швейцарских франков (5,8 млрд евро), поэтому в настоящее время многие компании занимаются разработкой более дешевых аналогов дорогого и не всегда доступного оригинала [3].

Методы определения специфической активности для различных мАТ отличаются и зависят от характера антигена и строения молекулы конкретного антитела. Тем не менее существуют общие методы оценки аналогичности биологических свойств, например, такие как связывание с Бс-рецепторами и комплементом, антитело-зависимая клеточно-опосредо-ванная цитотоксичность (АЗКЦ), КЗЦ, используемые за некоторым исключением для большинства мАТ. Комплемент-зависимая цитотоксичность является механизмом лизиса клеток-мишеней посредством связывания антите-

ОЦЕНКА МЕДИЦИНСКИХ ТЕХНОЛОГИЙ

38 1б1201б1 PEMEÜUUM

ла с клеткой и активацией системы комплемента с формированием мембраноа-такующего комплекса (С5Ь-С6-С7-С8-С9{п}). Метод количественной оценки КЗЦ позволяет получить численную характеристику биологической активности мАТ в зависимости от концентрации по его влиянию на гибель клеток-мишеней. Это позволяет провести сравнение двух и более лекарственных препаратов (ЛП) по данному критическому показателю качества, т. е. по показателю, определяющему один из терапевтических механизмов действия препарата в организме человека. Оценка комплемент-зависимой цитотоксичности является одним из основных методов изучения Бс-опосредованных функций практически всех мАТ, антиген которых ассоциирован с клеточной мембраной. КЗЦ является важным механизмом действия таких мАТ, как, например, ритуксимаб [4, 5], офатумумаб [6, 7] и др. Целью нашего исследования явилось изучение именно КЗЦ, поскольку это один из ключевых методов определения биологической активности мАТ.

• ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНАЯ ЧАСТЬ

Постановка метода оценки комплемент-зависимой цитотоксичности ритуксимаба

Нами были изучены две серии биоаналогичного ЛП ритуксимаба в лекарственной форме концентрата для приготовления раствора для инфузий, 10 мг/мл (далее — Образец 1 и Образец 2). Указанные серии представляли собой серии, заложенные на хранение при различных условиях, — это серия препарата ритук-симаб, хранящаяся при температуре +5 °С, и серия препарата ритуксимаб, хранящаяся при температуре -80 °С. В качестве стандарта активности была использована одна из серий препарата ритуксимаб в форме концентрата для приготовления раствора для инфузий, 10 мг/мл, которая при проведении сравнительных исследований в рамках подтверждения биоаналогичности как по физико-химическим свойствам, так и по результатам исследования КЗЦ в рамках изучения специфической активности была наиболее близка к оригинальному ЛП Мабтера (держатель ре-

гистрационного удостоверения «Ф. Хоф-фманн-Ля Рош Лтд.», Швейцария). Стоит отметить, что сравнительное изучение специфической активности биоаналогичного ЛП как в рамках подтверждения биоаналогичности оригинальному ЛП, так и в рамках рутинного подтверждения качества разработанного биоаналога (при сравнении со стандартным образцом активности (СО)) проводится одинаковыми методами, а обработка результатов таких исследований — сходная.

В работе использована линия клеток Wil2-S — клеточная линия человеческих лимфобластных клеток, экспрес-сирующих CD20-антиген. Также при постановке метода КЗЦ было использовано два контроля:

1 — контроль максимального лизиса клеток с использованием агента, полностью лизирующего клетки — 5%-ный раствор Тритона Х-100;

2 — контроль спонтанной цитоток-сичности сывороточного комплемента — суспензия клеток с комплементом без добавления ритуксимаба.

Подготовка клеток

Клеточную культуру осматривали под микроскопом с целью оценки морфологии клеток, контаминации, а также гомогенности клеток. Ресуспендирова-ли клетки с целью избавления от клеточных агрегатов путем многократного перемешивания. Затем отбирали часть культуры клеток для оценки их жизнеспособности (с целью дальнейшего расчета количества необходимой культуры на лунку планшета), предварительно смешав клеточную суспензию с трипановым синим. Итоговая жизнеспособность клеток составила 88% (при норме не менее 85%), т. е. 1,8 млн/мл, что является приемлемым для проведения эксперимента. Далее пробирки с клеточной суспензией ресуспендирова-ли в течение 5 мин с ускорением 200^ Надосадочную жидкость отбирали и отбрасывали, добавляли свежую культу-ральную среду.

Приготовление последовательных разведений исследуемых образцов и стандартного образца активности

Разведения анализируемых образцов и СО проводили в 96-луночных планшетах в соответствии с таблицей 1. В каждую лунку планшета предварительно поместили среду для культивирования клеток в соответствии с таблицей 1.

Исходный раствор ритуксимаба в объеме 36 мкл помещали в 1-ю лунку планшета к 264 мкл культуральной среды. Из этой лунки отбирали 30 мкл полученного раствора и помещали во 2-ю лунку планшета к 270 мкл культуральной среды. Далее из 2-й лунки отбирали 100 мкл раствора и помещали в 3-ю лунку к 200 мкл культуральной среды и т. д. по схеме до 10 лунки. Последнюю порцию раствора отбрасывали.

Определение комплемент-зависимой цитотоксичности

Приготовленные разведения каждого из образцов ритуксимаба (Образец 1 и Образец 2) переносили в 2 аналитических 96-луночных планшета соответственно в трех повторах для каждой концентрации по 50 мкл слева-направо по уменьшению концентрации; в каждый из указанных планшетов также добавляли разведения СО в трех повторах для каждой концентрации по 50 мкл, кроме лунок с контролем максимального лизиса клеток (в 3 повторах) и спонтанной цитотоксичности сывороточного комплемента (в 3 повторах). В лунки с ритуксимабом добавляли подготовленную суспензию клеток по 50 мкл на лунку (100 тыс./лунка). Планшеты с суспензией клеток и ритуксимабом инкубировали в течение 60 мин в атмосфере 5% СО2 при температуре 37 °С. Далее в планшеты добавляли по 100 мкл предварительно разбавленного раствора комплемента человека до получения конечной концентрации комплемента в лунке 20%. Затем планшеты инкубировали в атмосфере 5% СО2 при температуре 37 °С в течение 60 мин. Затем в каждую лунку планшетов добавляли метаболический краситель Presto Blue™ Cell Viability Reagent («Invitrogen», США), перемешивали раствор в каждой лунке при помощи многоканальной пипетки и инкубировали в атмосфере 5% СО2 при температуре 37 °С в течение 22 ч.

БИОАНАЛОГИ РИТУКСИМАБА: ИЗУЧЕНИЕ АКТИВНОСТИ И ОЦЕНКА ЦИТОТОКСИЧНОСТИ

PEMfOUUM

612016

39

таблиц^1 Схема приготовления последовательных разведений анализируемых образцов и стандартного образца активности

Объем ЛП, мкл Номера столбцов круглодонного планшета

1 2 3 4 5 6 7 8 9 10

Переносимый объем, мкл 36 ^ 30 100 100 100 100 100 100 100 100 . -А 100

Объем среды для культивирования клеток, мкл 264 270 200 200 200 200 200 200 200 200

Концентрация ЛП в разведении, мкг/мл 1 200 120 40 12 4 1,2 0,4 0,12 0,04 0,01

Детектирование полученных результатов изучения комплемент-зависимой цитотоксичности

Детектирование полученных результатов проводилось с использованием многофункционального микропланшетного ридера, определяющего интенсивность флуоресценции (единицы измерения — относительные флуоресцентные единицы) в каждой лунке планшета при длине волны возбуждения/испускания 560/590 нм.

Статистическая обработка результатов

Для обработки данных были использованы: Microsoft Excel 2010, Microsoft Word 2010, GraphPad Prism 6, Statisti-ca 10.

Для описания данных, полученных в ходе эксперимента по определению сравнительной КЗЦ, а именно численных оценок интенсивности флуоресценции, мы использовали среднее, медиану, минимум, максимум, стандартное отклонение.

Изначально предполагалось, что совокупность имеет нормальное распределение, поскольку полученные данные всегда будут с высокой вероятностью колебаться вокруг среднего при объеме выборки более 30 на каждую исследуемую группу. Это связано с природой данных, т. к. при измерении интенсивности флуоресценции на одном приборе образцов вещества с одинаковой концентрацией даже с учетом внутри-и межсерийной вариабельности от эксперимента к эксперименту не будет большого разброса значений и они бу-

дут колебаться относительно близко неизвестных истинных величин. Согласно рекомендациям Chow [8], общим подходом в исследованиях на биологических системах является сравнение агрегированных показателей, однако в силу большей вариабельности целесообразно также подтверждение сопоставимости вариабельности (дисперсий) данных биоаналога и ЛП сравнения. Поэтому нами было проведено сравнение средней интенсивности флуоресценции для Образца 1 и СО, а также Образца 2 и СО с использованием t-критерия (критерия Стьюдента). Кроме того, был применен дисперсионный анализ и проведено сравнение соответственно дисперсии между группами с использованием F-критерия. При использовании живых объектов (культура клеток) в исследованиях биоаналогичности характерна значительная вариабельность получаемых результатов и полная идентичность практически недостижима, поэтому нами был рассчитан 90% доверительный интервал (ДИ) для разности средних, а также отношения средних.

Для оценки и интерпретации построенных ДИ существует несколько способов выбора границ признания биоаналогичности в биологических исследованиях [9], которые в настоящее время пока не одобрены в качестве регулятор-ных стандартов и носят рекомендательный характер. Одним из таких способов является использование интервала ± 20%, именно указанный диапазон в нашей работе был принят в качестве приемлемого для 90% ДИ для отноше-

ния средних. Выбор границы биоаналогичности представляет собой риск разработчика биоаналога: чем больше обнаружено различий на этапах физико-химических, биологических испытаний и доклинических исследований, тем выше риск получения несопоставимого клинического профиля, т. е. тем выше риск убытков разработчика вследствие необходимости доработки процесса производства и повторения всей программы исследований. С помощью метода количественной оценки аналогичности биологических свойств возможна оценка наиболее значимых свойств и своевременная оптимизация технологических этапов разработки биоаналога [9].

• РЕЗУЛЬТАТЫ ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНОГО ИЗУЧЕНИЯ СРАВНИТЕЛЬНОЙ КОМПЛЕМЕНТ-ЗАВИСИМОЙ ЦИТОТОКСИЧНОСТИ РИТУКСИМАБА (ОБРАЗЦА 1 И СТАНДАРТНОГО ОБРАЗЦА)

Нами была измерена интенсивность флуоресценции образцов ритуксимаба в зависимости от его концентрации в лунке в трех повторах как для Образца 1, так и для СО.

На рисунке 1 представлен график зависимости величины интенсивности флуоресценции от логарифма концентрации ритуксимаба для Образца 1 и СО. Поскольку именно 50%-ная ингибиру-ющая концентрация (The half maximal inhibitory concentration — IC50) является наиболее чувствительной концентрацией, позволяющей выявить различия между исследуемыми образцами препарата, по соответствующей данной концентрации интенсивности флуоресценции проводили сравнение ис-

40 1б1201б1 РЕМШШМ

ОЦЕНКА МЕДИЦИНСКИХ ТЕХНОЛОГИЙ

рисуно^1 Кривая зависимости величины

интенсивности флуоресценции от логарифма

концентрации ритуксимаба для Образца 1 и СО

£ 8 000 :с (-г-

си з б 000 :с 5 :с си \ 1

^ И 4 000 22 — СО " — образец 1 \

5 2 000 15 5 V ,.

о :с -5 3-2-10 1 2

Логарифм концентрации

рисуно^2 Кривая зависимости величины

интенсивности флуоресценции от логарифма

концентрации ритуксимаба для Образца 2 и СО

з 8 000 иц н и Г-1-Л

е з б 000 н т н е \ \

ц & 4 000 е 1 — СО — образец 1

5 2 000 § т и V. ,.

о н-т- 3 -2 -1 0 1 2

Логарифм концентрации

следуемых образцов ритуксимаба и СО. По результатам эксперимента 1С50 составила 0,123 мкг/мл. В таблице 2 представлены показатели интенсивности флуоресценции, соответствующие 1С50 (относительные флуоресцентные единицы), в трех повторах; результаты тестирования с использованием критерия и Б-критерия, а также рассчитанный 90%-ный ДИ разности средних и отношения средних Образца 1 и СО (где Ьзнач. — расчетное значение ^критерия, р — расчетный уровень значимости при тестировании с использованием ^критерия, Б-отн. дисперс. — расчетное значение Б-критерия, р дисперс. — расчетный уровень значимости в дисперсионном анализе).

Таким образом, полученный 90%-ный ДИ отношения средних Образца 1 и СО попадает в заранее принятый диапазон, равный 80—120%. Следовательно, можно сделать вывод о сопоставимости Образца 1 и СО по КЗЦ.

• РЕЗУЛЬТАТЫ ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНОГО ИЗУЧЕНИЯ СРАВНИТЕЛЬНОЙ КОМПЛЕМЕНТ-ЗАВИСИМОЙ ЦИТОТОКСИЧНОСТИ РИТУКСИМАБА (ОБРАЗЦА 2 И СТАНДАРТНОГО ОБРАЗЦА)

Также нами была измерена интенсивность флуоресценции образцов ритук-симаба в зависимости от его концентрации в лунке в трех повторах для Образца 2 и СО.

На рисунке 2 представлен график зависимости величины интенсивности флуоресценции от логарифма кон-

центрации ритуксимаба для Образца 2 и СО.

По результатам эксперимента 1С50 составила 0,123 мкг/мл. В таблице 3 представлены показатели интенсивности флуоресценции, соответствующие 1С50 (относительные флуоресцентные единицы), в трех повторах; результаты тестирования с использованием критерия и Б-критерия, а также рассчитанный 90%-ный ДИ разности средних и отношения средних Образца 2 и СО (где Ьзнач. — расчетное значение критерия, р — расчетный уровень значимости при тестировании с использованием критерия, Б-отн. дисперс. — расчетное значение Б-

критерия, р дисперс. — расчетный уровень значимости в дисперсионном анализе).

Полученный 90%-ный ДИ отношения средних Образца 2 и СО попадает в заранее принятый диапазон, равный 80— 120%. Следовательно, можно сделать вывод о сопоставимости Образца 2 и СО по КЗЦ.

Таким образом, нами были исследованы 2 экспериментальные серии разработанного биоаналога ритуксимаба. По результатам проведенного эксперимента показана сопоставимая со стандартным образцом активности специфическая активность двух серий препарата ритуксимаб.

таблиц^2 Сводные результаты проведенного исследования КЗЦ ритуксимаба для Образца 1 и СО

Образец 1 СО

1-й повтор 5 472 5 222

2-й повтор 5 491 4 751

3-й повтор 5 715 4 980

Среднее 5 559,33 4 984,33

Означение 3,бб759

Р 0,02143

F-отн. дисперс. 3,03730

р дисперс. 0,49538

ДИ разности средних 1б5,бб48—984,3352

ДИ отношения средних* 103,32%—119,75%

* Принятый допустимый диапазон ДИ 80-120%.

БИОАНАЛОГИ РИТУКСИМАБА: ИЗУЧЕНИЕ АКТИВНОСТИ И ОЦЕНКА ЦИТОТОКСИЧНОСТИ

PEMfOUUM

б 1201б

41

таблиц^з Сводные результаты проведенного исследования КЗЦ ритуксимаба для Образца 2 и СО

Образец 1 СО

1-й повтор 4 913 5 369

2-й повтор 5 015 5 014

3-й повтор 5 001 5 193

Среднее 4 976,33 5 192,00

Означение -2,0092

P 0,11490

F-отн. дисперс. 10,3053

р дисперс. 0,17690

ДИ разности средних -495,917—64,58329

ДИ отношения средних* 90,45—101,24%

* Принятый допустимый диапазон ДИ 80-120%.

• ОБСУЖДЕНИЕ И ЗАКЛЮЧЕНИЕ

Существует три возможных механизма действия для антител, подобных ритуксимабу, приводящих к гибели В-клетки путем связывания мембран-ассоциированным антигеном: КЗЦ, АЗКЦ и индукция апоптоза. Нами был воспроизведен механизм КЗЦ, однако следует отметить, что имеются только косвенные данные, свидетельствующие о значимости того или иного из перечисленных выше механизмов терапевтического эффекта в условиях in vivo [10, 11].

По результатам анализа регистрационных досье биоаналогичных ЛП ри-туксимаба, готовящихся к регистрации в России, а также по результатам апробации одного из методов подтверждения специфической активности биоаналогов мАТ — оценки КЗЦ — была разработана программа изучения сравнительной специфической активности биоаналогов ритуксимаба в рамках подтверждения их биоаналогичности.

Минимальный объем исследований, необходимых на этапе доклинического изучения для подтверждения сопоставимости по специфической активности изучаемого биоаналога ритуксимаба и ЛП сравнения, которым для ритуксима-ба является Мабтера, представлен в таблице 4.

Отметим, что в исследованиях связывания с CD20, индукции апоптоза, АЗКЦ и КЗЦ для презентации антигена следует использовать следующие клеточные линии: Wil2-S, Ramos, Raji. Исследования in vivo не всегда обязательны для всех биоаналогов и могут потребоваться для выявления эффектов мАТ, которые в исследованиях in vitro выявить невозможно. Таким образом, такие исследования становятся необходимыми применительно к биоаналогам ритуксимаба [3].

Исследование in vivo предпочтительно проводить на яванских макаках, поскольку для мАТ основной релевантной моделью являются нечеловекообраз-

ные приматы. Для дополнительного подтверждения сопоставимости по специфической активности in vivo можно в качестве животной модели использовать мышей, являющихся носителями ксенотрансплантатов опухоли человека.

Отметим, что объем необходимых исследований специфической активности любого биоаналога зависит от характера результатов, полученных на предыдущих этапах сравнительного изучения, и качества данных. При возникновении различий на этапе сравнительных доклинических фармакодина-мических исследований может потребоваться дополнительное изучение, однако при высокой убедительности можно попытаться обосновать сокращение объема исследований. Но если получены сомнительные результаты, отказываться от проведения дополнительных исследований недопустимо. Все исследования необходимо направить на выявление потенциальных различий между биоаналогом и ЛП сравнения, а также, при обнаружении таких различий, на оценку их клинической значимости. Всякое выявленное значимое различие необходимо должным образом обосновать, поскольку оно может противоречить биоаналогичности, и в случае необходимости следует провести дополнительные исследования. Разработанная программа подтверждения сопоставимости по специфической активности может быть использована разработчиками на этапе планирования и реализации программы док-

таблиц^4 Минимальный объем сравнительных исследований сопоставимости по специфической активности биоаналогов ритуксимаба

Исследования in vitro Исследование in vivo

Аффинность связывания Исследование влияния

с антигеном CD20 на развитие зародышевых

Индукция апоптоза центров в брыжеечных лимфатических

Связывание с Fc-рецепторами узлах и селезенке у яванских макак

Связывание с субкомпонентом

комплемента C1

Индукция АЗКЦ

Индукция КЗЦ

ОЦЕНКА МЕДИЦИНСКИХ ТЕХНОЛОГИЙ

42 1б1201б1 РЕМШШМ

линического фармакодинамического изучения сопоставимости биоаналогов ритуксимаба, что позволит уменьшить расходы и оптимизировать ресурсы на разработку этого дорогостоящего биологического ЛП.

Таким образом, апробация и воспроизведение методики определения КЗЦ на примере бианалогичного ритуксимаба подтверждают ее пригодность для изучения сравнительной специфической активности биоаналогов мАТ и ЛП сравнения. Полученный 90%-ный ДИ для отношения средней интенсивности флуоресценции, соответствующей 1С50,

для двух исследованных образцов биоаналогичного ритуксимаба попадает в заранее принятый диапазон, равный 80—120% (для Образца 1 — 90% ДИ: 103,32—119,75%; для Образца 2 — 90% ДИ: 90,45—101,24%). Метод оценки КЗЦ и статистическую обработку полученных результатов рекомендуется использовать не только в рамках подтверждения сравнительной специфической активности биоаналогов мАТ, обладающих способностью индуцировать КЗЦ, но и в рамках рутинного подтверждения качества мАТ.

Исследование было проведено в рамках договора о сотрудничестве на базе ООО «Международный биотехнологический центр «Генериум» (МБЦ «Генериум») с использованием предоставленных компанией образцов препарата.

кроме того..._

Предупреждение вертикальной передачи ВИЧ-инфекции

По данным Всемирной организации здравоохранения, в 2014 г. 73% из полутора миллионов беременных ВИЧ-инфицированных женщин получили эффективные антиретровирусные препараты, что способствовало предупреждению вертикальной передачи (от беременной женщины ребенку) ВИЧ-инфекции и сифилиса. Критерии валидации предотвращения вертикальной передачи этих инфекций были разработаны ВОЗ в 2014 г. Достижение этой цели предполагает тщательную работу с уязвимыми группами населения, тестирование беременных женщин и их партнеров на наличие инфекционных заболеваний, свободный доступ инфицированных женщин и детей к лечению. Благодаря проведенным программам удалось предотвратить вертикальную передачу ВИЧ-инфекции в Беларуси, Таиланде, Армении, сифилиса — в Республике Молдова. Первой страной, официально объявленной свободной от вертикальной передачи ВИЧ-инфекции в 2015 г., стала Куба.

Завершена I фаза КИ портативного диализного аппарата

Группа исследователей из Медицинского центра Сидар-Синай (Калифорния), Калифорнийского университета в Лос-Анжелесе, Вашингтонского университета (Сиэтл) и других научных центров США опубликовала отчет о I фазе клинического исследования портативного диализного аппарата (Wearable Artificial Kidney, WAK). Вес работающего от аккумулятора устройства составляет около 4,5 кг, оно позволяет пациенту сохранять свободу перемещений непосредственно во время процедуры гемодиализа. Целью КИ была оценка способности WAK поддерживать водно-электролитный и объемный гомеостаз у пациентов с терминальной стадией хронической болезни почек в течение 24 ч. Первоначально в испытаниях планировалось задействовать 10 больных, однако впоследствии из-за технических проблем с устройством это число пришлось сократить до 7. Тем не менее у принявших участие в испытаниях добровольцев WAK продемонстрировал способность поддерживать нормальные значения контрольных показателей в течение всего времени работы при отсутствии серьезных нежелательных эффектов. Исследователи отмечают, что после устранения выявленных технологических недоработок портативный диализный аппарат может стать перспективной альтернативой используемому в настоящее время стационарному диализному оборудованию.

ИСТОЧНИКИ

1. Jiang XR, Song A, Bergelson S, Arroll T, Parekh B, May K et al. Advances in the assessment and control of the effector functions of therapeutic antibodies. Nat Rev Drug Discov, 2011, 10: 101-11.

2. da Silva A, Kronthaler U, Koppenburg V, Fink M, Meyer I, Papandrikopoulou A et al. Target-directed development and preclinical characterization of the proposed biosimilar rituximab GP2013. Leuk Lymphoma, 2014, 55(7): 1609-17.

3. Vital EM, Kay J, Emery P. Rituximab biosimilars. Expert Opin Biol Ther, 2013, 13(7): 1049-62.

4. Мабтера. Государственный реестр лекарственных средств [официальный сайт]. URL: http://grls.rosminzdrav.ru/ ImgInstr.aspx?folder=ScanVavilova&Filepat h=\Ne_trebuet_vnesenia\Net_ND_IZM\437 115\IP&idReg=85739&isOld=1&fileType=j pg&pfolder=2 (дата обращения

16.10.2014).

5. Summary of product characteristics: MabThera. European Medicines Agency [официальный сайт]. URL http://www.ema. europa.eu/docs/en_GB/document_library/EP AR_-_Product_Information/human/000165/ WC500025821.pdf (дата обращения

03.01.2015).

6. Арзерра. Государственный реестр лекарственных средств [официальный сайт]. URL: http://grls.rosminzdrav.ru/ ImgInstr.aspx?folder=ScanVavilova&Filepat h=\Ne_trebuet_vnesenia\Net_ND_IZM\440 492\IP&idReg=27729&isOld=1&fileType=j pg&pfolder=2 (дата обращения 19.09.2015).

7. Summary of product characteristics: Arzerra. European Medicines Agency [официальный сайт]. URL: http://www.ema. europa.eu/docs/en_GB/document_library/E PAR_-_Product_Information/human/ 001131/WC500093091.pdf (дата обращения 19.09.2015).

8. Chow SC. Biosimilars: Design and analysis of follow-on biologics. Chapman&Hall / CRCbiostatisticsseries, 2013, 444 p.

9. Руководство по экспертизе лекарственных средств. Глава 1: Выбор и обоснование границ признания биоаналогичности (биоподобия). Том IV. М.: ПОЛИГРАФ-ПЛЮС, 2014. С. 4—30.

10. Cragg MS, Glennie MJ. Antibody specificity controls in vivo effector mechanisms of anti-CD20 reagents. Blood, 2004, 103(7): 2738-43.

11. Golay J, Zaffaroni L, Vaccari T, Lazzari M, Borleri GM, Bernasconi S et al. Biologic response of B lymphoma cells to anti-CD20 monoclonal antibody rituximab in vitro: CD55 and CD59 regulate complement-mediated cell lysis. Blood, 2000, 95(12): 3900-8.