CC BY
60
актиновых микрофиламентов на периферию клетки. Осмиофиль-ные тельца располагались под плазмолеммой.
Заключение. Таким образом, у крыс с алиментарным дефицитом магния, обнаруженные морфологические изменения свидетельствовали о развитии хронического воспаления в стенке кровеносных сосудов с последующим склерозированием и формированием диффузного мелкоочагового кардиосклероза, что в целом косвенно подтверждается данными Maier J. с соавт. [4]. Данный процесс сопровождался увеличением объемной плотности соединительнотканной стромы преимущественно вокруг кровеносных сосудов, что способствует ухудшению кровоснабжение миокарда и, по [3], развитию гипоксических повреждений сердечной мышцы. Кроме того, обнаруженные ультраструктур-ные изменения со стороны эндотелия артерий мышечного типа и артериол говорит о возможности возникновения эндотелиальной дисфункции при магнийдефицитных состояниях, а выраженные повреждения гладких миоцитов артериол отражают существование длительной вазоконстрикции, способствующей ишемическому повреждению миокарда.
Литература
1. Ueshima K. // Magnes. Res. 2005. № 4. P. 275-84
2. Bobkowski W., Nowak A., Durlach J. // Magnes. Res. 2005. № 1. P.35-52.
3. Malpuech-Brugere C., Maier J. AM., Mazur A. // Biochimica et Biophysical Acta. 2004. Vol. 1689, №9. P. 13-21.
4. Maier J. A.M. // Mol. Aspects Med. 2003. Vol. 24, №6. P. 137-146.
5. Wolf F.I., Trapani V., Simonacci M., Ferré S., Maier J.AM. // Magnes. Res. 2008. Vol. 21, ;10. P. 58-64.
6. Yang Z.W., Gebrewold A., Novakowald M.et al. // Am. J. Physiol. Regul. Integr. Comp. Physiol. 2000. Vol. 278, №16 P. R628-R639.
7. Yokoyama S., Gu J., Nishida H.I.et al. // Magnes. Res. 1994. Vol. 7, №5. P. 97-105.
8. Ferre S., Mazur A., Maier J.AM. // Magnes. Res. 2007. Vol. 20, №4. P 66-71.
STRUCTURAL CHANGES IN CARDIAC ARTERIES AND MIOCARDIUM OF RATS ON MAGNESIUM DEFICIENCY EXPERIMENTAL MODEL
A.V. SMIRNOV, N.G. PANSHIN, A.A. SPASOV, M.V. KHARITONOVA
Volgograd State Medical University,
Department of Anatomical Pathology,
Department of Pharmacology,
Volgograd Research Centre of RAMS and AVR
Structural changes were studied in cardiac arteries and myocardium of rats on experimental model of alimentary magnesium deficiency. Endothelial damage and inflammatory features in arterial wall were revealed, development of fibrosis and perivascular sclerosis and ischemic injures damage of myocardium were also found.
Keywords: endothelial cells; magnesium; deficiency; inflammation; rat.
УДК 616.314-089-071
БИОАКТИВНАЯ БОНДИНГОВАЯ СИСТЕМА КАК ФАКТОР ПРОФИЛАКТИКИ ВТОРИЧНОЙ ДЕМИНЕРАЛИЗАЦИИ В ВОССТАНОВЛЕННОМ ЗУБЕ
Ю.А. ИППОЛИТОВ*
В работе представлены гистохимические исследования срезов удаленных зубов и показано наличие углеводно-белковых биополимеров в твердых тканях зуба. Автор предлагает применять обнаруженные биополимеры в бондинговых системах для повышения химической адгезии пломбировочных материалов к твердым тканям зуба и подтверждает это с помощью рентгеноспектрального микроанализа. Ключевые слова: биополимер, бондинговая система, зуб.
Для надежной адгезии пломбы, предотвращения краевой проницаемости и профилактики вторичного кариеса восстановленного зуба большое значение имеют качество и правильное
* ГОУ ВПО «Воронежская государственная медицинская академия им. Н.Н. Бурденко Федерального агенства по здравоохранению и социальному развитию», 394000 г. Воронеж, ул. Студенческая 10, ГОУ ВПО ВГМА им. Н.Н.Бурденко, тел. (4732) 55-56-19, факс (4732) 64-47-79, e-mail:
stomat@vmail.ru
применение адгезивной системы перед заполнением полости пломбировочным материалом [1]. Адгезивные системы представляют собой совокупность сильнодействующих химических агентов, активно влияющих на твердые ткани зуба. Особенно велика степень воздействия компонентов бондинга или праймера на слабоминерализованную эмаль и дентин у людей с пониженной сопротивляемостью к кариозному процессу [3]. Кроме того, следует учитывать, что в дентине зуба высокая доля органических субстанций, прежде всего коллагена, непосредственная связь с пульпарной тканью через дентинные канальцы и одонтоб-ласты, наличие неравномерно минерализованных дентинных структур, остаточная влажность, делающая дентин труднопроходимым для гидрофобного бонда из-за давления дентинной жидкости со стороны пульпы выше 6,9 кПа, покрытие дентина органическим слоем из остатков ротовой жидкости и крови [1].
Основной принцип сцепления современных дентинно-бондинговых систем основан главным образом на микромеханиче-ском проникновении адгезивной системы в деминерализованную кислотой дентинную поверхность. Кроме того, некоторые бондинго-вые препараты адгезивных систем могут обеспечивать дополнительное химическое сцепление между адгезивной системой и дентином.
В дентинных адгезивах используются различные химические вещества для достижения связи с дентином, в частности для удаления смазанного слоя и кондиционирования поверхности дентина использована этилендиаминтетрауксусная кислота (ЭДТА) с рН между 6,5 и 7,0. Кондиционированная поверхность потом обрабатывается гидроксиетилметакрилатом и глютараль-дегидом. Гидроксиетилметакрилат обеспечивает гидрофилию, а глютаральдегид сродство к коллагену на протравленной поверхности дентина. Потом следует третья аппликация дентинным мономером Б18-ОМА - содержащей смолы, с которым связывается пломбировочный материал [1].
Однако, эффективность используемых адгезивных систем остается недостаточной, так как полимеризующая усадка традиционных композитов, а также низкая тропность к биологической ткани приводит к отторжению от стенок полости зуба.
Это, видимо, связано с недооценкой наличия белковой составляющей в твердых тканях зуба, играющей важную роль в процессах минерализации и реминерализации эмали и дентина [2].
Цель исследования — повысить качество пломбирования зуба путем применения адгезивной биоактивной светоотверждаемой бондинговой системы.
Материалы и методы исследования — гистохимические микропрепараты получены из удаленных зубов по ортодонтиче-ским показаниям. Исследованы срезы зубов в проходящем свете для решения вопросов, связанных с топохимией катинного белка (КБ) и его составляющих аминокислот относительно распределения в структурах эмали, дентина, предентина, клеточного и бесклеточного цемента. Количественные исследования выполнены на установке «Микротелс-4» [2], где осуществляется оцифровка микротелевизионного изображения в пределах выбранных областей и расчет величин экстинкций по точкам. Изучено 10 премоляров верхней челюсти человека (выборка для дискриптив-ного анализа и построения матрицы схожести/различимости по Вилкокнсону), статистическая обработка осуществлялась с помощью программы 8ТХ, длина выборки 100 значений.
В работе использована адгезивная биоактивная светоотверждаемая бондинговая система (АБСБС), изготовленная на фирме ООО «Радуга Р» Россия при участии сотрудников кафедры терапевтической стоматологии Воронежской государственной медицинской академии им. Н.Н. Бурденко.
В составе бондинговой системы дентин-конденционер, содержащий 8% концентрированный раствор предельных и непредельных полифункциональных органических кислот, биопраймер, представляющий собой композицию из гидрофильного мономера (НЕМА) и водного раствора аминокислот, обнаруженных при гистохимических исследованиях срезов удаленных зубов [2], универсальный светоотверждаемый адгезив содержащий бондинг-смолы БИС-ГМА, БИС-уретан и светоотверждаемую систему.
Универсальный состав адгезива обеспечивает прочное соединение между зубом и любым композитным материалом, содержащим как БИС-ГМА, так и БИС-уретановые мономеры.
Материалом для исследования также служили 30 удаленных по ортодонтическим и пародонтологическим показаниям зубов, которые перед удалением за неделю были запломбированы с применением АБСБС. На отпрепарированную поверхность
дентина на 10 секунд наносили дентин-кондиционер, затем смывали водой, просушивали до «искрящегося» оттенка. На протравленную поверхность дентина и эмали наносили кисточкой биопраймер, через 30 секунд при необходимости повторно наносили биопраймер, чтобы поверхность была влажной, затем кисточкой наносили тонкий слой универсального светоотверждаемого адгезива, распределяли адгезив струей воздуха по поверхности дентина и затем облучали полимеризационной лампой в рабочем диапазоне синего света длиной волны 450- 500 нм мощностью 400мВт/см2 в течение 20 сек.
Из удаленных зубов лиц обоего пола и возраста от 18 до 55 лет готовили шлифы от 1 до 1,5 мм с помощью алмазного инструмента.
Механическую и химическую адгезию АБСБС оценивали с помощью растровой электронной микроскопии и рентгеноспектрального микрохимического анализа при увеличении от 500 до 1000 раз с помощью низковакуумного растрового электронного микроскопа ««JEOL JSM - 6380LV» производства Японии. Изображения были получены в режимах вторично-электронной эмиссии и обратнорассеянных электронов. Шлифы зубов подвергали воздействию неподвижного тонкосфокусированного электронного пучка. Объемность обеспечивалась большой глубиной фокуса электронного микроскопа и эффектом оттенения рельефа контраста во вторичных электронах.
Поверхность шлифа зуба очищали от загрязнений и сушили при комнатной температуре в вакууме при 0,8 Паскаль в течение 3-4 часов. Распределение химических элементов в области границы пломбировочного материала и ткани зуба было исследовано методом микрорентгеноспектрального картирования поперечных шлифов зуба с помощью системы энергодисперсного анализа INCA - 250. Планарное распределение химических элементов оценивали по окраске их рентгеновского изображения разными цветами: углерод - красный, фосфор - синий, кремний - зеленый.
В клинике функциональное состояние реставрации, а также краевое прилегание пломб к тканям зуба оценивали через 10 минут, а также через 3-5 дней. Для этого использовали клиническое обследование и электрометрические исследования с помощью электродиагностического аппарата «ДэнтЭст» (г. Москва ЗАО «Геософт Дент»). Измерения проводили при постоянном напряжении 4,26 Вольт, а полученные результаты измерений в микроамперах пересчитывали на значение сопротивления исследуемых твердых тканей зуба.
Результаты и их обсуждение. Наличие КБ идентифицируется по связыванию структурами декальцинированного зуба молекул бромфенолового синего при значении рН 8,2. Контрольные реакции выполнены с использованием трипана и хлористого тионила для деполимеризация белков и блокады карбоксильных групп «маркерных» аминокислот и КБ. Белок выявляется во всех отделах зуба и связан со структурами канальцев в дентине и эмали, со структурами предентина, идентифицируется также в клеточном и бесклеточном цементе в виде гомогеннного окрашивания.
Содержание КБ значительно в структурах эмали -0,3559+0,01, а=0,119, а в близлежащем дентине соответствующие значения составили величину 0,1528+0,004, а=0,045.
Зоной умеренного накопления КБ отличается область пре-дентина непосредственно на границе с пульповой камерой -0,2645+0,008, а=0,082. Наиболее значительные концентрации КБ оказались в элементах бесклеточного цемента - 0,4389+0.01, а=0,1124. В клеточном цементе эти значения несколько меньше -
0,3598+0,01, 0=0,112. Результаты являются статистически достоверными, в том числе отличия содержания КБ в различных видах цемента достоверны при р 0 99.
Результаты гистохимических исследований позволили предложить аминокислотный спектр КБ для использования в составе биологического праймера.
Полученные данные электрометрических исследований показали, что электросопротивление твердых тканей зубов после пломбирования через 10 минут составляют в среднем 1,95* 106 ±0,05 Ом, тогда как значения электросопротивления в зоне контакта пломбировочного материала с твердыми тканями зубов через 5 дней, значительно выше и в среднем составляет 9,06*106 ±0,05 Ом.
По нашему мнению, данный факт говорит о хорошей герметизации краевого прилегания пломбировочного материала к дентину и эмали зуба. Это также подтверждает и факт повышения адгезии пломбировочного материала к тканям зуба во времени, а также о повышении тканевого сопротивления.
На рентгеновских картах распределение химических элементов по поверхности пломбировочного материала и ткани зуба представлено 3 химическими элементами помеченными цветом, характеризующих проникновение компонентов АБСБС в дентин коронковой части зуба. Углерод, как характерный компонент органической составляющей биопраймера, наглядно накапливается в зоне адгезиии пломбировочного материала и дентина. Зона контакта дентина с пломбировочным материалом представлена плотноорганизованной полосой по всему протяжению с элементами проникновения пломбировочного материала в дентин зуба. (См. рентгеновскую карту распределения химических элементов, помеченных цветом: красный - углерод, синий - фосфор, зеленый - кремний; рис.1).
Кроме того, с помощью рентгеноспектрального микроанализа исследованы участки дентина зуба в зоне прилегания к пломбировочному материалу, а также в глубине от места контакта с материалом. В представленных таблицах под электронными изображениями шлифов зубов достоверно повышение углерода в дентине, прилегающем к пломбировочному материалу, что подтверждает проникновение биопраймера на водной основе в дентинные канальцы коронковой части зуба (табл. 2, 3, 4, рис. 2, 3, 4 распределения химических элементов).
200мкт
Рис. 1. Рентгеновская карта распределения химических элементов на границе прилегания промбировочного материала к дентину (углерод-красный, фосфор-синий, кремний-зеленый). Увеличение в 500 раз.
ЗООмкт 1 Электронное изображение 1
Рис. 2. Электронное изображение в режиме вторичной электронной эмиссии рентгенспектрального микроанализа распределения химических элементов. Указана зона сканирования коронкового дентина. Увеличение в 500 раз.
Таблица 2
Количественный микрохимический анализ в области дентина коронковой части зуба
Элемент Весовой % Атомный %
C 21.95 33.15
O 44.11 50.01
P 11.18 6.54
Ca 22.76 10.30
C 21.95 33.15
Итого 100.00
200мкш 1 Электронное изображение 1
Рис. 3. Электронное изображение в режиме вторичной электронной эмиссии рентгенспектрального микроанализа распределения химических элементов. Указана зона сканирования на границе коронкового дентина и пломбировочного материала. Увеличение в 500 раз.
Таблица 3
Количественный микрохимический анализ на границе коронкового дентина и пломбировочного материала.
Элемент Весовой % Атомный0/о
C 36.08 53.02
O 31.60 34.86
Si 13.14 8.26
Ca 4.49 1.98
Ba 14.69 1.89
Итого 100.00
200мкт 1 Электронное изображение 1
Рис. 4.. Электронное изображение в режиме вторичной электронной эмиссии рентгенспектрального микроанализа распределения химических элементов. Указана зона сканирования коронкового дентина вблизи границы с пломбировочным материалом. Увеличение в 500 раз.
Таблица 4
Количественный микрохимический анализ вблизи границы коронкового дентина и пломбировочного материала
Элемент Весовой % Атомный %
C 32.14 46.17
O 38.08 41.08
Si 6.07 3.73
P 6.91 3.85
Ca 10.05 4.33
Ba 6.75 0.85
Итого 100.00
Вывод. Таким образом, предложенная адгезивная биоактивная светоотверждаемая бондинговая система имеет химическую адгезию с дентином и пломбировочным материалом посредством проникновения химических элементов из биопраймера и пломбировочного материала в твердые ткани зуба, тем самым повышая качество пломбирования зуба.
Литература
1. Борисенко А.В. Композиционные пломбировочные и облицовочные материалы / А.В.Борисенко, В.П.Неспрядько. Киев: Книга плюс, 2001. 195 с.
2. Ипполитов ЮА. Топохимия и содержание «катионного белка» в структурах зуба человека / Ю.А.Ипполитов, Э.Г.Быков, О.М.Горшкова // Новости клинической цитологии. 2001. Т.5, № 3-4. С. 162.
3. Рот Г.И. К вопросу о выборе бондинговых систем при лечении кариеса / Г.И.Ронь, Ю.В.Мандра // Настольная книга стоматолога, работающего материалами фирмы Heraeus Kulzer. М., 2000. С. 8-11.
BIOACTIVE BONDING SYSTEM AS A FACTOR OF RENEWED TOOTH SECONDARY DEMINERALIZATHION PREVENTION.
YU.A. IPPOLITOV Voronezh State Medical Academy after N. N. Burdenko
The work demonstrates histochemical studies of the extracted teeth sections. The presence of carbohydrate-protein biopolymers in teeth hard tissues is shown. The author suggests using the discovered biopolymers in bond systems for the improvement of chemical adhesion of filling materials to teeth hard tissues. The study proves the suggestion by radiographic spectral microanalysis.
Key words: biopolymer, bond systems, a tooth
УДК 611.81:615.849
МОРФОЛОГИЧЕСКАЯ ИЗМЕНЧИВОСТЬ НЕЙРОЦИТОВ СТАРОЙ И ДРЕВНЕЙ КОРЫ ГОЛОВНОГО МОЗГА КРЫС ПРИ ДЕЙСТВИИ ИОНИЗИРУЮЩЕГО ИЗЛУЧЕНИЯ
Д. А. СОКОЛОВ, В. Н. ИЛЬИЧЕВА, Н. В. МАСЛОВ, В. П. ФЕДОРОВ*
В настоящем сообщении авторами приводится описание форм морфологической изменчивости нервных клеток цитоархитектониче-ского поля САз гиппокампа и пириформной зоны древней коры головного мозга крыс при действии ионизирующего излучения в дозе 87,5 Гр. Установлено, что эффект облучения заключается в стойком уменьшении морфологических форм пограничной и адаптационной изменчивости на фоне возрастания процентного содержания нейро-цитов с признаками альтеративных изменений.
Ключевые слова: нейроцит, ионизирующее излучение, цитоархитектоника.
Современная экологическая нейроморфология пополняет свое содержание новыми данными об изменениях структур нервной системы, развивающихся при действии различных факторов окружающей среды. Эти многочисленные факторы, воздействующие на живой организм, носят в основном антропогенную природу и возникают в результате научно-производственной и хозяйственной деятельности человека.
Среди антропогенных факторов, обладающих наибольшим биотропным эквивалентом, особое место занимает ионизирующее излучение. В настоящее время скопилось достаточное количество данных о морфологической реакции элементов центральной нервной системы в ответ на действие ионизирующей радиации. Однако, эти сведения, несмотря на свою многочисленность, достаточно противоречивы, несистематизированы, охватывают лишь некторые отделы ЦНС. Морфологические изменения нейронов, наблюдаемые исследователями, сводятся либо к описанию их линейных параметров, либо к подсчету так называемых «реактивных» и «деструктивных» клеток, что в определенной мере усложняет интерпретацию функционального состояния нейроци-тов при действии экзогенных факторов.
Идея создания универсальной классификации форм морфологической изменчивости нервных клеток обсуждалась нейроморфологами с середины XX века. Наибольшего внимания в этом отношении заслуживают работы Ю. М. Жаботинского [2], В. Н. Ярыгина с соавт. [5], где достаточно подробно изучено и описано многообразие форм нервных клеток, наблюдающихся как в интактном организме, так и при действии ряда физических, химических факторов, и некоторых заболеваний. Немаловажную роль сыграла работа Н. Н. Боголепова [1], где с применением метода полутонких срезов и электронной микроскопии был достигнут функциональный эквивалент морфологических изменений нервных клеток. Внимания заслуживает классификация типовых форм морфологической изменчивости центральной
* Воронежская UVF им. Н. Н. Бурденко 394036, г. Воронеж, ул. Студенческая, д. 10; (4732) 53-02-53.Воронежский институт физической культуры Московской государственной академии физической культуры 394000, г. Воронеж, ул. К. Маркса, 59
