CC BY
76
6-ФДГ, АлДГ и ЩФ - с другой, характеризуются выраженной противоположной направленностью. Так, снижение активности СДГ (0,02260±0,055) (Р<0,001), наблюдающееся через 3 мин, сочетается с повышением активности других исследованных ферментов: ЛДГ (0,052±0,002) (Р<0,001), Г-6-ФДГ
(0,02792±0,00129) (Р<0,001), АлДГ (0,0296±0,0016) (Р<0,001) и ЩФ (3,63±0,37) (Р<0,001). В то же время возрастание через 1 ч после облучения активности СДГ (0,04123±0,00109) (Р<0,001) сопровождается одновременным понижением каталитической активности ЛДГ (0,028±0,001) (Р<0,001), Г-6-ФДГ
(0,01491±0,006) (Р<0,001), АлДГ (0,017±0,006) и ЩФ (2,17±0,14) (Р<0,001). Динамика изменения активности дегидрогеназ, катализирующих реакции биоэнергетического обмена в нейроцитах древней коры, свидетельствуют о том, что в раннем пострадиационном периоде, через 3 мин после облучения, дефицит аэробного метаболизма в цикле лимонной кислоты (снижение активности СДГ) компенсируется повышением активности ключевых ферментов гликолиза (ЛДГ) и пентозофосфатного пути превращения глюкозы (Г-6-ФДГ). Спустя 1 час, стимуляция энергопродукции в цикле Кребса (повышение активности СДГ) приводит к угнетению анаэробных путей извлечения энергии (снижение активности (ЛДГ и Г-6-ФДГ). Одновременно в нейроцитах древней коры происходит активация реакций превращения этанола и транспортной функции эндотелия коры (3 мин, повышение активности АлДГ и ЩФ соответственно) с последующим ингибированием названных процессов (60 мин, снижение активности АлДГ и ЩФ).
Алкоголь в транквилизирующей дозе достоверно вызывал в нервных клетках древней коры, спустя 3 мин после введения, снижение активности СДГ (0,02524±0,00155) (Р<0,001), сменяющееся через 60 мин тенденцией к ее повышению. Кроме того выраженное увеличение активности ЛДГ (0,042±0,001) (Р<0,001) через 60 мин после введения алкоголя сочеталось с возрастанием активности Г-6-ФДГ (0,02108±0,00112) (Р<0,001) значительно превышающей исходный уровень во все сроки наблюдения. Таким образом, этанол в дозе 2,25 г/кг вызывал активизацию анаэробного энергообеспечения нейроцитов древней коры как за счет интенсификации гликолиза, так и вследствие раннего повышенного вовлечения в биоэнергетический метаболизм пентозо-фосфатного пути превращения глюкозы. Повышение активности АлДГ (0,0398±0,0016) (Р<0,001), наблюдающееся в течение часа после введения алкоголя, способствует активации в нейроцитах древней коры катаболизма этилового спирта. Напротив, снижение активности ЩФ (2,67±0,13) (Р<0,001) в эндотелии капилляров палеокортекса, наступающее к 60 мин, является в определенной мере гистохимическим критерием ограничения транспортной функции ГЭБ.
Под влиянием алкоголя в дозе 1,5 г/кг в нейроцитах палео-кортекса через 3 мин после введения показатели активности всех изученных ферментов обнаруживали тенденцию к незначительному повышению. К 60 мин активность СДГ (0,03547±0,00122) существенно не изменялась по сравнению с контролем, в то время как активность ЛДГ (0,035±0,001) (Р<0,001) и Г-6-ФДГ (0,02108±0,00112) (Р<0,001) достоверно повышалась.
Результаты гистохимического исследования позволяют заключить, что окислительно-восстановительные реакции в цикле лимонной кислоты оказываются сопряженными с повышенной активностью анаэробных путей биоэнергетического обмена: гликолиза и пентозо-фосфатного шунта. В то же время спустя 60 мин после воздействия активация уровня катаболизма винного спирта (повышение активности АлДГ - 0,0252±0,0009) (Р<0,001) сочетается с угнетением функции транскапиллярного обмена (снижение активности ЩФ - 2,85±0,04) (Р<0,001).
Выводы. К адекватным проявлениям неврологических синдромосходных состояний, возникающих при нарушении функций древней коры через 3 мин после действия у-облучения в дозе 87,5 Гр и этанола в дозе 2,25 г/кг, относятся обнаруживаемые в палеокортексе в этот период однотипные изменения активности ключевого фермента цикла Кребса, повышение активности ферментов-»маркеров» пентозофосфатного пути превращения углеводов (Г-6-ФДГ) и катаболизма этанола (АлДГ).
Литература
1. Арлащенко, Н.И. Экспериментальная модель для объективной оценки степени проявления первичной реакции на облучение у кроликов / Н.И. Арлащенко, А.Ю. Погосов // Известия АН СССР. Сер. биол.- 1984.- № 3.- С. 428-432.
2. Берстон, М. Гистохимия ферментов / М. Берстон.- М.: Мир, 1965.- 464 с.
3. Быков, Э.Г. Способ повышения качества микропрепаратов после постановки реакции азосочетания в цитохимии гидролаз / Э. Г. Быков: Рацпредложение.- Воронеж: ВГМИ, 1989.- № 1129.
4. Гайдамакин, НА. Состояние синапсов коры больших полушарий головного мозга при гамма-облучении / Н.А. Гайдамакин, И.Б. Ушаков // Журн. невропатологии и психиатрии им. С.С. Корсакова.- 1988.- Т. 88.- № 7.- С. 11-16.
5. Григорьев, Ю.Г. Космическая радиобиология / Ю.Г. Григорьев.- М.: Энергоатомиздат, 1982.- 176 с.
6. Давыдов, Б.И. Ионизирующее излучение и мозг: поведенческие и структурно-функциональные паттерны / Б.И. Давыдов, И.Б. Ушаков.- М.: ВИНИТИ, 1987.- 336 с.
7. Давыдов, Б.И. Радиационное поражение головного мозга / Б.И. Давыдов, И.Б. Ушаков, В.П. Федоров; под ред. акад. АПН СССР В.А. Пономаренко.- М.: Энергоатомиздат, 1991.- 240 с.
8. Даренская, Н.Г. Общность реакции организма на воздействия различных физических факторов и ионизирующего излучения как основа для прогнозирования радиочувствительности организма / Н.Г. Даренская, А.Ю. Григорьев, С.С. Кузнецова // Радиация и организм. Комбинированное действие ионизирующей радиации и других физических факторов среды.- Обнинск, 1984.- С. 28-31.
9. Курепина, М. М. Мозг животных / М.М. Курепина.- М.: Наука, 1981.- 148 с.
10. Копанев, В.А. Метод вероятностной оценки токсического эффекта / В.А. Копанев, Э.Х. Гинзбург, В.Н. Семенова.-Новосибирск, 1988.- 114 с.
11. Петрухин, В.Г. Методика комбинированных тканевых блоков для сравнительного патоморфологического изучения радиационной патологии / В.Г. Петрухин, Н.А. Гайдамакин // Радиационные аспекты реактивности организма в связи с космическим полетом. Серия: Проблемы космической биологии.- 1971 Т. 14.- С. 369-378.
12. Пирс, Э. Гистохимия теоретическая и прикладная /
Э. Пирс.- М.: Мир, 1962.- 962 с.
13. Karnovsky, M. J. A «direct-coloring» thiocholine method for choline esterase / M.J. Karnovsky, L. Roots // J. Histochem. Cyto-chem.- 1964.- Vol. 12.- Р. 219-221.
COMPARATIVE CHARACTERISTIC OF PALEOCORTEX REACTIONS FOR IONIZING RADIATION AND ALCOHOL INTOXICATION
V.N.ILICHEVA, B.N.USHAKOV, D.A.SOKOLOV
Voronezh State Medical Academy after N.N. Burdenko All-Russian Center of Experimental Medicine and Radiation after A.M. Nikiforov
In experiment on 550 white male-rats manifestations of neurological syndrome-similar conditions, occurring at paleocortex dysfunction after the exposure of y-irradiation in a dose of 87,5 Gy and ethanol in a dose of 2,25 g/kg have been determined. The manifest with the same type of changes in activity of the Krebs cycle enzyme, elevation of enzymes-»markers» of pentose-phosphate path of carbohydrates conversion and ethanol catabolism.
Key words: ancient crust, ionizing radiation, alcohol intoxication.
УДК: 616.31-089.28/.29
ВОЗМОЖНОСТЬ СНИЖЕНИЯ ГИПЕРЧУВСТВИТЕЛЬНОСТИ ДЕНТИНА НА ЭТАПЕ ПРЕПАРИРОВАНИЯ ЗУБА ПОД ОРТОПЕДИЧЕСКУЮ КОНСТРУКЦИЮ.
И.Ю. ИППОЛИТОВ, Ю.А.ИППОЛИТОВ, Л.Н.ДИДЮРИНА*
В работе представлена возможность герметизации дентинных канальцев отпрепарированного зуба под ортопедическую конструку-цию с целью снижения его гиперчувствительности на этапах протезирования.
Ключевые слова: гиперчувствительность, бондинговая система, дентин зуба, энергодисперсионный анализ.
Известную проблему ортопедической стоматологии представляет гиперчувствительность зубов после препарирования под
* ГБОУ ВПО «Воронежская государственная медицинская академия им.
Н.Н.Бурденко Минздравсоцразвития Российской Федерации», 394000, г. Воронеж, ул. Студенческая 10.
несъемные ортопедические конструкции. Гиперчувствительность зубов выражается болевыми ощущениями, исходящими от обнаженного дентина, в результате химического, термического или осмотического раздражения, которые не связаны с его патологическими изменениями. Речь идет о симптомокомплексе, возникающим от переноса раздражения сквозь обнаженный дентин посредством гидродинамических механизмов на нервные окончания пульпы зуба, что и приводит к болевой реакции. В стоматологической практике лечение гиперчувствительности зубов базируется, главным образом, на герметизации кариозных полостей, назначении противовоспалительных препаратов, методе закрытия дентинных канальцев. В отличие от эмали, сцепление адгезивных систем с дентином сложнее. Дентин содержит большое количество органических субстанций, в частности, коллагена. Минерализованный дентин по своей структуре состоит не только из дентинных канальцев, но и пор, количество которых увеличивается после протравливания кислотой от 1 до 13,4% [3].
Многие адгезивные системы не имеют достаточной тропно-сти к дентину из-за наличия в составе праймеров токсичных органических растворителей, таких как, ацетон [1], нарушения полимеризации, вследствие остаточной влажности и наличия кислорода на дентинной поверхности, делающими дентин труднопроходимым для гидрофобного химического соединения, а также давления дентинной жидкости со стороны пульпы (около 30 мм.рт.ст. и выше). Кроме того, для создания гибридной зоны между адгезивным веществом и дентином зуба необходимо сохранение проницаемости деминерализованного дентинного слоя, а в результате кислотного протравливания, растворяется, как органическая, так и минеральная составляющие дентина, оголяющие коллагеновые образования
Цель исследования — оценка эффективности применения универсальной биоактивной светоотверждаемой бондинговой системы для герметизации дентинных канальцев на этапах протезирования несъемными ортопедическими конструкциями.
Материалы и методы исследования. Для достижения поставленной цели в своей работе мы использовали универсальную биоактивную светоотверждаемую бондинговую систему (УБСБС). На клиническом ортопедическом приеме проводили щадящее кондиционирование отпрепарированного дентина с помощью 8% раствора предельных и непредельных полифунк-циональных органических кислот, растворяющего смазанный слой дентина и раскрывающего дентинные канальцы, что является очень важным этапом для создания гибридного слоя и сохранения проницаемости деминерализованного дентина для биопраймера. Биопраймер представляет собой композицию гидрофильного мономера (гидроксиэтилметакрилат) и водного раствора аминокислот белковой части коллагена [2]. Наличие аминокислот позволяет достигнуть биологической тропности к тканям зуба, эффективно сформировать гибридный слой в дентине зуба, образуя химико-механическую связь с влажным дентином.
Для полной изоляции отпрепарированного дентина нами применен универсальный светоотверждаемый адгезив, разработанный на кафедре терапевтической стоматологии ВГМА им.Н.Н.Бурденко совместно с сотрудниками фирмы ООО «Радуга-Р», содержащий оптимальное количество мономеров (бондинг смол - БИС-ГМА, БИС-УРЕТАН) и светоотверждаемую систему. Состав адгезива обеспечивает прочное соединение между дентином и стоматологическим материалом (цементам или композитом), содержащим компоненты универсального светоотверждаемого адгезива. На отпрепарированную поверхность дентина наносится дентин-кондиционер, содержащий 8% концентрированный раствор предельных и непредельных полифункциональных органических кислот, экспозиция 15 секунд. Затем осторожно смывается водой и высушивается до состояния «искрящегося». На протравленную поверхность дентина осторожными движениями апплицируется тонкий слой биопраймера. Струя воздуха распределяет биопраймер по всей поверхности, экспозиция 60 секунд. Далее, кисточкой наносится тонкий слой универсального светоотверждаемого адгезива, распределяется струей воздуха по поверхности дентина, с последующим применением полимеризационной лампы с длиной волны 450-500 нм в течение 20 сек.
Для оценки эффективности УБСБС при герметизации дентинных канальцев мы использовали аппарат «ДентЭст» (ЗАО «Геософт Дент»), позволяющий определить электропроводность твердых тканей зуба.
Основой для получения научных данных были 87 пациентов, имеющих признаки гиперчувствительности дентина. В группу наблюдения вошли практически здоровые лица, имеющие объективные жалобы на гиперчувствительность зубов после препарирования под несъемные ортопедические конструкции. Пациенты были разделены на 2 группы: первая - 43 пациента, которым после обработки зубов применяли УБСБС, вторая -44 человека, которым не применяли УБСБС, но рекомендовали полоскать полость рта теплым раствором натрия карбоната и применять зубные пасты, содержащие кальций и фтор. Критериями исключения являлась активная патология твердых тканей зубов и мягких тканей полости рта, которые потенциально могли быть причиной болевой реакции, отличной по этиологии от состояния гиперчувствительности дентина, а также курсовой прием анальгетиков, антидепрессантов, седативных и антигистаминных препаратов.
Для объективизации выраженности гиперчувствительности дентина выполнялась воздушная проба-тест по Т. 8Ьіґґ [4] после обработки зубов, после покрытия обработанных зубов УБСБС, а также во время последующих посещений на этапах примерок ортопедических конструкций. Тест предусматривал оценку реакции вестибулярной поверхности обработанных зубов на струю сжатого воздуха, направленного из воздушного пистолета стоматологической установки при температуре 20 °С (±3°С) перпендикулярно тестируемой поверхности на расстоянии около 1 см с экспозицией 1 сек. Оценка результатов теста проводилась по шкале чувствительности: 0 баллов - реакция отсутствует, 1 балл - пациент отмечает дискомфорт, но не настаивает на прекращении теста, 2 балла - пациент отмечает дискомфорт, но демонстрирует моторные реакции (отклоняет голову), 3 балла - пациент отмечает выраженную болевую реакцию, моторные реакции, направленные на немедленное прекращение теста.
Также нами была проведена субъективная оценка интенсивности болевой реакции в области отпрепарированных зубов методом опроса пациентов с применением цифровой рейтинговой шкалы КИЗ [5]. Рейтинговая шкала состоит из 11 пунктов от 0 (боли нет) до 10 (сильная боль, которую можно представить). Согласно экспертным оценкам значения от 1 до 3 соответствуют легкой интенсивности боли, от 4 до 6 - умеренной интенсивности, от 7 и выше сильной интенсивности.
Материалом для исследования также послужили удаленные по ортодонтическим и пародонтологическим показаниям 29 зубов, которые перед удалением были отпрерарированы и покрыты УБСБС согласно инструкции применения. Из удаленных зубов лиц обоего пола готовили сколы и изучали химическую адгезию с помощью растровой электронной микроскопии на низковакуумном электронном микроскопе модели «ШОЬ ^М - 6380ЬУ» производства Японии. Сколы подвергали воздействию неподвижного тонко сфокусированного электронного пучка. Исследования микрорельефа проводили в режиме вторичной электронной эмиссии при ускоряющем напряжении 10-15 кВ. Данная модель электронного микроскопа позволила провести энергодисперсионный анализ, когда планарное распределение химических элементов оценивали по окраске их рентгеновского изображения разными цветами: углерод - синий, кальций - красный.
Статистический анализ материалов, полученных в результате выполнения работы, проводился с использованием математического программного обеспечения 8ТЛТ18Т1СЛ 6Х.
Результаты и их обсуждение. Исходный уровень гиперчувствительности дентина после препарирования зубов в группах исследования не имел достоверных различий и составил по воздушной пробе в первой группе 2,6±0,4, во второй - 2,8±0,3, по рейтинговой шкале интенсивности болевой реакции 6,1±0,6 и 5,7±0,8 соответственно, по электрометрической диагностике дентина: 101±11,2 мкА (4,2x104 Ом) и 99±12,1 мкА
(4,3x104 0м)(р>0,05).
Покрытие отпрепарированных зубов УБСБС, а также применение пациентами полосканий полости рта теплым раствором натрия бикарбоната, зубных паст, содержащих кальций и фтор, обеспечило снижение гиперчувствительности, однако использование УБСБС позволило достоверно более эффективно снизить гиперчувствительность в первой группе в сравнении со второй группой. В первой группе значения воздушной пробы 1,2±0,2, интенсивности болевой реакции с применением рейтинговой шкалы 3,1±0,3, электрометрической диагностики - 43±5,1 мкА (9,9x104 Ом), тогда как во второй группе значения воздушной
пробы 2,3±0,4, интенсивности болевой реакции с применением рейтинговой шкалы 5,9±0,4, электрометрической диагностики -57±5,7 мкА (7,5x104 Ом), что дает основание говорить о снижении электропроводности дентина и повышении его электросопротивления на 25%, повышении его резистентности, снижении его гиперчувствительности, снижении вероятности бактериальной инвазии у пациентов в первой группе.
При анализе рентгеновских карт распределения химических элементов, углерод как характерный компонент органической составляющей биопраймера, наглядно накапливается в поверхностной зоне отпрепарированного дентина, что подтверждает химическую адгезию УБСБС к дентину зуба (см. рис.).
400мкт
Рис. Рентгеновская карта распределения химических элементов в поверхо-стном слое отпрепарированного дентина после аппликации УБСБС
(углерод - синий, кальций - красный). Увеличение х 500 крат
Таким образом, анализ результатов электрометрических исследований, проведенных воздушной пробы и оценки интенсивности болевой реакции в области отпрепарированных зубов, энергодисперсионный анализ показали высокую эффективность в снижении гиперчувствительности дентина при применения универсальной биоактивной светоотверждаемой бондинговой системы в процессе протезирования несъемными ортопедическими конструкциями.
Литература
1. Борисенко, А.В. Композиционные пломбировочные и облицовочные материалы /А.В. Борисенко, В.П. Неспрядько.-Киев: Книга плюс, 2001.- 195 с.
2. Ипполитов, Ю.А. Топохимия и содержание «катионного белка» в структуре зуба человека/ Ю.А. Ипполитов, Э.Г.Быков, О.М. Горшкова // Новости клинической цитологии.- 2001.- Т.5.-№3-4.- С.162.
3. Трушковски, Р. Д. Применение однокомпонентного адгезива для фиксации различных материалов / Р.Д. Трушковски // Настольная книга стоматолога, работающего материалами фирмы Heraeus Kulzer.- 2000.- С.18-21.
4. Schiff, T. Clinical evaluation of the efficacy of a desensitizing paste containing 8% arginine and calcium carbonate in providing instant and lasting in-office relief of dentin hypersensitivity / Schiff T., Delgado E., Zhang Y.P., De Vizio W., Mateo L.R..-Am J Dent 2009; 22 (Sp Is A):8A-15A.
5. Breivik? H. Assessment of pain. British Journal of Anaesthesia / Breivik H., Borchgrevink P.C., Allen S.M., Rosseland L.A., Romundstad L., Hals E.K., Kvarstein G., Stubhaug A..- 2008; 101 (1): 17-24
POSSIBLE DECREASE INDENTIN HYPERSENSITIVITYAT THE STAGE
OFPREPARATIONTOOTHBYORTHOPEDIC STRUCTURES.
I. YU. IPPOLITOV, YU.A. IPPOLITOV, L.N. DEDYURINA Voronezh N.N. Burdenko State Medical Academy
This scientific work describes thepossibility ofdentinaltubules-sealing on orthopedic preparedtooth, in orderto reduceitshypersensi-tivity toprostheticphases.
Key words: hypersensitivity, bondingsystem, toothdentin, Energy dispersiveanalysis.
УДК: 661.31
ИССЛЕДОВАНИЯ МЕТОДОМ ИК-СПЕКТРОМИКРОСКОПИИ С ИСПОЛЬЗОВАНИЕМ СИНХРОТРОННОГО ИЗЛУЧЕНИЯ ИНТАКТНЫХ И ПОРАЖЕННЫХ КАРИОЗНЫМ ПРОЦЕССОМ ЭМАЛИ И ДЕНТИНА ЧЕЛОВЕЧЕСКОГО ЗУБА
Ю.А.ИППОЛИТОВ*, А.Н. ЛУКИН**, П.В. СЕРЕДИН**
В нашей работе мы провели исследования интактных, а также пораженных кариозным процессом эмали и дентина человеческого зуба с привелечением методов ИК-спектромикроскопии с использованием синхротронного излучения.
Показано, что кариес эмали и дентина характеризуется ростом деформационных и валентных колебаний связей N-C-O, N-H и C=O, что говорит о деструктивных процессах в органическом матриксе кристалла гидроксиапатита.
Ключевые слова: интактная эмаль, кариес, интактный дентин, ИК-спектромикроскопия
Известно, что эмаль - самая твердая ткань человеческого организма. Это позволяет ей в ходе выполнения зубом его функции противостоять воздействию больших механических нагрузок. Вместе с тем она весьма хрупка, и в ней при значительной нагрузке могли бы возникнуть трещины, однако этого обычно не происходит благодаря тому, что под ней находится поддерживающий слой более упругого дентина.
Минеральную основу эмали составляют кристаллы апатитов. Кроме основного - гидроксиапатита (75%), в эмали содержится карбонатапатит (19%), хлорапатит (4,4%), фторапатит (0,66%). Менее 2% массы зрелой эмали составляют неапатитные формы.
В тоже время дентин, являющийся основной массой зуба состоит приблизительно на 70 % из неорганического материала в форме кристаллов гидроксиапатита. Органические вещества (белки, жиры, полисахариды) и вода составляют 28-30%. Аминокислотный состав белков типичен для коллагена, много глицина, пролина, оксипролина, нет серосодержащих аминокислот.
Органический состав, как эмали, так и дентина и поныне изучен меньше, чем их минеральная фаза. Так функциональной элементарной единицей органической матрицы эмали считается растворимый в кислоте кальцийсвязывающий белок, способный осаждаться в нейтральной среде при наличии ионов кальция. Кальцийсвязывающий белок эмали и кислотонерастворимый белок определяют ориентацию кристаллов в призмах эмали и ее структуру [1].
Понимание процессов, происходящих в эмали и дентине, как в норме, так и при патологии, во многом зависит от знания ее составных компонентов и связи между органической матрицей и неорганическим веществом. Значение белка до настоящего времени изучено недостаточно, большинство исследователей отводят ему пассивную роль. Так существует мнение, что кариесрези-стентность эмали зависит от содержания в ней не только неорганических веществ, но и белка. «Белковая сеть», окружающая апатиты эмали, предотвращает контакт кислоты с апатитом и смягчает ее влияние.
Известно, что на ранней стадии развития кариозного процесса, особенно пигментированного пятна, содержание белка в участке поражения увеличивается в 3-4 раза, и это пятно в течение нескольких лет может не превращаться в кариозную полость, хотя и наблюдается значительная убыль кальция и фосфора. Это служит важным, хотя и не прямым, доказательством роли белка в стабилизации очаговой деминерализации.
Основные затруднения при изучении органических веществ эмали и дентина связаны с их идентификацией и оценкой. Поэтому наиболее удобным методом исследования таких систем является Инфракрасная Фурье спектроскопия (FTIR), которая широко используется для определения качественного и количественного состава вещества, позволяет судить не только о молекулярном составе вещества, но и о внутренних напряжениях в его решетке, к которым данный метод является очень чувствитель-
* ГБОУ ВПО «Воронежская государственная медицинская академия им. Н.Н.Бурденко Минздравсоцразвития Российской Федерации». 394000, г. Воронеж, ул. Студенческая 10, тел (4732) 53-05-36
ФГБОУ ВПО «Воронежский государственный университет», 394006, г. Воронеж, Университетская пл. 1
