БЕЛОК KLOTHO, ФАКТОР РОСТА ФИБРОБЛАСТОВ 23 И ПОЧЕЧНАЯ ЭКСКРЕЦИЯ КАЛЬЦИЯ НА НАЧАЛЬНЫХ СТАДИЯХ ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНОЙ ХРОНИЧЕСКОЙ БОЛЕЗНИ ПОЧЕК

Богданова Евдокия Олеговна; Галкина Ольга Владимировна; Зубина Ирина Михайловна; Береснева Ольга Николаевна; Иванова Галина Тажимовна; Парастаева Марина Магрезовна; Каюков Иван Глебович; Добронравов Владимир Александрович

ОРИГИНАЛЬНЫЕ СТАТЬИ

Экспериментальные исследования

ORIGINAL ARTICLES Experimental investigations

Для цитирования: Богданова Е.О., Галкина О.В., Зубина И.М., Береснева О.Н., Иванова Г.Т., Парастаева М.М., Каюков И.Г., Добронравов В.А. Белок Klotho, фактор роста фибробластов 23 и почечная экскреция кальция на начальных стадиях экспериментальной хронической болезни почек. Нефрология 2018; 22 (6): 70-76. D0I:10.24884/1561-6274-2018-22-6-70-76

For citation: Bogdanova E., Galkina O.V., Zubina I.M., Beresneva O.N., Ivanova G.T., Parastaeva M.M., Kayukov I.G., V.A. Dobronravov*. Klotho protein, fibroblast growth factor 23 and renal calcium excretion in initial stages of experimental chronic kidney disease. Nephrology (Saint-Petersburg) 2018; 22 (6): 70-76 (In Russ.). D0I:10.24884/1561-6274-2018-22-6-70-76

Е.О. Богданова1, О.В. Галкина1, И.М. Зубина1, О.Н. Береснева1, Г.Т. Иванова2, М.М. Парастаева1, И.Г. Каюков1, В.А. Добронравов*1

БЕЛОК KLOTHO, ФАКТОР РОСТА ФИБРОБЛАСТОВ 23 И ПОЧЕЧНАЯ ЭКСКРЕЦИЯ КАЛЬЦИЯ НА НАЧАЛЬНЫХ СТАДИЯХ ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНОЙ ХРОНИЧЕСКОЙ БОЛЕЗНИ ПОЧЕК

1Научно-исследовательский институт нефрологии Научно-клинического исследовательского центра Первого Санкт-Петербургского медицинского университета им. акад. И.П. Павлова, Россия; 2лаборатория физиологии сердечно-сосудистой и лимфатической системы Института физиологии им. И.П. Павлова РАН, Санкт-Петербург, Россия

E. Bogdanova1, O.V. Galkina1, I.M. Zubina1, O.N. Beresneva1, G.T. Ivanova2, M.M. Parastaeva1, I.G. Kayukov1, V.A. Dobronravov*1

KLOTHO PROTEIN, FIBROBLAST GROWTH FACTOR 23 AND RENAL CALCIUM EXCRETION IN INITIAL STAGES OF EXPERIMENTAL CHRONIC KIDNEY DISEASE

institute of Nephrology Pavlov First Saint Petersburg State Medical University, Russia; laboratory of cardiovascular and lymphatic systems physiology Pavlov Institute of Physiology RAS, Saint Petersburg, Russia

РЕФЕРАТ

ВВЕДЕНИЕ. Фактор роста фибробластов 23 (FGF23) и его ко-рецептор Klotho могут быть связаны с изменениями кальциевого обмена при хронической болезни почек (ХБП) благодаря способности регулировать внутриклеточный транспорт Ca за счет модуляции катионных каналов TRPV5/ TRPV6. ЦЕЛЬ: установить, связаны ли Klotho и FGF23 с реналь-ной экскрецией Са на начальных стадиях экспериментальной ХБП. МАТЕРИАЛ И МЕТОДЫ. Для моделирования ХБП у крыс линии SHR выполняли резекцию 3/4 или 5/6 почек. Определяли концентрации интактных FGF23 и PTH в сыворотке крови методом ИФА и экспрессию белка Klotho в почке методом ИГХ, а также рассчитывали экскретируемую фракцию (FECa) и абсолютную экскрецию (UCa24) Ca с мочой. РЕЗУЛЬТАТЫ. Концентрация креатинина в сыворотке крови, его клиренс и выраженность интерстициального фиброза у экспериментальных моделей соответствовали начальным стадиям хронического повреждения почек. UCa24 и FECa были выше, экспрессия Klotho ниже в группах с более выраженной дисфункцией почек без достоверных различий в уровнях FGF23 и РТН. При множественном регрессионном анализе FECa и UCa24 не были ассоциированы с FGF23, Klotho и РТН. ЗАКЛЮЧЕНИЕ. Ренальная экскреция Са в условиях начальных стадий экспериментальной дисфункции почек не зависит от Klotho и FGF23.

Ключевые слова: белок Klotho, фактор роста фибробластов 23, ренальная экскреция кальция, гипертензия, хроническая болезнь почек

ABSTRACT

INTRODUCTION. It is suggested that fibroblast growth factor 23 (FGF23) and its co-receptor Klotho are probably associated with changes in calcium metabolism in chronic kidney disease (CKD) due to ability to regulate intracellular Ca transport by modulating the cationic channels TRPV5 and TRPV6. THE AIM is to investigate the association between Klotho, FGF23 and renal excretion of Ca in the initial stages of experimental CKD. MATERIAL AND METHODS. The experimental models of chronic kidney injury were resection of the renal tissue in spontaneously hypertensive rats (SHR). Serum concentrations of intact FGF23 and PTH were determined by ELISA, renal Klotho protein expression by IHC. The indices of Ca excretion were calculated. RESULTS. Serum creatinine concentration, creatinine clearance and the severity of interstitial fibrosis in experimental models corresponded to the initial stages of chronic kidney disease. UCa24 and FECa were higher, Klotho protein expression was lower in groups with more severe renal dysfunction, without significant differences in FGF23 and PTH levels. Multiple regression analysis showed that FECa and UCa24 were not associated with FGF23, Klotho, and PTH. CONCLUSION. Renal excretion of Ca in initial stages of experimental kidney damage is not associated with Klotho and FGF23 levels.

Keywords: Klotho protein, fibroblast growth factor 23, renal excretion of calcium, hypertension, chronic kidney disease

* Добронравов В.А. 197022, Санкт-Петербург, ул. Л. Толстого, д. 17, корп. 54. Первый Санкт-Петербургский государственный медицинский университет им. акад. И.П. Павлова, Научно-исследовательский институт нефрологии. Тел.: (812) 338-69-01; E-mail: dobronravov@ nephrolog.ru

ВВЕДЕНИЕ

a-Klotho (Klotho) - трансмембранный белок типа 1 с молекулярной массой (м.м.) 130 кДа, содержит крупный внеклеточный домен, состоящий из двух внутренних повторов (KL1 и KL2), имеющих гомологию с Р-глюкозидазой [1]. Внеклеточный домен может подвергаться протеолитическо-му процессингу металлопротеазами ADAM10/17 (A Disintegrin And Metalloproteinase domain 10/17), попадать в циркуляцию и представляет собой вторую изоформу белка Klotho (116 кДа) [2]. Помимо этого, в результате альтернативного сплайсинга образуется третья секретируемая изоформа Klotho с м.м. 68 кДа, которая содержит только субъединицу KL1 и не может быть заякорена на плазматической мембране [3]. Klotho экспрессирует-ся различными тканями и органами [1]. Однако считается, что почка является основным местом синтеза Klotho и источником его циркулирующих изоформ [4]. Функциональная роль различных изоформ Klotho все еще является предметом споров. Циркулирующий Klotho предположительно обладает FGF23-независимыми гормональными или ферментативными функциями, тогда как трансмембранная изоформа Klotho является ко-рецептором гормона костного происхождения -фактора роста фибробластов 23 (FGF23). Предполагают, что благодаря глюкозидазной активности циркулирующий Klotho способен модифицировать углеводный компонент катионных каналов TRPV5/ TRPV6, что приводит к их накоплению на плазматической мембране эпителиоцитов [5]. FGF23 действует на дистальные канальцы нефро-на, где на базолатеральной мембране эпителиоци-тов экспрессируются его канонический рецептор FGFR1c и ко-рецептор Klotho. Взаимодействие FGF23 с рецепторным комплексом приводит к запуску внутриклеточного сигнального каскада с участием ERK1/2, SGK1, WNK4 и увеличению количества TRPV5 на апикальной мембране [6]. По некоторым данным, при высокой концентрации FGF23 способен осуществлять свои биологические функции через связывание с FGFR3 и FGFR4 даже в условиях дефицита белка Klotho [7]. С целью определения роли FGF23 и Klotho в

регуляции канальцевой реабсорбции Са при ХБП была изучена взаимосвязь между уровнем реналь-ной экспрессии белка К1оШо, сывороточной концентрацией FGF23 и экскрецией Са при экспериментальной дисфункции почек.

МАТЕРИАЛ И МЕТОДЫ

Экспериментальное моделирование. Исследование выполнено на взрослых самцах крыс БНЯ массой тела 190-230 г (биоколлекция Института физиологии им. И.П. Павлова РАН). Общее количество экспериментальных животных составило 54. Эксперимент проводили в соответствии с требованиями по работе с лабораторными животными, после согласования с комиссией по контролю содержания и использования лабораторных животных ПСПбГМУ им. И.П. Павлова. Животных содержали в стандартных условиях вивария, в клетках площадью 0,2 м2 по пять крыс в каждой со свободным доступом к воде. Световой режим контролировался автоматически: 12 ч свет/12 ч темнота; температура в помещении составляла 20-22 оС. Животные получали стандартный лабораторный корм, содержащий 0,8 % Р1. Кормление осуществляли ежедневно по 25-30 г корма на крысу. Для создания экспериментальной реналь-ной дисфункции применяли хирургические модели резекции 3/4 или 5/6 почек [8, 9], контролем служили ложнооперированные животные с соответствующим сроком эксперимента (табл. 1).

За сутки до выведения из эксперимента у животных измеряли артериальное давление (АД) и частоту сердечных сокращений (ЧСС) манжеточ-ным методом, затем помещали в метаболические камеры и фиксировали для сбора мочи на 24 ч в условиях водной депривации. Взятие образцов крови и почечной ткани проводили при выведении животных из эксперимента.

Биохимическое исследование Кровь и мочу центрифугировали при 1500 g в течение 10 мин, после чего проводили исследования. Часть биоматериала хранили при температуре -80 оС. Срок хранения составил не более 6 мес при постоянном контроле температурного режима. Концентрацию Са, креатинина (Сг) определяли на авто-

Таблица 1 / Table 1

Модели хронической болезни почек Chronic kidney disease models

№ 1 2 3 4 5 6

Модель SHR1 SHR2 SHR1(3/4) SHR2(3/4) SHR1(5/6) SHR2(5/6)

Условия Ложная опера- Ложная опера- Резекция 3/4 Резекция 3/4 Резекция 5/6 Резекция 5/6

эксперимента ция, 1 мес ция, 2 мес почки, 1 мес почки, 2 мес почки, 1 мес почки, 2 мес

n 9 9 9 10 9 8

матическом анализаторе SYNCHRON CX DELTA (Beckman Coulter, США).

Абсолютную экскрецию Ca (UCa24) рассчитывали по формуле:

UCa24 (ммоль) = uCa х D, где uCa - концентрация Ca в моче (ммоль/л), D - диурез за 24 ч (л).

Фракционную экскрецию Ca (FECa) рассчитывали по формуле:

FECa (%) = (uCa х sCr)/(sCa х uCr) х 100, где uCa - концентрация Ca в моче (ммоль/л), sCa - концентрация Ca в сыворотке (ммоль/л), uCr - концентрация креатинина в моче (ммоль/л), sCr - концентрация креатинина в сыворотке (ммоль/л).

Скорость клубочковой фильтрации у крыс оценивали по клиренсу креатинина, рассчитанному по формуле:

CCr (мл/мин) = (uCr х D)/(sCr х 1440), где uCr - концентрация креатинина в моче (ммоль/л), sCr - концентрация креатинина в сыворотке (ммоль/л), D - диурез (мл), 1440 - количество минут в сутках.

Концентрации интактных PTH и FGF23 в сыворотке крови крыс определяли иммунофермент-ным методом с использованием тест-систем «Rat Intact PTH ELISA Kit» (Immutopics, Inc., США) и «FGF23 ELISA Kit» (Kainos Laboratories, Inc., Япония).

Гистологическое исследование. Почку фиксировали в 5 % нейтральном формалине (рН 7,2) при комнатной температуре (22 °С) в течение 16 ч, готовили срезы толщиной не более 4 мкм. Площадь коллагенового фиброза измеряли в 10 полях зрения для каждого микропрепарата почки, окрашенного по методике трихром по Массону.

Таблица 2 / Table 2 Корреляционный анализ Correlation analysis

FGF23 PTH Klotho sCr

FECa 0,35 (0,01) 0,43 (0,002) -0,43 (0,002) 0,72 (<0,001)

UCa24 0,40 (0,001) 0,36 (0,01) -0,41 (0,001) 0,56 (<0,001)

Примечание. Указаны значения коэффициента корреляции Спирмена и p (в скобках); FGF23 - фактор роста фибробла-стов 23, PTH - паратиреоидный гормон, sCr - концентрация креатинина сыворотки, FECa - фракционная экскреция Ca, UCa24 - абсолютная экскреция Ca.

The values of Spearman's correlation coefficient and p (in brackets) are represented; FGF23 - serum fibroblast growth factor 23, PTH - serum intact parathyroid hormone, sCr - serum creatinine; sCa - serum calcium, FECa - fractional excretion of Ca, UCa24 -daily Ca excretion.

Для детекции К1оШо в паренхиме почки использовали первичные поликлональные антитела кролика аЬ69208 (АЪеаш, Великобритания), систему Бако ЕпУшоп (Бако, США) и подкрашивали гематоксилином. Содержание ЫоШо исследовали в корковом веществе почки на участках тубулоин-терстиция без существенных фибропластических изменений в 10 полях зрения для каждого гистологического препарата при помощи программы «Видео ТесТ-Морфология 5.2» (ООО «Видеотест», Россия).

Доля Б2 продукта (%) = [(£10 А/Б)/10] х100,

где А - площадь масок со специфическим продуктом реакции; Б - площадь поля зрения.

Статистический анализ проводили при помощи пакета ЗАБ/БТАТ 6.1. Данные представлены как среднее и стандартное отклонение (М±8Б) или медиана с интерквартильным размахом (ш [25 %-75 %)]. Для сравнения групп в зависимости от типа переменной и характера распределения применяли следующие тесты: F-критерий Фишера, критерий Краскелла-Уоллиса. Для исследования связей между переменными применяли корреляционный анализ Спирмена и множественный регрессионный анализ. Межгрупповые различия и регрессионные коэффициенты считали статистически значимыми при р<0,05.

РЕЗУЛЬТАТЫ

Соответствие моделей начальным стадиям хронической болезни почек (ХБП) подтверждалось закономерными изменениями показателей функции почек и выраженностью ренального фиброза у экспериментальных животных (рис. 1).

g- 5 CO CO

CO £2- Ю, ю

y— Fi y— EC

D oi OL оi

I i I i

CO CO CO CO

Рис. 1. Концентрация креатинина в крови и ренальный фиброз в экспериментальных моделях.

Figure 1. The levels of serum creatinine and renal fibrosis in experimental models.

A 2,42

2,38

ц 2,34

о 2,30 s

s- 2,26 я О

со 2,22 2,18

2,14

К х

от

Mean±Conf. Int.

2 X

от

1 7 /У 1

i /

Т /л i /

*

-L 1 Т у

1

F(5;48)=2,11; р=0,08

5 5 CD со

со со Ю ю

5 Е

X X X X

от от от от

Г 0,38

0,34

0,30

S 0,26 о

В 0,22 *

0,18 0,14 0,10

1 1

1 1 X .

. "Г .

1-, i

|F(5;54)= 10,7; р <0,0011

Е 2

X X

iНе можете найти то, что вам нужно? Попробуйте сервис подбора литературы.

от от Median 125 %-75%

5 д; со ю

со со ю ю

2 5

X X X X

ОТ от от от

1,4 1,0 0,6 0,2 -0,2

] FECa, % (L) I uCa24, ммоль (R)

т щ

FECa: F(5;48) = 19,47; р < 0,001 uCa24: F(5;48) = 10,22; р < 0,001

О. X

ОТ

гм се х от

-^-^-^—0,00

0,04 0,03 0,02 0,01

Mean±Conf. Int. В Ю00 900 800 700

со

£ 600 СЭ

5 5 со со

СО, со. ю. Й

т— см т— см

о; 0£ 01 се

X X X X

от от от от

s

500 400 300

Ж 1 1

1 1

1 1 J 1

|F(5;54) = 1,72; р = 0,15|

се х от

X

от

Median 125%-75%

5 5 со со

со СО, ю. ю.

у- см" с\Г

се се се се

X X X X

от от от от

Д 180 160 140 с, 120

г

"Е 100

х

ID.

80 60 40 20 0

II

1 1 1 1 1 1

1

F(5;54) = 0,89; р = 0,49

се х от

см

се х от

Median 125 %-75%

со со

со со ю ю

т— см см

се се. се се

X X X X

от от от от

Рис. 2. Показатели обмена кальция при моделировании ХБП. А - концентрация кальция в крови (ммоль/л), Б - относительная и абсолютная экскреция кальция, В - концентрация FGF23 в сыворотке крови (пг/мл), Г - экспрессия белка Klotho в почке (доля площади поля зрения), Д - концентрация PTH в сыворотке крови (пг/мл).

Figure 2. Indices of calcium exchange in CKD models: А - the levels of serum calcium (mmol/L), B - daily and fractional Ca excretion, C - the levels of serum FGF23 (pg/ml), D - renal Klotho protein expression (part of FOV), E - the levels of serum PTH (pg/ml).

При снижении функции почек у спонтанно ги-пертензивных крыс наблюдали рост экскретируе-мой фракции и абсолютной экскреции Ca (рис. 2, Б), сопровождающийся снижением ренальной экспрессии белка Klotho (см. рис. 2, Г) при отсутствии достоверных изменений концентраций PTH и FGF23 (см. рис. 2, В, Д). Концентрация Ca в сыворотке крови значимо не изменялась (см. рис. 2, А).

Ренальная экскреция кальция имела достоверные корреляционные связи с концентрациями PTH, FGF23, экспрессией Klotho в почке и в сыворотке крови (табл. 2).

При регрессионном моделировании FECa и UCa24 были независимо связаны с sCr, но не с экспрессией белка Klotho в почке, концентрациями FGF23 и PTH. Ассоциаций sCa с исследуемыми показателями выявлено не было (табл. 3).

Таблица 3 / Table 3

Множественный регрессионный анализ Multiple regression analysis

Модели (зависимая переменная) Models (dependent variable) Независимые переменные Independent variables Beta SE(Beta) Значение p p-value

Модель 1 (sCa) Adjusted R2=0,05; р=0,65 FGF23 0,168 0,147 0,257

PTH -0,107 0,142 0,456

Klotho 0,064 0,162 0,692

sCr -0,069 0,164 0,678

Модель 2 (FECa) Adjusted R2=0,45; р<0,001 FGF23 0,053 0,114 0,647

PTH 0,076 0,110 0,496

Klotho 0,121 0,138 0,388

sCr 0,746 0,136 <0,001

Модель 3 (UCa24) Adjusted R2=0,21; р=0,006 FGF23 0,190 0,137 0,171

PTH 0,067 0,132 0,614

Klotho 0,062 0,166 0,713

sCr 0,478 0,163 0,005

Примечание. Указаны скорректированные коэффициенты детерминации R2, значения р для моделей, стандартизованные коэффициенты регрессии Beta, стандартная ошибка среднего SE(Beta) и значения р для коэффициента Beta. FGF23 - фактор роста фибробластов 23, PTH - паратиреоидный гормон, sCr - концентрация креатинина в сыворотке, sCa - кальций в сыворотке, FECa - фракционная экскреция Ca, UCa24 - абсолютная экскреция Ca.

Adjusted determination coefficients R2 and their p values, standardized regression coefficients Beta, their standard errors SE(Beta) and p values for the Beta coefficient are represented. FGF23 - serum fibroblast growth factor 23, PTH - serum intact parathyroid hormone, sCr - serum creatinine; sCa - serum calcium, FECa - fractional excretion of Ca, UCa24 - daily Ca excretion.

ОБСУЖДЕНИЕ

До недавнего времени РТН считался главным гормоном, противодействующим гипокальцие-мии, закономерно развивающейся при ХБП. В экспериментальных исследованиях последних лет было показано, что FGF23 и его ко-рецептор К1оШо также способны регулировать реабсорб-цию Са в тубулярном эпителии [5, 10]. При этом активация регуляторной системы FGF23/Klotho/ FGFRs предположительно происходит несколько раньше реакции паращитовидных желез и роста концентрации РТН [11].

В настоящем исследовании при снижении функции почек у спонтанно гипертензивных крыс наблюдали рост относительной и абсолютной экскреции кальция при тенденции к увеличению концентраций РТН и FGF23 в крови, а также закономерном снижении ренальной экспрессии белка К1оШо. Однако выявленные корреляционные зависимости противоречат предполагаемым молекулярным механизмам действия исследуемых гормонов [5, 6, 10]. Уровень FGF23 прямо коррелировал с FECa. Эффекты FGF23, напротив, способствуют увеличению реабсорбции Са, а рост его концентрации должен был бы приводить к снижению экскреции Са почками. Наблюдаемая корреляционная зависимость может быть связана с FGF23-опосредованным нарушением образования кальцитриола [12, 13]. Известно, что действие FGF23 связано с угнетением синтеза активной формы Б-гормона [12]. В свою очередь

кальцитриол участвует в регуляции реабсорб-ции Са не только через действие на экспрессию и секрецию РТН, но также стимулирует внутриклеточный транспорт через цитоплазматиче-ский Б-зависимый кальций-связывающий белок (кальбиндин-Б) и АТФ-зависимую Са-помпу на базолатеральной мембране [13].

Физиологически обоснованной могла бы являться обратная корреляционная зависимость между мочевой экскрецией кальция и К1оШо. Как предполагают, последний может обладать разнообразными FGF23-независимыми свойствами, включая регуляцию Са-каналов (ТЯРС5/ТЯРС6) [14-20].

Полученные нами данные регрессионного моделирования не подтверждают предположений о том, что К1оШо и FGF23 независимо связаны с регуляцией почечной экскреции Са, как и данные других исследований [21]. Существенно более высокие показатели иСа24 и FECa при увеличении степени выраженности экспериментальной дисфункции почек, очевидно, обусловлены действием иных Са-регулирующих механизмов.

ЗАКЛЮЧЕНИЕ

Экскреция Са почками в условиях ранних стадий экспериментальной ХБП, по-видимому, не зависит от эффектов К1оШо и FGF23.

Работа выполнена при поддержке Российского Фонда фундаментальных исследований (гранты №1304-01886, №18-015-00425, №18-315-00342).

БИБЛИОГРАФИЧЕСКИЙ СПИСОК

1. Kuro-o M, Matsumura X Aizawa H et al. Mutation of the mouse klotho gene leads to a syndrome resembling ageing. Nature 1997;390:45-51. Doi: 10.1038/36285

2. Imura A, Iwano A, Tohyama O et al. Secreted Klotho protein in sera and CSF: implication for post-translational cleavage in release of Klotho protein from cell membrane. FEBS Lett 2004;565:143-147. Doi: 10.1016/j.febslet.2004.03.090

3. Matsumura X Aizawa H, Shiraki-Iida T et al. Identification of the human klotho gene and its two transcripts encoding membrane and secreted klotho protein. Biochem Biophys Res Commun 1998;242:626-630. Doi: 10.1006/bbrc.1997.8019

4. Lindberg K, Amin R, Moe OW et al. The kidney is the principal organ mediating klotho effects. J Am Soc Nephrol 2014;25:2169-2175. Doi: 10.1681/ASN.2013111209

5. Van Husen M, Fischer AK, Lehnhardt A et al. Fibroblast growth factor 23 and bone metabolism in children with chronic kidney disease. Kidney Int 2010;78:200-206. Doi: 10.1038/ ki.2010.107

6. Andrukhova O, Smorodchenko A, Egerbacher M et al. FGF23 promotes renal calcium reabsorption through the TRPV5 channel. EMBO J 2014;33:229-246. Doi: 10.1002/ embj.201284188

7. Alexander Grabner, Karla Schramm, Neerupma Silswal et al. FGF23/FGFR4-mediated left ventricular hypertrophy is reversible. SciRep 2017; 7: 1993. Doi: 10.1038/s41598-017-02068-6

8. Takahashi S, Okada K, Nagura Y et al. Three-quarters nephrectomy in rats as a model of early renal failure. Jpn J Nephrol 1991;33(1):27-31. Doi: 10.14842/jpnjnephrol1959.33.27

iНе можете найти то, что вам нужно? Попробуйте сервис подбора литературы.

9. Береснева ОН, Парастаева ММ, Иванова ГТ и др. Оценка кардиопротективного действия малобелковой соевой диеты и уровень неорганических анионов сыворотки крови у спонтанно-гипертензивных крыс с нефрэктомией. Нефрология 2007; 11(3): 70-76. Doi: 10.24884/1561-6274-2007-11-3-7076 [Beresneva ON, Parastaeva MM, Ivanova GT et al. Assessment of cardioprotective effects of low-protein soy diet and level of nonorganic anions of blood serum in spontaneously hypertensive rats. Nephrology (Saint-Petersburg) 2007;11(3):70-76]

10. Huang CL. Regulation of ion channels by secreted Klotho. Adv Exp Med Biol 2012;728:100-106. Doi: 10.1007/978-1-4614-0887-1_7

11. Isakova T, Wahl P, Vargas GS et al. Fibroblast growth factor 23 is elevated before parathyroid hormone and phosphate in chronic kidney disease. Kidney Int 2011;79(12):1370-1378. Doi: 10.1038/ki.2011.47

12. Armbrecht HJ, Wongsurawat N, Zenser TV, Davis BB. Effect of PTH and 1,25(OH)2D3 on renal 25(OH)D3 metabolism, adenylate cyclase, and protein kinase. Am J Physiol 1984;246(1 Pt 1):102-107. Doi: 10.1152/ajpendo.1984.246.1.E102

13. Johnson JA, Kumar R. Vitamin D and renal calcium transport. Current Opinion in Nephrology and Hypertension 1994;3(4):424-429

14. Kurosu H, Yamamoto M, Clark JD et al. Suppression of aging in mice by the hormone Klotho. Science 2005; 309:1829-1833. Doi: 10.1126/science.1112766

15. Xu X Sun Z. Molecular basis of Klotho: from gene to function in aging. Endocr Rev 2015; 36:174-193. Doi: 10.1210/ er.2013-1079

16. Cha SK, Ortega B, Kurosu H, et al. Removal of sialic acid involving Klotho causes cell-surface retention of TRPV5 channel via binding to galectin1. Proc Natl Acad Sci USA 2008; 105:98059810. Doi: 10.1073/pnas.0803223105

17. Tohyama O, Imura A, Iwano A, et al. Klotho is a novel beta-glucuronidase capable of hydrolyzing steroid beta-glucuronides. J BiolChem 2004;279:9777-9784. Doi: 10.1074/jbc.M312392200

18. Hu MC, Shi M, Zhang J, et al. Klotho: a novel phosphaturic substance acting as an autocrine enzyme in the renal proximal tubule. FASEB J 2010;24:3438-3450. Doi: 10.1096/fj.10-154765

19. Chang Q, Hoefs S, Van Der Kemp AW, et al. The beta-glucuronidase Klotho hydrolyzes and activates the TRPV5 channel. Science 2005;310:490-493. Doi: 10.1126/science.1114245

20. Huang CL. Regulation of ion channels by secreted Klotho. Adv Exp Med Biol. 2012; 728:100-106. Doi:10.1007/978-1-4614-0887-1_7

21. Andrukhova O, Bayer J, Schüler C et al. Klotho Lacks an FGF23-Independent Role in Mineral Homeostasis. JBMR 2017;32(10):2049-2061. Doi: 10.1002/jbmr.3195

Сведения об авторах:

Богданова Евдокия Олеговна

197022, Россия, Санкт-Петербург, ул. Л. Толстого, д. 17, корп. 54. Первый Санкт-Петербургский государственный медицинский университет им. акад. И.П. Павлова, Научно-исследовательский институт нефрологии, лаборатория биохимического гомеостаза. Тел.: (812) 338-69-31; E-mail: [email protected]. Bogdanova Evdokia

Affiliations: 197022 Russia, St. Petersburg, L. Tolstoy st., 17, build. 54, Pavlov First Saint Petersburg State Medical University Institute of Nephrology Laboratory of Biochemical Homeostasis, Phone (812) 338-69-31; E-mail: [email protected].

Галкина Ольга Владимировна, канд. биол. наук 197022, Россия, Санкт-Петербург, ул. Л. Толстого, д. 17, корп. 54. Первый Санкт-Петербургский государственный медицинский университет им. акад. И.П. Павлова, Научно-исследовательский институт нефрологии, лаборатория биохимического гомеостаза. Тел.: (812) 338-69-31; E-mail: [email protected]. Olga V. Galkina PhD

Affiliations: 197022 Russia, St. Petersburg, L. Tolstoy st., 17, build. 54, Pavlov First Saint Petersburg State Medical University Institute of Nephrology Laboratory of Biochemical Homeostasis, head, Phone (812) 338-69-31; E-mail: [email protected].

Зубина Ирина Михайловна, канд. биол. наук 197022, Россия, Санкт-Петербург, ул. Л. Толстого, д. 17, корп. 54. Первый Санкт-Петербургский государственный медицинский университет им. акад. И.П. Павлова, Научно-исследовательский институт нефрологии, лаборатория биохимического гомеостаза. Тел.: (812) 338-69-31; E-mail: [email protected]. Irina M. Zubina PhD

Affiliations: 197022 Russia, St. Petersburg, L. Tolstoy st., 17, build. 54, Pavlov First Saint Petersburg State Medical University Institute of Nephrology Laboratory of Biochemical Homeostasis, Phone (812) 338-69-31; E-mail: [email protected].

Береснева Ольга Николаевна, канд. биол. наук 197022, Россия, Санкт-Петербург, ул. Л. Толстого, д. 17, корп. 54. Первый Санкт-Петербургский государственный медицинский университет им. акад. И.П. Павлова, Научно-исследовательский институт нефрологии, лаборатория клинической физиологии почки. Тел.: (812) 338-69-31; E-mail: [email protected] Olga N. Beresneva PhD

Affiliations: 197022 Russia, St. Petersburg, L. Tolstoy st., 17, build. 54, Pavlov First Saint Petersburg State Medical University Institute ofNephrology Laboratory of Kidney Clinical Physiology, Phone (812) 338-69-31; E-mail: [email protected]

Иванова Галина Тажимовна, канд. биол. наук 199034, Санкт-Петербург, наб. Макарова, д. 6. Институт физиологии им. И.П. Павлова РАН, лаборатория физиологии сердечно-сосудистой и лимфатической системы. Тел.: (812) 328-11-01, e-mail: [email protected]

Galina T. Ivanova PhD

Affiliations: 199034, Санкт-Петербург, наб. Макарова, д. 6. Pavlov, Institute of Physiology RAS Laboratory of cardiovascular and lymphatic systems physiology, Phone (812) 328-11-01, E-mail: [email protected]

Парастаева Марина Магрезовна, канд. биол. наук 197022, Россия, Санкт-Петербург, ул. Л. Толстого, д. 17, корп. 54. Первый Санкт-Петербургский государственный медицинский университет им. акад. И.П. Павлова, Научно-исследовательский институт нефрологии, лаборатория клинической физиологии почки. Тел.: (812) 338-69-01; E-mail: [email protected] Marina M. Parastaeva PhD

Affiliations: 197022 Russia, St. Petersburg, L. Tolstoy st., 17, build. 54, Pavlov First Saint Petersburg State Medical University Institute ofNephrology Laboratory of Kidney Clinical Physiology, Phone (812) 338-69-01; E-mail: [email protected]

Проф. Каюков Иван Глебович, д-р мед. наук 197022, Россия, Санкт-Петербург, ул. Л. Толстого, д. 17, корп. 54. Первый Санкт-Петербургский государственный медицинский университет им. акад. И.П. Павлова, Научно-исследовательский институт нефрологии, лаборатория клинической физиологии почки. Тел.: (812) 338-69-01; E-mail: [email protected]

Prof. Ivan G. Kayukov, MD, PhD, DSc

Affiliations: 197022 Russia, St. Petersburg, L. Tolstoy st., 17, build. 54, Pavlov First Saint Petersburg State Medical University Institute ofNephrology Laboratory of Kidney Clinical Physiology, head, Phone (812) 338-69-01; E-mail: [email protected]

Проф. Добронравов Владимир Александрович, д-р мед. наук 197022, Россия, Санкт-Петербург, ул. Л. Толстого, д. 17, корп. 54. Первый Санкт-Петербургский государственный медицинский университет им. акад. И.П. Павлова, Научно-исследовательский институт нефрологии, заместитель директора. Тел.: (812) 338-69-01; E-mail: [email protected] Prof. Vladimir A. Dobronravov, MD, PhD, DSc Affiliations: 197022 Russia, St. Petersburg, L. Tolstoy st., 17, build. 54, Pavlov First Saint Petersburg State Medical University Institute of Nephrology, Vice Director, Phone (812) 338-69-01; E-mail: [email protected]

Авторы заявляют об отсутствии конфликта интересов.

Поступила в редакцию: 01.10.2018 Принята в печать: 14.11.2018 Article received: 01.10.2018 Accepted for publication: 14.11.2018

KLOTHO protein, fibroblast growth factor 23 and renal calcium excretion in initial stages of experimental chronic kidney disease