CC BY
33
JOURNAL OF NEW MEDICAL TECHNOLOGIES - 2016 - V. 23, № 4 - P. 71-78
УДК: 612.111.6 : 616.37 - 002.1 - 08- 092.9 DOI: 10.12737/23853
БЕЛКОВО-ЛИПИДНЫЙ СПЕКТР МЕМБРАНЫ И ВНУТРИКЛЕТОЧНЫЙ МЕТАБОЛИЗМ ЭРИТРОЦИТОВ ПРИ ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНОМ ОСТРОМ ДЕСТРУКТИВНОМ ПАНКРЕАТИТЕ; КОРРЕКЦИЯ НАРУШЕНИЙ ПРОИЗВОДНЫМИ
3-ОКСИПИРИДИНА
В. А. РАГУЛИНА, С. А. ДОЛГАРЕВА, Н.А. КОНОПЛЯ, О. А. СУНЯЙКИНА, О.Н. БУШМИНА
Курский государственный медицинский университет, ул. К. Маркса 3, Курск, 305041, Россия, e-mail: konoplya51@mail.ru
Аннотация. Цель работы стало установление нарушений белково-липидного спектра мембран и внутриклеточного метаболизма эритроцитов в условиях экспериментального острого деструктивного панкреатита и эффективности использования в их коррекции производных 3-оксипиридина. Эксперименты были проведены на крысах Вистар. Все исследования проводили в одно и то же время суток. Острый деструктивный панкреатит воспроизводили путем перевязки протоков поджелудочной железы с последующим подкожным введением прозерина. Производные 3-оксипиридина начинали вводить сразу после моделирования пятикратно, через 24 часа, внутрибрюшинно: соединение ХС-9 -35 мг/кг, мексидол и этоксидол по 50 мг/кг. Электрофорез выделенных из мембраны эритроцитарных белков проводили по методу U.K. Laemmli. Липиды определяли методом тонкослойной хроматографии. Состояние метаболизма эритроцитов оценивали по содержанию в них малонового диальдеги-да, ацилгидроперекисей, Total NO, активности супероксиддисмутазы, каталазы, общей сорбционной способности и емкости гликокаликса клеток. Установлены выраженные нарушения внутриклеточного метаболизма эритроцитов и белково-липидного спектра их мембран, ответственных за структурооб-разование, стабилизацию, формообразование, гибкость мембраны, внутриклеточный метаболизм, Использование производных 3-оксипиридина позволяет корригировать и нормализовать ряд показателей структурно-функциональных свойств эритроцитов. Максимальной эффективностью обладает этоксидол, минимальной - мексидол, ХС-9 занимает промежуточное положение.
Ключевые слова: экспериментальный острый панкреатит, производные 3-оксипиридина, структурно-функциональные свойства эритроцитов.
PROTEIN-LIPIDIC MEMBRANE SPECTRUM AND INTRACELLULAR METABOLISM OF ERYTHROCYTES IN EXPERIMENTAL ACUTE DESTRUCTIVE PANCREATITIS; DISORDER CORRECTION BY 3-OXYPYRIDIN DERIVATIVES
V.A. RAGULINA, S.A. DOLGAREVA, N.A. KONOPLYA, O.A. SUNYAKINA, O.N. BUSHMINA
Kursk State Medical University, Karl Marx Str., 3, Kursk, 305041, Russia, e-mail: konoplya51@mail.ru
Abstract: The research objective is to reveal disorder of protein-lipidic membrane spectrum and intracellular metabolism of erythrocytes in experimental acute destructive pancreatitis (ADP) and 3-oxypyridin derivatives efficiency in their correction as well. The experiments were conducted with Wistar rats. ADP was implemented by means of pancreatic ducts ligation followed by subcutaneous proserinum injection. 3-oxypyridin derivatives were intraperitoneally introduced five-times in 24 hours just after simulation: compound ХС-9 - 35 mg/kg, mexidol and etoxidol - 50 mg/kg each. The electrophoresis of erythrocytic membrane proteins was carried out by means of U.K. Laemmli's method. Lipids were determined by the method of thin-layer chromatography. Condition of erythrocyte metabolism was evaluated by the content of malon-dialdehyde, acyl hydroperoxides, Total NO, superoxide dismutase, catalase, total sorption capacity and capacity cell glycocalyx. Expressed disorders of erythrocytes intracellular metabolism and protein-lipidic spectrum of their membranes responsible for structure formation, stabilization, morphogenesis, membrane flexibility and intracellular metabolism have been determined. The use of 3-oxypyridin derivatives allows to
JOURNAL OF NEW MEDICAL TECHNOLOGIES - 2016 - V. 23, № 4 - P. 71-78
correct and to normalize some indices of erythrocytes structurally-functional properties. Etoxydol has a maximal efficiency, mexidol - a minimal efficiency, XC-9 is in intermediate position. Key words: experimental acute pancreatitis, 3-oxypyridin derivatives, erythrocytes
В настоящее время в структуре летальности при острой хирургической патологии органов брюшной полости острый панкреатит занимает ведущую позицию. Основной причиной летальности при остром панкреатите является прогрессирующий эндотоксикоз, приводящий к полиорганной недостаточности [1,11,12]. Чрезвычайно важное место в системе лечебных мероприятий при патологии занимает восстановление морфофункционального состояния форменных элементов крови [5,13,17].
Между тем до сих пор действие антиокси-дантов на их морфофункциональное состояние при панкреатите изучено неполно [6,9,15]. Использование антиоксидантной терапии обусловлено тем, что одним из пусковых механизмов в патогенезе многих заболеваний, в том числе и панкреатита являются мембранодеста-билизирующие процессы [7,19,20]. Безусловно, важнейшей предпосылкой для такого рода исследований послужили сведения последних лет о важнейшей роли липидных и белковых нарушений в патогенезе различных заболеваний [8,9,18]. Необходимой оценкой эффективности препаратов является их доклиническое испытание на экспериментальных моделях патологических состояний.
Цель исследования - установление нарушений белково-липидного спектра мембран и внутриклеточного метаболизма эритроцитов в условиях экспериментального острого деструктивного панкреатита и эффективности использования в их коррекции производных 3-оксипиридина.
Материалы и методы исследования. Эксперименты проведены на 84 здоровых половозрелых крысах Вистар, массой 130-180 г. В опытах использовали животных, прошедших карантинный режим вивария Курского государственного медицинского университета и не имевших внешних признаков каких-либо заболеваний. Все исследования проводили в одно и то же время суток, с 8 до 12 ч, с соблюдением принципов, изложенных в Конвенции по защите позвоночных животных, используемых для экспериментальных и других целей (г. Страсбург, Франция, 1986) и согласно правилам
лабораторной практики РФ (приказ МЗ РФ № 267 от 19.06.2003 г.).
Производные 3-оксипиридина вводили пятикратно, через 24 часа, внутрибрюшинно в экспериментально подобранных дозах: ХС-9 -35 мг/кг, этоксидол - 50 мг/кг. В качестве препарата сравнения использовали производное ок-сипиридина - мексидол, который вводили внутрибрюшинно, в дозе 50 мг/кг, по той же схеме, что и исследуемые соединения.
Экспериментальный острый деструктивный панкреатит (ОДП) у животных воспроизводили путем перевязки протоков поджелудочной железы с последующим подкожным введением прозерина [2]. Производные 3-оксипиридина начинали вводить с первых суток моделирования ОДП. Животные после моделирования экспериментальный острый панкреатит (ЭОП) выводились из опыта через 5 суток.
Для получения эритроцитов гепаринизи-рованную цельную кровь отстаивали дважды в 10 мМ Nfl-фосфатном буфере (рН=7,4), содержащем 0,9% хлорида натрия и 3% декстрана Т-500, в течение 30 минут при температуре 37°С. После этого кровь центрифугировали, удаляли надосадочную жидкость аспирацией. Эритро-цитарную массу подвергали дополнительной очистке на хроматографической колонке через HBS-целлюлозу. В целях определения общей сорбционной способности эритроцитов (ССЭ), обусловленной наружной архитектоникой клеточной мембраны, по отношению к витальным красителям, 1 мл суспензии эритроцитов смешивали в пробирке с 3 мл 0,025% раствора ме-тиленового синего, инкубировали 10 мин при комнатной температуре и центрифугировали в течение 10 мин при 800 g. При длине волны 630 нм определяли оптическую плотность при помощи спектрофотометра PD 303 S Apel (Япония) исходного раствора и надосадочной жидкости в единицах экстинкции по отношению к изотоническому раствору натрия хлорида. Количество поглощенного красителя выражали в процентах по формуле (1):
ССЭ=100-100 С2/С1, (1)
где ССЭ - сорбционная способность эритроцитов в % поглощенного красителя; С1 - оптическая
ВЕСТНИК НОВЫХ МЕДИЦИНСКИХ ТЕХНОЛОГИЙ - 2016 - Т. 23, № 4 - С. 71-78 JOURNAL OF NEW MEDICAL TECHNOLOGIES - 2016 - V. 23, № 4 - P. 71-78
плотность раствора до инкубации с эритроцитами в ед. экстинкции; С2 - оптическая плотность раствора после инкубации с эритроцитами, ед. экстинкции.
Для определения сорбционной емкости гли-кокаликса (СЕГ) 1 мл суспензии эритроцитов, содержащий 4*107 клеток, смешивали с равным объемом изотонического раствора натрия хлорида, содержащего 0,005% альцианового синего, инкубировали 10 мин при температуре 21°С и центрифугировали в течение 10 мин при 400 g. При длине волны 617 нм, используя в качестве контроля изотонический раствор натрия хлорида, измеряли концентрацию красителя в надосадочной жидкости. Количество поглощенного альцианового синего рассчитывали в граммах на 1 эритроцит.
Интенсивность процессов перекисного окисления липидов (ПОЛ) оценивали спектрофото-метрически при помощи спектрофотометра PD 303 S Apel (Япония) по содержанию в эритроцитах продуктов деградации полиненасыщенных жирных кислот - производных тиобарби-туровой кислоты (малоновый диальдегид - МДА и ацилгидроперекиси - АГП). Для оценки состояния антиоксидантной системы определяли активность супероксиддисмутазы (СОД), каталазы методом прямо-
го/конкурентного твердофазного им-муноферментного анализа с применением готовых коммерческих наборов. Уровень Total NO выявляли с использованием двух аналитических операций: измерение эндогенного нитрита и превращение нитрата в нитрит с использованием нитрит-редуктазы с последующим измерением общего нитрита по абсорбции азокрасителя в реакции Грисса при длине волны 540 нм с применением коммерческого набора для твердофазного ИФА фирмы «R&D» (Англия). Регистрация всех результатов иммуноферментного анализа осуществлялась при помощи автоматического ридера для ИФА Эфос 9305 (Россия).
Мембраны эритроцитов получали методом G.T. Dodge [24]. Электрофорез проводили в присутствии додецилсульфата натрия в вертикальных пластинах полиакриламидного геля по методу U.K. Laemmli [26]. Белки окрашивали кума-си голубым R-250 по модифицированной мето-
дике G. Fairbanks [25]. Липиды определяли методом тонкослойной хроматографии [16].
Статистическую обработку результатов исследования проводили по общепринятым критериям вариационно-статистического анализа с вычислением средних величин (M), ошибки средней арифметической (m) с помощью пакета компьютерных программ Microsoft Excel, 2010. Существенность различий оценивали по U-критерию. Статистически значимыми считали различия с p=0,05.
Результаты и их обсуждение. В условиях ОДП через 5 суток после моделирования установлено снижение содержания а- и ß-спектрина, анкирина, анионтранспортного белка (АТБ), актина, глицеральдегид-3-
фосфатдегидрогеназы (Г-3-ФД), глутатион-S-трансферазы (Г-S-T) и повышение уровня белков полосы 4.1 и 4.5, паллидина, дематина, тропо-миозина (табл. 1).
Таблица 1
Структурно-функциональные свойства мембраны эритроцитов у животных с ОДП на фоне приема производных 3-оксипиридина (мг %, M±m)
Примечание: здесь и далее звездочкой отмечены достоверные отличия средних арифметических (р=0,05); цифры рядом со звездочкой - по отношению к показателям какой группы эти различия
Таким образом, выявлено 100% нарушение в количественном отношении исследованных показателей белкового спектра мембраны эритроцитов, ответственных за структурообра-зование и стабилизацию мембраны эритроцитов (а- и р-спектрин, дематин, анкирин, белок
Показатели l 2 3 4 s
Контроль ОДП ОДП+мек сидол ОДП+ХС-9 ОДП+это ксидол
а-спектрин 108,5±6,2 72,2±3,7"1 83,4±4,3"1-2 90,2±4,1"1-2 95,6±4,8"i-3
ß-спектрин 91,3±4,1 64,7±3,5"1 73,8±3,2"1-2 82,5±4,5"1'3 84,3±3,5"1'3
Анкирин 70,5±4,1 38,4±2,21"i 50,6±3,r1-2 54,5±4,2"1-2 56,3±3,9"1-2
АТБ 196,2±9,3 162,6±7,2"i 180,4±5,2"1-2 185,4±5,6"2 183,9±4,9"2
4.1 81,9±4,1 92,1±4,4"1 86,3±3,9 88,5±4,2 83,9±4,1
Паллидин 64,9±3,2 78,1±3,5"i 70,3±3,6 72,3±4,1 69,8±3,8
4.5 72,9±3,2 88,4±3,8"1 80,2±3,5"1-2 78,4±4,3"2 75,9±3,1*2
Дематин 41,2±2,8 53,1±2,4"1 51,3±2,8"! 46,2±2,9 45,2±3,0
Актин 164,1±5,1 133,2±4,5"i 150,5±5,2"1-2 147,3±4,2"i. 2 153,9±5,9"i. 2
Г-3-ФД 57,0±2,2 41,4±3,1"i 50,3±2,1"1-2 52,4±3,1"2 54,3±3,8"2
Тропомиозин 65,4±4,6 72,1±3,7"1 68,3±3,2 67,±2,2 65,3±3,7
Г-S-T 63,4±2,7 48,4±3,1"i 54,9±3,0"1-2 56,8±2,3"1-2 57,1±3,5"1-2
JOURNAL OF NEW MEDICAL TECHNOLOGIES - 2016 - V. 23, № 4 - P. 71-78
полосы 4.1, паллидин, АТБ), формообразование и гибкость мембраны (актин, тропомиозин), внутриклеточный метаболизм (АТБ, Г-3-ФД, Г-Б-Т, белок полосы 4.5).
Таблица 2
Липидный спектр мембран эритроцитов у животных с ОДП на фоне приема производных 3-оксипиридина (мг%, М±т)
Показатели 1 2 3 4 5
Контроль ОДП ОДП+мек сидол ОДП+ХС-9 ОДП + этокси-дол
Холестерин 43,0±2,1 51,4±3,Г1 47,4±2,2 48,5±3,1 46,6±3,2
Эфиры холестерина 38,0±2,2 43,7±2,4"1 42,4±1,2"i 40,4±2,2 41,7±2,3
Свободные жирные кислоты 4,3±0,2 6,31±0,2"1 5,75±0,3"1-2 5,21±0,4"1-2 5,0±0,2"1-2
Моно-и диг-лицериды 10,4±0,4 8,1±0,3"i 9,33±1,1 10,01±2,1 10,0±1,0
Триглицери-ды 15,6±1,2 10,5±1,1"i 11,6±1,2"i 13,9±1,31"2-3 14,2±1,7"2-3
Фосфатидил-холин 24,0±1,9 16,2±1,0"i 20,3±1,2"1-2 19,8±1,3"1-2 21,6±1,8"2
Фосфатидил-этаноламин 24,63±2, 1 19,4±1,8"i 18,4±0,8"i 20,7±1,4"1 19,2±1,1"i
Лизофосфа-тидил-холин 22,3±0,1 26,7±1,3"i 27,4±0,9"i 25,5±1,0"1 23,1±1,1"2-3
Фосфатидил-инозитол 5,1±0,06 4,0±0,07"i 4,4±0,2"1-2 4,62±0,2"1-2 4,7±0,3"2
Сфингомие-лин 11,8±0,5 8,1±0,3"i 9,1±0,3"1-2 10,17±0,3"i-3 10,4±0,2"i-3
Таблица 3
Метаболический статус эритроцитов у животных с ОДП на фоне приема производных 3-оксипиридина (М±т)
Показатели 1 2 3 4 5
Контроль ОДП ОДП + мексидол ОДП + ХС-9 ОДП + этоксидол
МДА, мкмоль/л 0,32±0,03 0,89±0,03"i 0,41±0,3-1-2 0,38±0,03*2 0,35±0,04*2
АГП, усл. ед. 0,11±0,02 0,59±0,02"i 0,28±0,03-1-2 0,14±0,02"2-3 0,3±0,02"1-2-4
Каталаза, мккат/л 12,4±0,9 9,3±0,8"i 10,4±0,6"i 14,4±1,1"2-3 11,5±0,8"2-4
СОД, усл. ед./мл 22,1±1,3 12,1±1,2*1 16,2±2,0-1-2 20,5±2,1"2-3 18,0±1,5*1,2
Total NO, мкмоль/л 4,9±0,2 2,2±0,07"i 3,1±0,04-1-2 5,0±0,4*2 3,9±0,5*2
СЕГ, 10ц г/эр 13,4±1,3 29,2±2,1"i 20,4±1,8-1-2 14,3±1,2-1-2 17,5±1,1"!-2
СЕЭ, % 0,92±0,04 2,27±0,1"i 1,88±0,2-1-2 0,9±0,03"2-3 1,02±0,04"2-3
После моделирования у животных ОДП в эритроцитарной мембране выявлено повышене уровеня холестерина и его эфиров, свободных жирных кислот, лизофосфатидилхолина и снижение моно- и диглицеридов, триглицери-дов, фосфатидилхолина, фосфатидилэтанола-
мина, фосфатидилинозитола и сфингимиелина (табл. 2).
При оценке показателей метаболизма эритроцитов установлено, что в условиях ОДП в эритроцитах повышается концентрация МДА, АГП, сорбционные показатели (СЕЭ и СЕГ), снижается активность каталазы, СОД, уровень Total NO (табл. 3).
Основными связующими компонентами в нарушении функциональной активности органа при панкреатите являются развитие системного оксидантного стресса, ускорение процессов перекисного окисления липидов, рост фосфолипазной активности [1,11,12,17,18,20], что и обусловливает дестабилизацию клеточных мембран не только клеток поджелудочной железы, но и эритроцитов. Становится очевидным направление поиска средств при экспериментальном ОДП, обладающих антиоксидантной активностью, в том числе, изучение влияния на структурно-функциональные свойства
эритроцитов производных 3-оксипиридина, причем в сравнении с хорошо известным и широко применяемым при остром панкреатите мексидолом.
Использование у животных мексидола на фоне моделирования ОДП корригирует в мембране эритроцитов уровень обеих под-фракций спектринов, анкирина, АТБ, белка полосы 4.5, актина, Г-3-ФД, Г-S-T (табл. 1). Мекси-дол у данной группы животных корригировал также содержаниев эритроцитарной мембране свободных жирных кислот, фосфатидилхолина, фосфатидилинозитола и сфингомиелина (табл. 2).
Введение животным с ОДП ХС-9, в отличие от мексидола, нормализовало уровень в мембране красных клеток крови АТБ, белка полосы 4.5, Г-3-ФД, эфиров холестерина и триглицеридов, корригировало содержание р-спектрина и сфингомиелина (табл. 1, 2).
Применение этоксидола более эффективно, по сравнению с ХС-9, корригирует нарушения содержания белков и липидов в мембране красных клеток крови у животных с ОДП: нормализует дополнительно уровень фосфатидилхолина, лизофосфатидил-холина, фосфатидилинозитола и корригирует представительность а-спектрина (табл. 1, 2).
JOURNAL OF NEW MEDICAL TECHNOLOGIES - 2016 - V. 23, № 4 - P. 71-78
Введение мексидола животным с ОДП корригирует (в сторону, но не до уровня показателей контроля) содержание в эритроцитах продуктов ПОЛ, стабильных метаболитов оксида азота, активность СОД и показатели сорбцион-ных свойств эритроцитов. Введение этоксидола дополнительно нормализовало концентрацию МДА, стабильных метаболитов оксида азота, активность каталазы и СЕЭ. Применение ХС-9 оказалось более эффективным, так как нормализовало все исследованные показатели (табл. 3).
Полученные результаты свидетельствуют о выраженных изменениях белково-липидного спектра мембраны и внутриклеточного метаболизма красных клеток крови у животных в условиях ОДП, при этом использование производных 3-оксипиридина позволяет корригировать и нормализовать ряд показателей структурно-функциональных свойств эритроцитов. Максимальной эффективностью обладает эток-сидол, минимальной - мексидол, тогда как ХС-9 занимает промежуточное положение (табл. 1,2). Следует отметить большую эффективность ХС-9 по сравнению с этаксидолом в отношении показателей функциональной активности эритроцитов (табл. 3).
Известно, что гиперактивация процессов пероксидации липидов сопровождается значительным изменением состава и степени окис-ленности мембранных фосфолипидов, что в конечном итоге приводит к нарушению целостности липидного бислоя клеточных мембран и снижению активности фосфолипидзависи-мых энзиматических систем. В условиях активного протекания свободнорадикальных процессов наиболее резко уменьшается количество фосфолипидов, содержащих в своем составе полиненасыщенные жирные кислоты. Избира-
Литература
тельная делипидизация мембран вызывает увеличение соотношения между содержанием холестерина и фосфолипидов в бислое клеточных мембран, что способствует нарушению физико-химических свойств цитомембран [3,5,14,21,22].
Дезорганизация липидов мембраны, являющихся субстратом перекисного окисления и ферментативного гидролиза, приводит к нарушению антиоксидантного гомеостаза, снижению активности транспортных и ферментных белков и в конечном итоге к необратимым структурно-функциональным изменениям [3,15,21].
Результаты проведенного экспериментального исследования обосновывают целесообразность применения производных 3-оксипиридина при остром панкреатите. Учитывая механизмы действия препаратов, при его назначении следует придерживаться принципа опережения, направленного на прерывание патологических процессов, приводящих к нарушению функции других органов и тканей. Это позволит избежать прогрессирования расстройств гомеостаза, особенно синдрома системного воспалительного ответа в тот период болезни, когда, на фоне компенсаторного напряжения, защитные силы организма еще способны мобилизовать «сохранившиеся» резервы.
С другой стороны, научные положения работы углубляют теоретические представления о механизмах действия препаратов, способствующих коррекции структурно-функциональных свойств эритроцитов, сущности и направленности реакций, лежащих в основе мембранопро-текторного эффекта антиоксидантной терапии при остром панкреатите.
References
1. Агапов М.А., Хорева М.В., Гоский В. А. Возможности Agapov MA, Khoreva MV, Goskiy VA. Vozmozhnosti коррекции синдрома системной воспалительной korrektsii sindroma sistemnoy vospalitel'noy reaktsii реакции при остром деструктивном панкреатите // pri ostrom destruktivnom pankreatite [Correction of Экспериментальная и клиническая гастроэнтероло- systemic inflammatory response syndrome in acute гия. 2011. № 7. С. 18-23. destructive pancreatitis]. Eksperi-mental'naya i
klinicheskaya gastroenterologiya. 2011;7:18-3. Russian.
2. Алехин С.А., Назаренко Д.П., Емельянов Р.А. Моде- Alekhin SA, Nazarenko DP, Emel'yanov RA. Modeliro-лирование острого панкреатита у крыс. Курск, 2006. vanie ostrogo pankreatita u krys [Simulation of acute 78 с. pancreatitis in rats]. Kursk; 2006. Russian.
3. Боровская М.К., Кузнецова Э.Э., Горохова В.Г., Ко- Borovskaya MK, Kuznetsova EE, Gorokhova VG, Ko-рякина Л.Б., Курильская Т.Е., Пивоваров Ю.И. ryakina LB, Kuril'skaya TE, Pivovarov Yul. Strukturno-Структурно-функциональная характеристика мем- funktsional'naya kharakteristika membrany eritrotsita i
JOURNAL OF NEW MEDICAL TECHNOLOGIES - 2016 - V. 23, № 4 - P. 71-78
браны эритроцита и ее изменение при патологиях разного генеза // Бюллетень ВСНЦ СО РАМН. 2010. № 3 (73). С. 334-354.
4. Бровкина И.Л., Быстрова Н.А., Лазаренко В.А., Прокопенко Л.Г. Витамины. Эритроциты. Иммунитет. Курск: Изд-во КГМУ, 2013. 108 с.
5. Будяков С.В., Конопля Н.А., Гаврилюк В.П., Конопля А.И. Структурно-функциональные свойства эритроцитов у больных с гнойным верхнечелюстным синуситом // Курский науч.-практ. вестн. «Человек и его здоровье». 2010. № 3. С. 64-69.
6. Бушмина О.Н., Долгарева С.А., Локтионов А.Л., Конопля А.И. Метаболические нарушения в условиях экспериментального острого деструктивного панкреатита и воздействия этанола // Системный анализ и управление в биомедицинских системах. 2015. Т. 14, № 3. С. 396-404.
7. Оксид азота и показатели оксидантного стресса у больных с обострением хронического панкреатита панкреатитом / Винокурова Л.В., Березина О.И., Дроздов В.Н. [и др.] // Эксперим.и клинич. гастроэнтерология. 2011. № 2. С. 75-81.
8. Гаврилюк В.П., Конопля А.И., Костин С.В. Иммун-нометаболические нарушения у детей с разлитым аппендикулярным перитонитом с различной степенью тяжести // Курский науч.-практ. вестн. «Человек и его здоровье». 2010. № 4. С. 38-42.
9. Гаврилюк В.П., Назаренко П.М., Конопля А.И. Структурно-функциональные нарушения эритроцитов и их коррекция у больных с легким и тяжелым течением острого панкреатита // Курский на-уч.-практ. вестн. «Человек и его здоровье». 2007. № 3. С. 29-37.
10. Гаврилюк Е.В., Конопля А.И., Михин В.П. Иммунные и оксидантные нарушения у больных острым инфарктом миокарда и их коррекция мексикором // Курский науч.-практ. вестн. «Человек и его здоровье». 2008. № 4. С. 54-60.
11. Горский В.А., Агапов М.А., Хорева М.В. Синдром системной воспали тельной реакции и возможный путь коррекции при остром панкреатите // Врач. 2014. №7. С. 47-49.
12. Острый деструктивный панкреатит: современное хирургическое лечение / Дарвин В.В., Онищен-
ee izmenenie pri patologiyakh raznogo geneza [Structural and functional characterization of the erythrocyte membrane and its change in pathology of different genesis]. Byulleten' VSNTs SO RAMN. 2010;3 (73):334-54. Russian.
Brovkina IL, Bystrova NA, Lazarenko VA, Prokopenko LG. Vitaminy. Eritrotsity. Immunitet [Vitamins. Erythrocytes. Immunity.]. Kursk: Izd-vo KGMU; 2013. Russian.
Budyakov SV, Konoplya NA, Gavrilyuk VP, Konoplya AI. Strukturno-funktsional'nye svoystva eritrotsitov u bol'nykh s gnoynym verkhnechelyustnym sinusitom [Structural and functional properties of erythrocytes in patients with purulent maxillary sinusitis]. Kurskiy nauch.-prakt. vestn. «Chelovek i ego zdorov'e». 2010;3:64-9. Russian.
Bushmina ON, Dolgareva SA, Loktionov AL, Konoplya AI. Metabolicheskie narusheniya v usloviyakh ekspe-rimental'nogo ostrogo destruktivnogo pankreatita i vozdeystviya etanola [Metabolic disorders in experimental acute pancreatitis and the destructive effects of ethanol]. Sistemnyy analiz i upravlenie v biomeditsins-kikh sistemakh. 2015;14(3):396-404. Russian. Vinokurova LV, Berezina OI, Drozdov VN, et al. Oksid azota i pokazateli oksidantnogo stressa u bol'nykh s obostreniem khronicheskogo pankreatita pankreatitom [Nitric oxide and indicators of oxidative stress in patients with acute exacerbation of chronic pancreatitis pancreatitis]. Eksperim.i klinich. gastroenterologiya. 2011;2:75-81. Russian.
Gavrilyuk VP, Konoplya AI, Kostin SV. Immunnome-tabolicheskie narusheniya u detey s razlitym appendi-kulyarnym peritonitom s razlichnoy stepen'yu tyazhes-ti [Immunnometabolicheskie disorders in children with diffuse peritonitis appendicular with varying degrees of severity]. Kurskiy nauch.-prakt. vestn. «Chelovek i ego zdorov'e». 2010;4:38-42. Russian. Gavrilyuk VP, Nazarenko PM, Konoplya AI. Struktur-no-funktsional'nye narusheniya eritrotsitov i ikh kor-rektsiya u bol'nykh s legkim i tyazhelym techeniem ostrogo pankreatita [Structural and functional abnormalities of red blood cells and their correction in patients with mild and severe acute pancreatitis]. Kurskiy nauch.-prakt. vestn. «Chelovek i ego zdorov'e». 2007;3:29-37. Russian.
Gavrilyuk EV, Konoplya AI, Mikhin VP. Immunnye i oksidantnye narusheniya u bol'nykh ostrym infarktom miokarda i ikh korrektsiya meksikorom [The immune and oxidant disturbances in patients with acute myo-cardial infarction and Mexicor correction]. Kurskiy nauch.-prakt. vestn. «Chelovek i ego zdorov'e». 2008;4:54-60. Russian.
Gorskiy VA, Agapov MA, Khoreva MV. Sindrom sis-temnoy vospali tel'noy reaktsii i vozmozhnyy put' kor-rektsii pri ostrom pankreatite [Syndrome of systemic inflammatory response and a possible way of correction in acute pancreatitis]. Vrach. 2014;7:47-9. Russian. Darvin VV, Onishchenko SV, Krasnov EA, et al. Ostryy destruktivnyy pankreatit: sovremennoe khirurgi-
JOURNAL OF NEW MEDICAL TECHN
ко С.В., Краснов Е.А. [и др.]// Анналы хирургической гепатологии. 2014. Т. 19, № 4. С. 76-82.
13. Конопля А.А., Караулов А.В., Конопля А.И., Гаври-люк В.П. Взаимосвязь коррекции иммунных и окси-дантных нарушений со структурно-функциональными свойствами эритроцитов при хронических сальпингоофоритах. Курск: Изд-во ГОУ ВПО КГМУ Росздрава, 2009. 180 с.
14. Конопля А.И., Гаврилюк В.П., Костин С.В. Нарушения иммунного статуса и перекисного окисления липидов при разлитом аппендикулярном перитоните у детей // Курский научно-практический вестник «Человек и его здоровье». 2010. № 1. С. 34-39.
15. Конопля А.И., Лазаренко В.А., Локтионов А.Л. Взаимосвязь иммунометаболических и эритроци-тарных нарушений с этиологией острого панкреатита. Курск: Изд-во ГОУ ВПО КГМУ Минздрава России, 2013. 162 с.
16. Крылов В.И., Виноградов А.Ф., Ефремова С.И. Метод тонкослойной хроматографии липидов мембран эритроцитов // Лаб. дело. 1984. № 4. С. 205-206.
17. Локтионов А.Л., Конопля А.И., Евсегнеева И.В. Острый панкреатит как клинико-иммунологическая проблема (обзор литературы) // Физиология и патология иммунной системы. Иммунофармакогене-тика. 2013. Т.17, № 11. С. 3-17.
18. Локтионов А.Л., Конопля А.И., Лунев М.А., Караулов А.В. Иммунные и оксидантные нарушения в патогенезе воспалительных заболеваний пародонта // Иммунология. 2015. Т. 36, № 5. С. 319-328.
19. Мосоян С.С. Показания к антиоксидантной терапии в лечении острого деструктивного панкреатита // Вестник Российской военно-медицинской академии.
2014. № 2 (46). С. 93-96.
20. Рагулина В.А., Локтионов А.Л., Конопля А.И., Гаврилюк В.П. Взаимосвязь между характером и степенью нарушений иммунитета и эндотелтиальной дисфункцией при экспериментальном остром панкреатите // Научные ведомости Белгородского государственного университета. Медицина. Фармация.
2015. № 10. С. 177-183.
21. Савин Е.И., Хадарцев А.А., Иванов Д.В., Субботина Т.И., Морозов В.Н. Регуляция свободнорадикаль-ных процессов модулирующим воздействием электромагнитного излучения в сочетании с введением
LOGIES - 2016 - V. 23, № 4 - P. 71-78
cheskoe lechenie [Ostryy destruktivnyy pankreatit: sovremennoe khirurgicheskoe lechenie]. Annaly khi-rurgicheskoy gepatologii. 2014;19(4)76-82. Russian. Konoplya AA, Karaulov AV, Konoplya AI, Gavrilyuk VP. Vzaimosvyaz' korrektsii immunnykh i oksidantnykh narusheniy so strukturno-funktsional'nymi svoystvami eritrotsitov pri khroni-cheskikh sal'pingooforitakh [The relationship of correction of immune and oxidant disturbances from structural and functional properties of erythrocytes in chronic salpingo]. Kursk: Izd-vo GOU VPO KGMU Roszdrava; 2009. Russian.
Konoplya AI, Gavrilyuk VP, Kostin SV. Narusheniya immunnogo statusa i perekisnogo okisleniya lipidov pri razlitom appendikulyarnom peritonite u detey [Disorders of the immune status and lipid peroxidation when spilled appendicular peritonitis at children]. Kurskiy nauchno-prakticheskiy vestnik «Chelovek i ego zdorov'e». 2010;1:34-9. Russian.
Konoplya AI, Lazarenko VA, Loktionov AL. Vzaimos-vyaz' immunometabolicheskikh i eritrotsitarnykh naru-sheniy s etiologiey ostrogo pankreatita [The relationship of erythrocyte immune and metabolic disorders with an etiology of acute pankrea Titano]. Kursk: Izd-vo GOU VPO KGMU Minzdrava Rossii; 2013. Russian. Krylov VI, Vinogradov AF, Efremova SI. Metod tonkos-loynoy khromatografii lipidov membran eritrotsitov [Method TLC erythrocyte membrane lipids]. Lab. delo. 1984;4:205-6. Russian.
Loktionov AL, Konoplya AI, Evsegneeva IV. Ostryy pankreatit kak kliniko-immunologicheskaya problema (obzor literatury) [Acute pancreatitis is a clinical and immunological problem (review)]. Fiziologiya i patolo-giya immunnoy sistemy. Immunofarmakogenetika. 2013;17(11):3-17. Russian.
Loktionov AL, Konoplya AI, Lunev MA, Karaulov AV. Immunnye i oksidantnye narusheniya v patogeneze vospalitel'nykh zabolevaniy parodonta [The immune and oxidant disturbances in the pathogenesis of inflammatory periodontal diseases]. Immunologiya. 2015;36(5):319-28. Russian.
Mosoyan SS. Pokazaniya k antioksidantnoy terapii v lechenii ostrogo destruktivnogo pankreatita [Indications of antioxidant therapy in the treatment of acute destructive pancreatitis]. Vestnik Rossiyskoy voenno-meditsinskoy akademii. 2014;2(46):93-6. Russian. Ragulina VA, Loktionov AL, Konoplya AI, Gavrilyuk VP. Vzaimosvyaz' mezhdu kharakterom i stepen'yu narusheniy immuniteta i endoteltial'noy disfunktsiey pri eksperimental'nom ostrom pankreatite [The relationship between the character and the degree of immunity disorders and endoteltialnoy dysfunction in experimental acute pancreatitis]. Nauchnye vedomosti Belgorodskogo gosudarstvennogo universiteta. Meditsina. Farmatsiya. 2015;10:177-83. Russian. Savin EI, Khadartsev AA, Ivanov DV, Subbotina TI, Morozov VN. Regulyatsiya svobodnoradikal'nykh protsessov moduliruyushchim vozdeystviem elektro-magnitnogo izlucheniya v sochetanii s vvedeniem stvo-
ВЕСТНИК НОВЫХ МЕДИЦИНСКИХ ТЕХНОЛОГИЙ - 2016 - Т. 23, № 4 - С. 71-78 JOURNAL OF NEW MEDICAL TECHNOLOGIES - 2016 - V. 23, № 4 - P. 71-78
стволовых клеток // Международный журнал прикладных и фундаментальных исследований. 2005. №5. С. 77-79.
22. Хадарцев А.А., Морозов В.Н., Карасева Ю.В., Хадар-цева К. А., Фудин Н.А. Патофизиология стресса, как баланс стрессогенных и антистрессовых механизмов // Вестник неврологии, психиатрии и нейрохирургии. 2012. № 7. С. 16-21.
23. Шишкина Л.Н., Шевченко О.Г. Липиды эритроцитов крови и их функциональная активность // Успехи современной биологии. 2010. Т. 130, №6. С. 587602.
24. Dodge G.T., Mitchell C., Hanahan D.J. The preparation and chemical characteristics of hemoglobin free ghosts of human eryrhrocytes // Arch. Biochem. Biophys. 1963. V. 100. P. 119-130.
25. Fairbanks G., Steck T. Electrophoretic analysis of the major polypeptides of the human erythrocyte membrane // Biochemistry. 1971. V. 10. P. 2606-2616.
26. Laemli U.K. Cleavage of structural proteins during the assembly of the head of bacterophage T4 // Nature. 1970. V. 227. P. 680.
lovykh kletok [Regulation of free radical processes modulating influence of electromagnetic radiation in combination with the administration of stem cells]. Mezhdunarodnyy zhurnal prikladnykh i fundamen-tal'nykh issledovaniy. 2005;5:77-9. Russian. Khadartsev AA, Morozov VN, Karaseva YuV, Khadart-seva KA, Fudin NA. Patofiziologiya stressa, kak balans stressogennykh i antistressovykh mekhanizmov [The pathophysiology of stress, as the balance of stress and anti-stress mechanisms]. Vestnik nevrologii, psikhiatrii i neyrokhirurgii. 2012;7:16-21. Russian. Shishkina LN, Shevchenko OG. Lipidy eritrotsitov kro-vi i ikh funktsional'naya aktivnost' [Lipids of red blood cells and their functional activity]. Uspekhi sovremen-noy biologii. 2010;130(6):587-602. Russian. Dodge GT, Mitchell C, Hanahan DJ. The preparation and chemical characteristics of hemoglobin free ghosts of human eryrhrocytes. Arch. Biochem. Biophys. 1963;100:119-30.
Fairbanks G, Steck T. Electrophoretic analysis of the major polypeptides of the human erythrocyte membrane. Biochemistry. 1971;10:2606-16. Laemli UK. Cleavage of structural proteins during the assembly of the head of bacterophage T4. Nature. 1970;227:680.
