CC BY
60
Таблица 2
Значимые ассоциации I/D полиморфизма гена ангиотензин-конвертирующего фермента с эхокардиографическими показателями у женщин, Ме (Q25-Q75)
Генотипы
Показатели DD и ID II p
(n=59) (n=17)
S ЛЖ сист, см2 6,18(5,28-7,04) 5,34(4,58-5,77) 0,04
КСР ЛЖ, мм 28,0(26,0-30,0) 26,0(24,0-27,0) 0,03
КСО, мл 29,0(24,0-34,0) 24,0(21,0-28,0) 0,03
Таблица 3
Значимые ассоциации генетических полиморфизмов вазоактивных гормонов с эхокардиографическими показателями у женщин, Ме ^25^75)
Показатели Полиморфизмы p
-6A/G AGT
АА и AG (n=54) GG (n=22)
S ЛЖ диаст, см2 17,29(15,96-18,11) 15,24(14,57-17,32) 0,008
ДлЛЖ диаст, мм 6,9(6,8-7,0) 6,8(6,7-6,9) 0,007
Дл ЛЖ сист, мм 5,5(5,3-5,8) 5,3(5,2-5,7) 0,03
КДР ЛЖ, мм 47,0(45,0-48,0) 44,0(43,0-47,0) 0,01
ЛП, мм 30,0(28,0-32,0) 32,0(30,0-34,0) 0,05
КДР ПЖ, мм 27,0(26,0-30,0) 29,5(27,0-32,0) 0,03
КДО ЛЖ, мл 102,0(93,0-108,0) 88,5(82,0-103,0) 0,007
УО, мл 71,0(66,0-75,0) 64,0(60,0-73,0) 0,05
ИММЛЖ, г/м2 92,6(80,0-101,4) 81,9(72,2-90,8) 0,02
-1166 A/C ATIIR1
СС и АС (n=37) АА (n=39)
ПП, мм 31,0(29,0-33,0) 30,0(27,0-31,0) 0,003
КДР ПЖ, мм 29,0 (27,0-31,0) 27,0(25,0-30,0) 0,01
циации генотипа -6AG AGT с более высоким конечно-диастолическим размером левого желудочка у беременных с гестозом [5].
Исходя из полученных данных, можно сделать вывод о том, что женщины, имеющие в генотипе высокопродуктивный аллель -6А (генотипы -6АА и -6AG) по полиморфизму -6АЮ ангиотен-зиногена и индивидуумы с генотипом -6GG, имеют определенные морфологические различия камер сердца.
При изучении ассоциации -1166А/С полиморфизма гена рецептора ангиотензина II 1-го типа с эхокардиографическими показателями у женщин установлены более высокие размеры правых отделов сердца (предсердия и желудочка) у женщин, имеющих аллель -1166С (генотипы -1166СС и -1166АС) в сравнении с гомозиготами по аллелю -1166А (р=0,003-0,01) (табл. 3).
Учитывая то, что увеличение правых отделов сердца наблюдается в результате повышения артериального давления в малом круге кровообращения [11, при отсутствии бронхо-легочной патологии в рассматриваемой нами выборке, можно сделать предположение о некотором повышении
сосудистого тонуса именно в малом круге кровообращения при наличии аллеля -1166С гена рецептора ангиотензина II 1-го типа. Таким образом, данный полиморфизм может являться в дальнейшем фактором риска развития легочной гипертензии у женщин. В некоторых исследованиях генетический вариант -1166C ATИR1 выявлялся у пациентов с артериальной гипертензией чаще, чем у здоровых лиц [12, 16, 17].
При оценке морфофункциональных особенностей сердца у беременных (п=241) не выявлено значимых ассоциаций генетических полиморфизмов вазоактивных гормонов с эхокардиографическими показателями. При этом следует отметить, что согласно полученным в настоящей работе данным вне беременности ряд молекулярногенетических маркеров ассоциирован с отдельными эхокардиографическими показателями у женщин. При возникновении беременности, когда происходят кратковременные значительные изменения в функционировании организма женщины, и в том числе ее сердечно-сосудистой системы [7, 8, 9], эти ассоциации нивелируются.
Таким образом, в результате проведенного исследования впервые на выборке из женщин русской национальности, являющихся уроженками Центрального Черноземья России, продемонстрированы значимые ассоциации полиморфных маркеров генов вазоактивных гормонов с эхокардиографическими показателями.
ЛИТЕРАТУРА
1. Затикян Е.П. Врожденные и приобретенные пороки сердца у беременных. Функциональная и ультразвуковая диагностика. - М.: Триада-Х, 2004. -328 с.
2. Лимборская С.А., Хуснутдинова Э.К., Балановская Е.В. Этногеномика и геногеография народов Восточной Европы. - М: Наука, 2002. - 261 с.
3. Мозговая Е.В., Малышева О.В., Иващенко Т.Э. и др. Эндотелиальная дисфункция при гестозе: патогенез, генетическая предрасположенность, диагностика и профилактика // Молекулярнобиологические технологии в медицинской практике. - Новосибирск, 2004. - С. 110-135.
4. Реброва О.Ю. Статистический анализ медицинских данных. Применение пакета прикладных программ STATISTICA. - М.: МедиаСфера, 2006. -312с.
5. Решетников Е.А., Акулова Л.Ю., Добродомо-ва И.С., и др. Полиморфизм генов-кандидатов и эхокардиографические показатели у беременных в норме и при гестозе // Вестник РУДН. Серия «Медицина». - 2009. - № 4. - С 223-224.
6. Решетников Е.А., Акулова Л.Ю., Добродомо-ва И. С. и др. Изучение роли индекса массы тела в характере ассоциаций генетических полиморфизмов вазоактивных гормонов с показателями артериального давления у женщин в конце беременности // Научные ведомости БелГУ. Серия «Медицина. Фармация». - 2011. - Т. 99, № 4. - С. 153-159.
7. Сидорова И.С. Этиопатогенетические основы ведения беременных с фетоплацентарной недостаточностью // Гинекология. - 2006. - Т. 8, № 5-6. -С. 28-32.
8. Силиберто К.Ф. Маркс Ф., Эйнштейн А. Физиологические изменения, связанные с беременностью // Хирург. - 2006. - № 12. - С. 25-28.
9. Сокольникова И.В. Параметры внутрисердечной и центральной гемодинамики в первом, втором, третьем триместрах физиологической беременности // Сибирский медицинский журнал. - 2008. - № 5. -С. 19-21.
10. Спиридонова М.Г., Трифонова Е.А., Фадюши-на С.Е. и др. Молекулярно-генетический анализ полиморфных маркеров генов, ответственных за функционирование факторов эндотелиальной системы в связи с осложненным протеканием беременности // Медицинская генетика. - 2007. - Т. 6, № 7(61). - С. 38-42.
11. Струтынский А.В., Ройтберг Е. Внутренние болезни. Сердечно-сосудистая система. - М.: Бином. Лаборатория знаний, 2003. - 856 с.
12. Хамидуллаева Г.А., Елисеева М.Р., Срожидинова Н.З. и др. Особенности распределения полиморфных маркеров генов ренин-ангиотензин-альдостероновой системы, связь с гипертрофией левого желудочка у больных эссенциальной гипертонией узбекской национальности // Кардиология. - 2007. - № 4. - С. 54-58.
13. Brodde O.E. Betal- and beta2-adrenoceptor polymorphisms and cardiovascular diseases // Fundam Clin Pharmacol. - 2008. - Vol. 22, N 2. - Р. 107-125.
14. Danser A.H., Schalekamp M., Bax W. et al. Angiotensin-converting enzyme in the human heart. Effect of the deletion/insertion polymorphism // Circulation. -1995. - Vol. 92. - P. 1387-1388.
15. Dosenko V.E., Zagoriy V.Y., Haytovich N.V. et al. Allelic polymorphism of endothelial NO-synthase gene and its functional manifestations // Acta Bio-chimica Polonica - 2006. - Vol. 53, N 2. -P. 299-302.
16. Kikuya M., Sugimoto K., Katsuya T. et al. A/C1166 gene polymorphism of the angiotensin II type 1 receptor (AT1) and ambulatory blood pressure: the Ohasa-ma Study // Hypertens Res. - 2003. - N 26. -Р. 141-145.
17. Jones A., Dhamrait S.S., Payne J.R. et al. Genetic variants of angiotensin II receptors and cardiovascular risk in hypertension // Hypertension. - 2003. -Vol. 42, № 4. - Р. 500-506.
18. Lieb W., Bolbrinker J., Döring A. et al. No associa-
tion of the CYP3A5*1 allele with blood pressure and left ventricular mass and geometry: the
KORA/MONICA Augsburg echocardiographic
substudy // Clin Sci. - 2006. - Vol. 111, N 6. -P. 365-72.
19. Mathew C.C. The isolation of high molecular weight eukaryotic DNA // Methods in Molecular Biology. -1984. - N 2. - P. 31-34.
20. Mello G., Parretti E., Fatini C. et al. Low-molecular-weight heparin lowers the recurrence rate of preeclampsia and restores the physiological vascular changes in angiotensin-converting enzyme DD women // Hypertension. - 2005. - Vol. 45, N 1. - P. 86-91.
21. Roberts C.B., Rom L., Moodley J., Pegoraro R.J. Hypertension-related gene polymorphisms in preeclampsia, eclampsia and gestational hypertension in Black South African women //Hypertension. - 2004. -Vol. 22, N 5. - P. 945-948.
22. Wang H.Y, Li C.M., Wang Z., Yang F. Relationships between polymorphisms of angiotensin-converting enzyme and methylenetetrahydrofolate reductase genes and genetic susceptibility to pregnancy induced hypertension // Zhonghua Fu Chan Ke Za Zhi.-2004. - Vol. 39, N 6. - P. 369-372.
23. Zafarmand M.H., Nijdam M.E., Franx A. et al. The angiotensinogen gene M235T polymorphism and development of preeclampsia/eclampsia: a meta-analysis and meta-regression of observational studies // J Hypertens. - 2008. - Vol. 26, N 9. - Р. 1726-1734.
УДК 616.65-002:615.036.8
БЕЛКИ И ЛИПИДЫ МЕМБРАНЫ ЭРИТРОЦИТОВ ПРИ ХРОНИЧЕСКОМ ПРОСТАТИТЕ; ВОЗМОЖНОСТИ ФАРМАКОЛОГИЧЕСКОЙ КОРРЕКЦИИ НАРУШЕНИЙ
© Шатохин М.Н., Конопля А.И., Гаврилюк В.П., Долгарева С.А., Блинков Ю.А.
Кафедра эндоскопической урологии Российской медицинской академии последипломного образования, Москва; кафедра биологической химии Курского государственного медицинского университета, Курск
E-mail: [email protected]
Целью исследования явилось установление изменений физико-химических свойств эритроцитов у пациентов с обострением хронического простатита и разработка эффективных способов фармакологического воздействия их нарушений. У пациентов с хроническим простатитов, проходивших стационарное лечение в Урологическом центре НУЗ ЦКБ № 1 ОАО «РЖД» г. Москва, установлены изменения представительности белков и липидов в мембране красных клеток крови, направленных на уменьшение прочности и деформируемости эритроцитарной мембраны, повышение общей сорбционной способности эритроцитов и их гликокаликса и снижение их метаболической активности. Использование галавита, олифена и эссенциале у больных хроническим простатитом более эффективно, чем традиционная фармакотерапия, корригирует нарушенные показатели физико-химических свойств эритроцитарной мембраны.
Ключевые слова: хронический простатит, фармакологическая коррекция, эритроциты, фосфолипиды, белки мембран эритроцитов.
PROTEINS AND LIPIDS OF THE MEMBRANE OF ERYTHROCYTES IN CHRONIC PROSTATITIS;
POSSIBILITIES OF PHARMACOLOGICAL CORRECTION OF DISTURBANCES Shatokhin M.N., Konoplya А-I., Gavrilyuk V.P., Dolgareva S.A., Blinkov Yu.A.
Endoscopic Urology Department of the Russian Medical Academy of Postgraduate Education, Moscow;
Biochemistry Department of the Kursk State Medical University, Kursk
The research objective was the establishment of the changes of proteins amount and lipids in the membrane of erythrocytes in patients with exacerbation of the chronic prostatitis and the development of effective ways of pharmacological correction of disturbances of the structural and functional properties of erythrocytes in the given category of patients. In patients with chronic prostatites hospitalized in the Urological centre of the Central hospital of N 1, the changes of the amount of proteins and lipids in the membrane of red blood cells which are referred on the reduction of durability and deformability of an erythrocyte membrane, increase in the general sorption ability of erythrocytes and decrease in their metabolic activity were established. The use of gavavit, olifen and essentiale in patients with chronic prostatitis was more efficient, than traditional pharmacotherapy correcting the broken indicators of physical and chemical properties of the erythrocyte membrane.
Keywords: chronic prostatitis, pharmacological correction, erythrocytes, phospholipids, fibers of membranes of erythrocytes.
Хронические воспалительные заболевания половой системы у мужчин занимают одно из первых мест в структуре общей заболеваемости. Для них характерно длительное, рецидивирующее течение, приводящее к снижению работоспособности и ухудшению половой функции у большинства больных. По данным различных авторов, хронический простатит и простатовезикулит в 4050% случаев являются причиной бесплодного брака [6, 8]. Эти обстоятельства, как и частота заболевания, определяют актуальность проблемы хронических воспалительных заболеваний половой системы для практической медицины.
Лечение хронических воспалительных заболеваний мочеполовой системы у мужчин в настоящее время остается серьезной проблемой для практического здравоохранения. Зарегистрированы многочисленные побочные эффекты исполь-
зования антибиотиков и химиотерапевтических средств: аллергические реакции, дисбактериоз, гепатотоксичность, иммуносупрессивное действие в лечении инфекций, вызванных внутриклеточными патогенами. Развивающейся после курса антибиотикотерапии синдром «иммунологической недостаточности» и «окислительного стресса» может привести к персистенции возбудителя, рецидивам заболевания, реинфекции [2,
4].
При этом большинство авторов исходят из позиции, что красные кровяные клетки, помимо осуществления присущей им специфической газотранспортной функции, принимают участие в обеспечении стабильности и регуляции кислотноосновного состояния и водно-солевого обмена, определяют микрореологические свойства крови и функции иммунокомпетентных клеток и т.д.,
участвуя тем самым в процессах, связанных с поддержанием гомеостаза на уровне целого организма в условиях нормы и патологии [1, 3, 10, 15]. При этом не исключена важная роль эритроцитов в поддержании иммунометаболического гомеостаза и в условиях обострения хронического простатита (хП) [2, 4, 8].
Мембрана эритроцита играет ключевую роль в детерминации гомеостаза и функциональной способности клетки. От физико-химического состояния эритроцитарной мембраны зависят процесс активного транспорта ионов, особенности функционирования мембранассоциированных ферментов, характер взаимодействия клетки со средой, тогда как организация мембраны красных клеток крови напрямую зависит от представительности в ней белков и липидов [4].
Целью исследования явилось установление изменений представительности белков и липидов в мембране эритроцитов у пациентов с обострением хронического простатита; разработка способов фармакологического воздействия нарушений структурно-функциональных свойств эритроцитов.
МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ
Под постоянным наблюдением в Урологическом центре НУЗ ЦКБ № 1 ОАО «РЖД» г. Москва в 2008-10 гг. находилось 48 пациентов с обострением хронического простатита. Клинический диагноз устанавливался на основании анамнеза, данных клинических и инструментальных методов обследования. Включение больных в исследование осуществлялось на основании информированного согласия.
Все больные по проводимому лечению делились на две группы: первая группа (28 пациентов) получали лечение по традиционной схеме (обезболивающие препараты, спазмолитики, антибио-тикотерапия цефалоспоринами III поколения, препараты, улучшающие тонус сосудов, - детра-лекс, флебодиа 600, физиотерапевтические процедуры, массаж простаты), вторая (20 пациентов) - дополнительно получали галавит (100 мг, внутримышечно, через 24 часа, № 5, затем, 100 мг, внутримышечно, через 72 часа, № 20), олифен (7% - 2,0 мл, внутривенно, в 500 мл 5% раствора глюкозы, через 24 часа, № 7), эссенциале (5,0 мл, внутривенно, через 24 часа, № 10).
Лабораторные методы исследования крови проводились по общепринятым методикам при поступлении больных в стационар и 30-е сутки. При оценке гемограмм за основу брались физиологические нормы, соответствующие международной системе единиц (СИ) в клинических исследованиях.
Эритроциты получали из 5 мл гепаринизиро-ванной крови по методу E. Beutler [11]. Определяли сорбционную способность эритроцитов (ССЭ) [9] и сорбционную емкость их гликокалик-са (СЕГ) [7]. О функциональном состоянии эритроцитов судили также по накоплению малонового диальдегида (МДА) [1].
Мембраны эритроцитов получали методом G.T. Dodge [12]. Электрофорез проводили в присутствии додецилсульфата натрия в вертикальных пластинах полиакриламидного геля по методу U.K. Laemmli [14]. Белки окрашивали кумаси голубым R-250 по модифицированной методике G. Fairbanks [13]. Липиды выделяли методом тонкослойной хроматографии [5].
Статистическую обработку результатов исследования проводили, используя непараметрические методы (критерии Вилкоксона, Манна-Уитни), параметрический критерий Стьюдента. Статистически значимыми считали различия с p<0,05.
РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЯ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ
У пациентов с ХП при поступлении в стационар выявлено снижение представительности в мембране красных клеток крови обеих подфрак-ций спектрина, анионтранспортного белка (АТБ) и повышение уровня анкирина, белка полосы 4.1, 4.5, паллидина, дематина, актина, глицеральде-гид-3-фосфатджегидрогеназы, тропомиозина, глутатион^-трансферазы (табл. 1). Выявленные изменения приводят к повышению сорбционной способности мембраны эритроцитов и сорбционной емкости их гликокаликса и накоплению внутри клеток малонового диальдегида (табл. 1).
Установлены изменения представительности белков в мембране красных клеток крови, исходя из их функциональной активности, направлены на уменьшение прочности и деформируемости эритроцитарной мембраны, повышение общей сорбционной способности эритроцитов и их гли-колаликса и снижение метаболической активности.
На фоне проводимой традиционной фармакотерапии у пациентов с ХП наблюдается нормализация в эритроцитарной мембране уровня палли-дина и коррекция, но не до уровня нормы, количества а- и ß-спектрина, белка полосы 4.1 и уровня внутри клеток МДА (табл. 1).
Тогда как назначение таким пациентам дополнительно галавита, олифена и эссенциале позволило нормализовать представительность анки-рина, белка полосы 4.1, глицеральдегид-3-фосфатдегидрогеназы, тропомиозина, глутатион-S-трансферазы и корригировать количество дема-тина и актина (табл. 1).
Таблица 1
Белки мембран красных клеток крови и их сорбционные свойства у больных ХП на фоне проводимой фармакотерапии (мг%, М±т)
Показатели Здоровые ХП ХП + ТЛ ХП + ТЛ + гала-вит + олифен + эссенциале
1 2 3 4
а-Спектрин (1а) 127,8±6,03 92,3±4,1*1 113,3±4,01*1,2 120,2±3,02*1,2
Р-Спектрин (1Р) 133,8±5,87 84,3±3,2*1 106,6±5,2*1,2 97,9±3,61*1,2
Анкирин (2) 110,3±4,4 121,1±4,31*1 125,6±4,05*1 111,31±5,9*2,3
Анионтранспортный белок (3) 217,1±15,3 177,7±4,06*1 179,6±7,45*1 171,8±7,34*1
Белок полосы 4.1 (4.1) 33,7±2,13 52,8±4,03*1 41,2±3,01*1,2 33,1±2,1*2,3
Паллидин (4.2) 55,6±3,42 64,8±2,12*1 56,5±3,07*2 53,6±2,17*2
Белок полосы 4.5 (4.5) 78,3±3,79 101,9±5,6*1 98,2±4,4*1 101,5±3,76*1
Дематин (4.9) 19,1±1,2 40,7±3,1*1 38,06±2,65*1 31,2±2,51*1-3
Актин (5) 101,1±4,14 151,5±8,6*1 148,2±3,33*1 121,9±6,28*1-3
Глицеральдегид-3 -фосфатдегидрогеназа (6) 26,1±2,2 36,4±2,7*1 37,8±2,1*1 24,7±1,13*2,3
Тропомиозин (7) 51,84±3,53 77,1±2,6*1 73,1±3,89*1 53,1±2,66*2,3
Глутатион-8-трансфераза (8) 39,3±2,06 57,5±3,2*1 60,5±4,43*1 36,8±2,56*2,3
СЕГ 16,4±1,3 35,7±2,5*1 33,4±2,67*1 34,0±3,13*1
ССЭ 0,95±0,07 1,58±0,13*1 1,55±0,08*1 1,58±0,05*1
МДА 2,3±0,11 5,22±0,13*1 4,09±0,09*1,2 3,61±0,06*1,2
Примечание: звездочкой отмечены достоверные отличия средних арифметических (р < 0,05); цифры рядом со звездочкой - по отношению к показателям какой группы даны эти различия; ТЛ - традиционное лечение.
Таблица 2
Нейтральные липиды и фосфолипиды красных клеток крови у больных ХП на фоне проводимой фармакотерапии (мг%, М±т)
Показатели Здоровые ХП ХП + ТЛ ХП + ТЛ + галавит + олифен + эссенциале
1 2 3 4
Холестерин 47,8±1,4 50,7±1,1*1 51,3±2,1*1 47,21±1,73*2,3
Эфиры холестерина 46,2±1,62 49,4± 1,13*1 50,02±1,98*1 48,3± 1,12
Свободные жирные кислоты 2,98±0,17 2,71±0,2 2,8±0,31 2,63±0,18
Моно- и диглицериды 9,6±0,49 9,61±0,42 10,07±0,51 10,1±1,3
Т риглицериды 14,5±0,67 15,1±1,23 16,2±1,73 15,8±1,09
Фосфатидилхолин 23,0±0,7 18,37± 1,1*1 19,4±0,93*1 21,5±0,83*1-3
Фосфатидилэтаноламин 23,5±0,97 20,4±0,81*1 22,3±0,62*2 23,71±0,87*2
Лизофосфатидилхолин 5,4±0,17 7,21±0,22*1 6,81±0,3*1,2 5,9±0,17*1-3
Фосфатидилинозитол 19,7±0,69 18,9±1,7 20,3±2,41 18,5± 1,71
Сфингомиелин 11,0±0,52 12,3± 1,29 11,9±0,69 10,91±0,88
Примечание: звездочкой отмечены достоверные отличия средних арифметических (р < 0,05); цифры рядом со звездочкой - по отношению к показателям какой группы даны эти различия; ТЛ - традиционное лечение.
У пациентов с ХП при госпитализации выявлено повышение в эритроцитарной мембране уровня свободного холестерина, эфиров холестерина, лизофосфатидилхолина и снижение количества фосфатидилхолина, фосфатидилэтаноламина (табл. 2).
Таким образом, у больных ХП в мембране эритроцитов выявлены изменения и в липидном спектре, что, в свою очередь, сказывается и на организации мембраны в целом. Так, повышенный уровень холестерина уменьшает подвижность жирных кислот, снижает латеральную диффузию липидов и белков, изменяет функцию
