CC BY
30
Гематол. и трансфузиол., 2012, т. 57, № 3
заболевания. Объективный ответ на терапию достигнут у 11 (55%) больных, причем полный ответ был получен у 1 (5%), очень хороший частичный ответ - у 5 (25%), частичный ответ - у 5 (25%) больных.
Заключение. Применение программы RVP у больных ММ, резистентной к ранее проводимой бортезомибсодержа-щей терапии, показало хорошую клинико-гематологическую эффективность в лечении этой тяжелой категории больных.
BCR-ABL-зависимая резистентность к терапии иматинибом у больных хроническим миелолейкозом
С.В. Морданов ', А.Н. Зельцер ', О.А.Устаева ', Ю.В. Шатохин ', Е.В. Бурнашева ', С.И. Куцев 23 'ГБОУ ВПО Ростовский государственный медицинский университет Минздравсоцразвития России, Ростов-на-Дону;
2ФГБУ Медико-генетический научный центр РАМН; 3ГБОУ ВПО Российский национальный исследовательский медицинский университет
им. Н.И. Пирогова Минздравсоцразвития России, Москва
Введение. К BCR-ABL-зависимым механизмам резистентности к терапии хронического миелолейкоза (ХМЛ) ингибиторами тирозинкиназ, приводящим к изменению состояния BCR-ABL тирозинкиназы, относят амплификацию и мутации гена BCR-ABL. Роль мутаций гена BCR-ABL в развитии первичной и вторичной резистентности хорошо изучена. Однако, исследования амплификации гена BCR-ABL, а также клиническое значение сочетания мутаций и амплификации гена BCR-ABL практически не исследовано. Целью данного исследования явилось изучение мутаций и амплификации гена BCR-ABL у больных ХМЛ с отсутствием ответа или утратой достигнутого ответа на терапию иматинибом.
Материалы и методы. Для анализа амплификации гена BCR-ABL методом флюоресцентной in situ гибридизации (FISH) исследовали образцы костного мозга 174 больных ХМЛ, получавших иматиниб в дозе 400-800 мг/сут, из них в соответствии с критериями ELN (M.Baccarani et al., 2009) у 51 больного - оптимальный или субоптимальный ответом, у 86 - неудача терапии, у 37 - утрата достигнутого ответа. Определение нуклеотидной последовательности киназного домена гена BCR/ABL методом прямого ДНК секвенирова-ния киназного домена гена BCR-ABL выполнено у 104 больных, из них 68 - с неудачей терапии, 36 - с утратой достигнутого ответа.
Результаты и обсуждение. Мутации киназного домена гена BCR/ABL были выявлены у 42 (40,4%) из 104 больных. При этом мутации обнаружены у 28 (35,0%) из 79 больных в хронической фазе ХМЛ, у 14 (58,3%) из 24 человек - в фазе акселерации. Мутации выявлены у 23 (33,8%) из 68 больных ХМЛ с первичной резистентностью, у 19 (52,8%) из 36 - с вторичной резистентностью. Вероятность достижения пол-
ного цитогенетического ответа (ПЦО) к 60-му мес терапии иматинибом у больных с мутациями гена BCR-ABL составляет 22,6% против 81,6% (р < 0,0001). Анализ амплификации гена BCR-ABL методом FISH не выявил дополнительные копии гена ни в одном случае в группе больных с оптимальным или субоптимальным ответом. Дополнительные копии гена BCR-ABL (от 1 до 7) выявлены у 44 (35,7%) из 123 больных с резистентностью к терапии иматинибом. При этом амплификация гена BCR-ABL обнаружена у 32 (37,2%) больных с первичной резистентностью и у 12 (32,4%) со вторичной резистентностью. Вероятность достижения ПЦО у больных с амплификацией гена BCR-ABL к 60-му мес терапии иматини-бом составляет 31,6% против 63,8% (р < 0,0001). Более того, вероятность достижения ПЦО не отличается у больных с низким содержанием клона клеток с амплификацией (Q1-Q2, 1-6% клеток костного мозга с амплификацией) и с высокой долей клеток костного мозга с амплификацией (Q3-Q4, 7-72% клеток костного мозга с амплификацией; р = 0,86454). Сочетание мутации киназного домена гена BCR-ABL и амплификации гена BCR-ABL наблюдается не более чем у 3% больных (г = -0,4467; р = 0,0024).
Заключение. Мутации и амплификация гена BCR-ABL являются наиболее значимыми механизмами первичной и вторичной резистентности к терапии иматинибом. У пациентов с рецидивом ХМЛ частота мутаций почти в 2 раза выше, чем у больных с первичной резистентностью. Амплификации гена BCR-ABL, в частности появление низкопроцентных клонов клеток с амплификацией, обнаруживается у резистентных больных с такой же частотой, что и мутации в этом гене. Сочетание мутации и амплификации гена BCR-ABL по нашим данным является исключительно редким событием.
Роль мутации V617F гена Jak2 в диагностике Ph-негативных миелопролиферативных заболеваний
при венозных тромбозах портальной системы
М.В. Нарейко, Н.Д. Хорошко, М.А. Соколова, Е.А. Семенова, Т.И. Соловьева, А.В. Мисюрин, Е.Б. Орел, Е.А. Киценко ФГБУ Гематологический научный центр Минздравосоцразвития России, Москва
Введение. Цель исследования - определение мутации V617F в гене Jak2 как основного маркера латентного течения миелопролиферативного заболевания (МПЗ) протекающего с тромбозами вен портальной системы в дебюте заболевания.
Материалы и методы. За период с 1994 г. по 2011 г. обследованы 30 больных в возрасте 17-64 лет (средний возраст 30,5 года): в 1-й группе было 23 больных с внепеченочным тромбозом (портальной, селезеночной вен, мезентериальных вен) и во 2-й группе - 7 больных с тромбозами печеночных вен (синдром Бадда-Киари). Ни у кого из них не выявлено миелопролиферативное заболевание до развития острого тромбоза. Скрининг больных производили в среднем в течение 6 мес от констатации тромбоза (1-12 мес). Спленомегалию выявили у 8 (27%) из 30 больных. Выделенную из гранулоцитов крови ДНК проанализировали на мутацию V617F гена Jak2 у 28 больных. Исходно были исключены больные с циррозом и вирусными гепатитами. Отсутствовали больные с предрасполагающими факторами к развитию тромбозов (предшествующие абдоминальные операции, воспалительные процессы в кишечнике, пароксизмальная ночная гемоглобинурия, применение контрацепции). Всем больным выполнен скрининг на тромбофилию по следующим параметрам: мутация фактора
Лейдена, мутация 020210А гена протромбина, протеина С, S, волчаночный антикоагулянт, АТ к кардиолипину, гипер-гомоцистеинемия. У 27 больных провели гистологическое исследование костного мозга, у 6 - трепанобиопсию выполнили в динамике через 2-19 лет. Биоптаты фиксированы в 10% забуференном формалине, залиты парафином, впоследствии изготовлены срезы толщиной 3-5 микрон. Окраска гематоксилином и эозином.
Результаты и обсуждение. Обе группы были сходны по показателям числа клеток периферической крови, обычным факторам риска развития тромбоза в системе гемостаза. Средняя концентрация гемоглобина у всех больных составила 127 г/л (85-191 г/л), среднее число эритроцитов 5,3 х 1012/л, среднее число лейкоцитов 11,3 х 109/л (5,3-17,3 х 109/л), среднее число тромбоцитов 434 х 109/л (103-1239 х 109/л). Мутацию 2V617F гена Jak выявили у 23 (82%) из 28 обследованных. Пропорция больных не менее чем с одной аномалией при скрининге на тромбофилию была одинаковой у больных с мутацией Jak2V617F (43%) и без нее (40%).
Биопсию костного мозга выполнили у 27 больных в обеих исследуемых группах. Подтверждение МПЗ по данным биопсии костного мозга получено у 5 (71%) из 7 больных с
64
