CC BY
56
О.А. Рычкова и соавт.
БАНК КАРАНТИНИЗИРОВАННЫХ ЗАМОРОЖЕННЫХ ЭРИТРОЦИТОВ..
morphine-induced cardioprotection involve the delta (delta)-opioid receptor in the intact rat heart // Mol. Cell. Cardiol. -1997. - Vol. 29, No. 8. - P. 2187-2195.
10. Valen G. Extracardiac approaches to protecting the heart // Eur. J. Cardiothorac. Surg. - 2009. - Vol. 35, No. 4. - P. 651-657.
11. Vidrio H., Sanchez-Salvatori M.A., Medina M.J. Cardiovascular effects of, N-11-OH-A8-tetrahydrocannabinol-dimethylheptyl in rats // Cardiovascular Pharmacol. - 1996. - Vol. 28. - P. 332336.
12. Wagner J.A., Varga K., Jarai Z. et al. Mesenteric vasodilation mediated by endothelial anandamide receptors // Hypertension - 1999. - Vol. 33, No. 1, Pt. 2. - P. 429-434.
13. Wagner J.A., Jarai Z., Batkai S. et al. Hemodynamic effects of cannabinoids: coronary and cerebral vasodilation mediated by cannabinoid CB1 receptors // Eur. J. Pharmacol. - 2001. -Vol. 423, No. 2-3. - P. 203-210.
14. Welch, S.P. Blockade of cannabinoid-induced antinociception by norbinaltorphimone, but not N,N-Diallyl-Tyrosine-Aib-Phenylalanine-Leucine, iCl 174,864 or naloxone in mice // J. Pharmacol. Exp. Ther. - 1993. - Vol. 265, No. 2. - P. 633-640.
15. Zhao Z.Q., Corvera J.S., Halkos M.E. et al. Inhibition of myocardial injury by ischemic postconditioning during reperfusion -comparison with ischemic preconditioning // Am. J. Physiol. Heart Circ. Physiol. - 2003. - Vol. 285, No. 2. - P. H579-H588.
Поступила 30.11.2012
Сведения об авторах
Лишманов Юрий Борисович, докт. мед. наук, профессор, член-корреспондент РАМН, заместитель директора по НИР ФГБУ "НИИ кардиологии" СО РАМН. Адрес: 634012, г. Томск, ул. Киевская, 111а. E-mail: [email protected]. Маслов Леонид Николаевич, докт. мед. наук, профессор, заведующий лабораторией экспериментальной кардиологии ФГБУ "НИИ кардиологии" СО РАМН. Адрес: 634012, г. Томск, ул. Киевская, 111а. E-mail: [email protected]. Цибульников Сергей Юрьевич, лаборант-исследователь лаборатории экспериментальной кардиологии ФГБУ "НИИ кардиологии" СО РАМН. Адрес: 634012, г. Томск, ул. Киевская, 111а. E-mail: [email protected]. Крылатов Андрей Владимирович, лаборант-исследователь лаборатории экспериментальной кардиологии ФГБУ "НИИ кардиологии" СО РАМН. Адрес: 634012, г. Томск, ул. Киевская, 111а. E-mail: [email protected].
УДК 616.155.194:613.952:612.111
БАНК КАРАНТИНИЗИРОВАННЫХ ЗАМОРОЖЕННЫХ ЭРИТРОЦИТОВ В КГБУЗ "АЛТАЙСКИЙ КРАЕВОЙ ЦЕНТР КРОВИ"
О.А. Рычкова1, В.А. Елыкомов1, Т.Н. Индюшкина2
1ГБОУ ВПО "Алтайский государственный медицинский университет" Минздрава России 2КГБУЗ "Алтайский краевой центр крови", Барнаул E-mail: [email protected]
BANK OF QUARANTINED FROZEN RED BLOOD CELLS IN ALTAI REGIONAL BLOOD CENTER
O.A. Rychkova1, V.A. Elykomov1, T.N. Indyushkina2
1Altai State Medical University, Barnaul 2Altai Regional Blood Center, Barnaul
Обеспечение вирусной безопасности гемокомпонентов - актуальная задача современной трансфузиологии. Опыт применения карантинизированных эритроцитсодержащих сред крайне ограничен. В статье проанализирован многолетний опыт работы Отделения долгосрочного хранения клеток крови КГБУЗ "Алтайский краевой центр крови" в области карантинизации эритроцитов. Проанализирована структура первичного и вторичного брака эритроцитсодержащих гемокомпонентов. Разработан алгоритм обеспечения вирусной безопасности размороженных отмытых эритроцитов на основе 6-месячной карантинизации.
Ключевые слова: вирусная безопасность, карантинизация, размороженным отмытые эритроциты.
Viral safety control of blood components is a crucial task of modern transfusiology. The experience of using quarantined red blood cells is currently very limited. The article presents an analysis of long-standing experience of Altai Regional Blood Center in quarantine of red blood cells. The patterns of primary and secondary spoilage of the red blood cell-containing hematological components were analyzed. The algorithm of viral safety provision for the use of frozen-thawed-washed red blood cells was developed based on six-month quarantine. Key words: viral safety, quarantine, frozen-thawed-washed red blood cells.
Введение
Проблема обеспечения вирусной безопасности гемо-трансфузий не теряет своей актуальности. Основными технологиями минимизации риска инфицирования реципиентов являются использование современных лабораторных маркеров гемотрансмиссивных инфекций, ка-рантинизация и вирусинактивация гемокомпонентов [3. 4 ,
7-10, 16, 17, 19-22].
В настоящее время процедура вирусной инактивации плазмы и тромбоконцентратов успешно внедряется в широкую производственную практику службы крови России, однако она не применима к эритроцитсодержащим средам, а в литературе имеются лишь единичные сообщения о разработках подобных методик для красной крови [6-8, 14, 15]. В настоящее время для эритроцитсодержа-щих сред с целью обеспечения биологической безопасности используются фильтры с селективной сорбцией прионов: "Р-капт", MacoPharma (одобрен ЕС в 2006 г.), "Лейкотрап аффинити плюс", Pall (2010 г) [4].
Карантинизация свежезамороженной плазмы внедрена и используется почти во всех регионах Российской Федерации [14, 15, 18], причем "пионером" в этой области была "Алтайская краевая СПК" [1-3]. Однако каранти-низация эритроцитсодержащих сред долгое время была лимитирована сложностью предлагавшихся технологий [23-27]. Метод, предложенный В.Н. Мельниковой и соавт., ориентирован на нужды практического здравоохранения, позволяет накапливать запас эритроцитов, в том числе редких фенотипов, и осуществлять их карантинизацию [5, 7, 8].
В данной работе представлен многолетний опыт работы Банка эритроцитов, криоконсервированных при умеренно низких температурах, позволяющий не только создавать запас редких по фенотипу эритроцитов, но и проводить в полном объеме процедуру карантинизации красной крови, обеспечивая вирусбезопасными эритро-цитсодержащими компонентами пациентов Алтайского края.
Цель работы: оценить эффективность использования процедуры карантинизации замороженных эритроцитов в обеспечении вирусной безопасности гемотрансфузий в условиях Алтайского краевого центра крови.
Материал и методы
Криоконсервирование, хранение, размораживание и отмывание эритроцитов проводили согласно "Инструкции по криоконсервированию клеток крови" [5] в Банке крови с 2006 по 2010 гг. [1-3].
Замораживанию подвергали эритроцитную массу, заготовленную на глюкозо-цитратном растворе и хранившуюся не более 5 дней после заготовки от донора. Смешивание эритроцитной массы с ограждающими растворами проводили в первичных емкостях, в которых была заготовлена консервированная кровь. В качестве крио-консервирующего агента использовали глицерин в высокой концентрации (раствор 11555). После глицерини-зации контейнеры с эритроцитами помещали в электрохолодильники, где они подвергались замораживанию и
хранению до года (при температуре -40 °С). Деглицери-низацию размороженных эритроцитов проводили с использованием солевых растворов №С1 с понижающейся концентрацией (6, 2 и 1%) методом серийного центрифугирования. На заключительном этапе эритроциты ре-суспендировали в растворе ЦНИИГПК 8в [5].
Конечными точками для оценки эффективности процедуры карантинизации были показатели вторичного абсолютного брака замороженных образцов эритроцитов.
Результаты
Обеспечение вирусной безопасности гемокомпонен-тов осуществлялось в несколько этапов.
На первом этапе проводился отбор доноров [1-3, 11-13]. В КГБУЗ "Алтайский краевой центр крови" каждый потенциальный донор крови и ее компонентов проверяется по электронной базе лиц, имеющих противопоказания или медицинские отводы от донаций (в настоящее время содержит информацию о более 170 тыс. граждан края).
На втором этапе проводилась лабораторная диагностика маркеров гемотрансмиссивных инфекций [1-3, 9, 10, 16]: скрининг всех образцов донорской крови на гепатиты В и С, ВИЧ, сифилис осуществлялся методом ИФА; далее ИФА-негативные образцы подвергались ПЦР-иссле-дованию в минипулах, в режиме реального времени. Дополнительным маркером гемотрансмиссивных инфекций позиционировался уровень аланинаминотрансфера-зы (АЛТ), таблица 1.
Как видно из таблицы 1, суммарный первичный брак по маркерам гемотрансмиссивных инфекций и биохимическому маркеру биологической безопасности гемо-компонентов оставался стабильным - в пределах 4,9% (3,73-5,61%).
Разработка и внедрение методики карантинизации компонентов донорской крови обусловлены наличием феномена "серонегативного периода" при инфицировании гепатитами В и С, ВИЧ, сифилисом.
С целью обеспечения хранения и карантинизации эритроцитсодержащих сред в КГБУЗ "АКЦК" в 1999 г. был
Таблица 1
Доля выявленных положительных ИФА-маркеров гепатитов В, С, ВИЧ, повышенного уровня АЛТ в структуре первичного брака донорской крови в КГБУЗ "АКЦК" за 2006-2010 гг. (в % от общего объема заготовленной консервированной крови)
Причины первичного брака эритроцитарной массы, % 2006 2007 Годы 2008 2009 2010
Гепатит В 0,4 0,2 0,17 0,17 0,1
Гепатит С 1,0 0,9 0,7 0,8 0,6
ВИЧ 0,002 0,01 0,02 0,04 0,03
Сифилис 0,6 0,5 0,4 0,4 0,3
АЛТ 3,5 4,0 4,1 2,9 2,7
Всего 5,5 5,61 5,39 4,31 3,73
БАНК КАРАНТИНИЗИРОВАННЫХ ЗАМОРОЖЕННЫХ ЭРИТРОЦИТОВ...
О.А. Рычкова и соавт.
Таблица 2
Структура абсолютного вторичного брака криоконсервиро-ванных эритроцитов за 2006-2010 гг.
Вид брака 2006 2007 Годы 2008 2009 2010
Сифилис 26 40 38 54 22
(0,28%) (0,48%) (0,39%) (0,5%) (0,22%)
ВИЧ - - - - -
Гепатит С 66 70 20 24 76
(0,71%) (0,83%) (0,2%) (0,23%) (0,77%)
Гепатит В 116 96 66 42 38
(1,25%) (1,14%) (0,67%) (0,4%) (0,38%)
Всего, от заложенных, 208 206 124 120 136
доз (%) (2,24%) (2,45%) (1,3%) (1,13%) (1,37%)
Таблица 3
Доля доз замороженных эритроцитов, прошедших 6-месячную карантинизацию, от заложенных на карантинизацию образцов в целом в ОДХКК КГБУЗ "АКЦК" в 2006-2010 гг.
Показатели 2006 2007 Годы 2008 2009 2010
Прошло 6-месячную 3 947 4 831 6 482 3 773 3 898
карантинизацию, доз
Доля от заложенных 42,4 57,4 66,1 35,6 39,3
на карантин доз в целом, %
создан Банк крови (в настоящее время - Отделение долгосрочного хранения клеток крови - ОДХКК).
В статье представлены результаты работы Банка крови с 2006 по 2010 гг.
Ежегодно в ОДХКК на хранение и карантинизацию закладывается до 9 тыс. доз замороженных эритроцитов: в 2006 г. - 9306, в 2007 г. - 8416, в 2008 г. - 9803, в 2009 г - 10604, в 2010 г. - 9917 доз.
Хранение замороженных эритроцитов осуществлялось в течение 6 мес., после чего проводилось повторное обследование доноров на наличие маркеров гемотранс-миссивных инфекций. Информация о положительных тестах вносилась в электронную базу данных с целью предотвращения дальнейших донаций от данного донора, и производилась выборка и уничтожение всех образцов гемокомпонентов от данного донора, заложенных на хранение и карантин.
Результаты тестов повторного обследования доноров характеризуют показатели вторичного абсолютного брака криоконсервированных эритроцитов, прошедших ка-рантинизацию (табл. 2).
Таким образом, за 2006-2010 гг. после 6 мес. каранти-низации в результате лабораторного мониторинга было выявлено и уничтожено 794 образца криоконсервирован-ных эритроцитов, заготовленных от доноров, находившихся в периоде "серонегативного окна" в момент кро-водачи.
Стабильно высокое количество закладываемых на карантинное хранение доз замороженных эритроцитов позволяет обеспечивать большинство пациентов каран-тинизированными эритроцитсодержащими компонентами (табл. 3).
Таким образом, в условиях "промышленной" заготовки донорской крови в регионе с учетом повторного исследования доноров в течение 1 года уровень каранти-низации красной крови составил от 40 до 66%.
Заключение
Представленные в работе результаты повторного обследования доноров послужили основанием для разработки алгоритма обеспечения вирусной безопасности реципиентов эритроцитсодержащих гемокомпонентов. В Алтайском крае в 2002 г. был принят Приказ краевого отдела здравоохранения (Приказ КЗО от 19.02.2002 г № 75), определяющий декретированную группу пациентов, которым переливаются только карантинизированные эритроциты - беременные, роженицы, дети до 18 лет.
Считаем, что представленный опыт работы Банка крови КГБУЗ "Алтайский центр крови" может быть полезен в обеспечении вирусбезопасными гемокомпонентами трансфузионнозависимых пациентов.
Литература
1. Елыкомов В.А., Шойхет Т.Ю., Шойхет М.Я. Методика каран-тинизации донорской крови как стандарт вирусбезопас-ности гемотрансфузий // Трансфузиология в Сибири : сборник научно-практических статей. - Барнаул, 2003. - С. 5253.
2. Елыкомов В.А., Зяблицкая Т.А., Колмогорова И.И. и др. Ка-рантинизация донорской плазмы и эритроцитов на Алтайской краевой станции переливания крови (пятилетний опыт) // Здравоохранение и медицинская техника. - 2004.
- № 8 [12]. - С. 10.
3. Елыкомов И.В. Разработка оптимальной схемы инфекционной безопасности донорских гемокомпонентов при поэтапном внедрении современных технологий в службе крови Алтайского края: дис. ... канд. мед. наук. - Барнаул, 2010.
- 159 с.
4. Жибурт Е.Б. Безопасность переливания донорской плазмы: взгляд трансфузиолога // Заместитель главного врача. -2011. - № 6. - С. 84-89.
5. Инструкция по криоконсервированию клеток крови (утв. первым заместителем Министра здравоохранения РФ А.Д. Царегородцевым 29.05.1995) [Электронный ресурс]. - URL: http://lawmix.ru/med/16759.
6. Коденев А.Т., Ващенко Г.А., Капустов В.И. и др. Качество эритроцитов, криоконсервированных при умеренно низких температурах // Вестник службы крови России. - 2010. -№ 1. - С. 23-27.
7. Мельникова В.Н., Кирьянова Г.Ю., Филиппова О.И. Каран-тинизация лейкофильтрованных донорских эритроцитов
- важное звено в обеспечении инфекционной и иммунологической безопасности гемотрансфузий // Трансфузио-логия. - 2007. - № 1-2. - С. 63-64.
8. Мельникова В.Н., Селиванов Е.А., Кирьянова Г.Ю. и др. Значение лейкофильтрации при криоконсервировании эритроцитов с целью их карантинизации // Вестник службы крови России. - 2010. - № 4. - С. 3-7.
9. Постановление Правительства РФ от 26 января 2010 г. № 29 "Об утверждении технического регламента о требованиях безопасности крови, ее продуктов, кровезамещаю-щих растворов и технических средств, используемых в трансфузионно-инфузионной терапии" [Электронный ресурс]. - URL: http://www.transfusion.ru/2010/01-30-1.html.
10. Постановление Правительства РФ от 31 декабря 2010 г. № 1230 "Об утверждении правил и методов исследований и правил отбора образцов донорской крови, необходимых для применения и исполнения технического регламента о требованиях безопасности крови, ее продуктов, кровеза-мещающих растворов и технических средств, используемых в трансфузионно-инфузионной терапии" [Электронный ресурс]. - URL: http://www.transfusion.ru/2011/01-14-5.html.
11. Приказ Министерства здравоохранения Российской Федерации от 14 сентября 2001 г. № 364 "Об утверждении порядка медицинского обследования донора крови и ее компонентов" [Электронный ресурс]. - URL: http://base. consultant.ru/cons/cgi/online.cgi?req=doc;base=LAW;n= 78073.
12. Приказ Министерства здравоохранения и социального развития Российской Федерации от 16 апреля 2008 г. № 175н "О внесении изменений в Приказ Министерства здравоохранения Российской Федерации от 14 сентября 2001 г. № 364 "Об утверждении порядка медицинского обследования донора крови и ее компонентов" [Электронный ресурс]. - URL: http://www.transfusion.ru/2008/05-21-2.html.
13. Приказ Министерства здравоохранения и социального развития Российской Федерации от 6 июня 2008 г. № 2б1н "О внесении изменений в Приказ Министерства здравоохранения Российской Федерации от 14 сентября 2001 г. № 364 "Об утверждении порядка медицинского обследования донора крови и ее компонентов" [Электронный ресурс]. - URL: http://www.transfusion.ru/2008/07-08-1.html.
14. Приказ Министерства здравоохранения Российской Федерации от 7 мая 2003 г. № 193 "О внедрении в практику работы службы крови в Российской Федерации метода каран-тинизации свежезамороженной плазмы" [Электронный ресурс]. - URL: http://www.transfusion.ru/2010/04-19-2.html.
15. Приказ Министерства здравоохранения и социального развития России от 19 марта 2010 г. №170 "О внесении изменений в Приказ Министерства здравоохранения Российской Федерации от 7 мая 2003 г. № 193 "О внедрении в практику работы службы крови в Российской Федерации метода карантинизации свежезамороженной плазмы" [Электронный ресурс]. - URL: http://www.transfusion.ru/2010/03-25-1.html.
16. Приказ МЗ РФ от 30 июля 2001 г. № 292 "Об использовании иммуноферментных тест-систем для выявления антител к ВИЧ в сыворотке крови человека" [Электронный ресурс]. -URL: http://base.consultant.ru//cons/cqi/online.cqi?req= doc;base=EXP;n=300417.
17. Селиванов Е.А., Бессмельцев С.С., Дудкевич И.Г. и др. Современные проблемы донорства в Российской Федерации // Вестник службы крови России. - 2011. - № 1. - С. 5-14.
18. Селиванов Е.А., Данилова Т.Н., Дегтярева И.Н. и др. Служба
крови России: современное состояние и перспективы развития // Трансфузиология. - 2010. - Т. 11, № 4. - С. 2-15.
19. Федоров А.П., Шукман С.А., Степанова В.Н. Актуальность карантинизации компонентов крови // Трансфузиология.
- 2011. - № 2. - Т. 12. - С. 120-121.
20. Guidelines for viral inactivation and removal procedures intended to assure the viral safety of human blood plasma products. - Geneva : WHO Expert Committee on Biological Standardization, 2001. - 72 p.
21. Guide to the Preparation, Use and Quality Assurance of Blood Components : recommendation No R (95) 15 on the Preparation. 14th ed. - Strasbourg : Council of Europe Press, 2008. - 283 p.
22. Standarts for blood banks and transfusion services. 17th ed. [Электронный ресурс] / (ed.) H.G. Klein. - Bethesda, MD : American Association of Blood Banks, 1996. - URL: http:// www.karger.com/Book/Home/234519.
23. Meryman H.T. Frozen red blood cells // Transfus. Med. Rev. -1989. - No 3. - P. 121-127.
24. Meryman H.T., Hornblower M.A. A method for freezing and washing RBCs using a high glycerol concentration // Transfusion. - 1972. - No 12. - P. 145-156.
25. Scott K.L., Lecak J., Acker J.P. Biopreservation of red blood cells: past, present and future // Transfus. Med. Rev. - 2005. - Vol. 19.
- P. 127-142.
26. Valeri C.R. Frozen red blood cells // Principles of transfusion medicine. 2nd ed. / (eds.) E.C. Rossi, T.L. Simon, G.S. Moss, S.A. Gould. - Baltimore, MD : Williams and Wilkins, 1995. - P. 6166.
27. Valeri C. R., Ragno G., Van Houten P. et al. Automation of the glycerolization of red blood cells with the highseparation bowl in the Haemonetics ACP 215 instrument // Transfusion. - 2005.
- Vol. 45, No 10. - P. 1621-1627.
Поступила 31.01.2013
Сведения об авторах
Рычкова Ольга Александровна, ассистент кафедры гематологии и трансфузиологии ФПК и ППС ГБОУ ВПО "Алтайский государственный медицинский университет" Минздрава России. Адрес: 656038, г. Барнаул, пр. Ленина, 40. E-mail: [email protected]. Елыкомов Валерий Анатольевич, докт. мед. наук, профессор, заведующий кафедрой гематологии и транс-фузиологии ФПК и ППС ГБОУ ВПО "Алтайский государственный медицинский университет" Минздрава России.
Адрес: 656038, г. Барнаул, пр. Ленина, 40. Индюшкина Татьяна Николаевна, главный врач КГБУЗ "Алтайский краевой центр крови". Адрес: 656010, г. Барнаул, пр. Ленина, 197.
