Научная статья на тему 'Бактерицидные свойства дезинфектантов из группы четвертичных аммониевых соединений относительно микобактерий'

Бактерицидные свойства дезинфектантов из группы четвертичных аммониевых соединений относительно микобактерий Текст научной статьи по специальности «Ветеринарные науки»

CC BY
711
86
i Надоели баннеры? Вы всегда можете отключить рекламу.
Ключевые слова
ДЕЗИНФЕКТАНТ / «ТЕТРАМИН» / «МАКСИСАН» / «БРОМОСЕПТ 50» / «ДЕЛЬТАМИН» / МИКОБАКТЕРИИ / ТЕСТ-КУЛЬТУРА / КОНЦЕНТРАЦИЯ / ЭКСПОЗИЦИЯ / M. FORTUITUM / M. BOVIS / DISINFECTANT / TETRAMIN / MAKSISAN / BROMOSEPT 50 / DELTAMIN / MYCOBACTERIA / TEST CULTURE / CONCENTRATION / EXPOSURE

Аннотация научной статьи по ветеринарным наукам, автор научной работы — Палий Анатолий Павлович, Завгородний Андрей Иванович

В комплексе ветеринарно-санитарных и организационно-хозяйственных мероприятий, которые проводятся с целью профилактики и борьбы с туберкулезом животных, важное значение имеет дезинфекция, которая направлена на инактивацию возбудителя заболевания в окружающей среде. На сегодняшний день режимы дезинфекции, предусмотренные инструкциями и наставлениями, не всегда дают должный эффект, что особенно касается дезинфицирующих препаратов из группы четвертичных аммониевых соединений. Целью работы было проведение поиска эффективных туберкулоцидных препаратов из группы четвертичных аммониевых соединений, а также изучение их бактерицидного действия на микобактерии. Работа проводилась в лаборатории изучения туберкулёза ННЦ «ИЭКВМ». Бактерицидные свойства относительно микобактерий изучали у дезинфицирующих препаратов отечественного и зарубежного производства: «Бромасепт 50» (Израиль), «Дельтамин» (Российская Федерация), «Максисан» (Украина), «Тетрамин» (Российская Федерация). В результате проведенных научных экспериментов было установлено, что не все дезинфицирующие препараты из группы четвертичных аммониевых соединений проявляют туберкулоцидное действие. Определено, что препарат «Тетрамин» владеет бактерицидными свойствами относительно возбудителя туберкулеза M. bovis в концентрации 2,0% при экспозиции 5 ч. При проведении профилактических и оздоровительных мероприятий при туберкулезе животных можно применять только те дезинфицирующие препараты, у которых подтверждено наличие бактерицидного действия относительно микобактерий в лабораторных условиях.

i Надоели баннеры? Вы всегда можете отключить рекламу.
iНе можете найти то, что вам нужно? Попробуйте сервис подбора литературы.
i Надоели баннеры? Вы всегда можете отключить рекламу.

BACTERICIDAL PROPERTIES OF DISINFECTANTS OF QUATERNARY AMMONIUM COMPOUNDS GROUP AGAINST MYCOBACTERIA

Among the veterinary-sanitary and organization measures which are taken to prevent and control tuberculosis (TBC) in animals, disinfection is essential to inactivate the pathogen in the environment. At present, the disinfections prescribed in the guidelines do not always produce an expected effect, and in particular that concerns the disinfectants of quaternary ammonium compounds group. The research purpose involved the search for effective disinfectants from the group of tuberculocidal quaternary ammonium compounds and the study of their bactericidal action against mycobacteria. The research was conducted at the National Research Center "Institute of Experimental and Veterinary Medicine", Kharkiv, Ukraine. Bactericidal properties against mycobacteria were studied in the following disinfectants: Bromosept 50 (Israel), Deltamin (Russia), Maksisan (Ukraine), and Tetramin (Russia). It was revealed that not all disinfectants of quaternary ammonium compounds group rendered a tuberculocidal action. It was found that Tetramin disinfectant revealed bactericidal properties against TBC causative agent M. bovis in 2.0% concentration at 5 hours exposure. When taking preventive and treatment measures at TBC in animals, only those disinfectants may be applied which bactericidal action against mycobacteria was proved in laboratory environment.

Текст научной работы на тему «Бактерицидные свойства дезинфектантов из группы четвертичных аммониевых соединений относительно микобактерий»

ВЕТЕРИНАРНАЯ МЕДИЦИНА

УДК 619:614.48:616.98:579.873.21 А.П. Палий,

А.И. Завгородний

БАКТЕРИЦИДНЫЕ СВОЙСТВА ДЕЗИНФЕКТАНТОВ ИЗ ГРУППЫ ЧЕТВЕРТИЧНЫХ АММОНИЕВЫХ СОЕДИНЕНИЙ ОТНОСИТЕЛЬНО МИКОБАКТЕРИЙ

Ключевые слова: дезинфектант, «Тетрамин», «Максисан», «Бромосепт 50», «Дельтамин», микобактерии, тест-культура, ЛА. fortuitum, М. bovis, концентрация, экспозиция.

Введение

Туберкулез является одним из наиболее распространенных и экономически значимых инфекционных заболеваний среди людей и сельскохозяйственных животных. Несовершенство противотуберкулезных мероприятий связано в первую очередь с недостаточной изученностью возбудителя заболевания, эпизоотологических особенностей инфекции, низкой информативностью существующих методов прижизненной диагностики туберкулеза, способностью микобактерий длительное время находиться в окружающей среде и проявлять устойчивость к действию негативных факторов окружающей среды [1]. Ежегодное выявление животных с характерными для туберкулеза изменениями в благополучных областях, краях и республиках свидетельствует, что настоящая эпизоотическая ситуация занижена, нежели официально зарегистрирована [2]. Считается, что основными причинами возникновения заболевания крупного рогатого скота в 45% случаев является наруше-

ние требований при проведении оздоровительных противотуберкулёзных мероприятий, в 20% случаев — это скармливание молодняку обрата с молокоперерабатывающих предприятий, 15% случаев — контакт животных на пастбищах и водопое с животными частного сектора и других хозяйств, а в 8% случаев не удается установить пути занесения возбудителя заболевания [3]. В неблагополучных относительно туберкулёза фермах наиболее контаминированы микобактериями навозные каналы, пол стойл, кормовые и навозные проходы, кормушки, с которых в 15,5% случаев выделяют M. bovis, в 2,3% — M. tuberculosis и более 80% — атипичные микобактерии [4].

В связи с этим возникает необходимость своевременного выявления и ликвидации источника инфекции и проведения комплекса ветеринарно-санитарных мероприятий. В этом случае ведущая роль принадлежит дезинфекционным мероприятиям. Однако следует отметить, что применение дезинфицирующих препаратов не всегда обеспечивает уничтожение возбудителя туберкулеза во внешней среде [5].

В Российской Федерации и Белоруссии значительная часть разрешенных к применению дезинфицирующих средств относится к четвертичным аммониевым соединениям.

Для этих препаратов характерны низкая токсичность и экологическая безопасность, наличие моющих свойств, бактерицидный эффект относительно грампозитивных и грамнегативных микроорганизмов [6]. Однако число туберкулоцидных средств из данной химической группы ограничено [7].

Цель исследования — провести поиск эффективных туберкулоцидных препаратов из группы четвертичных аммониевых соединений и изучить их бактерицидное действие на микобактерии.

Материалы и методы

Работа проводилась в лаборатории изучения туберкулёза ННЦ «ИЭКВМ». Бактерицидные свойства относительно микобактерий изучали у дезинфицирующих препаратов отечественного и зарубежного производства, состоящих из четвертичных аммониевых соединений:

- «Бромасепт 50» («ABIC Biological Laboratories Teva Ltd.», Израиль);

- «Дельтамин» (ООО «СК-Трейд», Российская Федерация);

- «Максисан» (ЗАО «Украинский научнопроизводственный центр дезинфекции», Украина);

- «Тетрамин» (ЗАО «Петроспирт», Российская Федерация).

На первом этапе исследования по определению бактерицидных свойств дезинфицирующих препаратов проводили с помощью суспензионного метода определения бактерицидной активности химических дезинфектантов относительно атипичных микобактерий вида M. fortuitum, которые имели типичные культуральные и биологические свойства. С этой целью выросшую на среде Павловского бактериальную массу тест-культуры бактериологической петлёй вносили в стерильные флаконы (200 см3) с бусами. Путём взвешивания определяли вес внесенной бактериальной массы, а затем во флаконы добавляли необходимое количество стерильного изотонического раствора из расчёта, чтобы взвесь содержала 1 мг/см3 микобактерий. Флаконы встряхивали на шуттель-аппарате на протяжении 30 мин. до получения однородной взвеси микобактерий. После приготовления рабочих растворов дезинфицирующих препаратов отдельно вносили во флаконы объёмом 20 см3 по 10 см3. Затем в каждый опытный и контрольный флакон вносили отдельно по

0.2 см3 взвеси микобактерий, содержимое флаконов тщательно перемешивали. Через

1, 5 и 24 ч содержимое флаконов, каждого в отдельности, переносили в центрифужные пробирки, которые центрифугировали при 1500 об/мин. на протяжении 30 мин. Для нейтрализации препаратов в

опытных пробирках осадок, который образовался после центрифугирования, а также контрольные пробы дважды отмывали стерильным изотоническим раствором.

Полученный осадок опытных и контрольных проб ресуспензировали в 5 см3 стерильного изотонического раствора и стерильной пипеткой высевали на 10 пробирок с питательной средой для культивирования микобактерий. Пробирки с посевами выдерживали в термостате при температуре 37°С на протяжении 3 мес. и через каждые 3-5 дней проводили учёт роста культур. Отсутствие роста колоний микобактерий в пробирках с опытными посевами при наличии роста колоний в пробирках с контрольными посевами было признаком бактерицидного действия дезинфицирующего препарата.

Следующим этапом наших исследований было определение бактерицидных свойств препарата на тест-объектах (батист, дерево, кафель, металл, стекло), которые кон-таминировали возбудителем туберкулёза М. bovis. На каждый тест-объект наносили смесь, содержащую 1 см3 взвеси тест-культуры и 0,5 см3 стерильного навоза. Тест-объекты выдерживали в стерильном боксе 5 ч. После этого опытные тест-объекты обрабатывали исследуемым препаратом. На контрольные тест-объекты вместо раствора дезинфектанта наносили стерильный физиологический раствор. После выдерживания заданной экспозиции с каждого контрольного и опытного тест-объектов делали смывы стерильным изотоническим раствором в чашки Петри, содержимое которых затем переносили в центрифужные пробирки и центрифугировали при 1500 об/мин. на протяжении 20 мин. Для нейтрализации действия препарата осадок в пробирке дважды отмывали стерильным изотоническим раствором путём центрифугирования. Полученный осадок опытных и контрольных проб ресуспен-зировали в 5 см3 стерильного изотонического раствора и стерильной пипеткой высевали на питательную среду для культивирования микобактерий. Пробирки с посевами выдерживали в термостате при температуре 37°С на протяжении 3 мес. и через каждые 3-5 дней проводили учёт роста культур.

Результаты исследований

Результаты проведенных исследований бактерицидного действия препаратов относительно ЛА. fortuitum суспензионным методом представлены в таблице 1.

Из материалов, представленных в таблице 1, следует, что дезинфектант «Бромо-септ 50» в концентрации 1,0-5,0% при экспозиции 1-24 ч не проявляет бактерицидные

свойства относительно тест-культуры М. fortuitum, при этом рост колоний составил от 10 и более на поверхности питательной среды. При применении дезинфицирующего препарата «Дельтамин» в концентрации 5,0% (24 ч) и 7,0 % (5-24 ч) установлен суббактерицидный эффект, при этом на поверхности питательной среды наблюдали рост не более 10 колоний микобактерий. Дезинфектант «Максисан» обуславливает задержку роста микроорганизмов и проявляет суббактерицидное действие при применении в концентрации 4,0-5,0% (5 ч) и

2.0-3,0% (24 ч), при этом рост микобактерий не превышал 10 колоний на питательной среде.

Увеличение режимов применения данных дезинфектантов является не обоснованным, поэтому дальнейшие опыты с ними не проводились.

Вместе с этим установлено, что дезинфицирующий препарат «Тетрамин» проявляет бактерицидное действие на М. fortui-tum при применении в концентрации

2.0-3,0% при экспозиции 5-24 ч.

Следующим этапом было определение бактерицидных свойств препарата «Тетрамин» относительно возбудителя туберкулёза М. bovis с применением тест-объектов (табл. 2).

Результаты таблицы 2 показывают, что дезинфицирующий препарат «Тетрамин» в концентрации 2,0-3,0% при экспозиции 5 ч полностью обеззараживает все тест-объекты, контаминированные М. bovis.

При биологическом исследовании были подтверждены бактерицидные свойства относительно микобактерий препарата «Тетрамин». На введение туберкулина (ППД) для млекопитающих реагировали только морские свинки контрольной группы, у которых при патологоанатомическом исследовании были выявлены характерные для туберкулеза поражения внутренних органов. Культуральным исследованием отобранного от опытных и контрольных животных биологического материала возбудитель туберкулеза М. bovis был выделен только от животных контрольной группы.

Статистическая достоверность полученных результатов составляет 99,9%.

Таблица 1

Бактерицидные свойства препаратов относительно М. fortuitum

Дезинфектант Концентрация, % Экспозиция, ч Контроль

1 3 5 24

Бромосепт 50 1,0 ++++ ++++ ++++ +++ ++++

3,0 ++++ +++ +++ ++ ++++

5,0 +++ ++ ++ ++ ++++

Дельтамин 1,0 ++++ ++++ ++++ ++++ ++++

3,0 ++++ +++ +++ ++ ++++

5,0 +++ +++ ++ + ++++

7,0 +++ ++ + + ++++

Максисан 1,0 ++++ +++ ++ ++ ++++

2,0 ++++ +++ ++ + ++++

3,0 +++ +++ ++ + ++++

4,0 +++ ++ + + ++++

5,0 +++ ++ + + ++++

Тетрамин 0,5 +++ ++ ++ ++ ++++

1,0 ++ ++ + + ++++

2,0 + + - - ++++

3,0 + + - - ++++

Примечание. «—» — рост колоний отсутствует; «+» — до 10 колоний микобактерий; «++» — от 10 до 20 колоний микобактерий; «+++» — от 20 до 50 колоний микобактерий; «++++» — больше 50 колоний микобактерий на поверхности питательной среды.

Таблица 2

Бактерицидные свойства препарата «Тетрамин» относительно М. bovis

Режим применения Тест-объект Контроль

батист дерево кафель металл стекло

2,0% — 5 ч - - - - - +

2,0% — 24 ч - - - - - +

3,0% — 5 ч - - - - - +

Примечание: «—» — рост колоний отсутствует; «+» — рост колоний микобактерий.

Вывод

Результаты проведенных экспериментов свидетельствуют о том, что не все дезинфицирующие препараты из группы четвертичных аммониевых соединений проявляют туберкулоцидное действие. Установлено, что препарат «Тетрамин» владеет бактерицидными свойствами относительно возбудителя туберкулеза М. bovis в концентрации 2,0% при экспозиции 5 ч.

При проведении профилактических и оздоровительных мероприятий при туберкулезе сельскохозяйственных животных можно применять только те дезинфицирующие препараты, у которых подтверждено наличие бактерицидного действия относительно микобактерий в лабораторных условиях.

Библиографический список

1. Кассич Ю.Я. и др. Туберкулез животных и меры борьбы с ним. — Киев: Урожай, 1990. — 304 с.

2. Солодова И.В. Ретроспективный анализ изменений эпизоотической ситуации по туберкулезу крупного рогатого скота в Российской Федерации за 1951-2009 гг.: авто-

+ +

УДК 619:636.8:615

ПРИМЕНЕНИЕ РВОТНЫХ

Ключевые слова: кошки, рвотные средства, настойка чемерицы, нашатырноанисовые капли, перекись водорода, натрия хлорид, поваренная соль.

Введение

Рвотные средства (эметики) применяются в ветеринарной медицине с целью вызвать рвоту для более быстрой и полной эвакуации содержимого желудка через пищевод и ротовую полость. Этот метод применяется при отравлениях ядами растительного и минерального происхождения.

Рвоту при отравлениях вызывают у животных, у которых этот рефлекс природно развит. Нет смысла вызывать рвоту, если отравление произошло не через желудно-кишечный тракт или время отравления составляет более 4 ч, а также животным в бессознательном состоянии, склонным к кровотечениям, беременным. Не следует использовать рвотные средства в случае проглатывания инородных предметов или

реф. дис. ... канд. вет. наук: 06.02.02 [ГНУ ВНИИЭВ]. - М., 2011. - 23 с.

3. Бутенко М.Г. Аналіз причин рецидивів туберкульозу великої рогатої худоби в раніше оздоровлених господарствах // Вет. медицина України. - 2007. - № 8. - С. 15.

4. Жуков О.В. Совершенствование экспрессных методов дифференциации микобактерий туберкулеза в материалах животноводческих ферм: автореф. дис. . канд. вет. наук: 16.00.03. - Воронеж, 2002. -22 с.

5. Боранбаев А.В. Луницын В.Г., Роман-цева Ю.Н. Эффективность дезинфицирующих средств для санации почв зимников ма-ралоферм при туберкулёзе // Вестн. Алтайского гос. аграр. ун-та. - 2012. - № 10 (96). - С. 100-103.

6. Мартынов Г.Н. Фармако-токсикология дезинфектантов на основе четвертичных аммониевых соединений и их применение в птицеводстве: автореф. дис. ... д-ра вет. наук: 16.00.04. - Белгород, 2002. - 38 с.

7. Палій А. П. Туберкулоцидні властивості препарату на основі четвертинних амонієвих сполук // Науковий вісник Луганського нац. аграр. ун-ту. Серія «Вет. науки». - Луганськ, 2012. - № 37. - С. 97-101.

+

Е.В. Краскова, О.Г. Дутова СРЕДСТВ ДЛЯ КОШЕК

веществ прижигающего действия. Все эти обстоятельства необходимо учесть ветеринарному врачу, прибегнувшему к этому методу оказания помощи.

По механизму действия рвотные средства условно разделяют:

1. Средства прямого действия, когда рвотные средства проникают через гемато-энцефалический барьер, где взаимодействуют с Д2-дофаминергическими рецепторами триггерной зоны, что обеспечивает быстрый рвотный эффект [1]. Рвотные средства прямого действия апоморфина гидрохлорида, ликорина гидрохлорида относятся к списку А и подлежат строгому учету [2, 3]. Поэтому эти средства в виду своей недоступности применяются на практике редко.

2. Средства рефлекторного действия, когда вещества раздражают чувствительные рецепторы желудка, импульсы идут в рвотный центр, и наступает акт рвоты.

i Надоели баннеры? Вы всегда можете отключить рекламу.