CC BY
89
ВЕТЕРИНАРНАЯ МЕДИЦИНА
УДК 619:614.48:616.98:579.873.21 А.П. Палий,
А.И. Завгородний
БАКТЕРИЦИДНЫЕ СВОЙСТВА ДЕЗИНФЕКТАНТОВ ИЗ ГРУППЫ ЧЕТВЕРТИЧНЫХ АММОНИЕВЫХ СОЕДИНЕНИЙ ОТНОСИТЕЛЬНО МИКОБАКТЕРИЙ
Ключевые слова: дезинфектант, «Тетрамин», «Максисан», «Бромосепт 50», «Дельтамин», микобактерии, тест-культура, ЛА. fortuitum, М. bovis, концентрация, экспозиция.
Введение
Туберкулез является одним из наиболее распространенных и экономически значимых инфекционных заболеваний среди людей и сельскохозяйственных животных. Несовершенство противотуберкулезных мероприятий связано в первую очередь с недостаточной изученностью возбудителя заболевания, эпизоотологических особенностей инфекции, низкой информативностью существующих методов прижизненной диагностики туберкулеза, способностью микобактерий длительное время находиться в окружающей среде и проявлять устойчивость к действию негативных факторов окружающей среды [1]. Ежегодное выявление животных с характерными для туберкулеза изменениями в благополучных областях, краях и республиках свидетельствует, что настоящая эпизоотическая ситуация занижена, нежели официально зарегистрирована [2]. Считается, что основными причинами возникновения заболевания крупного рогатого скота в 45% случаев является наруше-
ние требований при проведении оздоровительных противотуберкулёзных мероприятий, в 20% случаев — это скармливание молодняку обрата с молокоперерабатывающих предприятий, 15% случаев — контакт животных на пастбищах и водопое с животными частного сектора и других хозяйств, а в 8% случаев не удается установить пути занесения возбудителя заболевания [3]. В неблагополучных относительно туберкулёза фермах наиболее контаминированы микобактериями навозные каналы, пол стойл, кормовые и навозные проходы, кормушки, с которых в 15,5% случаев выделяют M. bovis, в 2,3% — M. tuberculosis и более 80% — атипичные микобактерии [4].
В связи с этим возникает необходимость своевременного выявления и ликвидации источника инфекции и проведения комплекса ветеринарно-санитарных мероприятий. В этом случае ведущая роль принадлежит дезинфекционным мероприятиям. Однако следует отметить, что применение дезинфицирующих препаратов не всегда обеспечивает уничтожение возбудителя туберкулеза во внешней среде [5].
В Российской Федерации и Белоруссии значительная часть разрешенных к применению дезинфицирующих средств относится к четвертичным аммониевым соединениям.
Для этих препаратов характерны низкая токсичность и экологическая безопасность, наличие моющих свойств, бактерицидный эффект относительно грампозитивных и грамнегативных микроорганизмов [6]. Однако число туберкулоцидных средств из данной химической группы ограничено [7].
Цель исследования — провести поиск эффективных туберкулоцидных препаратов из группы четвертичных аммониевых соединений и изучить их бактерицидное действие на микобактерии.
Материалы и методы
Работа проводилась в лаборатории изучения туберкулёза ННЦ «ИЭКВМ». Бактерицидные свойства относительно микобактерий изучали у дезинфицирующих препаратов отечественного и зарубежного производства, состоящих из четвертичных аммониевых соединений:
- «Бромасепт 50» («ABIC Biological Laboratories Teva Ltd.», Израиль);
- «Дельтамин» (ООО «СК-Трейд», Российская Федерация);
- «Максисан» (ЗАО «Украинский научнопроизводственный центр дезинфекции», Украина);
- «Тетрамин» (ЗАО «Петроспирт», Российская Федерация).
На первом этапе исследования по определению бактерицидных свойств дезинфицирующих препаратов проводили с помощью суспензионного метода определения бактерицидной активности химических дезинфектантов относительно атипичных микобактерий вида M. fortuitum, которые имели типичные культуральные и биологические свойства. С этой целью выросшую на среде Павловского бактериальную массу тест-культуры бактериологической петлёй вносили в стерильные флаконы (200 см3) с бусами. Путём взвешивания определяли вес внесенной бактериальной массы, а затем во флаконы добавляли необходимое количество стерильного изотонического раствора из расчёта, чтобы взвесь содержала 1 мг/см3 микобактерий. Флаконы встряхивали на шуттель-аппарате на протяжении 30 мин. до получения однородной взвеси микобактерий. После приготовления рабочих растворов дезинфицирующих препаратов отдельно вносили во флаконы объёмом 20 см3 по 10 см3. Затем в каждый опытный и контрольный флакон вносили отдельно по
0.2 см3 взвеси микобактерий, содержимое флаконов тщательно перемешивали. Через
1, 5 и 24 ч содержимое флаконов, каждого в отдельности, переносили в центрифужные пробирки, которые центрифугировали при 1500 об/мин. на протяжении 30 мин. Для нейтрализации препаратов в
опытных пробирках осадок, который образовался после центрифугирования, а также контрольные пробы дважды отмывали стерильным изотоническим раствором.
Полученный осадок опытных и контрольных проб ресуспензировали в 5 см3 стерильного изотонического раствора и стерильной пипеткой высевали на 10 пробирок с питательной средой для культивирования микобактерий. Пробирки с посевами выдерживали в термостате при температуре 37°С на протяжении 3 мес. и через каждые 3-5 дней проводили учёт роста культур. Отсутствие роста колоний микобактерий в пробирках с опытными посевами при наличии роста колоний в пробирках с контрольными посевами было признаком бактерицидного действия дезинфицирующего препарата.
Следующим этапом наших исследований было определение бактерицидных свойств препарата на тест-объектах (батист, дерево, кафель, металл, стекло), которые кон-таминировали возбудителем туберкулёза М. bovis. На каждый тест-объект наносили смесь, содержащую 1 см3 взвеси тест-культуры и 0,5 см3 стерильного навоза. Тест-объекты выдерживали в стерильном боксе 5 ч. После этого опытные тест-объекты обрабатывали исследуемым препаратом. На контрольные тест-объекты вместо раствора дезинфектанта наносили стерильный физиологический раствор. После выдерживания заданной экспозиции с каждого контрольного и опытного тест-объектов делали смывы стерильным изотоническим раствором в чашки Петри, содержимое которых затем переносили в центрифужные пробирки и центрифугировали при 1500 об/мин. на протяжении 20 мин. Для нейтрализации действия препарата осадок в пробирке дважды отмывали стерильным изотоническим раствором путём центрифугирования. Полученный осадок опытных и контрольных проб ресуспен-зировали в 5 см3 стерильного изотонического раствора и стерильной пипеткой высевали на питательную среду для культивирования микобактерий. Пробирки с посевами выдерживали в термостате при температуре 37°С на протяжении 3 мес. и через каждые 3-5 дней проводили учёт роста культур.
Результаты исследований
Результаты проведенных исследований бактерицидного действия препаратов относительно ЛА. fortuitum суспензионным методом представлены в таблице 1.
Из материалов, представленных в таблице 1, следует, что дезинфектант «Бромо-септ 50» в концентрации 1,0-5,0% при экспозиции 1-24 ч не проявляет бактерицидные
свойства относительно тест-культуры М. fortuitum, при этом рост колоний составил от 10 и более на поверхности питательной среды. При применении дезинфицирующего препарата «Дельтамин» в концентрации 5,0% (24 ч) и 7,0 % (5-24 ч) установлен суббактерицидный эффект, при этом на поверхности питательной среды наблюдали рост не более 10 колоний микобактерий. Дезинфектант «Максисан» обуславливает задержку роста микроорганизмов и проявляет суббактерицидное действие при применении в концентрации 4,0-5,0% (5 ч) и
2.0-3,0% (24 ч), при этом рост микобактерий не превышал 10 колоний на питательной среде.
Увеличение режимов применения данных дезинфектантов является не обоснованным, поэтому дальнейшие опыты с ними не проводились.
Вместе с этим установлено, что дезинфицирующий препарат «Тетрамин» проявляет бактерицидное действие на М. fortui-tum при применении в концентрации
2.0-3,0% при экспозиции 5-24 ч.
Следующим этапом было определение бактерицидных свойств препарата «Тетрамин» относительно возбудителя туберкулёза М. bovis с применением тест-объектов (табл. 2).
Результаты таблицы 2 показывают, что дезинфицирующий препарат «Тетрамин» в концентрации 2,0-3,0% при экспозиции 5 ч полностью обеззараживает все тест-объекты, контаминированные М. bovis.
При биологическом исследовании были подтверждены бактерицидные свойства относительно микобактерий препарата «Тетрамин». На введение туберкулина (ППД) для млекопитающих реагировали только морские свинки контрольной группы, у которых при патологоанатомическом исследовании были выявлены характерные для туберкулеза поражения внутренних органов. Культуральным исследованием отобранного от опытных и контрольных животных биологического материала возбудитель туберкулеза М. bovis был выделен только от животных контрольной группы.
Статистическая достоверность полученных результатов составляет 99,9%.
Таблица 1
Бактерицидные свойства препаратов относительно М. fortuitum
Дезинфектант Концентрация, % Экспозиция, ч Контроль
1 3 5 24
Бромосепт 50 1,0 ++++ ++++ ++++ +++ ++++
3,0 ++++ +++ +++ ++ ++++
5,0 +++ ++ ++ ++ ++++
Дельтамин 1,0 ++++ ++++ ++++ ++++ ++++
3,0 ++++ +++ +++ ++ ++++
5,0 +++ +++ ++ + ++++
7,0 +++ ++ + + ++++
Максисан 1,0 ++++ +++ ++ ++ ++++
2,0 ++++ +++ ++ + ++++
3,0 +++ +++ ++ + ++++
4,0 +++ ++ + + ++++
5,0 +++ ++ + + ++++
Тетрамин 0,5 +++ ++ ++ ++ ++++
1,0 ++ ++ + + ++++
2,0 + + - - ++++
3,0 + + - - ++++
Примечание. «—» — рост колоний отсутствует; «+» — до 10 колоний микобактерий; «++» — от 10 до 20 колоний микобактерий; «+++» — от 20 до 50 колоний микобактерий; «++++» — больше 50 колоний микобактерий на поверхности питательной среды.
Таблица 2
Бактерицидные свойства препарата «Тетрамин» относительно М. bovis
Режим применения Тест-объект Контроль
батист дерево кафель металл стекло
2,0% — 5 ч - - - - - +
2,0% — 24 ч - - - - - +
3,0% — 5 ч - - - - - +
Примечание: «—» — рост колоний отсутствует; «+» — рост колоний микобактерий.
Вывод
Результаты проведенных экспериментов свидетельствуют о том, что не все дезинфицирующие препараты из группы четвертичных аммониевых соединений проявляют туберкулоцидное действие. Установлено, что препарат «Тетрамин» владеет бактерицидными свойствами относительно возбудителя туберкулеза М. bovis в концентрации 2,0% при экспозиции 5 ч.
При проведении профилактических и оздоровительных мероприятий при туберкулезе сельскохозяйственных животных можно применять только те дезинфицирующие препараты, у которых подтверждено наличие бактерицидного действия относительно микобактерий в лабораторных условиях.
Библиографический список
1. Кассич Ю.Я. и др. Туберкулез животных и меры борьбы с ним. — Киев: Урожай, 1990. — 304 с.
2. Солодова И.В. Ретроспективный анализ изменений эпизоотической ситуации по туберкулезу крупного рогатого скота в Российской Федерации за 1951-2009 гг.: авто-
+ +
УДК 619:636.8:615
ПРИМЕНЕНИЕ РВОТНЫХ
Ключевые слова: кошки, рвотные средства, настойка чемерицы, нашатырноанисовые капли, перекись водорода, натрия хлорид, поваренная соль.
Введение
Рвотные средства (эметики) применяются в ветеринарной медицине с целью вызвать рвоту для более быстрой и полной эвакуации содержимого желудка через пищевод и ротовую полость. Этот метод применяется при отравлениях ядами растительного и минерального происхождения.
Рвоту при отравлениях вызывают у животных, у которых этот рефлекс природно развит. Нет смысла вызывать рвоту, если отравление произошло не через желудно-кишечный тракт или время отравления составляет более 4 ч, а также животным в бессознательном состоянии, склонным к кровотечениям, беременным. Не следует использовать рвотные средства в случае проглатывания инородных предметов или
реф. дис. ... канд. вет. наук: 06.02.02 [ГНУ ВНИИЭВ]. - М., 2011. - 23 с.
3. Бутенко М.Г. Аналіз причин рецидивів туберкульозу великої рогатої худоби в раніше оздоровлених господарствах // Вет. медицина України. - 2007. - № 8. - С. 15.
4. Жуков О.В. Совершенствование экспрессных методов дифференциации микобактерий туберкулеза в материалах животноводческих ферм: автореф. дис. . канд. вет. наук: 16.00.03. - Воронеж, 2002. -22 с.
5. Боранбаев А.В. Луницын В.Г., Роман-цева Ю.Н. Эффективность дезинфицирующих средств для санации почв зимников ма-ралоферм при туберкулёзе // Вестн. Алтайского гос. аграр. ун-та. - 2012. - № 10 (96). - С. 100-103.
6. Мартынов Г.Н. Фармако-токсикология дезинфектантов на основе четвертичных аммониевых соединений и их применение в птицеводстве: автореф. дис. ... д-ра вет. наук: 16.00.04. - Белгород, 2002. - 38 с.
7. Палій А. П. Туберкулоцидні властивості препарату на основі четвертинних амонієвих сполук // Науковий вісник Луганського нац. аграр. ун-ту. Серія «Вет. науки». - Луганськ, 2012. - № 37. - С. 97-101.
+
Е.В. Краскова, О.Г. Дутова СРЕДСТВ ДЛЯ КОШЕК
веществ прижигающего действия. Все эти обстоятельства необходимо учесть ветеринарному врачу, прибегнувшему к этому методу оказания помощи.
По механизму действия рвотные средства условно разделяют:
1. Средства прямого действия, когда рвотные средства проникают через гемато-энцефалический барьер, где взаимодействуют с Д2-дофаминергическими рецепторами триггерной зоны, что обеспечивает быстрый рвотный эффект [1]. Рвотные средства прямого действия апоморфина гидрохлорида, ликорина гидрохлорида относятся к списку А и подлежат строгому учету [2, 3]. Поэтому эти средства в виду своей недоступности применяются на практике редко.
2. Средства рефлекторного действия, когда вещества раздражают чувствительные рецепторы желудка, импульсы идут в рвотный центр, и наступает акт рвоты.
