CC BY
399
УДК 579.22:582.28:66.081
Эмилия Коломиец Валентина Бабицкая
Татьяна Пучкова
директор Института микробиологии HAH Беларуси, член-корреспондент
заведующая лабораторией экспериментальной микологии Института микробиологии HAH Беларуси, доктор биологических наук
старший научный сотрудник лаборатории экспериментальной микологии Института микробиологии HAH Беларуси, кандидат биологических наук
БАД ИОВОГО ПОКОЛЕИИЯ
В Беларуси допущены к применению 943 биологически активные добавки к пище (БАД). В самой республике производятся 126 из этих наименований [1], из них только 4 — грибного происхождения. Созданы они сотрудниками лаборатории экспериментальной микологии Института микробиологии HAH Беларуси совместно с унитарным предприятием диагностических и лекарственных препаратов «Диалек» концерна «Белбиофарм» в рамках ЖТП «Промышленная биотехнология». БАД зарегистрированы в Министерстве здравоохранения Республики Беларусь (№ 08-33-0.272447, 08-33-0.274230, 08-33-0.272449, 08-33-0.274321) и реализуются через сеть аптек. Упаковка содержит 30 капсул по 0,5 г. Препараты в 10—15 раз дешевле импортируемых из стран ближнего и дальнего зарубежья (15 г стоят 3,5 тыс. белорусских рублей). Белорусские БАД превосходят мировые аналоги и по содержанию полисахаридов и каротиноидов.
По данным европейского регионального бюро ВОЗ, около 80 % всех заболеваний так или иначе связано с питанием, а 41 % — с основными детерминантами питания. Для населения Беларуси характерны дефицитные состояния, обусловленные недостатком витаминов, ненасыщенных жирных кислот, пищевых волокон, уровнем потребления микронутриентов вследствие геохимических особенностей региона (недостаток йода, селена). Путь решения этой проблемы лежит в расширенном применении функциональных препаратов с высокой пищевой и биологической ценностью для достижения уровня оптимальной обеспеченности организма нутриентами, формирования физиологического депо незаменимых факторов питания, которые способствуют повышению функциональных ресурсов человека, его работоспособности, качества жизни и устойчивости к действию факторов внешней среды [2]. Перспективным источником таких препаратов, как показывает мировая практика, являются базидиальные грибы.
Физиологически активные соединения грибов
Физиологически активные соединения (ФАС) грибов привлекали и привлекают внимание специалистов всего мира. Многие из ФАС ста-
ли основой широкого спектра антибиотиков, другие — препаратов онкостатического, иммуномодулирующего действия. К концу XX — началу XXI в. были накоплены данные, показывающие, что именно грибы благодаря большой гетерогенности физиолого-биохимиче-ских свойств могут стать основными продуцентами в биотехнологии и заменить растения, животных и бактерии. Повышенному интересу к грибам способствовали многочисленные исследования, показавшие, что эти организмы способны быть незаменимыми источниками для получения лекарственных препаратов, имеющих ранозаживля-ющую, антиспидовую, иммуномодулирующую и особенно антираковую активности. Именно на основании этих достижений к 90-м гг. прошлого столетия была создана новая область медицины — фармацевтическая микология [3—9].
высшие базидиальные грибы являются не только вкусным и полезным продуктом питания. в них содержатся и различные антибиотики, гормональные и ростовые вещества, а также ряд важных для жизнедеятельности организма человека соединений. Поэтому в последние годы внимание ученых всего мира направлено на изучение возможности использования грибов в качестве источника биологически активных и лечебных веществ. особое место в царстве грибов занимают грибы с выдающимися целебными свойствами. Пальму первенства разде-
ляют дальневосточные — шии-таке, маитаке и рейши. к ним по эффективности действия можно отнести всем известную вешенку и серно-желтый трутовик.
Шии-таке (Lentinus edo-des). название происходит от двух слов: shii — дерево, take — гриб. другое его название — японский, либо китайский черный гриб. в природе встречается на дальнем востоке, в японии, китае и Корее. Растет на мертвой древесине дуба, бука, каштана. культивировать гриб начали в китае около двух тыс. лет до н.э., затем эта техника была передана в японию. Шии-таке занимает одно из первых мест в списке целебных грибов китая и японии. при регулярном употреблении шии-таке снижается вес, уровень холестерина в крови. используют его и для лечения импотенции. из всех лекарственных грибов, активных против опухолей, шии-таке стоит на первом месте. в 1969 г. из плодовых тел и биомассы шии-таке получен препарат «лентинан» — полисахарид высокой биологической активности, состоящий из линейных или разветвленных глюканов. он обладает иммунологической и гематологической активностями, стимулирует т-лимфоциты, подавляемые при онкологических заболеваниях и спиде. препарат непосредственно не действует на клетки рака, а повышает иммунитет организма. на основе «лентина-на» в японии созданы коммерческие лекарственные препараты.
Рейши (Ganoderma lucidum). Гриб используют в лечебных целях народной медицины востока свыше двух тыс. лет. в японии его называют «божественный гриб», гриб бессмертия, в китае и корее — линь чи, что означает «гриб жизни». согласно древним источникам, рейши именовался средством, «дающим вечную молодость», или «божественной травой». в дикорастущем виде встречается только на 2—3 абрикосовых или персиковых деревьях. в последнее время учеными китая, японии и вьетнама разработаны способы культивирования гриба на специальных плантациях. сейчас лечебные свойства рей-ши всесторонне изучаются в ведущих медицинских учреждениях японии, сША, франции, канады.
Серно-желтый трутовик (Laetiporus sulphureus). дереворазруша-ющий гриб растет преимущественно на лиственных породах деревьев и образует плодовые тела, окрашенные в оттенки желтого, оранжевого и розового цветов. молодые плодовые тела съедобны. обладает антимикробными, галлюциногенными, цитотоксическими,
антиоксидантными, радиопротекторными и антивирусными свойствами. синтезирует большое количество каротиноидов.
Грибы сами собой представляют лекарственные препараты, содержащие все биологически активные вещества (БАв), необходимые для сохранения здоровья. примером может служить тот факт, что в плодовых телах некоторых грибов в пуле липидов содержится до 90 % линолевой кислоты, которая входит в состав таких известных лекарственных препаратов, как «Эссенциале», «липостабил», «витамин Р-99», получаемых в настоящее время из растений и животных. в грибах есть все необходимые микроэлементы и витамины, а также антиоксиданты с высоко выраженной способностью к обрыву цепи свободнорадикального окисления и очень ценные протекторные соединения (трегалоза и маннит), предохраняющие мембраны при стрессорных воздействиях [3].
отличительной особенностью грибных продуктов является то, что они — «живые системы», обладающие биологической активностью и проявляющие эффекты физиологического воздействия. преимущества функциональных препаратов грибного происхождения очевидны: они естественны для организма человека и при избытке самостоятельно выводятся из него; они представляют совокупность взаимодействующих между собой компонентов, а не сумму самостоятельно действующих веществ.
Грибы богаты белками, которые содержат все 18 аминокислот, входящих в формулу сбалансированного питания. в значительном количестве в них присутствуют лизин и лейцин, которых очень мало в белках злаковых. более 60 % липидов грибов составляют ненасыщенные жирные кислоты. в грибах имеется значительное количество калия и фосфора в органической форме, много ценных микроэлементов (железа, кобальта, селена), а также витаминов (с, весь комплекс витаминов группы в, токоферол, кальциферол и эргостерол). таким образом, действующим началом грибов является уникальный, созданный самой природой, комплекс бав.
среди метаболитов грибов особое место занимают каротиноид-ные пигменты. длительное время одна из их основных функций в живом организме сводилась к способности служить предшественником витамина А, и лишь в последние десятилетия благодаря установлению у ^каротина антирадикального и антиоксидантного эффектов расширилось понимание роли и важности каротиноид-ных пигментов в жизнедеятельности организмов. исследования последних лет заставили обратить внимание и на другие кароти-ноидные пигменты, в частности ксантофиллы — кислородсодержащие производные каротина. Установленная антиоксидантная активность каротиноидов позволила определить и их биологические функции в макроорганизмах, которые, как полагают, могут лежать в основе антимутагенных, антиканцерогенных, радиопротекторных, гиполипидемических, антисклеротических и других не
менее ценных свойств этих уникальных полиеновых соединений изопреноидной природы. Среди базидиальных грибов, выращиваемых в условиях глубинной культуры, обнаружены продуценты (серно-желтый трутовик — Laetiporus sulphureus) каротиноидных пигментов, в частности ксантофиллов. Способность к активному образованию каротиноидов у данного вида гриба является уникальной, поскольку среди базидиомицетов активные каротинои-дообразователи до сих пор не были известны. По сравнению с каротинообразующими дрожжами этот гриб обладает определенными преимуществами: он легко разрушается, экстрагирование из его биомассы каротиноидов и сопутствующих им липидных соединений не представляет больших трудностей. Данный гриб относится к съедобным, что немаловажно, если рассматривать его в качестве продуцента биологически активных липокароти-ноидных соединений, на основе которых могут быть созданы лечебные и лечебно-профилактические препараты.
Биологическую активность большинства грибов во многом определяют соединения углеводной природы, содержание которых достигает 60 % от сухой биомассы грибов [10]. Они представлены свободными и связанными сахарами, а также полисахаридами. Эти вещества выполняют резервную, осморегулирующую, регу-ляторную и протекторную функции. Интересны эти соединения и как маркеры, имеющие существенное значение в систематике царства Fungi [11, 12]. Установление в начале 70-х гг. прошлого столетия группой японских ученых онкостатического действия полисахаридов, выделенных из плодовых тел некоторых базидиальных грибов, привело к активному изучению этих соединений, а также поиску их продуцентов [13].
В Японии выпускается около десятка препаратов на основе глю-канов, полученных из высших базидиомицетов. полисахариды, выведенные из плодовых тел Schizophyllum commune («Сонифи-лан»), L. edodes («Лентинан») и Jametes versicolor («Крестин»), составляют в Японии около 30 % рынка онкостатиков и иммуно-корректоров [13]. На изучение этих полисахаридов и создание на их основе препаратов было потрачено более 10 лет и 10 биллионов йен. В Китае выпускается полисахарид-пептид (PSP), также широко использующийся как противораковое и иммуномодулиру-ющее средство. Полисахариды Pleurotus ostreatus («Плевран»), Grifola frondosa («Грифолан») проходят клинические испытания. Некоторые фракции водных экстрактов мицелия L. edodes (KS-2, LEM, LAP1, ЕР3), выращенного на плотных зерновых субстратах, оказались эффективными при лечении ряда серьезных вирусных инфекций. Активно изучаются углеводные компоненты плодовых тел гриба G. lucidum. Запатентован полисахаридсодержащий экстракт Ganopoly [14].
Полисахариды грибов обладают также гепатопротекторным, антиоксидантным, хемо- и радиопротекторным, антимикробным, противовирусным, гиполипидемическим и другими действиями. Полиаминосахариды хитин и хитозан — структурные компоненты клеточной стенки грибов — являются активными сорбентами ионов тяжелых металлов и токсинов [15—23]. В медицине хитозан применяют как ранозаживляющее средство, для лечения гастрита и язвенной болезни и понижения уровня холестерина в крови [11].
Большие перспективы представляет применение биополимеров высших базидиальных грибов в сельском хозяйстве для повышения устойчивости растений против фитопатогенных грибов. В отличие от химических препаратов полисахариды базидиомицетов обладают не только бактерицидными и фунгицидными свойствами, но и иммунизируют растения к патогенам.
Как известно, углеводы — ключ к поддержанию высокого энергетического уровня. За счет них организм покрывает потребность в энергии при интенсивной физической и умственной деятельности. Это явилось основой использования экстрактов грибов для создания углеводно-энергетических добавок и специальных энергетических напитков (натуральных тоников). Экстракты таких грибов, как шии-таке, рейши, маитаке, вешенка, проявляющие нейротонизирующее, стресспротекторное, иммуномодулирую-щее, адаптогенное, репаративное действия, позволяют сохранить и повысить без ущерба для здоровья физические ресурсы организма человека в условиях чрезмерных физических и психических нагрузок, повышают атлетические способности, ускоряют заживление травм суставов и мышц [24—26].
Широкое применение нашли грибные экстракты либо выделенные из них полисахариды в косметике: для стимуляции или восстановления иммунной функции кожи [27—28]. Hаибольшей биологической активностью обладают глюканы ß-конфигурации (ß-глюканы).
Спектр действия полисахаридов, флавоноидов, меланинов и других БАВ грибов, как и самого мицелия, весьма широк. Положительный опыт создания препаратов говорит о больших перспективах исследования высших базидиальных грибов для поиска новых БАВ и создания на их основе препаратов различного назначения.
Итак, базидиомицеты — многочисленная и разнообразная группа организмов (более 15 тыс. видов). Hаибольший интерес к этим грибам проявляют в странах Востока. В Китае известно свыше 270 видов, обладающих лекарственными свойствами, при этом макромицеты более чем 100 видов используются в традиционной медицине. Горячие водные экстракты (настои и эссенции) грибов долгое время использовались в народной медицине Кореи, Японии, США для лечения различных заболеваний. В Европе возрождение интереса к целебным свойствам грибов началось в 50-е гг. прошлого столетия в связи с поисками онкостатических препаратов. Современные исследования показали, что шляпочные грибы являются хорошими адаптогенами, повышающими устойчивость организма к стрессам, обусловленным химическими загрязнениями среды, шумом, нервными и физическими перегрузками, инфекционными компонентами.
В последнее время при получении различных препаратов предпочтение отдается глубинному мицелию, а не плодовым телам, поскольку глубинное культивирование позволяет получать экологически чистое сырье — субстанцию с заданными свойствами и в более короткие сроки. Исследования, проведенные в лаборатории экспериментальной микологии Института микробиологии HAH Беларуси, показали, что по содержанию БАВ, в том числе полисахаридов, мицелий значительно превосходит плодовые тела.
в составе белка глубинного мицелия выявлены все незаменимые для человека аминокислоты, входящие в формулу сбалансированного питания. в липидах глубинного мицелия преобладают непредельные жирные кислоты. содержание кислоты С182 (линолевой) составляет не менее 65 %, олеиновой (С181) — 15—20 %. Сумма насыщенных жирных кислот — 21,2—26,6 %, ненасыщенных — 73,4—78,8 %. Степень ненасыщенности липидов — 1,2—1,4. в глубинном мицелии, как и в плодовых телах, накапливаются соединения ароматической природы: флавоно-иды типа флавонов (шии-таке, вешенка), меланины (шии-таке), ганодериковая кислота (рейши). Наличие комплекса соединений обеспечивает высокую антиокислительную активность экстрактов как плодовых тел, так и глубинного мицелия.
Биологически активные добавки
одним из важнейших приоритетов любого государства признана забота о здоровье нации. вместе с тем радиоактивное загрязнение, наличие ксенобиотиков, тяжелых металлов, ядохимикатов, нитратов в пищевых продуктах и кормах сельскохозяйственных животных наряду с несбалансированным питанием отрицательно влияют на состояние здоровья, являются причиной повышения хронических, аллергических, онкологических и других заболеваний. неблагоприятное влияние факторов внешней среды можно уменьшить двумя путями. Первый — ограничить попадание в организм вредных веществ путем регламентирования и запрещения их поступления в среду обитания человека. второй, наиболее реальный путь — увеличить резистентность организма за счет повышения неспецифической устойчивости, расширения возможностей иммунной системы, усиления восстановительных процессов, касающихся также целостности генетических структур.
Статистические исследования, проведенные в Республике Беларусь в течение последних лет, свидетельствуют о неуклонном росте заболеваний, связанных с проблемами питания. по данным статистики, 95 % населения Беларуси недополучает селен — антиоксидант, важнейший защитный фактор организма, в том числе и от радиации. Свыше 70 % населения испытывает дефицит витамина С, от 60 до 80 % — группы витаминов в и фолиевой кислоты. недостаток йода, необходимого для нормального развития у детей центральной нервной системы, умственных способностей, испытывает население на 70—80 % территории страны [29].
таким образом, экологические проблемы и употребление рафинированных продуктов привели к тому, что только пищей невозможно обеспечить потребность организма в белках, аминокислотах, микроэлементах, витаминах. По данным Госсанэпиднадзора, за последние годы в стране возросло число заболеваний сердечно-сосудистых органов, органов пищеварения, опорно-двигательного аппарата.
в 2003 г. в Беларуси принят закон «О качестве и безопасности продовольственного сырья и пищевых продуктов для жизни и здоровья человека», в 2004 г. — Постановление Совета Министров республики Беларусь «об утверждении положения о по-
рядке производства и оборота биологически активных добавок к пище». А в 2005 г. принята Концепция гигиены питания на 2006— 2010 гг., одна из составляющих которой — создание биологически активных добавок к пище.
В последние годы уделяется большое внимание созданию принципиально новых препаратов, в том числе физиологически-функциональных, с высокой пищевой и биологической ценностью, обогащенных минеральными веществами, витаминами, пищевыми волокнами, полиненасыщенными жирными кислотами, олиго-сахаридами, антиоксидантами и т.д. Такие продукты получили название функциональных, поскольку они должны соответствовать как минимум двум из пяти критериев: укреплять иммунитет, предупреждать заболевания, продлевать жизнь, восстанавливать после заболевания, регулировать биоритмы.
По мнению ученых, функциональные препараты, к которым относятся БАД, премиксы, тонизирующие и лечебно-оздоровительные напитки — непременный атрибут здорового образа жизни, ибо они являются дополнительными мерами на пути к укреплению здоровья. По данным ВОЗ, в 2000 г. 80 % американцев и японцев, 50 % европейцев и только 1 % белорусов употребляли такие препараты регулярно. В настоящее время их применяют 3 % белорусов [30]. В Японии, где функциональные препараты грибного происхождения пользуются популярностью около 50 лет, самая высокая продолжительность жизни (более 80—90 лет) на земном шаре. После взрывов в Хиросиме и Нагасаки правительство Японии приняло обширную программу сохранения здоровья населения. Эта программа заключалась в необходимости приема (наряду с употреблением японцами океанической рыбы, сои, зеленого чая) БАД к пище. Они в Японии называются «функциональными продуктами питания».
БАД к пище — это натуральные препараты, которые помогают человеческому организму избавиться от вредных веществ, попадающих в него с пищей, водой, воздухом, лекарствами, а также добавить те компоненты, которые человек недополучает с пищей, в частности витамины, микроэлементы и др.
В 2001 г., по данным Nutrition Business Journal, объем продаж нутриентов в мире возрос на 7—8 % по сравнению с 2000 г. и составил 150 млрд долларов США. В настоящее время мировой рынок лекарственных грибов и нутрицевтиков на их основе оценивается примерно в 1,3 биллиона долларов: 900 млн дол. в Японии и Азии, 250 млн долларов в Европе, 150 — в Северной Америке. Одной из ведущих стран мира, производящей функциональные продукты, в том числе экстракты на основе лекарственных грибов, являются США.
Сегодня в мире предпочтение отдается БАД на основе сухого мицелия грибов, экстрактам (энерготоникам, оздоровительным напиткам) лекарственных грибов, которые используются как ну-трицевтики для коррекции состава пищи и как парафармацевти-ки в качестве лечебно-профилактических средств. Исторически натуральные тоники из грибов, БАД и сами грибы применяют для профилактики различных заболеваний, снятия хронической усталости, снижения излишнего веса; благодаря антиоксидант-ным свойствам они замедляют старение организма. Во многих
странах мира БАД и экстракты лекарственных грибов рекомендованы для коррекции пищевого рациона военнослужащих, спортсменов и лиц, подвергающихся тяжелым физическим нагрузкам. Так, в России препараты на основе гриба рейши и сами грибы используются космонавтами для повышения работоспособности и восстановления организма после полета [31]. В 1993 г. на первенстве мира в Германии и первенстве Китая в Пекине 6 китаянок побили 17 мировых рекордов. Секрет победы — наряду с физической подготовкой употребление ими БАд и напитков на основе лекарственных грибов. Эти бездопинговые БАД с большим успехом применяли спортсмены многих стран, в том числе национальные олимпийские команды КНР, Литвы, Латвии.
Американские исследователи установили, что пищевые добавки, изготовленные с использованием китайского гриба кордицепс, заметно увеличивают мышечную силу и повышают выносливость организма. Отчет о работе ученых был представлен на съезде Американского общества физиологов (American Physiological Society). Выяснилось, что использование экстрактов из китайских грибов приводит к более эффективному усвоению кислорода клетками организма и позволяет спортсменам успешно выдерживать длительные физические нагрузки [32]. С 1999 г. в Португа-
лии и США спортсменами активно применяются препараты, полученные на основе базидиального гриба Coriolus versicolor [33]. Многими исследователями экспериментально подтверждено влияние порошка шии-таке на ликвидацию синдрома хронической усталости, доказана эффективность его как гипотензивного средства с длительным пролонгированным действием, отмечено также, что гриб оказывает общее оздоравливающее действие на человека [34].
Несмотря на огромный потенциал лекарственных грибов, в Беларуси промышленное производство как самих грибов, так и функциональных препаратов на их основе только начинает налаживаться.
Созданные из глубинного мицелия грибов БАД содержат уникальный комплексбиологически активныхвеществ. Основой получения БАД «Лентин», «Диалентин» и «Рейшидин» явились фармкульту-ры полисахаридсинтезирующих грибов L. edodes и G. lucidum. Исследования биохимического состава сухого мицелия грибов — субстанцииБАД—показали,чтосодержаниеобщегобелкавбиомас-се составляло 30,0—36,0 %, эндополисахаридов — 10,0—12,0 %. Истинный белок по сумме аминокислот — 14,0—17,0 %. Содержание незаменимых аминокислот: изолейцин—3,6—4,3 %, лейцин—
Таблица 1. Влияние БАД на биохимические показатели у крыс с токсическим гепатитом
Препарат общий белок, г/л Альбумин, г/л Мочевина, мМ/л Креатинин, мкМ/л Холестерин, мМ/л Глюкоза, мМ/л AST, ед/л ALT, ед/л LDH, ед/л ALP, ед/л а-Амилаза, ед/л Гликоген печени, мг/г
7-е сутки наблюдения
Контроль 48,46±1,48 33,32±3,23 5,79±0,35 34,42±2,85 1,54±0,10 4,25±0,27 3,69±0,13 2,29±0,41 28,93±3,35 1,25±0,16 187,56±2,57 35,60±2,60
Тетрахлорметан, патология 55,26±4,24 35,41±0,85 3,75±0,56* 52,47±2,22* 1,66±0,08 4,52±0,20 4,33±0,17* 4,00±0,26* 33,32±4,11 2,66±0,36* 181,53±2,68 4,80±1,80*
Тетрахлорметан + «Рейшидин» 51,16±2,02 32,60±1,60 4,75±0,79** 37,5±2,02 1,47±0,10 4,27±0,45 3,63±0,18 2,27±0,27 30,02±1,00 1,66±0,24 184,53±3,86 14,70±1,80*
Тетрахлорметан + «Диалентин» 54,2±0,86 33,16±1,74 4,76±0,56 40,88±1,21 1,54±0,05 4,11±0,48 3,76±0,11 2,24±0,10 30,86±5,95 1,97±0,38 184,46±2,28 15,48±2,2
Тетрахлорметан + Карсил 51,54±0,94 34,60±1,15 5,61±0,2 22,64±1,67* 1,47±0,2 4,08±0,61 3,78±0,13 2,83±0,61 28,12±2,91 1,24±0,20 182,81±4,55 14,40±2,00*
14-е сутки наблюдения
Контроль 50,21±1,75 32,78±1,03 5,68±0,32 34,60±1,31 1,49±0,06 4,12±0,3 3,60±0,15 2,05±0,3 28,85±0,61 1,80±0,3 198,73±1,98 33,60±2,70
Тетрахлорметан, патология 50,50±2,76 33,06±2,09 4,52±0,25** 29,48±1,47 1,77±0,07* 4,71±0,27 4,03±0,28* 2,47±0,13 30,82±1,75 2,78±0,31** 195,41±4,17 20,20±4,20**
Тетрахлорметан + «Рейшидин» 49,94±4,21 30,10±1,60 5,20±0,39* 31,94±2,90 1,52±0,02 4,17±0,26 3,60±0,26 1,61±0,11 28,42±0,78 1,48±0,20 202,10±2,61 26,80±2,20**
Тетрахлорметан + «Диалентин» 47,32±3,32 29,90±1,18 5,01±0,23 32,39±1,21 1,52±0,06 4,53±0,31 3,78±0,15 1,78±0,21 27,06±3,34 1,78±0,28 199,0±6,58 24,0±2,80
Тетрахлорметан + Карсил 52,82±1,78 30,3±1,28 5,40±0,32 33,02±2,01 1,38±0,05 4,23±0,33 3,39±0,15 2,50±0,17 29,69±3,86 1,73±0,2 206,12±0,87 23,40±3,80
* — достоверность различия с контрольной группой Р <0,01, ** — достоверность различия с контрольной группой Р <0,05
7,3-9,4 %, лизин - 1,6-9,2 %, метионин + тирозин - 6,1-8,4 %, треонин - 4,1-4,7 %, валин - 5,5-6,9 %. Количество липидов в глубинном мицелии - 8,0-12,0 %. Сумма ненасыщенных жирных кислот составила 62,0-77,0 %, насыщенных - 23,0-38,0 %. Содержание олеиновой кислоты (С181) - 2,8-10,6 %, линолевой (С182) - 51,3-72,6 %. Фосфолипиды- 1,0-1,5 %, эргостерин -1,0-1,3 %. Фенольные соединения составили 680,0-762,0 мг %. Общее содержание углеводов достигает 47,0-53,2 %. Представлены они спиртовой, водной, кислотной, двумя щелочными фракциями, хитином и эндополисахаридами. Грибы синтезируют на подобранных питательных средах до 6 г/л и более экзополисаха-ридов. Антиокислительная активность (АОА) экстрактов глубинного мицелия полисахаридсинтезирующих грибов - 85-90 % по отношению к ионолу. В биомассе присутствует значительное количество минеральных элементов: Са, К, №, Fe, Мд, Р.
Содержание общего белка в мицелии гриба и. sulphureus -субстанции БАД - «Летипорин» - 18,0-22,0 %. Истинный белок по сумме аминокислот - 7,0-8,0 %. Содержание незаменимых аминокислот: изолейцин - 2,8%, лейцин - 5,3%, лизин—4,1 %, метионин + тирозин—4,2 %, треонин - 4,3 %, валин - 4,9 %. Содержание липидов в глубинном мицелии гриба - 19,0-23,0 %, сумма ненасыщенных жирных кислот - 85,2 %, насыщенных -14,8 %. Количество олеиновой кислоты (С181) - 10,4 %, линолевой (С182) - 74,8 %. Фосфолипиды составили 1,6-1,8 %, эргостерин -1,2-1,3 %. Общее содержание каротиноидов в мицелии гриба -10,0-12,0 мг/г абсолютно сухой биомассы. В составе каротино-идных пигментов обнаружены три фракции, представляющие собой кетокаротиноиды. Количественное соотношение каро-тиноидных фракций в общей компоненте, (%): 6,4:86,7:6,9. Наиболее высокий удельный вес приходится на пигмент, получивший тривиальное название «лэтипороксантин». Анти-оксидантная активность спиртового каротиноидсодержащего экстракта составляет 85,0-95,0 % по отношению к ионолу и обусловлена не только каротиноидными пигментами, но и другими липофильными компонентами экстракта (эргостерин, тритерпеновые кислоты, фосфолипиды и др.). В биомассе гриба и. sulphureus также присутствуют минеральные элементы: Na, К, Са, Мд, Р и Fe.
Хранение субстанций и самих БАД в течение 24 месяцев при температуре +50°С не влияло на изменение важнейших показателей: влажность, белок, полисахариды, липиды, фенольные соединения и др. наиболее высокая сохранность каротиноидных пигментов отмечена при сушке мицелия в токе теплого воздуха и обработке его аскорбиновой кислотой (10-1 М) либо ионолом (0,5 %).
Безвредность БАД на основе глубинного мицелия грибов подтверждена результатами исследований УП «Диалек» (Минск), проведенных на лабораторных животных (белые мыши, крысы, морские свинки и кролики). Показано отсутствие общего токсического действия БАД, а также установлено, что при пероральном поступлении в организм опытных животных БАД не обладают кожно-раздражающим и ирритативным действием и не проявляют каких-либо существенных функциональных и структур-
ных нарушений со стороны жизненно важных систем организма животных.
Доказаны иммуностимулирующее, гепатопротекторное и анти-оксидантное действия БАД. Гепатопротекторные свойства БАД исследовали на крысах линии Wistar. Опытных животных разделяли на следующие группы: 1 - получавшие тетрах-лорметан (патология); 2 - получавшие на фоне поражения печени БАД «Рейшидин», 3 - получавшие на фоне поражения печени БАД «Диалентин», 4 - получавшие на фоне поражения печени препарат сравнения «Карсил», 5 - интактные животные (контроль).
Экспериментальное поражение печени вызывали подкожным введением 50 %-ного масляного раствора тетрахлорметана в течение 4 суток, доза тетрахлорметана составила 2,0 мл/кг. БАД и гепатопротекторный препарат сравнения «Карсил» вводили перорально в виде взвеси в 1,5 %-ном крахмальном геле в дозе 30,0 мг/кг 3 дня параллельно с тетрахлорметаном, а затем еще в
Таблица 2. Влияние БАД на содержание МДА и активность СОД в печени крыс с токсическим гепатитом
Препарат МДА, Мх10-7/мг белка % СОД, у.е./мг белка %
7-е сутки наблюдения
Контроль 2,12±0,35 100 165,53±17,48 100
Тетрахлорметан, патология 3,32±0,16 5 6 97,84±12,84 59,1
Тетрахлорметан + «Рейшидин» 2,15±0,32 101,4 153,97±21,14 93,0
Тетрахлорметан + «Диалентин» 2,22±0,28 104,7 157,87±19,81 95,3
Тетрахлорметан + Карсил 2,73±0,15 128,7 166,70±27,90 100,7
14-е сутки наблюдения
Контроль 1,95±0,18 100 197,37±18,48 100
Тетрахлорметан, патология 2,29±0,12 117,4 128,75±8,12 65,23
Тетрахлорметан + «Рейшидин» 1,71±0,18 87,0 224,11±20,77 113,5
Тетрахлорметан + «Диалентин» 1,62±0,14 83,1 242,75±12,29 123,0
Тетрахлорметан + «Карсил» 1,70±0,21 87,1 279,85±21,56 141,8
Таблица 3. Влияние БАД «Рейшидин» на неспецифическую резистентность
Показатели Контрольная группа (n=10) Опытная группа (n=10)
Масса тела, г 25,8 ± 2,9 26,6 ± 4,7
Число лейкоцитов периферической крови, х 109/л 6,54 ± 1,97 5,72 ± 2,3
Полинуклеарные клетки периферической крови, % 33,5 ± 9,9 34,2 ± 7,03
Мононуклеарные клетки периферической крови, % 66,5 ± 9,9 65,8 ± 7,03
Фагоцитарная активность перитоне-альных макрофагов — фагоцитарный показатель, % 28,2 ± 5,4 48,7 ± 2,2*
фагоцитарная активность перитоне-альных макрофагов — фагоцитарное число 3,98 ± 1,2 6,28 ± 0,8**
Активность классического пути системы комплемента сыворотки крови, СН50 (у.е.) 26 ± 5,8 45,2 ± 8,2**
Активность альтернативного пути системы комплемента сыворотки крови, АР 50 (у.е.) 7,72 ± 2,9 11,6 ± 2,8 ***
* — достоверность различий с контрольной группой, Р < 0,0001, ** — достоверность различий с контрольной группой, Р < 0,01, *** — достоверность различий с контрольной группой, Р < 0,05
течение 10 суток. О влиянии БАД на функциональное состояние печени судили по активности маркерных ферментов цитолиза аланинаминотрансферазы (ALT), аспартатаминотрансферазы (AST), содержанию альбумина и общего белка в сыворотке крови, уровню гликогена в печени. Об активности перекисного окисления липидов (ПОЛ) в печени судили по содержанию малонового диальдегида (МДА) и активности супероксиддисмутазы (СОД). С целью исследования состояния обменных процессов в организме изучали содержание мочевины, креатинина, глюкозы, холестерина, активность щелочной фосфатазы (ALP), лактатдегидрогеназы (LDH), а-амилазы в сыворотке крови. Введение крысам гепато-тропного яда тетрахлорметана вызывало сильную интоксикацию, которая проявлялась как потеря аппетита, вялость, апатия и истощение. В группах крыс, получавших с лечебной целью «Диален-тин» и «Рейшидин», общие признаки интоксикации были менее выражены. На 7-е сутки интоксикации в крови этих животных повышалась активность AST и ALT соответственно в 1,2 и 1,7 раза. Наряду с этим увеличивалась активность ALP и LDH (таблица 1). В результате действия тетрахлорметана происходило нарушение углеводного обмена в печени, о чем свидетельствовало снижение в 7,4 раза гликогена. Страдала также мочевинообразовательная функция печени, уровень мочевины в крови снижался в 1,5 раза.
после приема БАД отмечалась положительная динамика ряда показателей. БАД снижали содержание в сыворотке крови альбумина, креатинина, привентировали повышение холестерина, повышали уровень мочевины и гликогена. Хотя уровень гликогена в печени «леченых» животных и повышался более чем в три раза, однако оставался достоверно сниженным по сравнению с интактными животными. Не полностью восстанавливалась и мочевинообразовательная функция.
В экспериментальных группах животных, получавших БАД, активность AST, ALT, ALP и LDH снижалась до уровня контрольных величин. Тенденция к снижению активности ферментов у «леченых» животных прослеживалась и на 14-е сутки опыта. Изучение гомогенатов печени исследуемых животных на содержание продуктов ПОЛ и активность СОД выявило увеличение в 1,6 раза содержания МДА с одновременным снижением в 1,7 раза активности СОД (таблица 2).
известно, что молекулярной основой гипертрансфераземии, свидетельствующей о повреждении печени тетрахлорметаном, нарушении ее функции, является усиление ПОЛ в гепатоцитах. Образующиеся продукты липопероксидации оказывают многостороннее действие на функцию печени: повреждают митохондрии и цитоплазматический ретикулум гепатоцитов — органеллы — с высоким содержанием ненасыщенных жирных кислот в фосфо-липидах мембран.
результаты проведенных исследований свидетельствуют, что на фоне терапии экспериментального гепатита БАД повышаются функциональные возможности печени, уменьшается выраженность воспалительной реакции в поврежденном органе.
ПОЛ и СОД весьма чувствительно реагировали на «лечебный эффект» грибов. Уже спустя 7 суток у животных, получавших БАД, уровень этих показателей практически достигал контрольных величин. Тенденция к снижению ПОЛ и увеличению СОД сохранялась и к 14-м суткам. Это указывает на то, что глубинный мицелий грибов и БАД обладают выраженным гепатопротектор-
Таблица 4. Влияние БАД «Диалентин» на специфическую резистентность
Показатели Контрольная группа (n=10) Опытная группа (n=10)
Масса селезенки, г 0,26 ± 0,07 0,28 ± 0,08
Селезеночный индекс 1,04 ± 0,38 1,25 ± 0,48
Число антителообразующих клеток селезенки (в 1 тыс. спленоцитов) 143,2 ± 41,6 165,8 ± 20,8
Титр гемагглютининов IgM, log2 3,5 ± 0,55 5,3 ± 0,52
Титр гемагглютининов IgG, log2 2,5 ± 0,5 2,9 ± 0,4
Выраженность реакции ГЗТ — индекс ГЗТ, % 6,7 ± 2,6 6,9 ± 2,9
Таблица 5. Сорбционный потенциал БАД
Сорбат «Диалентин» «Рейшидин» Полифепан
Co2+ 1,33 1,67 1,32
Zn2+ 1,32 1,41 1,41
Ni2+ 0,94 1,18 1,82
Pb2+ 10,13 15,98 7,12
Mn2+ 1,06 1,44 0,99
Cu2+ 1,30 2,30 2,37
Cd2+ 5,37 7,56 3,51
Метиленовый голубой 72,74 102,90 29,70
ным действием, в основе которого при экспериментальном токсическом гепатите лежат мембраностабилизирующие и антиок-сидантные свойства.
Для изучения иммунотропной активности использовали контрольную и опытную группу мышей, перорально получавших БАД из расчета 2,5 г/кг ежедневно в течение 10 суток. Индукция иммунного ответа производилась суспензией эритроцитов барана (0,1 мл суспензии в концентрации 1х108 клеток/мл на мышь) по стандартной схеме иммунизации.
Исследование иммунотропной активности БАД «Рейшидин» показало следующее: основное действие прослеживалось в отношении показателей неспецифического иммунитета. Так, в период введения БАД у животных опытной группы происходило значительное усиление фагоцитарной активности перитонеальных макрофагов. Аналогичные изменения отмечены и в отношении системы комплемента: у мышей, получавших БАД, наблюдалось достоверное в сравнении с контрольной группой увеличение активности как классического, так и альтернативного путей активации системы комплемента. БАД оказывала менее выраженное влияние на показатели специфического гуморального и клеточного иммунитета, индуцированного эритроцитами барана. Возможным объяснением наблюдаемых явлений может быть присутствие в мицелии G. lucidum — основе БАД — полисахаридных субстанций, способствующих активации фагоцитов (таблица 3).
Исследование иммунотропной активности БАД «Диалентин» выявило иную тенденцию: БАД в большей степени стимулировала развитие гуморального иммунного ответа, индуцированного эритроцитами барана по стандартной схеме. так, в опытной группе обнаружена тенденция к увеличению селезеночного индекса, числа антителообразующих клеток селезенки. Достоверностью отличались различия титра гемагглютининов: в опытной группе мышей увеличен уровень гемагглютининов класса М по сравнению с контрольной группой. В отношении гемагглютининов класса G также прослеживалась тенденция к увеличению
(таблица 4). Не исключено, что при увеличении сроков наблюдения до 14 дней и более титр гемагглютининов класса G был бы более выраженным. БАД при пероральном введении меньше влияла на неспецифическую резистентность: массу тела, уровень лейкоцитов, лейкоцитарную формулу и состояние системы комплемента, показатель специфического клеточного иммунитета, индуцированного эритроцитами барана, — реакцию гиперчувствительности замедленного типа (ГЗТ). Аналогичные результаты были получены и при исследовании БАД «Летипорин».
Перечисленные результаты подтверждают возможность использования глубинного мицелия грибов шии-таке, рейши, сер-но-желтый трутовик — субстанций БАД «лентин», «Диалентин», «Рейшидин» и «Летипорин» — для повышения иммунного статуса организма.
БАД обладают высоким сорбционным потенциалом, который в некоторых случаях превосходит потенциал известного энтеро-сорбента «Полифепан» (таблица 5).
БАД на основе лекарственных грибов «Лентин», «Диалентин», «Рейшидин» и «Летипорин» рекомендованы для восполнения витаминной и минеральной недостаточности, уменьшения отрицательного воздействия неблагоприятных экологических факторов, повышения иммунитета, устойчивости к простудным заболеваниям, выведения из организма радионуклидов, тяжелых металлов, экзо- и эндотоксинов.
Литература
1. Годовальников Г. Как восполнить дефицит здоровья // 069 (Рецепты здоровой жизни), 2005, № 19 (112). С. 2.
2. Мойсеенок А.Г., Ерчик В.Н., Мойсеенок Е.А. Незаменимые микронутриен-ты в применении и разработке рецептур биологически активных добавок // Новые технологии в пищевой промышленности: Материалы Межд. научно-практ. конф., 2002. С. 25—26.
3. Феофилова Е.П. Микология в Институте микробиологии РАН: история и перспективы развития // Микробиология, 2004, Т. 35, № 5. С. 674—686.
4. Краснопольская Л.М., Белицкий И.В., Антимонова А.В. и др. Лекарственные ба-зидиальные грибы: биотехнология культивирования и противоопухолевые свойства // Биотехнология: состояние и перспективы развития: Материалы Третьего Московского Межд. конгресса. Москва, 14—18 марта 2005 г. — М.: ЗАО «Экспо-биохим-технологии», РХТУ им. Д.И. Менделеева, 2005, Ч. 2. С. 72—73.
5. Шамцян М., Попов А., Панченко А. и др. Изучение гипохолестеринеми-ческого эффекта высших базидиомицетов // Биотехнология: состояние и перспективы развития: Материалы Третьего Московского Межд. конгресса. Москва, 14—18 марта 2005 г. — М.: ЗАО «Экспо-биохим-технологии», РХТУ им. Д.И. Менделеева, 2005, Ч. 2. С. 168—169.
6. Панченко А., Спиридонова В., Деникин М. и др. Изучение иммуномодули-
рующего и противоопухолевого действия высших грибов // Биотехнология:
состояние и перспективы развития: Материалы Третьего Московского Межд.
конгресса. Москва, 14—18 марта 2005 г. — М.: ЗАО «Экспо-биохим-техноло-гии», РХТУ им. Д.И. Менделеева, 2005, Ч. 2. С. 137—138.
7. Огарков Б.Н., Огаркова Г.Р., Самусенок Л.В. Пути создания некоторых лекарственных препаратов из микро— и макромицетов // Успехи медицинской микологии. — Т. 5. — М.: Национальная академия микологии, 2005. С. 206—210.
8. Бухало А.С., Соломко Э.Ф., Вассер С.П., Михайлова О.Б. Лекарственные препараты и пищевые добавки из макромицетов // Успехи медицинской микологии. — Т. 5. — М.: Национальная академия микологии, 2005. С. 254—256.
9. Филиппова И.А., Фунтик Т.В. Фунготерапия — естественная медицина будущего // Успехи медицинской микологии. — Т. 5. — М.: Национальная академия микологии, 2005. С. 279—281.
10. Wasser S.P., Weis A.L. Therapeutic effects of substances occurring in Higher Basidiomycetes mushrooms: a modern perspective (Review) // Critical Rev. Immunol, 1999, vol. 1. P. 65—96.
11. Феофилова Е.П., Немцев Д.В., Терешина В.М., Козлов В.П. Полиамино-сахариды мицелиальных грибов: новые биотехнологии и перспективы практического использования (обзор) // Прикл. биохим. и микробиол., 1996, Т. 32, № 5. С. 483—492.
12. Феофилова Е.П., Терешина В.М., Меморская А.С. и др. Изменения в составе углеводов цитозоля в процессе цитодифференцировки грибов порядка Agaricales // Микробиология, 1999, Т. 68, № 3. С. 356—361.
13. Reshetnikov S.V., Wasser S.P., Tan K.K. Higher Basidiomycetes as a source of antitumour and immunostimulating polysaccharides (Review) // Int. J. of Medicinal Mushrooms., 2001, vol. 3, № 4. P. 361—-394.
14. Lai T., Gao Y., Zhou S. Global marketing of medicinal Ling Zhi mushroom Gan-oderma lucidum (W. Curt.: Fr.) products and safety concerns // Int. J. of Medicinal Mushrooms., 2004, vol. 6, № 2, P. 185—190.
15. Шнырева А.В. Иммуномодулирующие свойства полисахаридов высших базидиальных грибов // Успехи медицинской микологии.— М.: Национальная академия микологии, 2004, Т. 3. С. 189—192.
16. Ooi V.E., Liu F. A review of pharmacological activities of mushroom polysaccharides // Int. J. of Medicinal Mushrooms., 1999. vol. 1, № 2. P. 196—206.
17. Cui J., Chisti Y. Polysaccharopeptides of Coriolus versicolor: physiological activity, uses, and production // Biotechnology Advances, 2003, vol. 21, № 2. P. 109—122.
18. Lee B.C., Bae J.T., Pyo H.B. e.a. Biological activities of the polysaccharides produced from submerged culture of the edible Basidiomycete Grifola frondosa // Enzyme and Microbial Technology, 2003, vol. 32, № 5. P. 574—581.
19. Oh K.W., Lee C.K., Kim Y.S. e.a. Antiherpetic activities of acidic protein bound polysaccharide isolated from Ganoderma lucidum alone and in combinations with acyclovir and vidarabine // J. of Ethnopharmacology, 2000, vol. 72, № 1—2. P. 221—227.
20. Kim Y.S., Eo S.K., Oh K.W. e.a. Antiherpetic activities of acidic protein bound polysaccharide isolated from Ganoderma lucidum alone and in combinations with interferons // J. of Ethnopharmacology, 2000, vol. 72, № 3. P. 451—458.
21. Zhang G.L., Wang Y.H., Teng H.L., Lin Z.B. Hepatoprotective role of Ganod-erma lucidum polysaccharide agains BCG-induced immune liver injury in mice // World J. Gastroenterol, 2002, vol. 8, № 4. P. 728—733.
22. Апрышко Г.Н., Апрышко В.П. Противоопухолевые препараты из грибов (по материалам банка данных РОНЦ РАМН) // Успехи медицинской микологии.— М.: Национальная академия микологии, 2004, Т. 3, С. 126—127.
23. Bobek P., Galbavy S. Effect of pleuran (beta- glucan from Pleurotus ost-reatus) on the antioxidant status of the organism and on dimethylhydrazine- induced precancerous lesions in rat colon // Br. J. Biomed. Sci., 2GG1, vol. 58, № 3 P. 164—168.
24. Пат. 197GG241 A1 ФРГ, Mm 6 A 23 L 2/38, A 23 L 2/52. Напиток для спортсменов / Geis K.R., Hamm M., Schindel E. — Заявл. 0l.01.9l; Опубл. G9.G7.98 // Изобр. стран мира, 1999, № 7, вып. 3. С. 2.
25. Пат. 99278G2 A1 WO, Mm 6 A 23 L 2/38. Оздоровляющий напиток, содержащий экстракт Phellinus linteus / Hong N.D., Han M.W., Yoo J.K. — Заявл. 28.11.97; Опубл. 1G.G6.99 // Изобр. стран мира, 2GGG, № 6, вып. 3. С. 58.
26. Пат. 3GG5G91 В2 5124974 A Япония, Mm 7 A 61 К 35/84, A 23 L 1/3G, A 61 P 3/1G. Пищевые продукты или напитки для улучшения метаболизма сахари-дов / Fujiwara H.— Заявл. 29.1G.1991; Опубл. 31.G1.2GGG // Изобр. стран мира, 2GG1, № 1, вып. 8. С. 36.
27. Пат. 618GG9G BA ŒA, 7 A 61 К 7/42, A 61 К 7/44, A 61 К 7/GG. Применение полисахаридов для улучшения светозащитного действия косметических или дерматологических светозащитных средств / Gers-Barlag H., Kropke R., Scheel O. — Заявл. 18.11.1998; Опубл. 3G.G1.2GG1 // Изобр. стран мира, 2GG2, № 2, вып. 8. С. 64.
28. Пат. 29G9825 В2 2G4971G A Япония, 6 A 61 К 7/GG. Косметическое средство / Yuusuke M. // Изобр. стран мира, 2GGG, № 14, вып. 8. С. 19.
29. Васильков B.A. БAД необходимы // Без рецепта, 2GG3, № 2. С. 8—9.
3G. Кенгерли И. Эти спорные и бесспорные БДДы // Без рецепта. 2GG3. № 2. С. 3—4.
31. Wasser S.P., Weis A.L. Medicinal mushrooms. Ganoderma lucidum (Curtis: Fr.) P. Karst. Reishi mushroom / Ed. E. Nevo. — Haifa—San Antonio — Kyiv, 1997. — 39 p.
32. Гамперис A. Удивительные препараты китайской компании шеншимин (Sigcess). — M^, 2GG5. — 52 с.
33. Горшина E£., Скворцова M.M. Трамелан — отечественная биологически активная добавка на основе сухой биомассы лекарственного базидиомицета Trametes pubescens (Shumach.) Pilt. и другие препараты грибов рода Trame-tes (Coriolus) // Успехи медицинской микологии. — Т. 5. — M.: Национальная академия микологии, 2GG5. С. 262—266.
34. Бабаянц О.В., Бушулян M.A., Залогина M.A. Фунготерапия — основа медицины XXI века // Успехи медицинской микологии. — M.: Национальная академия микологии, 2GG4. Т. 3. С. 196—197.
SUMMARY
Medicinal fungi and biologically active food supplements on their basis contain unique complex of substances with wide range of biological activities including immunomodulating, hepatoprotective and antioxidant.
Biologically active food supplements on the basis of medicinal fungi can be used by all sections of the people for making up for deficiency in vitamins, minerals, for raising immunity, resistance to catarrhal deceases, as well as by sportsmen for increasing work capacity, overcoming of psycho-emotional load, stress protection, recovery and rehabilitation.
