Азоли амфотерицин Б-резистентные штаммы Aspergillus fumigatus, изолированные из клинических материалов Текст научной статьи по специальности «Клиническая медицина»

ОРИГИНАЛЬНЫЕ СТАТЬИ I ORIGINAL ARTICLES

DOI: 10.24411/1815-3917-2020-11812

ОРИГИНАЛЬНЫЕ СТАТЬИ

DOI: 10.24411/1815-3917-2020-11812

Азол- и амфотерицин Б-резистентные штаммы Aspergillus fumigatus, изолированные из клинических материалов

Р.М.Гусейнов1, С.С.Джавадов1, АА.Кадырова1, Б.Боздоган4, Ш.М.Аскерова2, Б.Т.Тагиев3, И.Каралты3, А.Г.Байрамов1

1Азеpбайджанский медицинский унивеpситет, г.Баку, Азербайджан; 2Научно-исследовательский институт легочных заболеваний, г. Баку, Азербайджан; 3Учебно-терапевтическая клиника Азербайджанского медицинского университета, г. Баку, Азербайджан; 4Центр рекомбинантной ДНК и рекомбинантного протеина (REDPROM), Университет имени Аднан Мендереса, г. Айдын, Турция

Резюме: В последние годы в результате увеличения числа азол-резистентных штаммов лечение аспергиллезов существенно осложнилось. Целью данного исследования являлось выявление азоловой резистентности среди штаммов A.fumigatus, изолированных из клинических образцов пациентов, обратившихся в лечебные учреждения Азербайджанской Республики. Идентификация штаммов A.fumigatus проводилась на основе культуральных, морфологических признаков, а также молеку-лярно-генетическим методом с использованием внутренних транскрибируемых спейсерных регионов 1 и 4. Все штаммы были протестированы на чувствительность к вориконазолу, посаконазолу и амфотерицину Б в соответствии с рекомендациями EUCAST. 9 из 10 клинических изолятов были резистентны к посаконазолу, 2 из которых были также резистентны к вориконазолу. 4 штамма были резистентны к посаконазолу и амфотерицину Б. В результате исследования были выявлен высокий показатель резистентности (90%) среди клинических штаммов. Для более полной картины исследования должны быть продолжены на больших количествах штаммов с последующим молекулярно-генетическим анализом с целью выявления генов резистентности.

Ключевые слова: Aspergillus fumigatus, азоловая резистентность

Для цитирования: Гусейнов Р.М., Джавадов С.С., Кадырова А.А., Боздоган Б., Аскерова Ш.М., Тагиев Б.Т., Каралты И., Бай-рамов А.Г. Азол- и амфотерицин Б-резистентные штаммы Aspergillus fumigatus, изолированные из клинических материалов. Биомедицина (Баку). 2020;18(3): 10-15. DOI: 10.24411/1815-3917-2020-11812

Поступила в редакцию: 15.06.2020. Принята в печать: 28.08.2020.

Azole- and amphotericin B-resistant strains of Aspergillus fumigatus isolated from clinical materials

Huseynov R.M.1, Javadov S.S.1, Kadyrova A.A.1, Bozdogan B.4, Askarova S.M.2, Tagiyev B.T.3, Karalti I.3, Bayramov A.G.1

iAzerbaijan Medical University, Baku, Azerbaijan; 2Scientific Research Institute of Lung Diseases, Baku, Azerbaijan; 3Educational-Therapeutic Clinic of Azerbaijan Medical University, Baku, Azerbaijan; 4Recombinant DNA and Recombinant Protein Center (REDPROM), Adnan Menderes University, Aydin, Turkey

Abstract: Recently, emergence of azole resistant strains challenged management of patients with aspergillosis. The aim of investigation was detection of azole resistant A.fumigatus strains in clinic specimens of patients applied to hospitals of Azerbaijan Republic. Identification of strains was performed on basis of cultural, morphological features with subsequent molecular genetic analysis of internal transcribing spacer regions 1 and 4. All strains were tested for susceptibility to voriconazole, posaconazole and amphotericin B in accordance to EUCAST guidelines. 9 strains out of 10 were resistant to posaconazole, 2 of which were also resistant to voriconazole. 4 strains were resistant to posaconazole and amphotericin B. Results of our investigation revealed high rate of resistance (90%) in clinic isolates. Investigation on high number of isolates with subsequent molecular genetic analysis of resistance mechanisms is needed. Key words: Aspergillus fumigatus, azole resistance.

For citation: Huseynov R.M., Javadov S.S., Kadyrova A.A., Bozdogan B., Askarova S.M., Taqiyev B.T., Karalti I., Bayramov A.G. Azole- and amphotericin B-resistant strains of Aspergillus fumigatus isolated from clinical materials. Biomedicine (Baku). 2020; 18(3): 10-15. DOI: 10.24411/1815-3917-2020-11812

Для корреспонденции: Р.М.Гусейнов

Докторант кафедры Медицинской Микробиологии и Иммунологии, Азербайджанский Медицинский Университет, Баку, Азербайджан. E-mail: rav.huseyn@gmail.com

Received: 15.06.2020. Accepted: 28.08.2020.

Corresponding author: Huseynov R.M.

Doctoral student, The department of Medical Microbiology and Immunology, Azerbaijan Medical University, Baku, Azerbaijan E-mail: rav.huseyn@gmail.com

_БИРМЕДИЦИНД I T.18*N-3*2020 / BIOMEDICINE | voM8«№3«2020

DOI: 10.24411/1815-3917-2020-II812 ОРИГИНАЛЬНЫЕ СТАТЬИ / ORIGINAL ARTICLES

ВВЕДЕНИЕ. Aspergillus fUmigatus - плесневый грибок, распространенный повсеместно и образующий большое количество спор, которые могут попасть в нижние дыхательные пути человека. Споры, попавшие в альвеолы, быстро ликвидируются иммунной системой здорового индивидуума [1]. Однако, у пациентов с иммуносупрессией или же с хроническими структурными заболеваниями легких, данные грибки могут вызвать спектр заболеваний, включая хронический легочный аспер-гиллез (ХЛА) и инвазивный аспергиллез (ИА) [2]. В лечении аспергиллезов применяются азоловые препараты: итраконазол, вориконазол, посаконазол и исавуконазол [3]. Азолы, воздействуя на фермент 14?-деметилазу, кодируемый геном cyp51, блокируют синтез эргостерола - компонента клеточной стенки. Это приводит к накоплению в клетке токсических метилированных стеролов и ее гибели

[4].

К сожалению, в последние годы лечение инфекций, вызванных A.fumigatus, осложнилось с возникновением и распространением резистентности к азоловым препаратам [5]. Различные исследования показали варьирующую в пределах 50 - 100% смертность пациентов с азол-резистентны-ми штаммами. Исследования, проводившие сравнительную характеристику смертностей от чувствительных и резистентных штаммов, выявили, что смертность от резистентных штаммов выше на 23% - 31% [1].

Целью данного исследования являлось выявление азоловой резистентности среди штаммов A.fUmigatus, изолированных из клинических образцов пациентов, обратившихся в лечебные учреждения Азербайджанской Республики.

МАТЕРИАЛ И МЕТОДЫ. В период 2017-2019 годов были собраны клинические материалы пациентов, обратившихся в Научно-Исследовательскую Клиническую Микробиологическую Лабораторию, Учебно-Терапевтическую Клинику Азербайджанского Медицинского Университета и Научно-Исследовательский Институт Легочных Заболеваний Азербайджанской Республики.

Полученные образцы были инокулированы в 2 чашки Петри с агаром Сабуро с хлорамфениколом (0.5 г/л) (Pronadisa, Испания) и инкубированы при температуре 37°C в течение 7 дней [6]. Из колоний, характерных для Aspergillus spp., были приготовлены нативные препараты с окрашиванием лактофенолом хлопковым голубым [7]. Морфологическая идентификация была проведена с использованием таксономических ключей и руководств [6, 8]. Все изоляты, фенотипически идентифицирован-

ные как комплекс A.fumigatus, были инкубированы при 48°C для исключения криптических видов [9] и далее идентифицированы с использованием внутренних транскрибируемых спейсерных регионов l и 4 (ITSl и ITS4) [б, l0].

Молекулярная идентификация штаммов и тест на чувствительность к антифунгальным препаратам проводились в Центре Рекомбинантной ДНК и Реком-бинантного Протеина (REDPROM) Университета имени Аднан Мендереса (Турция). Для этого изоляты Aspergillus spp. инкубировались в течение 5-7 дней для получения роста, достаточного для экстракции ДНК. Далее готовилась суспензия спор в l мл физиологического раствора и центрифугировалась в течение 5 минут при l2000 rpm. Супернатант удалялся, а к оставшемуся осадку добавлялось l00 мкл буфера ДНК-экстракции (lM Трис HCl [pH 7.5), IGEPAL® CA-бЗО, Твин 20, протеиназа K [l0 мг/мл]). Микроцентрифужные пробирки, содержащие данную смесь спор и буфера ДНК-экстракции, были инкубированы 30 минут при 56°C с последующим нагреванием до l00°C на 8 минут. Два олигонуклеотидных праймера ITS l и ITS 4 были использованы для амплификации (ITS l, 5 '-TCC GTA GGT GAA CCT GCG G-3 '; ITS 4, 5 '-TCC TCC GCT TAT TGA TAT G-3') (Metabion International, Martinsried, Германия). 2 il из каждого тестируемого образца было добавлено в Master Mix Раствор (2.5 U Таг-полимеразы (Fermentas), l0X Таг буфера (l00 mM Трис-HCl, pH 8.3, 500 mM KCl), 2 mMMgCl2, 0.4 pmol праймеров, 0.2 mM dNTP, в конечном объеме 30 ¡L. Полимеразная цепная реакция (ПЦР) была проведена на термальном циклере Applied Biosystems SimpliAmp. Было проведено 35 циклов амплификации, состоящих из фазы денатурации (95°C - 30 сек), отжига (50°C - 30 сек), элонгации (72°C - l мин), и финальной элонгации при 72°C на 8 мин. Полученные ампликоны были разделены электрофорезом в агарозном геле с последующей секвенацией (Macrogen, http://dna.macrogen.com/eng/). Последовательности были сравнены с банком генов (www.blast.ncbi.nlm. nih.gov) и идентифицированы на основе гомологии последовательностей [ll].

Тест на чувствительность к антифунгальным препаратам. Все штаммы A.fumigatus были протестированы на чувствительность к вориконазолу, посако-назолу и амфотерицину Б в соответствии с рекомендациями Европейского комитета по определению чувствительности к антимикробным препаратам (European Committee on Antimicrobial Susceptibility Testing - EUCAST)1. Каждый антифунгальный агент был разведен в среде RPMI 1б40 с 2%о глюкозой и добавлен в количестве 100 fl в микродилюционные лунки. Для приготовления инокулума использовались споры 2-5-дневной культуры на агаре Сабуро, из которых готовилась суспензия в стерильной воде с Твином 20 (1%). Концентрация спор в суспензиях с использованием гемо-

1EUCAST definitive document E.DEF9.3.1. Methodfor the determination of broth dilution minimum inhibitory concentrations of antifungal agents for conidia forming moulds. January 2017. Available at: http://www.eucast.org/fileadmin/src/media/PDFs/EUCAST_files/AFST /Files/EUCAST_E_Def_9_3_1_Mould_testing_definitive.pdf.

ОРИГИНАЛЬНЫЕ СТАТЬИ / ORIGINAL ARTICLES DOI: 10.24411/1815-3917-2020-11812

Таблица. Антифунгальная чувствительность 10 клинических штаммов A.fumigatus к 3 препаратам (ВОР - вориконазол, ПОС - посаконазол, АМБ - амфотерицин Б)

Иэолят Клинический материал МИК (мг/л"1)

ВОР ПОС АМБ

30c Мокрота 1 0,5 2

47c Мокрота 0,5 0,25 2

52c Мокрота 4 1 1

53c Мокрота 0,5 1 2

68c Мокрота 4 1 1

71c Мокрота 2 1 4

92c Мокрота 0,25 1 2

109c Мокрота 2 1 2

136c Мокрота 0,5 1 4

137c Мокрота 0,5 1 4

цитометра доводилась до 2-5x10 конидий/мл. 10-кратным разведением получалась конечная концентрация в 2-5x105 конидий/мл. В микродилюционные лунки, содержащие антифунгальные препараты, добавлялось по 100 fil инокулума с дальнейшей инкубацией 37°C в течение 48 часов. Минимальной ингибирующей концентрацией (МИК) считалась та, при которой не наблюдалось визуального роста грибка в питательной среде. Изоляты с МИК для вориконазола и амфотерицина Б >4 мг/л и для посаконазола >0.5 мг/л считались резистентными2.

РЕЗУЛЬТАТЫ И ОБСУЖДЕНИЕ. Было изолировано 10 штаммов из клинических образцов. Все штаммы были изолированы у пациентов, обратившихся в клиники города Баку. Результаты теста на антифунгальную чувствительность полученных штаммов отображены в таблице.

9 из 10 штаммов были резистентны к посако-назолу (МИК от 0,5 до >1 мг/л-1), из которых 2 изо-лята (52c и 68c) были также резистентны к ворико-назолу (МИК=4 мг/л-1). 4 штамма были резистентны к посаконазолу и амфотерицину Б, среди которых 1(71c) был среднечувствителен к вориконазо-лу (МИК=2 мг/л-1).

Азолы не являются мутагенами, но способствуют селекции мутировавших штаммов [12]. При бесполом размножении, изобилующим в природе, образуется большое количество спор, среди которых в единичных количествах могут происходить спонтанные мутации. Данные мутантные штаммы, обладая более высокой способностью к выживанию, под воздействием стресс-факторов получают преимущество над "дикими" немутант-ными. В результате, при наличии стресс-фактора, в популяции происходит увеличение числа мутант-

ных штаммов [1]. Известно 2 возможных условия селекции: длительное лечение больных азолами и содержание азолов в большом количестве в окружающей среде. Мутантные штаммы могут приобрести отличительные фенотипические свойства-слабые по сравнению с нормальными штаммами темп роста и споруляцию [12]. При длительном лечении азолами часто развиваются точечные мутации (G54, P216, F219, M220, G138, Y431, G44), влекущие изменения в каналах, через которые азо-лы проходят в клетку-мишень [13]. Под воздействием же азолов, применяемых в окружающей среде, происходит образование тандемных повторов (TR) в промотерном регионе в сочетании с точечными мутациями гена cyp51 [14]. Примерами таких мутаций являются TR34/L98H, TR46/Y121F/ T289A, TR53 и TR53/L98H [15].

При этом часто фенотип резистентности зависит от типа мутации. Так, G54 мутанты обладают резистентностью к итраконазолу и посаконазолу и чувствительны к вориконазолу и исавуконазолу. Штаммы, резистентные к вориконазолу, резистентны также и к исавуконазолу. TR34- изоляты резис-тенты к итраконазолу (>16 мг/л-1), TR46-изоляты -к вориконазолу [12].

Согласно рекомендации Европейского общества клинической микробиологии и инфекционных заболеваний (European Society of Clinical Microbiology and Infectious Diseases - ESCMID) в сотрудничестве с Европейской конфедерацией медицинской микологии (European Confederation of Medical Mycology - ECMM) и Европейским респираторным обществом (European Respiratory Society - ERS) [3], для изолятов Aspergillus следует прово-

2European committee on antimicrobial susceptibility testing. Antifungal agents. Breakpoint tables for interpretation ofMICs. 2018. Available

at: http://www.eucast.org/fileadmin/src/media/PDFs/EUCAST fles/AFSTFiles/EUCAST E Def 9 3 1 Mould testing definitive.pdf

_БИОМЕДИЦИНА | т.18«№3«2020 / BIOMEDICINE | voM8«№3«2020

DOI: 10.24411/1815-3917-2020-11812 ОРИГИНАЛЬНЫЕ СТАТЬИ / ORIGINAL ARTICLES

дить идентификацию на уровне раздела. При лечении в качестве препаратов первой линии рекомендуются вориконазол или исавуконазол. Посакона-зол рекомендован для профилактики аспергиллеза у пациентов с острым миелолейкозом и миелоди-спластическим синдромом [3]. Лечение комбинацией препаратов не рекомендуется. В регионах с высокой распространенностью азол-резистентных штаммов в окружающей среде (>10%) международная экспертная панель рекомендует комбинацию азол-эхинокандин или липосомальный амфо-терицин Б как первичную терапию. При установлении наличия азоловой резистентности у штамма, изолированного у пациента, рекомендуется замена монотерапии азолом на липосомальный амфотери-цин Б. Из вышесказанного следует, что в зависимости от уровня резистентности стратегия лечения больных аспергиллезами существенно отличается. В зонах с низким показателем резистентности (<10%) проблемным считается предотвращение летальных исходов пациентов в спорадичных случаях аспергиллезов, вызванных резистентными штаммами, так как рутинное проведение тестов для определения резистентных штаммов осуществляется очень малым количеством лабораторий [1]. Таким образом, определение эпидемиологии резистентности в локальном масштабе имеет важное значение при выработке стратегии лечения в определенной стране.

На сегодняшний день случаи азоловой резистентности были зафиксированы в большинстве европейских стран. По данным сети Европейского сотрудничества по эпидемиологическому надзору за Aspergillus резистентностью (Surveillance Collaboration on Aspergillus Resistance in Europe -SCARE), включающего 22 медицинских центра в 19 странах, частота резистентности составила 3.2% [16]. Следует учитывать тот факт, что распространенность резистентности значительно варьирует как между странами, так и между различными медицинскими учреждениями и различными группами пациентов в одном медицинском учреждении

[17, 18].

Недавно проведенное генетическое исследование, изучившее 2026 изолятов из 13 стран, выявило 6% показатель распространенности резистентности [19]. Примечательно, что большинство выявленных как в Европе, так и в Азии штаммов имеют одинаковые механизмы резистентности, в частности TR34/L98H и TR46/Y121F/T289A мутации, которые, как считается, берут свое начало из окру-

жающей среды. В то же время, в штаммах, выявленных в США, данные механизмы встречаются нечасто. Считается, что такое различие в генотипе резистентности связано с различным количеством применяемых азоловых фунгицидов в аграрной промышленности в Европе и США. По данным van der Linden JW и др. [20], штаммы с мутацией TR34/L98H ассоциированы с высоким летальным исходом (89%) при аспергиллезах. По результатам того же исследования, распространенность азол-резистентных штаммов составила 5,3%, частота же резистентности - 4,6%. Однако, данная цифра варьировала в зависимости от медицинского центра, достигая 9,5%. Схожий плохой прогноз ассоциирован с TR46/Y121F/T289A мутацией [21].

Наше исследование выявило резистентность к посаконазолу у 9 (90%) из 10 клинических штаммов, из которых 2 также были резистентны к вори-коназолу. Так как тип мутации имеет различное влияние на МИК значения вориконазола (G54 точечные мутации не влияют на чувствительность штамма к вориконазолу) [9, 12], возможно, что в изученных клинических изолятах резистентность развилась под воздействием длительной терапии азоловыми препаратами. Однако, наличие у 2-х штаммов (52C и 68c) резистентности к обоим азо-лам допускает возможность миграции данной резистентности из штаммов окружающей среды.

3 изолята (30%) в нашем исследовании были резистентными к амфотерицину Б (МИК>2 мг/л-1), что свидетельствует о высокой вероятности осложнений при лечении больных. Предыдущие исследования выявили различные показатели распространенности резистентности к амфотерицину Б (096%) [22-25]. Самые высокие показатели были зафиксированы в Канаде и Бразилии - со значениями 96% и 27,4% соответственно [22, 23]. Другие исследования, проведенные Espinel-Ingroff A и др. и Dannaoui E и др. выявили низкие значения - 5,6% и 0% соответственно [24, 25].

ЗАКЛЮЧЕНИЕ. В результате исследования 10 клинических штаммов были выявлен высокий показатель резистентности (90%) к азоловым препаратам. 9 штаммов были резистентны к посакона-золу, 2 - к вориконазолу. Возможно, что главной причиной этого является малое количество исследованных изолятов. Для более полной картины исследования должны быть продолжены на больших количествах штаммов с последующим молекуляр-но-генетическим анализом с целью выявления генов резистентности.

БИОМЕДИЦИНА | Т.18«№3«2020 / BIOMEDICINE | voL18«№3«2020_

ОРИГИНАЛЬНЫЕ СТАТЬИ / ORIGINAL ARTICLES DOI: 10.24411/1815-3917-2020-11812

Литература / References

1. Lestrade PPA, Meis JF, Melchers WJG, Verweij PE. Triazole resistance in Aspergillus fumigatus: recent insights and challenges for patient management. Clin Microbiol Infect. 2019;25(7):799-806. DOI: 10.1016/j.cmi. 2018.11.027.

2. Kosmidis C, Denning DW. The clinical spectrum of pulmonary aspergillosis. Thorax. 2015;70(3):270-7. DOI: 10.1136/thoraxjnl-2014-206291.

3. Ullmann A.J., Aguado J.M., Arikan-Akdagli S. et al. Diagnosis and management of Aspergillus diseases: executive summary of the 2017 ESCMID-ECMM-ERS guideline. Clin Microbiol Infect. 2018;24(Suppl 1):e1-e38. doi: 10.1016/j.cmi.2018.01.002.

4. Scorzoni L., de Paula E.S., Marcos C.M. et al. Antifungal Therapy: New Advances in the Understanding and Treatment of Mycosis. Front Microbiol. 2017;8:36. DOI: 10.3389/fmicb.2017.00036.

5. Verweij P.E., Chowdhary A., Melchers W.J., Meis J.F. Azole Resistance in Aspergillus fumigatus: Can We Retain the Clinical Use of Mold-Active Antifungal Azoles? Clin Infect Dis. 2016;62(3):362-8. DOI: 10.1093/cid/civ885.

6. Samson R.A., Visagie C.M., Houbraken J. et al. Phylogeny, identification and nomenclature of the genus Aspergillus. Stud Mycol. 2014 Jun;78:141-73. DOI: 10.1016/j.simyco.2014.07.004.

7. Leck A. Preparation of lactophenol cotton blue slide mounts. Community Eye Health. 1999;12(30):24. Available at: https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PMC1706009/

8. McClenny N. Laboratory detection and identification of Aspergillus species by microscopic observation and culture: the traditional approach. Med Mycol. 2005;43(Suppl 1):S125-8. DOI: 10.1080/13693780500052222.

9. Riat A., Plojoux J., Gindro K. et al. Azole Resistance of Environmental and Clinical Aspergillus fumigatus Isolates from Switzerland. Antimicrob Agents Chemother. 2018;62(4):e02088-17. DOI: 10.1128/AAC.02088-17.

10. Schoch C.L., Seifert K.A., Huhndorf S. et al. Nuclear ribosomal internal transcribed spacer (ITS) region as a universal DNA barcode marker for Fungi. Proc Natl Acad Sci USA. 2012;109(16):6241-6. DOI: 10.1073/ pnas.1117018109.

11. Oryasin E., Biyik H.H., BasbulbuL G, BozdogAn B. Antimicrobial susceptibility patterns of environmental and hospital isolations of enterococci in Aydin. Turkish Journal of Biology. 2013;37:514-9. DOI: https://doi.org/10.3906/biy-1203-3 (In Turkish).

12. Rybak JM, Fortwendel JR, Rogers PD. Emerging threat of triazole-resistant Aspergillus fumigatus. J Antimicrob Chemother. 2019;74(4):835-842. DOI: 10.1093/jac/dky517.

13. Howard SJ, Cerar D, Anderson MJ, Albarrag A, et al. Frequency and Evolution of Azole Resistance in Aspergillus fumigatus Associated with Treatment Failure. Emerg Infect Dis. 2009;15(7):1068-1076. DOI: 10.3201/eid1507.090043.

14. Hollomon D. Does agricultural use of azole fungicides contribute to resistance in the human pathogen Aspergillus fumigatus? Pest Manag Sci. 2017;73(10):1987-1993. DOI: 10.1002/ps.4607.

15. Meis JF, Chowdhary A, Rhodes JL, et al. Clinical implications of globally emerging azole resistance in Aspergillus fumigatus. Philos Trans R Soc Lond B Biol Sci. 2016;371(1709):20150460. DOI: 10.1098/rstb.2015. 0460.

16. van der Linden JW, Arendrup MC, Warris A, et al. Prospective multicenter international surveillance of azole resistance in Aspergillus fumigatus. Emerg Infect Dis. 2015;21(6):1041-1044. doi:10.3201/eid2106.140717

17. Chowdhary A, Sharma C, Meis JF. Azole-Resistant Aspergillosis: Epidemiology, Molecular Mechanisms, and Treatment. J Infect Dis. 2017;216(suppl 3):S436-S444. DOI: 10.1093/infdis/jix210.

18. Hagiwara D, Watanabe A, Kamei K, Goldman GH. Epidemiological and Genomic Landscape of Azole Resistance Mechanisms in Aspergillus Fungi. Front Microbiol. 2016;7:1382. DOI: 10.3389/fmicb.2016.01382.

19. Ashu EE, Hagen F, Chowdhary A, et al. Global Population Genetic Analysis of Aspergillus fumigatus. mSphere. 2017;2(1):e00019-17. DOI: 10.1128/mSphere.00019-17

20. van der Linden JW, Snelders E, Kampinga GA, et al. Clinical implications of azole resistance in Aspergillus fumigatus, The Netherlands, 2007-2009. Emerg Infect Dis. 2011;17(10):1846-1854. DOI:10.3201/ eid1710.110226

21. van der Linden JW, Camps SM, Kampinga GA, et al. Aspergillosis due to voriconazole highly resistant Aspergillus fumigatus and recovery of genetically related resistant isolates from domiciles. Clin Infect Dis. 2013;57(4):513-20. DOI: 10.1093/cid/cit320.

22. Ashu EE, Korfanty GA, Samarasinghe H, et al. Widespread amphotericin B-resistant strains of

_БИРМЕДИЦИНД I T.18*N-3*2020 / BIOMEDICINE | voM8«№3«2020

DOI: 1O.24411/1S15-3917-2O2O-11S12 ОРИГИНАЛЬНЫЕ СТАТЬИ I ORIGINAL ARTICLES

Aspergillus fumigatus in Hamilton, Canada. Infect Drug Resist. 2OiS;ii:i549-1555. DOI:1O.2147/IDR.S17O952

23. Reichert-Lima F, Lyra L, Pontes L, et al. Surveillance for azoles resistance in Aspergillus spp. highlights a high number of amphotericin B-resistant isolates. Mycoses. 2O1S;6i(6):36O-365. DOI: iO.iiii/myc.12759.

24. Espinel-Ingroff A, Cuenca-Estrella M, Fothergill A, et al. Wild-type MIC distributions and epidemiological cutoff values for amphotericin B and Aspergillus spp. for the CLSI broth microdilution method (M3S-A2 document). Antimicrob Agents Chemother. 2O11;55(11):515O-5154. DOI:iO.ii2S/AAC.OO6S6-ii

25. Dannaoui E, Persat F, Monier MF, et al. In-vitro susceptibility of Aspergillus spp. isolates to amphotericin B and itraconazole. J Antimicrob Chemother. 1999;44(4):553-5. DOI: 1O.1O93/jac/44.4.553.

Информация о соавторах: С.С.Джавадов

Доктор философии по медицине, доцент, кафедра медицинской микробиологии и иммунологии, Азербайджанский Медицинский Университет, г. Баку, Азербайджан А.А.Кадырова

Профессор, доктор медицинских наук, зав. кафедрой кафедра медицинской микробиологии и иммунологии, Азербайджанский Медицинский Университет, г. Баку, Азербайджан Б.Боздоган

Профессор, доктор медицинских наук, зав. Центром Рекомби-нантной ДНК и Рекомбинантного Протеина (REDPROM), Университет имени Аднан Мендереса, г Айдын, Турция Ш. М.Аскерова

Кандидат биологических наук, ведущий научный сотрудник, Научно-исследовательский институт легочных заболеваний, г Баку, Азербайджан Б.Т.Тагиев

Врач-лаборант, лаборатория учебно-терапевтической клиники, Азербайджанский Медицинский Университет, г. Баку, Азербайджан И.Г.Каралты

Зав. лабораторией учебно-терапевтической клиники, Азербайджанский Медицинский Университет, г. Баку, Азербайджан

А.Г.Байрамов

Доктор философии по медицине, доцент, кафедра медицинской микробиологии и иммунологии, Азербайджанский Медицинский Университет, г. Баку, Азербайджан

Information about co-authors: Javadov S.S.

PhD in Medicine, Docent, Chair of Medical Microbiology and Immunology, Azerbaijan Medical University, Baku, Azerbaijan

Kadyrova A.A.

Proffesor, Doctor of Medical Sciences, Head of Medical Microbiology and Immunology Chair, Azerbaijan Medical University, Baku, Azerbaijan Bozdogan B.

Proffesor, Doctor of Medical Sciences,

Chief of Recombinant DNA and Recombinant Protein Center (REDPROM), Adnan Menderes University, Aydin, Turkey Askarova S.M.

PhD in Biology, Leading Researcher, Scientific Research Institute of Lung Deseases, Baku, Azerbaijan

Tagiyev B.T.

Laboratory Physician, Laboratory of Educational Therapeutical Clininc, Azerbaijan Medical University, Baku, Azerbaijan

Karalti I.

Head of Laboratory, Laboratory of Educational Therapeutical Clininc, Azerbaijan Medical University, Baku, Azerbaijan

Bayramov A.G.

PhD in Medicine, Docent, Chair of Medical Microbiology and Immunology, Azerbaijan Medical University, Baku, Azerbaijan