CC BY
59
при 80-кратном разбавлении положительного контроля соком здоровых растений картофеля.
Последовательность продуктов, полученных после амплификации с испытуемыми праймерами к АРМоУ на 97 % соответствовала участку гена РНК-зависимой РНК-полиме-разы (нуклеотиды 1444-1744) генома АРМоУ. Это свидетельствует о высокой специфичности разработанных праймеров.
Таким образом, в ФГУ «ВНИИКР» разработана диагностика на основе ПЦР, позволяющая выявлять два из трех известных штаммов APLV и наиболее распространенный штамм АРМоУ. Необходима расшифровка участков генома штаммов АРМоУ-С, АРМоУ-Н и APLV-Сol и получение к
ним специфических праймеров, что позволит разработать ПЦР-тест, позволяющий диагностировать все штаммы этих вирусов.
Проведенные эксперименты позволяют сделать следующие выводы:
1. Для выявления APLV и APMoV в растениях картофеля в качестве скрининг-теста применять ELISA-тест со штаммспецифичными антисыворотками фирмы DSMZ.
2. При тестировании клубней для вирусологической экспертизы использовать только глазки (длиной не менее 1 см) клубней без кожицы или «индексы».
3. Для подтверждения сероположи-тельных результатов использовать разработанный тест на основе ПЦР.
УДК 632.936.2
Аттрактивность насекомых -
С.В. ПИМЕНОВ, специалист-энтомолог Пятигорского филиала ФГУ «ВНИИКР» e-mail: [email protected]
Для своевременной и эффективной борьбы с вредителями продовольственных запасов, в частности зерна, очень важна диагностика его зараженности на ранних стадиях. С этой целью широко применяются ловушки и пищевые приманки. Для усиления аттрактивности пищевых приманок в корм могут добавляться различные виды растительных масел. Мы изучали возможность применения растительных масел в качестве аттрактантов насекомых. Ловушки, установленные на одном из предприятий хлебопродуктов Ставропольского края, содержали подсолнечное, кукурузное, льняное, оливковое и репейное масла. Контролем служила ловушка только с клеем пестификс.
Применение масляных ловушек позволило выявить практически всю энтомофауну склада. Было отловлено 24 вида насекомых, относящихся к 12 семействам. При подсчете и диагностике вредителей не учитывались случайные виды, не относящиеся к обитателям складских помещений (табл.). Наиболее широко были представлены семейства чернотелок (Tenebrionidae) - 5 видов, плоскотелок (Cucujidae) - 4 вида и огневок (Pyralidae) - 3 вида. Из вредителей запасов зерна в ловушках, расположенных по краю насыпи, обнаружено в среднем больше особей суринамского мукоеда (48,1 экз.), а из засорителей запасов зерна - бархатистого грибоеда (127,2 экз.).
Гусеницы огневок, жуки блестянок и скрытников концентрировались в средней и верхней частях насыпи зерна.
ЛИТЕРАТУРА
1. Avila A.C., Salazar L.F., Ortega M., Daniels J. A new strain of Andean potato mottle virus from Brazil // Plant Disease, 1984, vol. 68, р. 997-998.
2. Fribourg C.E., Jones R.A.C., Koenig R. Andean potato mottle, a new member of the Cowpea mosaic virus group // Phytopathology, 1977, vol. 67, p. 969-974.
3. Fribourg C.E., Jones R.A.C., Koenig R. Host plant reaction, physical properties and serology of three isolates of Andean potato latent virus from Peru // Annals of Applied Biology, 1977, Vol. 86, p. 373-380.
4. GibbsA.J., Hecht-PoinarE., WoodsR.D., McKee R.K. Some properties of three related viruses: Andean potato latent, dulcamara mottle and ononis yellow mosaic // Journal of General Microbiology, 1966, vol. 44, p. 177-193.
5. Koenig R., Lesemann D. Tymovirus group // CMI/AAB Descriptions of Plant Viruses, 1979, № 214, р. 7.
6. Lizirraga C., Canta CruzM., Jayasinghe U. Detection of isolate of Andean potato latent virus in ulluco (Ullucus tuberosus Caldas) // Plant Dis, 1996, vol. 80, p. 344-345.
7. EPPO. Phytosanitary procedures PM 3/21 (2). Post-entry quarantine for potato // Bulletin OEPP/EPPO Bulletin, 2004, vol. 34, p. 443-454.
Аннотация. Объекты внешнего карантина APMoV и APLV (список А1 ЕОКЗР и РФ) являются потенциально опасными патогенами для коллекционных и селекционных посадок картофеля в РФ. Для достоверной идентификации карантинных вирусов картофеля необходимо комплексное использование серологического (ИФА), молекулярного (ПЦР) и биологического (растения-индикаторы) тестов. В настоящее время во ВНИИКР и ВНИИКХ в рамках совместной программы проводится отработка методов выявления и идентификации APMoV и APLV.
Ключевые слова. Андийский вирус крапчатости картофеля (APMoV), андийский латентный вирус картофеля (APLV), внешний карантин, иммуноферментный анализ, полимеразная цепная реакция.
Abstract. APMoV and APLV (EPPO A1 List and Russia) associated with imported plants and plant products are potentially dangerous pathogens of potatoes planted for the purposes of selection and collection. These pathogens fall under the external quarantine regulations of the Russian Federation. Reliable identification of these pathogens requires use of integrated approach, i.e. use of a combination of serological (ELISA), molecular (PCR) and biological (indicator plants) methods. At present VNIIKR and VNIIKH under the joint initiative are testing and validating of APMoV and APLV identification methods.
Keywords. Andean potato mottle virus, Andean potato latent virus, external quarantine, Enzyme-linked immunosorbent assay, polymerase chain reaction.
ФГУ «ВНИИКР»,
ВНИИ картофельного хозяйства
38
ВНИИКР: НАУЧНЫЕ СООБЩЕНИЯ, НОВОСТИ
растительных масел при выявлении вредителей продовольственных запасов
Количество насекомых, отловленных на масляные ловушки, в сравнении с контрольным вариантом было значительно больше, что подтверждает аттрактивность масел для вредителей запасов. Результаты испытаний показали, что для насекомых отряда жесткокрылых наиболее привлекательным оказалось репейное масло. В ловушках с этим маслом обнаружено 48,9 % плоскотелок, 44,5 - грибоедов, 43,5 - огневок и 23,8 % - долгоносиков. В ловушках с льняным маслом несколько меньше: грибоедов - 37,3 %, плоскотелок - 24,2 % и долгоносиков -22,2 %. Оливковое и кукурузное мас-
ла занимали промежуточное положение. Наименьшей аттрактивнос-тью обладало подсолнечное масло, которое привлекло только 5,2 % плоскотелок, 2,4 % грибоедов, 2,1 % долгоносиков. Общая численность насекомых в этих ловушках была в 9,2 раза меньше, чем в варианте с репейным маслом.
Но не для всех видов вредителей репейное масло оказалось наилучшим аттрактантом. Например, для чернотелок и кожеедов наиболее аттрактивными были оливковое и подсолнечное масла. Для долгоносиков показатели аттрактивности растительных масел имели незначитель-
ные различия, кроме подсолнечного, в ловушках с которым было обнаружено наименьшее количество насекомых этого семейства. Эффективным аттрактантом для скрытноедов оказалось оливковое масло -50 % отловленных особей, остальные виды масел мало привлекали этих насекомых.
Для семейства огневок наиболее привлекательными были репейное (43,5 %) и льняное (37,1 %) масла. Минимальное количество насекомых отловлено в ловушки с оливковым (10,5 %) и кукурузным (5,6 %) маслами. Ловушки с подсолнечным маслом вообще не привлекали насекомых этого семейства. Самым многочисленным видом была южная амбарная огневка (Р!од1а ¡Мвгрипо-1в!!а НЬп.), численность которой в среднем на одну ловушку составила 7,7 экземпляров.
Для всего комплекса вредителей запасов(жуков и бабочек) наиболее эффективным оказалось кукурузное масло. Так, из 12 выявленных нами семейств в ловушках с этим маслом были обнаружены виды, относящиеся к 11 семействам. Отсутствие в ловушках насекомых из семейства капюшонников, вероятно, связано с их низкой численностью в складском помещении, где проводился эксперимент. По степени видового разнообразия отловленных вредителей на первом месте ловушки с кукурузным маслом, затем следуют репейное, льняное и подсолнечное. Таким образом, применение ловушек с масляными аттрактантами для мониторинга вредителей продовольственных запасов позволяет полнее и эффективнее выявлять их видовой состав и более объективно судить о численности. При этом сокращаются затраты времени и труда, существенно возрастает производительность и качество проводимых обследований.
Результаты отловов вредителей и засорителей запасов зерна с помощью масляных ловушек
Места расположения Отловлено
Биологическая группа ловушек в среднем
Вид насекомого край насыпи зерна середина насыпи верх насыпи на одну ловушку (экз.)
Вредители Trogoderma variabile Bail. 12 9 4 2,8
запасов зерна Tenebrioides mauritanicus L. 2 1 1 0,4
Rhizopertha dominica F. 1 0 0 0,1
Epurea depressa Gyll. 0 6 4 1,1
Oryzaephilus surinamensis L. 239 100 94 48,1
Cryptolestes ferrugineus St. 48 28 14 10
Cryptolestes minutus Ol. 1 2 1 0,4
Ahasverus advena Waltl. 76 45 97 24,2
Tenebrio molitor L. 1 0 0 0,1
Alphitophagus bifasciatus Say. 15 1 1 1,9
Alphitobius diaperinus Panz. 2 1 1 0,4
Tribolium confusum Duv. 3 2 4 1
Tribolium castaneum Hrbst. 9 22 12 4,7
Sitophilus granarium L. 122 9 12 15,9
Sitophilus oryzae L. 28 5 13 5,1
Plodia interpunctella Hbn. 5 29 35 7,7
Anagasta kuhniella Zell. 3 0 9 1,3
Ephestia ellutella Hbn. 6 15 22 4,8
Засорители Cryptophagus pilosus Gyll. 8 7 5 2,2
запасов зерна Cryptophagus subfumatus Kr. 1 1 0 0,2
Corticaria serrata Payk. 1 5 5 1,2
Typhaea stercorea L. 789 181 175 127,2
Anthicus floralis L. 4 0 0 0,4
Anthicus antherinus L. 5 0 2 0,8
Всего: 1381 469 511 787
ВНИИКР: НАУЧНЫЕ СООБЩЕНИЯ, НОВОСТИ
39
