М. Г. КИЧЕНКО (Москва)
Атипичные штаммы кишечной палочки как
показатели загрязнения воды
Из Института коммунальной гигиены и санитарии
Наличие и степень загрязнения воды определяются химическими, биологическими и 'бактериологическими методами.
Химические и биологические методы позволяют, определять загрязнение воды различными веществами, в том числе и органическими, но не дают указаний о происхождении загрязняющих факторов- и, следовательно, не сигнализируют об опасности возможного возникновения эпидемических заболеваний (Рашкович, Моисеев).
Весьма ц-енны бактериологические способы обнаружения загрязнения воды. Они имеют преимущество перед методом учета общего числа зародышей, так как указывают на наличие в воде патогенных форм микроорганизмов, представляющих опасность даже в ничтожном количестве.
Отсюда естественно возникает вопрос: какие виды микроорганизмов являются ¡постоянными обитателями воды и какие вносятся загрязняющими факторами?
О некоторых видах, например, возбудителях холеры и тифа, можно определенно сказать, что они попадают в воду с фекальными массами. Но не всегда удается обнаружить в воде патогенные микроорганизмы. Значительно легче выявить облигатных обитателей кишечника. Отсюда и возник вопрос о роли их при санитарной оценке воды.
Во время тифозных и холерных эпидемий конца, прошлого 'Столетия впервые было обращено внимание на 'присутствие в загрязненной воде кишечной палочки, встречающейся также в фекальных массах человека и животных.
Работы Пере, Монсберга и Рамбусека, Гинзбурга и Швера и др. установили связь ¡между источником загрязнения и водоисточником, содержащим кишечные палочки. Относительная легкость обнаружения ее в воде по сравнению с патогенными микробами дала возможность пользоваться кишечной палочкой в качестве косвенного показателя фекального загрязнения воды.
Кишечная палочка (В. coli) впервые выделена Эшерихом в 1885 г. из кала грудных детей.
Типичные представители ее фекального происхождения, согласно правилам 'стандартных методов исследования воды, характеризуются следующими свойствами: грамотрицательная короткая палочка слабоподвижная, аэроб, образует индол, свертывает молоко через 24 или 48 час., сбраживает глюкозу, лактозу и маннит при 4-6 и 37°. Некоторые штаммы сбраживают и сахарозу. На среде Эндо дают характерные колонии с металлическим блеском.
Серологические и антигенные свойства у нее выражены слабо. Большинство авторов указывает на то, что сыворотка, полученная при иммунизации одним штаммом, в большинстве случаев ■ н'е агглютинирует другие штаммы, выделенные даже из одного кишечника (Мостова, Грибкова), и, следовательно, эти реакции не могут служить для идентификации кишечной палочки фекального происхождения. Кишечная палочка довольно устойчива к концентрации водородных ионов. Предел колебаний pH, при котором кишечные палочки не погибают, лежит между 4,6—9,6 (Рубинштейн).
Наряду с типичными кишечными палочками в кишечнике человека и животных встречаются атипичные представители кишечно-тифозной группы. KpoiMe того, наблюдения многих авторов показали широкую изменчивость их под влиянием различных причин. Массини наблюдал образование красных узелков на бесцветных колониях. Отвитые узелки давали вновь красные и бесцветные колонии (В. coli mutabile). Бурри описал В. coli imperfectum, которые приобретали способность разлагать сахарозу. Мордберг наблюдал потерю способности к .размножению кишечной палочки, выделенной из испражнений, после пребывания ее на агаре. По данным Квашиной, кишечная палочка диссоциирует главным образом в паракишечную. Рогов наблюдал расщепление старых и све-жевыделенных культур В. coli на ряд вариантов с различными биохимическими
свойствами по отношению к молоку и углеводам и главным образом с потерей способности разлагать их.
В настоящее время, согласно правилам стандартных методов исследования воды по способам Эйкмана-Булира и американским, атипичные штаммы не имеют санитарного значения и не учитываются как показатели фекального загрязнения. Однако вопрос об их санитарном значении уже неоднократно поднимался многими исследователями.
Установлено (Харабковская, Каменецкая, Даниковская и Константинова, Эн-жеринг, Дрезель и Штикль, Osterle, Гундель, Азбелев и Хлебникова и др.), что из стула больных и бациллоносителей атипичные штаммы выделяются в большем количестве, чем из стула здоровых. Во время кишечных эпидемий водного происхождения в воде обнаруживается много атипичных штаммов (Фельдман, Азбелев и Хлебникова). С другой стороны, ряд авторов (Дрезель и Штикль, Верне.р и Плавская, Коган и др.) на основании экспериментальных данных, полученных с чистыми культурами, считает возможным изменение свойств кишечной палочки и в водоеме под влиянием таких причин, как микробная ассоциация водоема, бактериофаг и т. п.; поэтому они полагают, что атипичные штаммы следует учитывать наравне с типичной кишечной палочкой.
Американские исследователи (Поэ, Козер и др.) считают необходимым различать кишечные палочки почвенного и фекального происхождения. По их данным, цитрат-ассимилирующие расы кишечной палочки приобрели способность размножаться на синтетических средах вследствие длительного пребывания вне организма и потому не имеют санитарного значения. Минкевич с сотрудниками также полагают, что цитрат-ассимилирующие расы не могут 'служить показателями фекального загрязнения, так как срок, необходимый для приобретения способности усваивать цитраты, превышает период жизнедеятельности патогенных микробов клшечно-тифозной группы вне организма.
Противоположного взгляда придерживаются Азбелев и Хлебникова. По их мнению, цитрат-ассимилирующие расы должны учитываться как показатели фекального загрязнения, ибо способность усваивать цитраты присуща микробам заведомо кишечного происхождения, как В. paratyphi В.
Проверяя отношение к цитратам штаммов В. coli Escherichia, Поэ нашел, что "из 224 штаммов цитраты усваивали 51 штамм, не усваивали 173, тогда как из 146 штаммов группы aerogenes только один не усваивал цитраты.
Нами (Киченко и Сибиряков) из хлорированной и нехлорирован-ной воды, предварительно стерилизованной в автоклаве и затем зараженной типичной кишечной палочкой, не усваивающей цитраты в среде Козера, были выделены в течение первых суток варианты, которые, наряду с изменением других биохимических свойств, обладали способностью усваивать цитраты. Так, из 92 вариантов, полученных из хлорированной малыми дозами воды, 53,3% не росли на среде Козера, 39,1% давали слабый рост на этой среде, а 7,6% обильный рост. Из 12 вариантов, выделенных из нехлорированной воды, только 2 не дали роста на среде Козера, 8 дали слабый рост, а 2—-обильный. Следовательно, отсутствие1 способности усваивать цитраты на среде Козера не является постоянным и характерным свойством кишечной палочки кишечника; поэтому при идентификации выделенных штаммов данным свойством можно пользоваться только как подсобной реакцией, отнюдь не придавая ей решающего значения.
Гренаус и Васильева на основании результатов, полученных при сравнительной оценке различных методов определения происхождения кишечной палочки, выделяемой из воды, нашли, что проба на брожение при 46° является довольно точной для распознавания кишечной палочки фекального происхождения. Практически считается возможным сделать заключение об отсутствии ее в испытуемой воде, если посев пробы не вызвал брожения в среде накопления в течение 48 час. при 46°. Но Зингер, Закнавеки и др. находят, что проба на брожение недостаточна, так как некоторые водные бактерии способны вызвать брожение, особенно летом, давая ложное представление о присутствии в воде кишечной палочки, и, с другой стороны, многие штаммы ее, заведомо фекального происхождения, хорошо размножаясь при 46°, все же не настолько активны, чтобы разложить углеводы до образования СО?, и, следовательно, они не будут учтены. Кроме того, Новак отмечает, что для газообразования при 46° нужно большее количество зародышей кишечной палочки, чем при 37°.. Нейман и др. обнаружили, что некоторые штаммы еа, развившись и вызвав образование газа при 46°, затем отмирают при воздействии высокой температуры и продуктов жизнедеятельности бактерий, поэтому их нельзя обнаружить при высеве на среду Эндо
Производя анализы воды, поступающей в нашу лабораторию из разных источников, мы часто наблюдали несоответствие между титром брожения и коли-титром, а также выделение атипичных штаммов кишечной палочки при низком титре брожения, особенно в фруктовых водах. Так, в одной пробе клюквенной воды розлива пятидневной давности обнаружены были только бесцветные колонии, образовывавшие приятный запах,; через несколько пересевов эти штаммы стали, давать характерные для кишечной палочки колонии.
Ряд авторов отмечает вредное влияние воды на кишечную палочку. Блю-менберг, Зике, Мордберг, Новак и др. установили, что кишечная палочка, находясь в воде, теряет способность давать индол, сбраживать маннит 'и другие углеводы сперва при 46°, потом при 37° и т. д.; следовательно, .методы, основанные на свойствах кишечной палочки сбраживать углеводы при 46° и давать индол, по данным многих авторов, не гарантируют полной точности определения фекального загрязнения воды.
Поэтому, проводя обследовательскую работу по изучению загрязнения реки Урала и его подрусловых вод в районе г. Орска, на протяжении 60 км, мы поставили себе задачей уточнить частоту и характер отклонений кишечной палочки от принятых норм и таким образом выяснить значение атипичных штаммов их при санитарной оценке воды.
С этой целью для выяснения бродильной способности нами засевались пробы воды на среду Эйкмана на месте и доставлялись в лаь бораторию не позже трех часов после забора.
Выращивание происходило при 46°. Через 18—24 часа посев просматривался и из всех забродивших пробирок делался пересев, на среду Эндо. Пробирки, не давшие брожения, оставлялись еще на 24 часа при 46°, после чего производился высев на среду Эндо из всех пробирок: забродивших, не давших брожения и не обнаруживших заметного помутнения среды.
Пользуясь такой методикой, мы из 6 произведенных анализов получили совпадение титра брожения с коли-титром в 42 пробах, в 22 пробах ко-ли-титр был выше титра брожения на 1—2 и больше десятичных знаков, в 8 пробах титр брожения оказался выше «оли-титра и в 4 пробах при низком титре брожения типичной кишечной палочки не было выделено, но во всех случаях обнаружены атипичные штаммы. ' I
Скинер и Броун считают, что методы определения кишечной палочки по Эйкману и Булиру несовершенны, так как многие штаммы ее неспособны к росту при температуре 46°. Поэтому для установления точности метода накопления при 46° нами было проведено 36 параллельных наблюдений. Проба воды засевалась на среду Эйкмана и выращивалась, как обычно, в течение 46 часов при 46°. Параллельно та же проба фильтровалась через мембранный фильтр и выращивалась 24 часа на фильтре на среде Эндо при 317°. Для контроля за работой фильтров фильтрат засевался на среду Эйкмана и выращивался при 37°. В результате из 36 (посевов кишечная .палочка была обнаружена в фильтратах трех проб.
Мы констатировали, что из 36 проб только в 7 случаях наблюдалось -соответствие между коли-титром и числом колоний кишечной палочки на фильтре, в 4 случаях число колоний на фильтре было ниже, чем это определялось по коли-титру, в 17 случаях число зародышей ее на фильтре оказалось выше по сравнению с определением по коли-титру и в 8 случаях при отсутствии брожения и высоком коли-титре (>100) на фильтре оказалось значительное количество колоний кишечной палочки.
Следовательно, методы, основанные на накоплении кишечной палочки в жидких средах при 46°, не являются точными, так как в некоторых случаях они не давали возможности ее обнаружить.
Выделяемые из воды палочки не всегда обладают совокупностью признаков типичной кишечной палочки; некоторые из признаков выпадают.
Из Урала >и его подрусловых вод нами также |было выделено много атипичных штаммов кишечной группы. Кроме того, в 4 пробах при низком титре брожения выделены только .атипичные штаммы,, которые по своим морфологическим и некоторым1 биохимическим свойствам принадлежали, к кишечной группе.
Так как эти пробы дали почти одинаковые результаты, ограничимся лишь рассмотрением пробы № 42, взятой из ключа у Комиа-саровского затона. Ключ открывается вблизи проезжей дороги среди густого кустарника. Титр брожения в этой пробе был установлен в 0,1 см3 воды. При высеве на среду Эндо из всех забродивших пробирок мы не получили типичных колоний кишечной палочки даже в 100 см3 воды, посеянной по 10 см8 в 10 пробирках. Но высев на среду Эндо из всех пробирок дал однородные по морфологии, круглые, выпуклые, прозрачные, бесцветные по краю и слегка розовые в центре колонии. Для изучения было выделено 4 колонии. Выделенные штаммы оказались неактивными к углеводам на жидких средах Гисса, в частности, к лактозе и м.анниту, молока не изменяли и не давали индола. После хранения на агаре через 2 и 6 мес. эти штаммы стали давать типичные колонии на среде Эндо и приобрели способность разлагать на средах Гисса глюкозу, лактозу, маннит и сахарозу. Через 9 месяцев хранения на агаре один штамм обладал свойствами В. coli commune, второй В. coli alcaligenes, третий и четвертый погибли.
Всего было выделено 123 штамма из бесцветных колоний и 46-из красных, характерных для кишечной палочки: из них 5 штаммов— из красных слизистых колоний. Морфологически- все культуры состояли из более или менее длинных грамнегативных палочек с различно выраженной подвижностью. Все эти штаммы не разжижали желатины, но наблюдалось выпадение одного или нескольких био-химических -свойств! но отношению к углеводам, молоку и т. п., причем- наиболее частое выпадение обнаружено в отношении; маннита и лактозы (табл. 1).
Вернер, Летце, Смирнов и Летавет, Хайт и Фрадкина и Плавская и другие исследователи наблюдали изменение биохимических свойств кишечно-тифозной группы по отношению к -глюкозе, лактозе, ман-ниту, молоку и индоловой реакции под влиянием воды в лабораторных условиях.
Мы в течение 9 мес. изучали биохимические свойства штаммов» выделенных из р. Урала и его подрусловых вод. Проверены были через 2, 6 и 9 мес. 110 штаммов, выделенных из бесцветных колоний, и 43 штамма, из красных колоний. В период наблюдений все штаммы хранились на косом агаре при комнатной температуре к перевивались один р.а-з в месяц.
Из 110 штаммов! бесцветных колоний 41 дал на среде Эндо колонии с металлическим блеском, 61 штамм сохранил свойство -не разлагать лактозу на среде Эндо и 8 -штаммов, во вторую проверку давшие типичные для кишечной палочки колонии, через 9 мес. вио-вь потеряли способность разлагать лактозу на среде Эндо.
Первая подгруппа по выделении состояла из 6 видов, через: 9 мес. только из 3. Разница объясняется уменьшением атипичных и увеличением типичных штаммов кишечной палочки. Так, по выделении к группе В. coli commune было отнесено 9 штаммов, через 9 мес. хранения на агаре это число увеличилось до 25. Штаммов со свойствами В. coli commune по выделении оказалось 6, через 9 мес. 13. Маннитодефективных штаммов было- выделено 15, а через 9 мес. все они обладали! способностью разлагать маннит. Из 6 штаммов со свойствами В. paraeoli 3 стали разлагать лактозу на жидких и твердых -средах; 1 штамм, обладавший свойствами В. faecalis alca-
Таблица 1
Биохимические свойства штаммов, выделенных из р. Урала и его
подрусловых вод
№ Колонии на Эндо Число штаммов Среды Гисса Молоко Индол
глюкоза лактоза маннит + к о + СЗ О + неизмен. щелочит + —
+ н + 1 Е-1 ьг 1 н + +1 +1 bi + н + 1 Е-* 1 1 Е-1 •f +1 С-1 +1 bi + н + 1 н 1 К/ 1 Е-1 + +1 с-" + 1 Ьг
1 Нетипичные
(бесцвет-
ные и ро-
зовые) . 123 101 14 4 4 48 66 3 51 81 23 4 9 38 57 24 4 37 66
2 Типичные
(красные 61
и красные
с метал-
лическим
блеском) . 41 3.5 2 41 30 5 2 4 41 14 20 3 24 17 24 17
3 Красные
слизк. . . 0 2 1 . 2l 1 I1 1 1 21 1 1 1 1 4 1 4
» 1 Неустойчивые »
Примечание. К + Т + разлагает с кислотой и газом; К — Т — не разлагает; К + Т— разлагает с кислотой без газа; К± Т± образует кислоту с задержкой; К + св — образует кислоту с задержкой, но не свертывает; К + св -г образует кислоту и свертывает.
ligenes оказался активным к углеводам и молоку и через 9 мес. хранения на агаре приобрел свойства В. coli commune; 4 штамма со свойствами В. coli alcaligenes после хранения на агаре потеряли способность образовывать щелочь.
Самой большой по числу видов и штаммов оказалась вторая подгруппа из бесцветных колоний, сохранившая эту особенность в продолжение 9 мес. хранения на агаре. Но и здесь к концу наблюдения число видов уменьшилось за счет снижения количества .атипичных штаммов: так, по выделении насчитывалось 8 видов, а к последней проверке оказалось 5. При этом по выделении к группе В. coli commune отнесено было 2 штамма, а через 9 мес.—5. В группу В. coli commune вначале входил 1 штамм, а через 9 мес. — 7. На 3 увеличилось число штаммов, обладающих свойствами В. рага-coli, и на 4 — паратифоподобных, 4 маннитодефективных штамма приобрели способность разлагать маннит. Из 4 неактивных к углеводам штаммов 2 стали активными и т. д. Третью подгруппу составляли выделенные из бесцветных колоний штаммы, которые последовательно давали то бесцветные, то красные колонии. Малочисленность данной группы заставляет воздержаться от особых выводов. Все же необходимо отметить, что и здесь оказалось 2 маннитодефективных штамма, которые после хранения на косом агаре приобрели способность усваивать маннит.
Почти так же разнообразна и многочисленна по своим видам группа штаммов, выделенных ,из красных колоний. Она тоже характеризуется уменьшением числа видов после хранения на агаре, уве-
личением количества типичных штаммов В. coli наряду со снижением атипичных, в первую очередь маннитоде'фективных. Эти изменения, как и в первой группе, вызваны усилением активности штаммов к углеводам после хранения на агаре.
Таким образом, из 153 штаммов жидких питательных средах по выделении обладали -свойствами кишечной палочки 16,3% и разг-личные отклонения наблюдались у 83,7%. После же хранения на агаре последняя проверка через 9 мес. показала, что свойствами типичной кишечной палочки на жидких питательных средах обладали 32% -всех штаммов. Маннитодефективньгх штаммов по выделении оказалось 22,2%, после хранения на агаре — 2,6%.
Гедли, изучая законы диссоциации микробов, пришел к заклюг чению, что неблагоприятные условия существования микробов ведут к изменению их свойств. Это положение подтверждено рядом работ других авторов. Отсюда с несомненностью вытекает, что выделенные нами из воды атипичные штаммы происходят от типичных представителей кишечной группы, которые, попав в воду с фекальными массами, под влиянием неблагоприятных условий временно утратили характеризующие их свойства, но все же не потеряли способности восстанавливать их.
Здесь, однако, возникает вопрос о продолжительности воздействия вредного фактора, достаточной для изменения свойств микробов.
Хайт и Фрадкина на 14-й день обнаружили отщепление вариантов кишечной палочки, находящейся в проточной воде. Летце на •4-й день выделил из хлорированной воды варианты, подобные napaf-тифозным. Смирнов и Летавет на 5-й день пребывания в проточной воде брюшнотифозной палочки наблюдали отщепление шероховатых вариантов. Киченко и Сибиряков выделили атипичные штаммы из стерильной воды, зараженной типичной суточной культурой кишечной палочки, в течение первых 24 часов пребывания ее в этой среде. Отщепление вариантов наблюдалось нами под влиянием воды, хлорированной малыми дозами и нехлорированной. При этом) хлорированная вода оказала более сильное действие, чем нехлорированная, но величина дозы хлора (взяты были дозы 0,1—0,15 и 0,2 мг/л) не имела в данном случае заметного влияния, тогда как длительность пребывания кишечной палочки в хлорированной воде в значительной мере определяла количество отщепляющихся бесцветных колоний. Так, в первые 15 мин. бесцветные колонии на -среде Эндо насчитывались единицами, через 30—45 мин. их было уже больше, чем красных, при общем снижении числа зародышей, а через 24 часа число бесцветных,, вновь упало по сравнению с красными. Нехлорированная вода такого закономерного влияния на изменчивость свойств кишечной палочки к лактозе не оказала и количество бесцветных колоний было незначительным во все периоды.
Изучение показало, что под влиянием хлорированной и нехлО'-рированной воды в большинстве случаев типичная кишечная палочка теряет активность к углеводам, главным образом к манниту.
Равич-Биргер объясняет это тем, что- культуры, даже очищенные десятикратным рассевом на чашках из одной колонии, состоят из особей с различными свойствами. Эти свойства быстрее выявляются под влиянием воздействия неблагоприятных факторов (в данном случае воды) и -потому легче обнаруживаются.
Длительное изучение 18 вариантов, выделенных из хлорированной воды, и 7, выделенных из нехлорированной, показало -следующее: под влиянием неблагоприятных условий микроорганизмы потеряли "некоторые свойства;' но" в условиях пребывания только на обычных искусственных питательных ср^даК без '"йрийенёайя средств,
2 Гигиена и санитария, № 7 spt . _
ускоряющих процессы изменчивости, вскоре возобновили многие из утраченных свойств, а через 2 года почти все восстановили их полностью. При этом 5 вариантов из хлорированной и один из нехло-рированной воды получили способность разлагать сахарозу. Один вариант из нехлорированной воды в течение двух лет сохранял свойства В. faecalis alcaligenes. Один вариант из хлорированной воды не восстановил способности разлагать лактозу, но стал разлагать сахарозу. Кроме того, один вариант В-10-3 штамма В. coli 63 из красной колонии, выделенной из хлорированной воды, расщепился1 через 2 мес. хранения на агаре на бесцветные и красные колонии (табл. 2 и 3). ■ ". | ■;
Таблица 2:
Изменение за 2 года биохимических свойств выделенных из хлорированной воды вариантов В. coli D и В. coli 63
По выделении Количество Через 6 мес. Количество Через 12 мес. Количество Через 2 года Количество
В. coli commune 5 В. coli commune В. coli манн и-тодефективные В. coli alcaiig. 3 1 1 В. coli commune В. coli маннито-дефективные 2 1 В. coli commune 31
В. coli alcaligenes 3 В. coli alcaligenes 3 В. coli commune \ В. coli ман.-мальтозонеуст. цитр.+ В. coli цитр.+ 1 1 1 В. coli commune В. coli commune 1 2
В. faecalis alcal.genes 1 Слизистые 1 В. coli commune 1 В. coli commune 1
В. coli маннито-мальтозоне-устойчивые 2 В. coli commune 1 В. coli commune В. coli aärogenes 1 1 В. coli commune В. coli aerogenes 1 1
В. coli вданнито-мальтозодефек-тивные 1 В. coli аёго-genes 1 В. coli aerogenes 1 B. coli commune 1
В. coli мальтозо-дефективные 2 В. coli маннито-дефективные В. coli commune 1 2 В. coli мальто-зодефективные В. coli aerogenes 1 B. coli commune В coli commune 1 1
В. coli неустойчивые 1 В. coli маннито-мальтозоде-фективные 1 В. coli commune 1 B. coli commune 1
В. coli дефектив-. ные маннитоне-устийчивые 1 В. coli commune 1 В. coli маннито-мальтозоне-устойчивые 1 В paracoli 1
В. coli мальтозо-неустойчивые 1 В. coli commune 1 В. coli ман.-мальтозонеустой-чивые 1 B. coli commune 1
1 2 варианта погибли
/
В продолжение двух лет культуры из красных колоний обладали свойствами В. coli communis, но отщепляли красные и бесцветные колонии, культуры же из бесцветных колоний давали только- бесцветные колонии со свойствами паратифозных культур. Некоторые из них агглютинировали с сывороткой В. paratyphi В до титра 1 : 15 ООО и выше титра почти вдвое. Другие агглютинировали одновременно с сывороткой В. paratyphi В и В. paratyphi А почти до половины титра. Большинство давало групповую агглютинацию с сывороткой В. paratyphi A, paratyphi В и другими сыворотками паратифозной группы. Кроме того, были выделены неагглютинабильные штаммы.
Таблица 3
Изменение за 2 года биохимических свойств выделенных из нехлорирован ной в ды вариантов В. coli D и В. coli 63
По выделении Количество Через 6 мес. Количество Через 12 мес. о и н о Щ К ч ¿i Через 2 года Количество
В. coli 3 В. coli 2 В. coli 3 В. coli 3
alcaligenes commune commune commuue
В. coli маннито- 1
дефективные
В. coli маннито- 1 В. coli 1 В. coli 1 В. coli 1
мальтозодефек- cummune commune commune
тивные
В. coli маннито- 1 В. coli 1 В. coli 1 В. coli 1
мальтозодефек- commune commune commune
тивные
В. faecalis 1 В. faecalis 1 В. faecalis 1 В. faecalis 1
alcaligenes alcaligenes alcaligenes alc..Iigenes
В. coli маннито- 1 В. coli 1 B. coli маннито- 1 В. coli 1
неустойчивые commune лактозодефек- commune
тивные
При иммунизации кроликов бесцветными вариантами были, получены сыворотки с невысоким титром, агглютинирующие типичные штаммы В. paratyphi А и В. paratyphi В и некоторые свои- дочери ние варианты.
Бесцветные варианты, отщепившиеся позже от красных колоний., обладали в большинстве случаев биохимическими свойствами паратифозных культур и агглютинировались сыворотками типичных штаммов, а также сыворотками, полученными при иммунизации кроликов первыми дочерними вариантами, и не агглютинировались с сывороткой от другого варианта того же штамма.
Вариант В-10-3 представляет большой интерес, так как указывает на то, что под влиянием вредных факторов могут произойти глубокие изменения биохимических, серологических и антигенных: свойств данного микроорганизма. Вопрос о патогенных свойствах порученных вариантов требует изучения, хотя в литературе и есть данные, указывающие на приобретение микроорганизмами патогенных свойств одновременно с изменением биохимических, серологических и антигенных.
\
На практическое значение изменчивости кишечной группы в воде указывают многие авторы. Зингер считает, что В. paracoli возникают из В. coli и являются дефективными В. Coli. Годер и Зингер нашли, что большинство нетипичных штаммов образуется из типичных и поэтому даже при 'незначительном содержании подобных штаммов воду надо взять под подозрение. Дрезель, Коган и др. высказывают мнение о том, что микроорганизмы в воде .могут переходить из паразитарного состояния в сапрофитное и обратно под влиянием различных факторов, в том числе и бактериофага.
Наши экспериментальные данные подтверждают предположение о том, что кишечная палочка под воздействием воды в водоеме изменяет характеризующие ее свойства (возможно, даже в первые 24 часа), вследствие этого при .идентификации ее ошибочно можно отнести к нетипичным штаммам, которые по существующим правилам контроля! питьевых вод не учитываются. В результате санитарная оценка воды окажется неправильной. Такая ошибка тем более недопустима, что, как выше мы указывали, атипичные штаммы чаще всего выделяются из патологического кишечника и из воды во время водных эпидемий (эпидемия в Ростове-на-Дону в 1926 г.).
Таким образом-, наличие атипичных штаммов в воде сигнализирует о неблагополучном состоянии водоснабжения или водоема. Это необходимо учесть при санитарной оценке воды.
Выводы
1. Методы санитарно'-бактериологического исследования воды, основанные на способности кишечной палочки -сбраживать углеводы при 46°, не дают точных данных о' наличии в воде кишечной палочки фекального происхождения.
2. В экспериментальных условиях под влиянием' стерильной и недостаточно хлорированной воды, а также в естественных водоемах типичная кишечная палочка изменяет свои свойства главным образом в сторону выпадения отдельных признаков- ее, но вместе с тем приобретает способность разлагать сахарозу и расти на среде Ко-зера.
3. Выпадение признаков чаще наблюдается у штаммов по- отношению к манниту и лактозе, но эти выпадения не носят стойкого характера и у многих микроорганизмов восстанавливаются при хранении их на агаре.
4. Выделяемые из воды атипичные штаммы происходят от типичных представителей кишечной группы. Поэтому атипичные штам>-мы кишечной палочки должны учитываться при санитарной оценке-литьевых вод наравне с типичными.