Ассоциированные с полом различия реакций нейровоспаления в коре больших полушарий при манифестации болезни Альцгеймера в эксперименте Текст научной статьи по специальности «Фундаментальная медицина»

Оригинальная статья

УДК 616.894-053.8:615.3

https://doi.org/10.57034/2618723X-2024-02-05

Ассоциированные с полом различия реакций нейровоспаления в коре больших полушарий при манифестации болезни Альцгеймера в эксперименте

Д.И. Поздняков1,2*, А.А. Вихорь1

1 Пятигорский медико-фармацевтический институт — филиал ФГБОУ ВО ВолгГМУ, г. Пятигорск, Россия

2 Пятигорский государственный научно-исследовательский институт курортологии — филиал ФГБУ «Федеральный научно-клинический центр медицинской реабилитации и курортологии ФМБА России», г. Пятигорск, Россия

*Е-mail: [email protected]

Резюме. Болезнь Альцгеймера — одно из самых распространенных нейродегенеративных заболеваний, которое ежегодно диагностируется впервые у более 1,5 млн человек, а количество лиц с подтвержденным диагнозом составляет около 55 млн. Одной из особенностей патогенеза болезни Альц-геймера является развитие нейровоспаления, изучение особенностей течения которого позволит значительно улучшить процесс разработки новых лекарственных препаратов для коррекции данного заболевания. В данной работе оценены зависимые от пола различия процесса нейровоспаления при болезни Альцгеймера в эксперименте. Экспериментальную болезнь Альцгеймера моделировали на крысах Вистар (самцах и самках) путем введения агрегатов Aß1-42 в гиппокамп животных. В процессе работы оценивали концентрацию фактора некроза опухоли-а, интерлейкинов 1ß, 10, 6 и NOD-подобных рецепторов, которую определяли в коре больших полушарий методом твердофазного им-муноферментного анализа.

В ходе эксперимента было установлено, что у крыс как самцов, так и самок введение агрегатов Aß142 индуцирует нейровоспалительную реакцию. При этом у крыс-самок процесс нейровоспаления протекал активнее, что выражалось в более высоком содержании интерлейкина-^, интерлейкина-6 и NOD-подобных рецепторов по сравнению с самцами в 1,4 раза (p<0,05), 1,5 (p<0,05) и в 4 (p<0,05) соответственно. Стоит отметить, что концентрация фактора некроза опухоли-а и интерлейкина-10 статистически значимо не отличалась в группах самок и самцов с экспериментальной болезнью Альцгеймера. Таким образом, показано, что у крыс-самок Вистар реакции нейровоспаления протекают интенсивнее, чем у самцов, что можно использовать в ходе доклинических исследований новых лекарственных препаратов, предназначенных для лечения болезни Альцгеймера.

Ключевые слова: нейровоспаление, нейродегенеративные заболевания, интерлейкины, половые различия, крысы

Благодарности. Работа выполнена без спонсорской поддержки.

Для цитирования: Поздняков Д.И., Вихорь А.А. Ассоциированные с полом различия реакций нейровоспаления в коре больших полушарий при манифестации болезни Альцгеймера в эксперименте. Лабораторные животные для научных исследований. 2024; 2. 58-65. https://doi.org/10.57034/ 2618723X-2024-02-05.

© Поздняков Д.И., Вихорь А.А., 2024

Original article

Sex-associated differences in neuroinflammation reactions in the cerebral cortex during the manifestation of alzheimer's disease in an experiment

D.I. Pozdnyakov12*, A.A. Vikhor1

1 Pyatigorsk Medical and Pharmaceutical Institute — branch of the Volga State Medical University, Pyatigorsk, Russia

2 Pyatigorsk State Research Institute of Balneology — branch of the Federal State Budgetary Institution "Federal Scientific and Clinical Center for Medical Rehabilitation and Balneology of the Federal Medical and Biological Agency of Russia", Pyatigorsk, Russia

*E-mail: [email protected]

Abstract. Alzheimer's disease is one of the most common neurodegenerative diseases, which affects more than 1.5 million people annually, and the number of people with a confirmed diagnosis is about 55 million. One of the features of the pathogenesis of Alzheimer's disease is the development of neuroinflammation, the study of the course of which will significantly improve the process of developing new drugs to correct this disease. This article evaluates the gender differences in the neuroinflammation process in Alzheimer's disease in an experiment. Experimental Alzheimer's disease was reproduced in Wistar rats (males and females) by AP1-42 aggregates injection into the hippocampus of animals. During the work following parameters were evaluated: the concentration of tumor necrosis factor-a, interleukin-1p, interleukin-10, interleukin-6 and NOD-like receptors, which was measured in the cerebral cortex by solid-phase enzyme immunoassay. During the experiment, it was found that in both male and female rats, the injection of AP1-42 aggregates induces a neuroinflammatory reaction. At the same time, in female rats, the neuroinflammation process was more active, which was expressed in an increase in the content of interleukin-ip, interleukin-6 and NOD-like receptors, compared with males by 1.4 times (p<0.05); 1.5 times (p<0.05) and 4 (p<0.05) times, respectively. It is worth noting that the concentration of tumor necrosis factor-a and interleukin-10 did not differ significantly in the groups of females and males with experimental Alzheimer's disease. Thus, it was shown that in female Wistar rats, neuroinflammation reactions are more intense than in males, which can be used in preclinical studies of new drugs intended for the treatment of Alzheimer's disease.

Keywords: neuroinflammation, neurodegenerative diseases, interleukins, gender differences, rats

Acknowledgements. The study was performed without external funding.

For citation: Pozdnyakov D.I., Vikhor A.A. Sex-associated differences in neuroinflammation reactions in the cerebral cortex during the manifestation of alzheimer's disease in an experiment. Laboratory Animals for Science. 2024; 2. 58-65. https://doi.org/10.57034/2618723X-2024-02-05.

Введение

Нейровоспаление является одной из основных защитных реакций центральной нервной системы (ЦНС) и напрямую связано с патогенезом нейродегенеративных заболеваний [1]. Существует разделение процесса нейровоспаления на два типа в зависимости от длительности его течения: нейропротекторный и нейродегене-ративный. Нейропротекторное нейровоспаление — это когда последствия от травмы носят кратковременный характер и длятся в течение короткого периода времени без тяжелых последствий со стороны нервной системы. При хроническом течении воспалительного процесса с постоянным воздействием на ЦНС нейровоспаление приобретает нейродеге-неративный характер [2]. Согласно данным, представленным R. Dhapola и соавт. и К. Shi

и соавт. [3, 4], одним из основных нейродегенеративных заболеваний считается болезнь Альцгеймера (БА), от которой страдает около 55 млн человек во всем мире. При этом одним из ведущих патофизиологических процессов в развитии БА является нейровоспаление, приводящее к активации ряда факторов, которые будут способствовать развитию дегенерации в коре больших полушарий головного мозга [5]. Среди данных факторов выделяют процесс активации глиальных клеток, который приводит к высвобождению ряда провоспалительных молекул: фактор некроза опухоли-а (ФНО-а), интерлейкины (ИЛ) 1р и 6 [6]. Также выделяют взаимосвязь этих процессов (посредством активации NOD-подобных рецепторов — NDLR) с образованием нейрофибриллярных клубков тау-белка и внеклеточным отложением бета-амилоида (Ар) — главных особенностей тече-

ния БА [7, 8]. Так, NDLR-зависимое повышение уровня ИЛ-1р будет катализировать процесс образования других цитокинов, таких как ИЛ-6, которые в последствии будут активировать CDK5, индуцируя гиперфосфорилирование тау и формирование нейрофибриллярных включений [9, 10].

В связи с высокой патогенетической значимостью реакций нейровоспаления изучению данного процесса посвящено обширное количество клинических исследований. Например, А. Ng и соавт. [11] в метаанализе, обобщающем 34 клинических исследования, продемонстрировали, что имеется значимая связь между развитием нейровоспаления при БА и депрессией. В ходе доклинических исследований БА нейровоспаление и ключевые молекулы, которые опосредуют инициацию и поддержание данного процесса, рассматриваются как одни из наиболее перспективных фармакотерапев-тических мишеней [12].

В то же время изучению влияния пола экспериментальных животных на течение нейрово-спалительной реакции и БА в общем отводится намного меньшая роль. По данным R. Zakaria и соавт. [13], в подавляющем большинстве случаев, в ходе доклинических исследований при моделировании БА используются крысы-самцы, хотя указывается, что на крысах-самках возможно воспроизведение патогенетического фенотипа заболевания, наиболее близкого к таковому в клинической практике. Однако стоит отметить, что в некоторых исследованиях установлены половые различия отдельных звеньев патогенеза БА. Например, Р. Babaei и соавт. [14] показали, что реакции окислительного стресса в ткани головного мозга у крыс с БА протекают интенсивнее у самок, о чем свидетельствовал пониженный по отношению к крысам-самцам уровень восстановленного глутатиона.

R. Biasibetti и соавт. [15] продемонстрировали, что при моделировании БА путем введения стрептозотицина в гиппокамп животных имеются существенные половые отличия в формировании холинергических нарушений, энергодефицита и окислительного стресса. Таким образом, отдельные патогенетические механизмы развития БА изучаются в контексте зависимых от пола изменений, но в то же время нейровоспалению уделяется не такое пристальное внимание, что актуализирует оценку данного патофизиологического механизма течения БА с позиции пол-ассоциированных отличий.

Цель исследования — проведение исследования, направленное на выявление возможных половых различий реакций нейровоспаления

в коре больших полушарий у крыс с болезнью Альцгеймера.

Материал и методы

Экспериментальная работа проводилась на половозрелых крысах самцах и самках Вистар массой тела 210-230 г (п=40), полученных из питомника лабораторных животных «Рап-полово» (д. Рапполово, Ленинградская обл.). Содержание животных соответствовало положениям Директивы ЕС 2010/631. Животные находились в помещениях лаборатории живых систем Пятигорского медико-фармацевтического института (ПМФИ) при контролируемых условиях окружающей среды: нормальном атмосферном давлении, температуре воздуха 22-24 °С, влажности воздуха 55-75% и 12-часовом цикле день/ночь с сохранением нормальных для данного вида циркадных ритмов. Доступ животных к воде и полнорационному корму не ограничивали. Все манипуляции, проводимые с экспериментальными животными, соответствовали международным нормам экспериментальной этики [16]. Оперативные процедуры выполнены под хлоралги-дратной анестезией (хлоралгидрат 350 мг/кг интраперитонеально). Дизайн исследования был одобрен локальным этическим комитетом ПМФИ (протокол № 8 от 07.07.23). За 14 дней до начала эксперимента животных помещали в карантинном помещении, затем их разделили на 4 группы по 10 особей: 1-я группа — ложноо-перированные самцы (ЛО $); 2-я группа — лож-нооперированные самки (ЛО $); 3-я группа — самцы с моделью патологии (НК $); 4-я группа — самки с моделью патологии (НК $).

Количество животных в группе рассчитывали по формуле:

n=(t0,05xSd)2/d2,

где: Sd — дисперсия межгрупповых различий; d — средняя разница, когда ожидаемая величина является значимой; t0,05 — дисперсия межгрупповых различий при р=0,05.

Принимая, что n>30, t=2, Sd=3 и d=2, рассчитанное значение п составляет не менее 9 особей в одной группе [17].

Животным 3-й и 4-й групп проводилось моделирование БА путем внутригиппокампальной инъекции (в СА1-часть гиппокампа. Стереотак-сические координаты: переднезадняя 3,8 мм, медиально-латеральная 2 мм, дорсально-вен-тральная 2,6 мм от брегмы) агрегатов Ap142. Агрегаты получали ex tempore путем растворения фрагментов Ap142 (Sigma-Aldrich, Германия) в смеси диметилсульфоксид/вода очищен-

1 Директива 2010/63/EU Европейского парламента и Совета Европейского союза по охране животных, используемых в научных целях / пер. с англ. Под ред. М.С. Красильщиковой, И.В. Белозерцевой. Санкт-Петербург, 2012. 48 с. [Direktiva 2010/63/EU Yevropeyskogo Parlamenta i Soveta Yevropeyskogo Soyuza po okhrane zhivotnykh, ispoí'zuyemykh v nauchnykh tseíyakh / transí. from English. Ed. M.S. Krasilshchikova, I.V. Beíozertseva. St. Petersburg, 2012. 48 p. (In Russ.)].

6001

500-

400-

я 300

ф 200

О 100

ная (1/9) при непрерывном перемешивании. Животных анестезировали хлоралгидратом, фиксировали в стереотаксической установке и отмечали место, необходимое для выполнения трепанации. Далее крыс извлекали из установки, скальпировали и бором проделывали трепанационное отверстие (при периодическом охлаждении 0,9% раствором натрия хлорида) согласно отмеченным ранее координатам. Агрегаты Ар142 вводили в конечной концентрации 1 ммоль/л в объеме 2 мкл, используя шприц Гамильтона 10 мкл. После проведения процедуры моделирования патологии животных оставляли на 21 день [18]. Ежедневно животных осматривали на предмет наличия отклонений локомоторной активности, сенсорного восприятия, состояния кожных покровов. Смертности в процессе эксперимента отмечено не было. К ложнооперированным группам применялись манипуляции, аналогичные таковым при моделировании БА, за исключением введения агрегатов Ар142.

На 22-й день проведения исследовательской работы животных подвергали эвтаназии методом декапитации с последующим извлечением головного мозга, который помещали на ледяную баню температурой не выше 4 °С. После выделяли кору больших полушарий путем иссечения скальпелем по средней борозде и непосредственно отделяли нужный биомате-

* А _I_

ЛО $

НК $

ЛО $

ЛО $

Рис. 1. Оценка изменения концентрации NDLR в коре больших

полушарий у крыс с болезнью Альцгеймера. Здесь и на рис. 2-5: по горизонтали, красная линия — среднее значение, синяя — медианное значение; тест Ньюмена—Кейлса (р<0,05), достоверно относительно: # — ЛО-группы * — ЛО-группы $; й — НК-группы $

10-|

9-

8-

i 7-

u; 6-

-i 5-

i- 4-

Ф ^ 3-

x о 2-

К 1-

04

ЛО $

НК $

ЛО $

ЛО $

Рис. 2. Оценка изменения концентрации ИЛ-1$ в коре больших полушарий у крыс с болезнью Альцгеймера

риал. Далее путем механического гомогенизирования в холодном буферном растворе, состоящем из 1 мМ этиленгликольтетраацетата, 215 мМ маннитола, 75 мМ глюкозы, 0,1% бычьего сывороточного альбумина, 20 мМ HEPES; рН 7,2 (соотношение масса ткани/объем буферного раствора составляло 1:7), получали гомо-генат, который впоследствии центрифугировали при 10 000 g в течение 15 мин. В выделенном супернатанте методом иммунофермент-ного анализа определяли изменение реакций нейровоспаления путем оценки концентрации основных биомаркеров данного процесса: ИЛ 1, 6, 10, ФНО-а и NDLR. Реактивы для проведения процедуры ИФА являлись видоспеци-фичными (Cloud Clone corp., КНР). В ходе анализа применяли систему микропланшетного ридера Infinite F50 (Tecan, Австрия).

Все результаты, полученные в ходе экспериментальной работы, обрабатывали методами вариационной статистики с использованием пакета прикладных программ «StatPlus 7.0» (AnalystSoft Inc., США). Исходные данные были проверены на нормальность распределения согласно критерию Шапиро—Уилка. Для сравнения групп средних применяли параметрические методы ANOVA с посттестом Ньюмена—Кейлса и непараметрические методы статического анализа — тест Крускалла—Уол-лиса с постпарным сравнением в тесте Данна. Различия считали статистически значимыми при p<0,05.

Результаты и обсуждение

По результатам анализа установлено, что в группе самок с моделью патологии БА величина уровня NDLR превосходила показатели контрольной группы животных в 44,7 раза (p<0,05). В группах самцов наблюдалась схожая тенденция к повышению уровня NDLR, увеличение концентрации рецепторов в сравнении с контрольной группой составило 10,6 раза (p<0,05), что было в 4 раза (p<0,05) меньше, чем у самок крыс с БА (рис. 1).

В ходе процедуры оценки концентрации ИЛ-1р было определено, что в группе самок с БА отмечено повышение содержания данного цито-кина в 12,5 раза (p<0,05) в сравнении с группой ложнооперированных крыс-самок. По данным, полученным в процессе определения концентрации ИЛ-1р в группах самцов, была отмечена тенденция к повышению уровня данного цитокина, который существенно превосходил показатели ложнооперированной группы крыс-самцов в 4,8 раза (p<0,05). При этом показатели у крыс-самцов были в 1,4 раза (p<0,05) ниже, чем в группе крыс-самок с БА (рис. 2).

В результате исследования установлено, что уровень ИЛ-6 в группе самок с моделью патологии был выше в 7,5 раза (p<0,05), чем у ложнооперированной группы. Содержание ИЛ-6 в группе самцов с эксперименталь-

#

0

*

ной БА было выше, нежели у ложноопериро-ванных животных, в 4,9 раза (р<0,05). В то же время концентрация ИЛ-6 у крыс-самок с БА была в 1,5 раза (p<0,05) выше, чем у крыс-самцов с БА (рис. 3).

Уровень ИЛ-10 (рис. 4) в группах крыс ($, <) с моделью патологии снижался в равной зависимости по отношению к соответствующим показателям ложнооперированных крыс на 63,2% (p<0,05) и на 56,4% (p<0,05).

При проведении сравнительного анализа данных определения концентрации ФНО-а установлено, что в группах животных ($, <) с моделью патологии в равной зависимости повышался уровень данного цитокина, который превышал показатели ложноопе-рированных животных в 2,8 раза (p<0,05) и в 2,3 раза (p<0,05) соответственно (рис. 5).

На протяжении последних лет идет активное изучение нейровоспаления как потенциального фактора в развитии нейродегене-рации. Так, в 2016 г. V. Calsolaro и соавт. [19] провели ряд исследований с применением нейровизуализации и изучением биопсии головного мозга пациентов с БА, в которых показали существенную роль нейровоспаления в течении БА. Помимо этого, особое внимание направлено на исследование мультибелково-го комплекса, известного как NDLR-связанная инфламмасома. NDLR активируется как ответ на повышение концентрации агрегатов Ар, что впоследствии будет приводить к увеличению продукции цитокинов и активации сопряженных с ними патофизиологических механизмов развития БА, например, каспа-за-зависимых реакций апоптоза [20, 21]. Исследования показывают, что NDLR-связанная инфламмасома и вызванное ей нейровоспа-ление приводят к гибели нейронов и снижению когнитивных функций [19]. В то же время NDLR подвержены значительному полиморфизму (зависимому от пола), что делает данный мультибелковый комплекс краеугольным камнем пол-ассоциированных реакций воспаления. Как отмечают S. Green-Fulgham и соавт. [22], при наличии патологического процесса в ЦНС у крыс-самок наблюдается повышенная экспрессия NDLR, что приводит к гиперцитокинемии и неконтролируемой ней-ровоспалительной реакции. В данном исследовании показано, что при моделировании БА у самок крыс по сравнению с самцами концентрация NDLR была выше в 4 раза (p<0,05), что, вероятно, объясняет повышенные уровни цитокинов в ткани головного мозга у самок крыс по отношению к самцам. Также основываясь на полученных результатах, можно оптимизировать подход к доклинической оценке средств нейропротекторного действия, что позволит увеличить их трансляционный успех. Как отмечают N. Zhang и соавт. [23], успешное применение нейропротекторов в клинической практике весьма ограничено, что не в последнюю оче-

20 "I

18-

Jt 16-

X 14-

u; 12-

=1 m 10-

n

iX 8-

Ф ^ 6-

X о 4-

2-

04

#

ло $

нк $

ло <

* А

ЛО <

Рис. 3. Оценка изменения концентрации ИЛ-6 в коре больших полушарий у крыс с болезнью Альцгеймера

32,521,510,50

ЛО $

НК $

ЛО <

ЛО <

Рис. 4. Оценка изменения концентрации ИЛ-10 в коре больших полушарий у крыс с болезнью Альцгеймера

200-|

180-

160-

X 140-

a; 120-

=l m 100-

n

iT 80-

Ф ^ 60-

X о 40-

20-

04

ЛО $

НК $

ЛО <

ЛО <

Рис. 5. Оценка изменения концентрации ФНО-а в коре больших полушарий у крыс с болезнью Альцгеймера

редь связано с выбором релевантной экспериментальной модели на этапе доклинических испытаний. В связи с этим исследованные пол-зависимые отличия реакций нейровоспаления у крыс с болезнью Альцгеймера могут быть использованы при изучении как фундаментальных особенностей течения нейродегене-ративных процессов, так и при доклинической оценке новых нейропротекторных соединений.

Заключение

На основании полученных данных можно говорить, что у крыс-самок процесс нейровоспаления в коре больших полушарий в условиях экспериментальной болезни Альцгеймера проходил намного интенсивнее за счет повышенной экспрессии NDLR (в 4 раза; р<0,05) и соот-

#

ветствующего увеличения уровня цитокинов интерлейкина-lß (в 1,4 раза; p<0,05) и ин-терлейкина-6 (в 1,5 раза; p<0,05). Результаты данного исследования позволят детальнее подходить к выбору пола экспериментальных животных при моделировании нейродегене-ративных заболеваний, в частности болезни Альцгеймера, что в свою очередь позволит улучшить подходы к доклиническому изучению нейропротекторов.

список источников

1. Rauf A., Badoni H., Abu-Izneid T. et al. Neuroinflamma-tory Markers: Key Indicators in the Pathology of Neurodegenerative Diseases // Molecules. 2022. Vol. 27. N. 17. P. 3194. DOI: 10.3390/molecules27103194.

2. Shastri A., Bonifati D.M., Kishore U. Innate immunity and neuroinflammation // Mediators Inflamm. 2013. Vol. 2013. P. 342931. DOI: 10.1155/2013/342931.

3. Dhapola R., Hota S.S., Sarma P. et al. Recent advances in molecular pathways and therapeutic implications targeting neuroinflammation for Alzheimer's disease // Inflammopharmacology. 2021. Vol. 29. N. 6. P. 16691681. DOI: 10.1007/s10787-021-00889-6.

4. Shi K., Yu Y., Li Z. et al. Causal relationship between dietary salt intake and dementia risk: Mendelian randomization study // Genes Nutr. 2024. Vol. 29. N. 1. P. 6. DOI: 10.1186/s12263-024-00741-w.

5. Scheltens P., De Strooper B., Kivipelto M. et al. Alzheimer's disease // Lancet. 2021 Vol. 397. N. 10284. P. 1577-1590. DOI: 10.1016/S0140-6736(20)32205-4.

6. Chen L., Deng H., Cui H. et al. Inflammatory responses and inflammation-associated diseases in organs // Oncotarget. 2017. Vol. 9. N. 6. P. 7204-7218. DOI: 10.18632/oncotarget.23208.

7. Martin S.C., Joyce K.K., Harper K.M. et al. Evaluating Fatty Acid Amide Hydrolase as a Suitable Target for Sleep Promotion in a Transgenic TauP301S Mouse Model of Neurodegeneration // Pharmaceuticals (Basel). 2024. Vol. 17. N. 3. P. 319. DOI: 10.3390/ph17030319.

8. Pang Y., Lin W., Zhan L. et al. Inhibiting Autopha-gy Pathway of PI3K/AKT/mTOR Promotes Apop-tosis in SK-N-SH Cell Model of Alzheimer's Disease // J. Healthc. Eng. 2022. Vol. 8. P. 6069682. DOI: 10.1155/2022/6069682.

9. Thakur S., Dhapola R., Sarma P. et al. Neuroinflammation in Alzheimer's Disease: Current Progress in Molecular Signaling and Therapeutics // Inflammation. 2023. Vol. 46. N. 1. P. 1-17. DOI: 10.1007/s10753-022-01721-1.

10. Dhapola R., Sarma P., Medhi B. et al. Recent Advances in Molecular Pathways and Therapeutic Implications Targeting Mitochondrial Dysfunction for Alzheimer's Disease // Mol. Neurobiol. 2022. Vol. 59. N. 1. P. 535-555. DOI: 10.1007/s12035-021-02612-6.

11. Ng A., Tam W.W., Zhang M.W. et al. IL-1ß, IL-6, TNF-a and CRP in Elderly Patients with Depression or Alz-

heimer's disease: Systematic Review and Meta-Analysis // Sci. Rep. 2018. Vol. 8. N. 1. P. 12050. DOI: 10.1038/s41598-018-30487-6.

12. Cohen J., Mathew A., Dourvetakis K.D. et al. Recent Research Trends in Neuroinflammatory and Neurodegenerative Disorders // Cells. 2024. Vol. 13. N. 1. P. 511. DOI: 10.3390/ceUs13060511.

13. Zakaria R., Wan Yaacob W.M., Othman Z. et al. Lipopoly-saccharide-induced memory impairment in rats: a model of Alzheimer's disease // Physiol. Res. 2017. Vol. 46. N. 4. P. 553-565. DOI: 10.33549/physiolres.933480.

14. Babaei P., Eyvani K., Kouhestani S. Sex-Independent Cognition Improvement in Response to Kaemp-ferol in the Model of Sporadic Alzheimer's Disease // Neurochem. Res. 2021. Vol. 46. N. 6. P. 1480-1486. DOI: 10.1007/s11064-021-03289-y.

15. Biasibetti R., Almeida Dos Santos J.P., Rodrigues L. et al. Hippocampal changes in STZ-model of Alzheimer's disease are dependent on sex // Behav. Brain Res. 2017. Vol. 316. P. 205-214. DOI: 10.1016/j.bbr.2016. 08.057.

16. Percie du Sert N., Hurst V., Ahluwalia A. et al. The ARRIVE guidelines 2.0: Updated guidelines for reporting animal research // PLoS Biol. 2020. Vol. 18. N. 7. P. e3000410.

17. Mead R, Gilmour SG, Mead A. Statistical principles for the design of experiments: applications to real experiments. Cambridge, UK: Cambridge University Press, 2012.

18. Kim H.Y., Lee D.K., Chung B.R. et al. Intracerebro-ventricular Injection of Amyloid-ß Peptides in Normal Mice to Acutely Induce Alzheimer-like Cognitive Deficits // J. Vis. Exp. 2016. Vol. 106. P. 53308. DOI: 10.3791/53308.

19. Calsolaro V., Edison P. Neuroinflammation in Alzheimer's disease: Current evidence and future directions // Alzheimers Dement. 2016. Vol. 12. N. 6. P. 719-732. DOI: 10.1016/j.ja1z.2016.02.010.

20. Yap J.K.Y., Pickard B.S., Chan E.W.L. et al. The Role of Neuronal NLRP1 Inflammasome in Alzheimer's Disease: Bringing Neurons into the Neuroinflammation Game // Mol. Neurobiol. 2019. Vol. 56. N. 11. P. 77417753. DOI: 10.1007/s12035-019-1638-7.

21. Franchi L., Eigenbrod T., Munoz-Planlo R. et al. The in-flammasome: a caspase-1-activation platform that regulates immune responses and disease pathogenesis // Nat. Immunol. 2009. Vol. 10. N. 3. P. 241-247. DOI: 10.1038/ni.1703.

22. Green-Fulgham S.M., Ball J.B., Kwilasz A.J. et al. In-ter1eukin-1beta and inflammasome expression in spinal cord following chronic constriction injury in male and female rats // Brain Behav. Immun. 2024. Vol. 115. P. 157-168. DOI: 10.1016/j.bbi.2023.10.004.

23. Zhang N., Nao J., Dong X. Neuroprotective Mechanisms of Salidroside in Alzheimer's Disease: A Systematic Review and Meta-analysis of Preclinical Studies // J. Agric. Food Chem. 2023. Vol. 71. N. 46. P. 17 597-17 614. DOI: 10.1021/acs.jafc.3c06672.

Информация об авторах

Д.И. Поздняков1,2, кандидат фармацевтических наук, доцент, заведующий кафедрой фармакологии с курсом клинической фармакологии, [email protected], https://orcid.org/0000-0002-5595-8182 А.А. Вихорь1,

студентка V курса лечебного факультета, https://orcid.org/0009-0006-1092-7901

1 Пятигорский медико-фармацевтический институт — филиал ФГБОУ ВО «Волгоградский государственный медицинский университет» Министерства здравоохранения Российской Федерации,

357532, Россия, Ставропольский край, г. Пятигорск, пр. Калинина, 11.

2 Пятигорский государственный научно-исследовательский институт курортологии — филиал ФГБУ «Федеральный научно-клинический центр медицинской реабилитации и курортологии ФМБА России», 357501, Россия, г. Пятигорск, пр. Кирова, д. 30.

Information about the authors

D.I. Pozdnyakov1,2, PhD, Associate Professor, Head of the Department of Pharmacology with a course in clinical Pharmacology, [email protected], https://orcid.org/0000-0002-5595-8182 A.A. Vikhor1,

a 5th year student of the Faculty of Medicine, https://orcid.org/0009-0006-1092-7901

1 Pyatigorsk Medical and Pharmaceutical Institute — branch of the Volga State Medical University, 357532, Russia, Stavropol Territory, Pyatigorsk, Kalinina Ave., 11.

2 Pyatigorsk State Research Institute of Balneology — branch of the Federal State Budgetary Institution "Federal Scientific and Clinical Center for Medical Rehabilitation and Balneology of the Federal Medical and Biological Agency of Russia",

357501, Russia, Pyatigorsk, Kirova Ave., 30.

Вклад авторов в написание статьи Д.И. Поздняков — разработка концепции исследования, проведение эксперимента, подготовка рукописи.

А.А. Вихорь — проведение эксперимента, статистическая обработка данных, подготовка рукописи.

Сведения о конфликте интересов

Авторы заявляют об отсутствии конфликта интересов.

Дата поступления рукописи

в редакцию: 05.04.2024

Дата рецензии статьи: 18.05.2024

Дата принятия статьи к публикации: 30.05.2024

Authors contribution

D.I. Pozdnyakov — research concept, conducting an experiment, preparing a manuscript. A.A. Vikhor — conducting an experiment, statistical analysis, preparation of a manuscript.

Conflict of interest

The authors declare no conflict of interest requiring disclosure in this article.

Received: 05.04.2024 Reviewed: 18.05.2024 Accepted for publication: 30.05.2024