CC BY
10
DOI: 10.17б50/1818-834б-2022-17-2-75-81
с-)]
cv cv
cv
«V
CS
cv cv
Ассоциация рSTAT3, pSyk с экспрессией белков c-Myc, р53, BCL2 и выживаемостью больных диффузной В-крупноклеточной лимфомой
В.А. Росин, Е.В. Ванеева, д.А. дьяконов, С.В. Самарина, И.В. Парамонов
ФГБУН «Кировский научно-исследовательский институт гематологии и переливания крови Федерального медико-биологического агентства»; Россия, 6100027Киров, Красноармейская ул., 72
Контакты: Елена Викторовна Ванеева vaneeva.elena.vic@mail.ru
Введение. Диффузная В-крупноклеточная лимфома (ДВМЛ) - одна из самых частых неходжкинских лимфом. Эффективность терапии R-CHOP (ритуксимаб, циклофосфамид, гидроксидаунорубицин, онковин, преднизолон) отмечена примерно у 6g % пациентов, в 2G-BG % случаев ДВМЛ характеризуется резистентным/рефрактерным течением. Цинические прогностические критерии не позволяют точно определить прогноз заболевания. В связи JN с этим на сегодняшний день проблема разработки дополнительных предикторов течения ДВKKЛ остается актуальной и непосредственно связана с патогенезом заболевания. R
Цель исследования - определить связь рSTAT3, pSyk с экспрессией белков c-Myc, р53, BCL2 и выживаемостью больных ДВШ.
Материалы и методы. Для исследования использовали биоптаты лимфатических узлов и других органов и тканей, полученные от 1GG пациентов с впервые установленным диагнозом ДВМЛ. Все больные получали стандартную иммунохимиотерапию по схеме R-CHOP. Определение относительного количества экспрессирующих рSTAT3, pSyk ^ опухолевых клеток проводили с помощью иммуногистохимического и морфометрического методов. Пороговое значение экспрессии белков вычисляли с применением ROC-анализа: для рSTAT3 оно составило 6S % положительных опухолевых клеток, для рSyk - 2S %. Взаимосвязь рSTAT3, pSyk с экспрессией с-Мус, p53, BCL2 определяли с помощью Х2-критерия Пирсона. Общую (ОВ) и беспрогрессивную (БПВ) выживаемость рассчитывали по методу Цплана-Майера (log-rank-тест).
Результаты. Установлена ассоциация гиперэкспрессии рSTAT3 с высоким содержанием в опухолевых клетках транскрипционных факторов с-Myc и р53 (p = 0,015 и p = 0,010 соответственно). В группе обследованных с высокой экспрессией pSTATB показатели 5-летней ОВ и БПВ были ниже, а риск возникновения летального исхода и прогрес-сирования заболевания почти в 1,5 раза выше, чем у больных с низкой экспрессией белка (p = 0,015 и p = 0,011 соответственно). При анализе коэкспрессии рSTAT3 и рSyk низкая ОВ и БПВ зарегистрирована у пациентов с одновременно высокой экспрессией указанных белков. При таком сочетании маркеров вероятность наступления неблагоприятного события у больных при расчете ОВ увеличивалась в 2,9 раза (p = 0,003; отношение рисков 2,9; 95 % доверительный интервал 1,4B-5,S5), при анализе БПВ - в 2,3 раза (p = 0,021; отношение рисков 2,3; 95 % доверительный интервал 1,14-4,S7) по сравнению с другими вариантами их совместной экспрессии. Заключение. Гиперэкспрессия pSTATB ассоциируется с неблагоприятными биологическими характеристиками ДВKKЛ и низкой выживаемостью пациентов. Сочетанная надпороговая экспрессия рSTAT3 и рSyk связана с более низкими показателями ОВ и БПВ по сравнению с их изолированной экспрессией.
Ключевые слова: диффузная В-крупноклеточная лимфома, экспрессия рSTAT3, экспрессия pSyk, выживаемость
Для цитирования: Росин В.А., Ванеева Е.В., Дьяконов Д.А. и др. Ассоциация рSTAT3, pSyk с экспрессией белков c-Myc, р53, BCL2 и выживаемостью больных диффузной В-крупноклеточной лимфомой. Онкогематология 2022;17(2): 75-S1. DOI: 1G.1765G/1S1S-SB46-2G22-17-2-75-S1.
association of pSTAT3, pSyk with c-Myc, p53, BCL2 proteins expression and survival of patients with diffuse large B-cell lymphoma
V.A. Rosin, E. V. Vaneeva, D.A. Dyakonov, S. V. Samarina, I. V. Paramonov
Kirov Research Institute of Hematology and Blood Transfusion of the Federal Medical and Biological Agency; 72 Krasnoarmeyskaya St., Kirov 6100027, Russia
Contacts: Elena Viktorovna Vaneeva vaneeva.elena.vic@mail.ru
BY 4.0
cv cv
«V «V
CS
cv cv
«V «V
Background. Diffuse large B cell lymphoma (DLBCL) is one of the most common non-Hodgkin's lymphomas. The effectiveness of R-CHOP (rituximab, cyclophosphamide, hydroxydaunorubicin, oncovin, prednisone) therapy was observed in about 60 % of patients, in 20-30 % of cases DLBCL is characterized by a refractory course. Standard clinical prognostic criteria do not accurately determine the prognosis of the disease. In this regard, the problem of developing additional predictors of DLBCL course remains relevant today and is directly related to the molecular pathogenesis of the disease. The objective: to determine the relationship of pSTAT3, pSyk with c-Myc, p53, BCL2 oncoproteins expression and survival of DLBCL patients.
Materials and methods. Biopsy specimens of lymph nodes and other organs and tissues obtained from 100 patients with newly diagnosed DLBCL were used for the study. All patients received standard first-line immunochemotherapy according to the R-CHOP regimen. Determination of the relative amount of tumor cells expressing pSTAT3, pSyk was carried out using immunohistochemical and morphometric methods. The threshold value of proteins expression was calculated using the ROC analysis: for pSTAT3 it was 68 % of positive tumor cells, for pSyk - 28 %. The relationship of pSTAT3, pSyk with c-Myc, p53, BCL2 expression was determined using the Pearson x2 test. Overall (OS) and progression-free (PFS) survival were calculated using the Kaplan-Meier method (log-rank test).
Results. The suprathreshold pSTAT3 expression was found to be associated with a high content of c-Myc and p53 transcription factors in tumor cells (p = 0.015 and p = 0.010, respectively). In the group of patients with isolated overexpression of pSTAT3, the 5-year OS and PFS were lower, and the risk of death and disease progression was almost 1.5 times higher than in patients with low protein expression (p = 0.015 and p = 0.011, respectively). When studying the co-expression of pSTAT3 and pSyk, the lowest OS and PFS were recorded in the subjects with a simultaneous high expression of these proteins. With this combination of markers, the probability of an adverse event in patients when calculating OS increased by 2.9 times (p = 0.003; hazard ratio 2.9; 95 % confidence interval 1.43-5.85), and when analyzing PFS -by 2.3 times (p = 0.021; hazard ratio 2.3; 95 % confidence interval 1.14-4.87) compared with other variants of their simultaneous expression.
Conclusion. Overexpression of pSTAT3 is associated with unfavorable biological tumor characteristics and poor patient survival. The combined suprathreshold expression of the pSTAT3 and pSyk proteins is associated with lower OS and PFS values compared to their isolated expression.
Key words: diffuse large B-cell lymphoma, pSTAT3 expression, pSyk expression, survival
For citation: Rosin V.A., Vaneeva E.V., Dyakonov D.A. et al. Association of pSTAT3, pSyk with c-Myc, p53, BCL2 proteins expression and survival of patients with diffuse large B-cell lymphoma. Onkogematologiya = Oncohematology 2022; 17(2):75-81. (In Russ.). DOI: 10.17650/1818-8346-2022-17-2-75-81.
Введение
Диффузная В-крупноклеточная лимфома (ДВККЛ) — частое лимфопролиферативное заболевание. Благодаря лечению по протоколу R-CHOP около 60 % пациентов достигают длительной ремиссии. Однако примерно у 40 % больных развивается рецидив или заболевание исходно является рефрактерным к терапии [1—3]. Согласно классификации Всемирной организации здравоохранения (2017) ДВККЛ представляет собой совокупность заболеваний, различных по биологическим свойствам и клиническому течению [4]. Лечение рефрактерных/рецидивных опухолей является одной из сложнейших задач онкогематологии, поскольку стандартные схемы оказываются неэффективны и требуются модифицированные или новые подходы [5].
В настоящее время при определении прогноза у пациентов с ДВККЛ при первичной диагностике делается акцент на изучение генетических признаков и их совокупностей. Многие из них могут быть оценены на уровне протеинов с помощью иммуногистохимического метода. В течение последних 10 лет проводятся исследования прогностической роли мутаций ряда генов (MYC, T53, BCL2, STAT, PI3K, BTK, SYK и др.) и/или экспрессии их белковых продуктов [5—7]. Установлено, что сигнальные пути (BCR, JAK/STAT3), ключевыми элементами которых являются молекулы STAT3 и Syk, активно вовлечены в патогенез ДВККЛ [8, 9].
В-клеточный рецептор представляет собой трансмембранный комплекс, функционирующий как сигнальная единица и состоящий из мембранного иммуноглобулина и гетеродимера белков CD79A и CD79B. Связывание иммуноглобулина с антигеном генерирует внутриклеточный сигнал, распространяющийся по сложной сети киназ, фосфатаз, адапторных белков и факторов транскрипции [8]. Одним из ключевых компонентов, расположенных в начале распространения сигнала в В-клетке, является тирозинкиназа Syk. Белок участвует в регуляции иммунного ответа, ангио-генезе, а также в дифференцировке лимфоцитов от стадии пре-В-клеток до плазмоцитов. Активированная форма Syk ^Syk) способна эффективно участвовать в передаче сигнала от мембраны к ядру клетки, обеспечивая запуск ключевых программ выживания и пролиферации [10—12].
pSTAT3 является продуктом стимулированных JAK (JAK1, JAK2/TYK2 при non-GCB подтипе ДВKKЛ (non germinal center B-cell-like, активированные В-клет-ки негерминативного происхождения), а JAK2 преимущественно при GCB (germinal center B-cell-like, В-клетки терминального центра)) [13]. Аутокринная петля интерлейкинов 6 и 10 стимулирует рецептор-ассоциированные JAK1 и JAK2, что приводит к фос-форилированию STAT3 [14]. В случаях дизрегуляции сигнального пути JAK/STAT3 активная форма белка
(pSTAT3) усиливает экспрессию ингибиторов апоптоза сурвивина и BCL2, способствуя неопластической трансформации клеток и повышению их выживаемости [15].
Изучение новых предикторов течения ДВККЛ важно с точки зрения возможности стратификации пациентов для выбора оптимальной тактики лечения с учетом всей полноты клинических, молекулярно-биологических данных. Несмотря на то что в последние годы активно проводятся исследования препаратов, подавляющих активность перечисленных молекул или составляющих сигнальных путей, прогностическое значение рSyk и рSTAT3 при ДВККЛ исследуется мало, а полученные результаты противоречивы [13, 16, 17]. Недостаточно информации о связи указанных маркеров с биологическими характеристиками опухоли и течением заболевания.
Цель исследования — определить связь рSTAT3, pSyk с экспрессией белков c-Myc, р53, BCL2 и выживаемостью больных ДВККЛ.
Материалы и методы
В ретроспективное исследование были включены 100 пациентов с впервые диагностированной ДВККЛ. Все больные получали полихимиотерапию по схеме R-CHOP в клинике Кировского научно-исследовательского института гематологии и переливания крови ФМБА России с 2012 по 2018 г. (отделение гематологии и химиотерапии с дневным стационаром, заведующая С.В. Самарина). Характеристика больных ДВККЛ представлена в табл. 1.
Медиана возраста больных составила 59 (24—83) лет. Проведение исследования одобрено локальным этическим комитетом (протокол № 31 от 27.10.2021).
Для исследования использовали архивные образцы (парафиновые блоки) лимфатических узлов или других органов, вовлеченных в патологический процесс, а также материал интраоперационных биопсий. Морфологические и иммуногистохимические исследования выполняли в лаборатории патоморфологии Кировского научно-исследовательского института гематологии и переливания крови ФМБА России (заведующий лабораторией к.м.н. Д.А. Дьяконов). Постановку имму-ногистохимических реакций осуществляли непрямым пероксидазным методом по стандартной методике в соответствии с протоколом для систем визуализации EnVISION (DAB+, Dako) с использованием широкой диагностической панели антител. Для детекции pSTAT3 (GeneTex, phosphorTyr705) и рSyk (GeneTex, phosphorTyr348) в опухолевых клетках гистологические срезы инкубировали с соответствующими монокло-нальными антителами. Морфометрическую оценку относительного содержания опухолевых клеток выполняли визуально способом двойного «слепого» анализа на световом микроскопе AxioScope.A1 (Carl Zeiss Microscopy GmbH, Германия) со встроенной фото-/видеока-мерой и программным обеспечением анализа изображений. Оценивали 10 полей зрения каждого образца
Таблица 1. Характеристика больных диффузной В-крупноклеточной лимфомой
Table 1. Characteristics of patients with diffuse large B-cell lymphoma
Характеристика Число пациентов, %
1 Number of patients, %
Пол:
Gender:
мужской 49
male
женский 51
female
Возраст, лет:
Age, years:
>60 60
<60 40
В-симптомы:
B-symptoms:
нет 51
no
есть 49
yes
Стадия диффузной В-крупноклеточ-
ной лимфомы (по классификации
Ann Arbor):
Ann Arbor stage of diffuse large B-cell
lymphoma:
III 40
III-IV 60
Экстранодальное поражение:
Extranodal lesion:
нет 64
no
есть 36
yes
Концентрация лактатдегидрогеназы:
Lactate dehydrogenase levels:
норма 50
normal
выше нормы 50
above normal
Иммуногистохимический подтип:
Immunohistochemical subtype:
GCB 35
non-GCB 65
Международный прогностический
индекс, группа риска:
International Prognostic Index, risk group,
points:
<2 45
>2 55
Ответ на терапию:
Response to therapy:
полный ответ 62
complete response
частичный ответ/рецидив/рефрак- 38
терность
partial response/relapse/refractory
Статус пациента на момент исследо-
вания:
Patient status at the time of the study:
летальный исход 35
lethal outcome
продолжает наблюдение 65
continues to be monitored
cv cv
cv cv
ев
cv cv
cv cv
Примечание. GCB — с фенотипом В-клеток герминального центра. Note. GCB — germinal center B-cell-like.
cv cv
сч сч
ев
cv cv
cv cv
с применением окуляров х 10 и объектива х 100. С учетом полученных результатов вычисляли среднее относительное содержание антигенположительных опухолевых клеток в исследуемом материале.
Статистическую обработку данных проводили с использованием статистической программы IBM SPSS Statistics 26. Пороговый уровень экспрессии белков в опухолевых клетках вычисляли с помощью ROC-анализа. Для pSTAT3 он составил 68 % положительных опухолевых клеток, для рSyk — 28 %. Согласно установленным порогам все образцы разделили на группы с высокой (гиперэкспрессия) (>68 % (+) для pSTAT3; >28 % (+) для рSyk) и низкой (<68 % (-) для pSTAT3; <28 % (—) для рSyk) экспрессией белков. У всех больных количественно оценивали экспрессию антигенов c-Myc, р53 и BCL2 в опухолевых клетках. Для указанных белков использовали пороговые значения экспрессии, рекомендованные Всемирной организацией здравоохранения (2017), применяемые в международных исследованиях и показывающие воспроизводимые результаты (40, 30 и 50 % положительных опухолевых клеток соответственно) [4]. Взаимосвязь маркеров рSTAT3, pSyk и белков c-Myc, p53, BCL2 оценивали с помощью критерия х2-критерия Пирсона с расчетом отношения шансов (ОШ). Проанализировали связь изолированной и сочетанной экспрессии pSTAT3, рSyk с прогнозом течения ДВККЛ. Пятилетнюю общую (ОВ) и беспрогрессивную (БПВ) выживаемость рассчитывали по методу Каплана—Майера с графическим построением соответствующих кривых (log-rank-тест). Показатели считали статистически значимыми прир <0,05.
Результаты
Изучена связь рSTAT3 и рSyk с характером экспрессии белков с-Мус, р53 и В^2 (табл. 2). Установлено, что надпороговая экспрессия маркера pSTAT3 почти в 2 раза чаще определялась у пациентов с уровнем с-Мус >40 %, чем у больных с низкой экспрессией транскрипционного фактора (р = 0,015; ОШ 3,9; 95 % доверительный интервал (ДИ) 1,33—11,8).
Частота встречаемости высокой экспрессии pSTAT3 была значительно выше у больных с р53-по-ложительным статусом, чем у обследуемых с низкой экспрессией р53 (р = 0,010; ОШ 2,8; 95 % ДИ 1,1-2,4). При исследовании связи маркера рSyk с экспрессией онкобелков с-Мус, р53 и В^2 статистически значимых межгрупповых различий не обнаружено.
Однако отмечена тенденция к преобладанию частоты встречаемости низкой экспрессии pSyk у больных с экспрессией с-Мус <40 % по сравнению с пациентами, имевшими надпороговый уровень экспрессии онкобел-ка. Высокая экспрессия pSyk несколько чаще отмечалась у обследованных с гиперэкспрессией р53 и В^2, чем у лиц с низкой экспрессией данных онкобелков (р >0,05).
Проанализирована связь экспрессии белка рSTAT3 с выживаемостью больных ДВККЛ, получавших лечение по протоколу R-CHOP (рис. 1). Установлено, что 5-летняя ОВ в группе пациентов с гиперэкспрессией рSTAT3 соответствовала 54,7 % (медиана 50 мес) против 76,6 % (медиана не достигнута) у пациентов с низкой экспрессией белка. У обследованных с высокой экспрессией маркера риск летального исхода был в 2,4 раза выше, чем у пациентов с подпороговым уровнем рSTAT3 (р = 0,015; отношение рисков (ОР) 2,4; 95 % ДИ 1,15-4,87).
Таблица 2. Взаимосвязь pSTAT3, pSyk с экспрессией онкобелков c-Myc, р53, BCL2 Table 2. Relationship of pSTAT3, pSyk with c-Myc, р53, BCL2 oncoproteins expression
Экспрессия онкомарке-ра, %
Oncomarker expression, %
Экспрессия pSTAT3
pSTAT3 expression 1
высокая (n = 53), низкая (n = 47),
n (%) n (%)
high (n = 53), low (n = 47),
n (%) n (%)
Экспрессия pSyk
высокая (n = 32), низкая (n = 68),
n (%) n (%)
high (n = 32), low (n = 68),
n (%) n (%)
*Различия показателей статистически значимы (р <0,05). *Differences are statistically significant (p <0.05).
c-Myc >40 17 (77,3) 5 (22,7) 0,015* 11 (50,0) 11 (50,0) 0,068
<40 36 (46,2) 42 (53,8) 21 (26,9) 57 (73,1)
р53 >30 34 (65,4) 18 (34,6) 0,010* 18 (34,6) 34 (65,4) 0,560
<30 19 (39,6) 29 (60,4) 14 (29,2) 34 (70,8)
BCL2 >50 32 (52,5) 29 (47,5) 0,892 23 (37,7) 38 (62,3) 0,187
<50 21 (53,8) 18 (46,2) 9 (23,1) 30 (76,9)
m 3
В
\D
О
100
80
60
40
20
pSTAT3 >68 % pSTAT3 <68 %
76,6; n = 47
54,7; n = 53
р = 0,015
0 20 40 60
Время наблюдения, мес / Follow-up time, months
100
80
60
40
a s
<и та о. g
<5 ^ a.
е
20
pSTAT3 >68 % pSTAT3 <68 %
72,3; n = 47
52,8; n = 53
р = 0,011
20 40 60
Время наблюдения, мес / Follow-up time, months
cv cv
cv cv
es
Рис. 1. Общая (а) и беспрогрессивная (б) выживаемость больных диффузной В-крупноклеточнойлимфомой в зависимости от экспрессииpSTAT3 Fig. 1. Overall (а) and progression-free (б) survival of diffuse large B cell lymphoma patients depending on рSTAT3 protein expression
В б
О
100
80
60
40
20
pSTAT3+/pSyk+ pSTAT3+/pSyk-pSTAT3-/pSyk+ pSTAT3-/pSyk-
29 р = 0,003
20 40 60
Время наблюдения, мес / Follow-up time, months
100
80
60
40
a s
<и та
О. О
<5 ^
CP
е
20
pSTAT3+/pSyk+ pSTAT3+/pSyk-pSTAT3-/pSyk+ pSTAT3-/pSyk-
cv cv
ev ev
63 р = 0,021
0 20 40 60
Время наблюдения, мес / Follow-up time, months
Рис. 2. Общая (а) и беспрогрессивная (б) выживаемость больных диффузной В-крупноклеточной лимфомой в зависимости от экспрессии pSTAT3/pSyk
Fig. 2. Overall (а) and progression-free (б) survival of diffuse large B cell lymphoma patients with different рSTAT3/рSyk co-expression
а
0
0
0
б
а
0
0
0
При расчете БПВ доля выживших пациентов с гиперэкспрессией рSTAT3 соответствовала 52,8 % (медиана 42 мес) против 72,3 % (медиана не достигнута) больных с низким количеством рSTAT3-положи-тельных опухолевых клеток. При этом риск рецидива и/или рефрактерности к терапии в случаях высокой экспрессии рSTAT3 был в 2,2 раза выше по отношению к обследованным с подпороговым уровнем его экспрессии (р = 0,011; ОР 2,2; 95 % ДИ 1,14-4,41).
Установлено, что 5-летняя ОВ больных с гиперэкспрессией рSyk составила 53,1 % (медиана 47 мес) против 70,6 % (медиана не достигнута) у обследованных с низкой экспрессией маркера. Аналогичная тенденция наблюдалась при анализе БПВ. У пациентов с гиперэкспрессией рSyk данный показатель был в 1,2 раза ниже по сравнению с данными больных, имевших низкую выраженность этого биомаркера в опухолевой ткани: 53,1 и 66,2 % соответственно (р >0,05).
Проанализирована связь сочетанной экспрессии изучаемых маркеров с характером течения ДВККЛ (рис. 2). Вариант pSTAT3+/рSyk+ выявлен у 17 % па-
циентов, одновременно низкая экспрессия обоих белков (рSTAT3—/рSyk—) — у 29 %. Комбинации экспрессии pSTAT3+/рSyk— и pSTAT3—/рSyk+ зарегистрированы в 38 и 16 % наблюдениях соответственно.
В группе обследованных с одновременной гиперэкспрессией белков рSTAT3 и рSyk установлены минимальные показатели ОВ по сравнению с больными, имевшими одновременно низкую экспрессию маркеров: 29,4 % (медиана28 мес) и 82,8 % (медиана не достигнута) соответственно (р <0,001). Полученные данные свидетельствуют о том, что у больных с наличием со-четанной гиперэкспрессии маркеров риск наступления летального исхода в 2,9 раза выше, чем у лиц с другими вариантами их коэкспрессии (р = 0,003; ОР 2,9; 95 % ДИ 1,43—5,85).
Показатели БПВ у пациентов с одновременно высоким уровнем экспрессии белков рSTAT3 и рSyk были значительно ниже, а риск возникновения прогрес-сирования заболевания в 2,3 раза выше, чем у лиц с другими комбинациями совместной экспрессии
cv cv
сч сч
ев
cv cv
ev ev
названных маркеров (р = 0,021; ОР 2,3; 95 % ДИ 1,144,87). Наиболее выраженные различия установлены между больными с рSTAT3+/рSyk+ и обследуемыми, имевшими одновременно низкую экспрессию протеинов (р = 0,001).
Обсуждение
В исследовании установлена связь гиперэкспрессии биомаркера рSTAT3 с высоким содержанием в опухолевых клетках транскрипционных факторов с-Мус и р53. Белок с-Мус контролирует экспрессию генов, кодирующих факторы индукции клеточного цикла, а также блокировку апоптоза, опосредованного белком р53. Выявленная ассоциация, возможно, обусловлена конститутивной активацией рSTAT3, которая способствует бесконтрольной транскрипции онкогена c-Myc и подавлению экспрессии факторов, индуцирующих апоптоз. Высокий уровень р53 в опухолевых клетках ДВККЛ можно объяснить выходом белка из-под контроля естественного ингибитора MDM2, в результате чего происходят замедление его деградации и накопление в субстрате опухоли.
В некоторых исследованиях установлена связь высокой экспрессии рSTAT3 с низкой выживаемостью больных ДВККЛ [13]. Результаты нашей работы подтверждают эти данные. В группе пациентов с надпоро-говым уровнем экспрессии pSTAT3 показатели 5-летней ОВ (54,7 %) и БПВ (52,8 %) были значительно ниже, а риск возникновения летального исхода и про-грессирования заболевания более чем в 2 раза выше по отношению к больным с низкой степенью экспрессии белка. Предположительно снижение продолжительности жизни больных ДВККЛ связано с тем, что рSTAT3 участвует в хронической активации целого спектра генов-мишеней (В^2, ВАХ, CED9, М^1, с-Мус, ци-клины и др.), способствующих устойчивости неопластических клеток к стандартной полихимиотерапии.
Тем не менее в исследовании СЛ. Ок и соавт. (и = 876) ассоциации надпорогового уровня pSTAТ3 с выживаемостью пациентов не установлено [17]. Возможно, расхождение данных связано с использованием другого порогового уровня экспрессии отмеченного белка и метода его расчета, а также иного клона антитела к pSTAТ3. Информация об этих показателях авторами указанной работы не представлена.
Выявлено, что сочетанная гиперэкспрессия изучаемых маркеров связана с неблагоприятным течением заболевания. При этом у пациентов с вариантом коэкспрессии рSTAT3+/рSyk+ зарегистрирована наиболее низкая ОВ (29 %) и БПВ (41 %). При данном сочетании маркеров вероятность наступления неблагоприятного события у больных при анализе ОВ увеличивалась в 2,9 раза, при анализе БПВ — в 2,3 раза по сравнению с другими комбинациями их совместной экспрессии. Полученные результаты указывают на то, что наличие неконтролируемой активации нескольких сигнальных путей способствует генерации более сильного пролиферирующего стимула в опухолевых клетках, а также повышенной устойчивости патологического процесса к проводимому лечению. Исследования коэкспрессии маркеров рSTAT3, рSyk при ДВККЛ не проводились. Таким образом, анализ дифференцированной экспрессии биомаркеров рSTAT3, рSyk на этапе первичной диагностики может способствовать выделению пациентов с заведомо неблагоприятным ответом на стандартную терапию ДВККЛ.
Заключение
Гиперэкспрессия pSTAТ3 ассоциируется с неблагоприятными биологическими характеристиками опухоли и низкой выживаемостью пациентов. Сочетанная надпороговая экспрессия белков рSTAT3 и рSyk связана с более низкими показателями ОВ и БПВ по сравнению с их изолированной экспрессией.
ЛИТЕРАТУРА/REFERENCES
1. Bahar T., Chowdhury Z.Z., Rahman Sh. et al. Clinicopathological correlation with outcome of diffuse large B cell lymphoma: experience in a specialized cancer care centre in Bangladesh.
J Medicine 2021;22(1):3-6. DOI: 10.3329/jom.v22i1.51383.
2. Ванеева Е.В., Росин В.А., Дьяконов Д.А. и др. Оценка прогностического значения экспрессии pSTAT3 при диффузной В-крупноклеточной лимфоме на российской выборке пациентов. Сибирский научный медицинский журнал 2019;39(5):125-33. [Vaneeva E.V., Rosin V.A., Dyakonov D.A. et al. Assessment of the prognostic value
of pSTAT3 expression in diffuse large B-cell lymphoma in a Russian sample
of patients. Sibirskiy nauchnyy meditsin-skiy zhurnal = Siberian Scientific Medical Journal 2019;39(5):125-33. (In Russ.)]. DOI: 10.15372/SMMJ20190515.
3. Mondello P., Mian M. Frontline treatment of diffuse large B-cell lymphoma: Beyond R-CHOP. Hematol Oncol 2019;37(4):333-44.
DOI: 10.1002/hon.2613.
4. Swerdlow S.H., Campo E., Harris N.L. et al. WHO classification of tumours
of haematopoietic and lymphoid tissues. 4th edn. Lyon, France: IARC, 2017.
5. Roschewski M., Staudt L.M., Wilson W.H. et al. Diffuse large B-cell lymphoma treatment approaches in the molecular era. Nat Rev Clin Oncol 2014;11(1):12—23. DOI: 10.1038/nrclinonc.2013.197.
6. Мисюрина А.Е., Кравченко С.К., Обухова Т.Н. и др. Экспрессия белков MYC и BCL2 у больных диффузной В-крупноклеточной лимфомой. Клиническая онкогематология 2015;1(8):44-53. [Misyurina A.E., Kravchenko S.K., Obukhova T.N. et al. Expression of MYC and BCL2 proteins in patients with diffuse large B-cell lymphoma. Klinicheskaya onkogematologiya = Clinical Oncohematology 2015;1(8):44-53.
(In Russ.)].
7. Расторгуев С.М., Королева Д.А., Булыгина Е.С. и др. Клиническое
и прогностическое значение молекулярных маркеров диффузной В-круп-ноклеточной лимфомы. Клиническая
OHKoreMararorna 2019;12(1):95—100. [Rastorguev S.M., Koroleva D.A., Boulygina E.S. et al. Clinical and prognostic value of molecular markers of diffuse large B-cell lymphoma. Klinicheskaya onkogematologiya = Clinical Oncohematology 2019:12(1): 95-100. (In Russ.)]. DOI: 10.21320/2500-2139-201912-1-95-100.
8. Miao Y., Medeiros L., Xu-Monette Z.Y. et al. Dysregulation of cell survival
in diffuse large B cell lymphoma: mechanisms and therapeutic targets. Front Oncol 2019;9:1-17. DOI: 10.3389/fonc.2019.00107.
9. Brachet-Botineau M., Polomski M., Neubauer A. et al. Pharmacological inhibition of oncogenic STAT3 and STAT5 signaling in hematopoietic cancers. Cancers 2020;12:240.
DOI: 10.3390/cancers12010240. 10. Seda V., Mraz M. Eur B-cell receptor signalling and its crosstalk with other pathways in normal and malignant cells.
J Haematol 2014;94(3):193-205. DOI: 10.1111/ejh.12427.
11. Никитин E.A. Передача сигнала через B-клеточный рецептор: механизмы и ингибиторы. Клиническая онко-гематология 2014;7(3):251—63. [Nikitin E.A. B-cell receptor signaling pathway: mechanisms and inhibitors. Klinicheskaya onkogematologiya = Clinical Oncohematology 2014;7(3): 251-63. (In Russ.)].
12. Wossning T., Herzog S., Kohler F. et al. Deregulated Syk inhibits di_erentiation and induces growth factor-independent proliferation of pre-B cells. J Exp Med 2006;203:2829-40.
DOI: 10.1084/jem.20060967.
13. Liu H., Zhu L., Sun C. et al. Clinical significance and prognostic value
of STAT3 expression in patients
with diffuse large B-cell lymphoma treated
with rituximab-CHOP therapy.
Int J Clin Exp Med 2016;9(6):9356-64.
14. Ковригина А.М., Байков В.В. Пато-морфологическая дифференциальная
диагностика первичного миелофибро-за. Учебное пособие. М., СПб.: Новар-тис Фарма, 2014. 11 c. [Kovrigina A.M., Baykov V.V. Pathological differential diagnosis of primary myelofibrosis. Study guide. Moscow, Saint-Petersburg: Novartis Pharma, 2014. 11 р. (In Russ.)].
15. Kolosenko I., Yu Y., Busker S. et al. Identification of novel small molecules that inhibit STAT3-dependent transcription and function. PLoS One 2017;12(6): e0178844. DOI: 10.1371/journal.pone.
16. Fei Y., Yu J., Li Y. et al. Plasma soluble PD-L1 and STAT3 predict the prognosis in diffuse large B cell lymphoma patients. J Cancer 2020;11(23):7001-8.
DOI: 10.7150/jca.47816.
17. Ok C.J., Xu-Monette Z.Y., Tzankov A. et al. STAT3 expression
and clinical inplications in de novo diffuse large B cell lymphoma: a report from the International DLBCL Rituximab-CHOP consortium program. Blood 2013;122:365. DOI: 10.1182/blood.V122.21.365.365.
cv cv
cv
«V
CS
cv cv
cv
«V
Вклад авторов
B.А. Росин, Е.В. Ванеева: разработка концепции и дизайна исследования, сбор и обработка данных, анализ и интерпретация данных, написание статьи;
Д.А. Дьяконов: разработка концепции и дизайна исследования, написание статьи;
C.В. Самарина: предоставление клинических данных;
И.В. Парамонов: административная поддержка, обзор публикаций по теме статьи. Authors' contributions
V.A. Rosin, E.V. Vaneeva: concept and design development, data collection, data analysis and interpretation, article writing;
D.A. Dyakonov: concept and design development, article writing; S.V. Samarina: provision of clinical data;
I.V. Paramonov: administrative support, review of publications on the article's topic.
ORcID авторов / ORcID of authors
B.А. Росин / V.A. Rosin: https://orcid.org/0000-0003-2054-2870
Д.А. Дьяконов / D.A. Dyakonov: https://orcid.org/0000-0001-8688-1344
C.В. Самарина / S.V. Samarina: https://orcid.org/0000-0001-8639-719X
конфликт интересов. Авторы заявляют об отсутствии конфликта интересов. conflict of interest. The authors declare no conflict of interest.
Финансирование. Исследование проведено при поддержке ФГБУН «Кировский научно-исследовательский институт гематологии и переливания крови Федерального медико-биологического агентства».
Financing. The study was performed with the support of Kirov Research Institute of Hematology and Blood Transfusion of the Federal Medical and Biological Agence.
Соблюдение прав пациентов и правил биоэтики
Протокол исследования одобрен локальным этическим комитетом ФГБУН «Кировский научно-исследовательский институт гематологии и переливания крови Федерального медико-биологического агентства». Протокол № 31 от 27.10.2021. Все пациенты подписали информированное согласие на участие в исследовании. compliance with patient rights and principles of bioethics
The study protocol was approved by the local ethics committee of Kirov Research Institute of Hematology and Blood Transfusion of the Federal Medical
and Biological Agence. Protocol No. 31 dated 27.10.2021.
All patients gave written informed consent to participate in the study.
Статья поступила: 06.12.2021. Принята к публикации: 28.02.2022. Article submitted: 06.12.2021. Accepted for publication: 28.02.2022.
