CC BY
7
Рациональная Фармакотерапия в Кардиологии 2023;19(3):222-229
DOI:10.20996/1819-6446-2023-2904
ISSN 1819-6446 (Print)
ISSN 2225-3653 (Online)
РОССИЙСКОЕ
КАРДИОЛОГИЧЕСКОЕ
ОБЩЕСТВО
ОРИГИНАЛЬНЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ
Ассоциация полиморфных вариантов генов СУР2С19, Р2КУ12, ^В3, 1Тв.А2 и eNOS3 с высокой остаточной реактивностью тромбоцитов на фоне приема клопидогрела и ацетилсалициловой кислоты в разные сроки инфаркта миокарда
Пронько Т. П.*, Снежицкий В. А., Степуро Т. Л., Копыцкий А. В.
Гродненский государственный медицинский университет, Гродно, Республика Беларусь
Цель. Изучение ассоциации полиморфных вариантов G681A (*2) гена CYP2C19, И1/И2 гена P2RY12, T1565Cгена ITGB3, С807Тгена ITGA2 и П86€гена eNOS3 с высокой остаточной реактивностью тромбоцитов (ВОРТ) к клопидогрелу и ацетилсалициловой кислоте (АСК) в разные сроки инфаркта миокарда (ИМ).
Материал и методы. Обследовано 400 пациентов с ИМ в возрасте от 31-74 лет, 317 (79,3%) мужчин и 83 (20,7%) женщины. Данные исследований: агрегации тромбоцитов, проведенной в 1-2-е, 12-14-е и 28-30-е сутки ИМ, и генотипирования, выполненного методом полимеразной цепной реакции, проанализированы с использованием программы БТАТ1БТ1СА 10.0.
Результаты. Выявлены различия в индуцированной агрегации тромбоцитов ADP-test 1-3 в зависимости от полиморфизма G681A гена CYP2C19, ADP-test 1 в зависимости от полиморфизма И1/И2 гена P2RY12, ADP-test 2 в зависимости от полиморфизма T1565Cгена ITGB3, АБРНей 1 в зависимости от полиморфизма T786Cгена eNOS. У носителей аллеля 681А гена CYP2C19 риск развития ВОРТ к клопидогрелу выше, по сравнению с носителями аллеля G681 на протяжении всего периода наблюдения: на 1-2-е сутки ИМ отношение шансов (ОШ) 1,8 (1,14-2,88), р=0,012, на 12-14-е сутки ИМ ОШ 1,7 (1,08-2,68), р=0,023 и на 28-30-е сутки ИМ ОШ 2,3 (1,42-3,81), р=0,0008. У носителей генотипа АА гена CYP2C19 риск развития ВОРТ к клопидогрелу выше, по сравнению с носителями генотипа GG, исходно ОШ 6,5 (1,16-36,4), р=0,033, на 28-30-е сутки ИМ ОШ 7,8 (1,26-48,0), р=0,027. У носителей локуса N2 гена P2RY12 риск развития ВОРТ к клопидогрелу на 1-2-е сутки ИМ выше, по сравнению с носителями локуса Н1 (ОШ 1,5 (1,02-2,22), р=0,039). У носителей аллеля 786C гена eNOS3 риск развития ВОРТ к АСК на 1-2-е сутки ИМ выше, по сравнению с носителями аллеля Т786 (ОШ 1,4 (1,02-1,96), р=0,036). У носителей гаплотипов минорных аллелей генов CYP2C19 + 1ТвА2 + P2RY12 + eNOS (ОШ 3,9 (1,13-13,65), р=0,032) и генов CYP2C19 + 1ТвА2 + eNOS (ОШ 5,1 (1,72-14,96), р=0,0032) риск развития ВОРТ к двойной антитромбоцитарной терапии (ДАТТ) на 28-30-е сутки ИМ выше, по сравнению с остальной выборкой пациентов.
Заключение. У пациентов с ИМ выявлена ассоциация ВОРТ к клопидогрелу с полиморфизмом G681A гена CYP2C19 в течение всего периода наблюдения, с полиморфизмом Н1/Н2 гена P2RY12 в первые сутки ИМ, с полиморфизмом T1565C гена ITGB3 на 10-12-е сутки ИМ, и ассоциация ВОРТ к АСК с полиморфизмом T786C гена eNOS в первые сутки ИМ. Гаплотипы минорных аллелей генов CYP2C19 + 1ТвА2 + P2RY12 + eNOS и генов CYP2C19 + 1Тв.А2 + eNOS ассоциировались с более высоким риском развития ВОРТ к ДАТТ на 28-30-е сутки ИМ.
Ключевые слова: высокая остаточная реактивность тромбоцитов, инфаркт миокарда, полиморфизмы генов СУР2С19, Р2НУ12, ПвВЗ, 1ТвА2, N053.
Для цитирования: Пронько Т. П., Снежицкий В. А., Степуро Т. Л., Копыцкий А. В. Ассоциация полиморфных вариантов генов CYP2C19, P2RY12, ^В3, 1Тв.А2 и eNOS3 с высокой остаточной реактивностью тромбоцитов на фоне приема клопидогрела и ацетилсалициловой кислоты в разные сроки инфаркта миокарда. Рациональная Фармакотерапия в Кардиологии. 2023;19(3):222-229. DOI:10.20996/1819-6446-2023-2904. EDN JRFHTY
Association of polymorphic variants of CYP2C19, P2RY12, ITGB3, ITGA2 and eNOS3 genes with high residual platelet reactivity while taking clopidogrel and acetylsalicylic acid at different terms of myocardial infarction
Pronko T. P.*, Snezhitskiy V. A., Stepuro T. L., Kapytski A. V. Grodno State Medical University, Grodno, Belarus
Aim. Study of the association of polymorphic variants of CYP2C19 (G681A), P2RY12 (H1/H2), ITGB3 (T1565C), ITGA2 (C807T), eNOS3 (T786C) genes with high residual platelet reactivity (HRPR) to clopidogrel and acetylsalicylic acid (ASA) at different terms of myocardial infarction (MI).
Material and methods. The study included 400 patients with MI aged 31-74 years, 317 (79,3%) men and 83 (20,7%) women. Platelet aggregation performed on days 1-2, 12-14 and 28-30 of MI, and genotyping by the polymerase chain reaction were analyzed using the STATISTICA 10.0 program. Results. Differences were found in ADP-test 1-3 depending on the CYP2C19(G681A) polymorphism, ADP-test 1 depending on the P2RY12(H1/H2)polymorphism, ADP-test 2 depending on the ITGB3 (T1565C) polymorphism, ASPI-test 1 depending on the eNOS (T786C) polymorphism. The risk of HRPR to clopidogrel is higher in 681A CYP2C19allele carriers compared to the G681 carriers throughout the entire observation period: initially odds ratio (OR) of 1,8 (1,14-2,88), p=0,012, on days 12-14 of MI, OR of 1,7 (1,08-2,68), p=0,023 and on days 28-30 of MI, OR of 2,3 (1,42-3,81), p=0,0008. The risk of HRPR to clopidogrel is higher in AA CYP2C19 genotype carriers compared to GG genotype carriers, on days 1-2 of MI (OR 6,5 (1,16-36,4), p=0,033), on days 28-30 of MI (OR 7,8 (1,26-48,0), p=0,027). The risk of HRPR to clopidogrel on days 1-2 of MI is higher in H2 P2RY12 locus carriers compared to H1 locus carriers (OR 1,5 (1,02-2,22), p=0,039). The risk of HRPR to ASA on days 1-2 of MI is higher in the 786C eNOS3 allele carriers compared to T786 allele carriers (OR 1,4 (1,02-1,96), p=0,036). Carriers of haplotypes of minor alleles of CYP2C19 + ITGA2 + P2RY12 + eNOS genes (OR 3,9 (1,13-13,65), p=0,032) and CYP2C19 + ITGA2 + eNOS genes (OR 5,1 (1,7214,96), p=0,0032) have higher risk of HRPR to dual antiplatelet therapy (DAPT) on days 28-30 of MI compared to the rest of patients.
Conclusion. The association of HRPR to clopidogrel with the CYP2C19 (G681A) polymorphism was found during the entire observation period, with the P2RY12 (H1/H2) polymorphism on days 1-2 of MI, with the ITGB3 (T1565C) polymorphism on days 10-12 of MI. The association of HRPR to ASA with eNOS (T786C) polymorphism was found on days 1-2 of MI. Minor allele haplotypes of the CYP2C19 + ITGA2 + P2RY12 + eNOS genes and CYP2C19 + ITGA2 + eNOS genes were associated with a higher risk of developing HRPR to DAPT on days 28-30 of MI.
Keywords: high residual platelet reactivity, myocardial infarction, CYP2C19, P2RY12, ITGB3, ITGA2, eNOS3 gene polymorphisms.
For citation: Pronko T. P., Snezhitskiy V.A., Stepuro T. L., Kapytski A. V. Association of polymorphic variants of CYP2C19, P2RY12, ITGB3, ITGA2 and eNOS3 genes with high residual platelet reactivity while taking clopidogrel and acetylsalicylic acid at different terms of myocardial infarction. Rational Pharmacotherapy in Cardiology 2023;19(3):222-229. DOI:10.20996/1819-6446-2023-2904. EDN JRFHTY
Corresponding Author (Автор, ответственный за переписку): tanya_pronko@mail.ru
Received/Поступила: 31.03.23
Review received/Рецензия получена: 27.04.2023
Accepted/Принята в печать: 26.06.2023
Введение
Последнее время большое внимание в литературе уделяется генетическим аспектам тромбообра-зования. Есть данные о возможной роли в развитии резистентности к ацетилсалициловой кислоте (АСК) полиморфных вариантов генов тромбоцитарных рецепторов фибриногена (ТОВ3) Т1565С, коллагена (ITGA2) С807Т, а также гена эндотелиальной синтазы оксида азота (eNOS3) Т786С [1, 2]. Роль в развитии вариабельности ответа к клопидогрелу принадлежит полиморфным вариантам генов тромбоцитарных пуринергических (Р2ЯУ12) Н1/Н2 рецепторов, рецепторов фибриногена (ТОВ3) Т1565С и коллагена (ТОА2) С807Т, а также гена eNOS3 (Т786С) и гена изофермента СУР2С19 (G681A) [1-3]. Очевидно, что влияние полиморфных вариантов некоторых генов на активность тромбоцитов и развитие высокой остаточной реактивности тромбоцитов (ВОРТ) / резистентности к двойной антитромбоцитарной терапии (ДАТТ) АСК и клопидогрелом может иметь определенную вариабельность в зависимости от конкретного региона и популяции. С другой стороны, индивидуальные генетические детерминанты имеют ограниченное клиническое значение, а их комбинированный эффект делает возможной стратификацию групп людей с высоким и низким риском развития тромботических осложнений. Поэтому изучение вклада генетических факторов в формировании ответа на АСК и клопидогрел позволит индивидуализировать подход к выбору и режиму дозирования антитромбоцитарных лекарственных средств, что повысит эффективность антитромбоцитарной терапии и снизит риск развития сердечно-сосудистых событий у пациентов с острым коронарным синдромом (ОКС).
Цель исследования - изучение ассоциации полиморфных вариантов G681A (*2) гена СУР2С19, Н1/Н2 гена Р2НУ12, Т1565Сгена ТОВ3, С807Тгена ТОА2 и Т786С гена eNOS3 с ВОРТ к клопидогрелу и АСК в разные сроки инфаркта миокарда (ИМ).
Материал и методы
В исследование включено 400 пациентов с ИМ европеоидной расы в возрасте от 31 года до 74 лет, средний возраст 58,0 [52,0; 65,0] лет, 317 (79,3%) мужчин и 83 (20,7%) женщины. Пациенты проходили обследование и лечение на базе Гродненского областного клинического кардиологического центра и реабилитацию на базе Гродненской областной клинической больницы медицинской реабилитации. Из них 322 пациента с Q-ИМ и 78 человек с не^-ИМ, 29 человек (7,2%) подвергались тромболитической терапии (ТЛТ), у 98 человек (24,5%) была выполнена ТЛТ, а в дальнейшем - процедура отсроченного чрескожного коронарного вмешательства (ЧКВ), 239 пациентам (59,8%) было выполнено первичное ЧКВ, 34 пациента (8,5%) были пролечены консервативно. Самыми частыми факторами риска сердечно-сосудистых заболеваний среди исследуемых лиц были артериальная гипертензия 96,8%, гиперхоле-стеринемия 74,5%, курение 65,8%, отягощенная по сердечно-сосудистым заболеваниям наследственность 58,0%, ожирение 32,5%, сахарный диабет 13,0%. В прошлом перенесенный ИМ был у 15,0% пациентов.
Исследование было выполнено в соответствии со стандартами надлежащей клинической практики и принципами Хельсинкской декларации. Все обследуемые подписывали информированное согласие на участие в исследовании, протокол которого был одобрен комитетом по биомедицинской этике Гродненского государственного медицинского университета №3 от 13.01.2016.
Критерии включения в исследование: наличие ИМ не более двухдневной давности, лица обоего пола, информированное согласие на участие в исследовании.
Критерии невключения: ИМ более чем двухдневной давности, наличие фибрилляции/трепетания предсердий, хроническая сердечная недостаточность стадии выше Н11А, наличие сопутствующих
острых воспалительных и онкологических заболеваний, активное внутренние кровотечение, анемии различного генеза, количество тромбоцитов менее 150х109/л, выраженная почечная и печеночная недостаточность, отказ от участия в исследовании.
Пациенты получали терапию, включающую АСК 75 мг/сутки («Аспикард», Борисовский ЗМП, Беларусь), клопидогрел (нагрузочная доза 300 мг, поддерживающая - 75 мг/сутки; 335 человек получали «Клопидогрел» Белмедпрепараты, Беларусь, 65 человек - «Плавикс», Санофи-Авентис, Франция), низкомолекулярные гепарины (эноксапарин), ато-рвастатин (нагрузочная доза 80 мг, с последующим снижением до поддерживающей 20-40 мг), бе-та-блокаторы (бисопролол 5-10 мг, метопролол 50100 мг), ингибиторы ангиотензинпревращающего фермента (лизиноприл 5-20 мг, рамиприл 5-10 мг), нитраты.
Исследование агрегации тромбоцитов проводилось при поступлении в стационар (не менее, чем через 12 часов от назначения нагрузочной дозы клопидогрела), через 12-14 и 28-30 дней от начала ИМ. Оценку агрегации тромбоцитов проводили при помощи мультиэлектродной агрегометрии на импедансном 5-канальном агрегометре Multiplate (Verum Diagnostica GmbH, Германия) с несколькими индукторами агрегации: с аденозин-5'-дифос-фатом (АДФ) (ADP-test) - для выявления чувствительности к клопидогрелу, с арахидоновой кислотой (ASPI-test) - для выявления чувствительности к АСК, с пептидом-активатором рецептора тромбина (Trap-test) - для отражения потенциальной способности тромбоцитов к агрегации. Показателем, наиболее полно отражающим тромбоцитарную активность, является площадь под агрегационной кривой (area under curve - AUC), представленная в виде единиц (unit - U). ВОРТ при приеме АСК определялась по данным ASPI-test при значении AUC выше 30 U, ВОРТ при приеме клопидогрела определялась по данным ADP-test при значении AUC выше 50 U [4].
Экстракцию геномной ДНК из лейкоцитов цельной крови проводили набором реагентов «ДНК-ЭКСТРАН-1», НПК «Синтол», РФ. Молекулярно-биологическое исследование генотипов полиморфных локусов гена тромбоцитарного рецептора фибриногена ITGB3 (T1565C) rs5918 и гена фер-мента-метаболизатора цитохрома CYP2C19 (G681A) rs4244285, гена тромбоцитарного рецептора коллагена ITGA2 (С807Т) rs1126643 проводили методом полимеразной цепной реакции (ПЦР) c флуоресцентной детекцией в режиме реального времени и с применением реагентов НПК «Синтол», РФ на амплификаторе Rotor Geene, Qiagen, Германия. Определение аллельных вариантов гена АДФ-рецептора тромбоцитов P2RY12 (T744C), rs2046934 проводили методом ПЦР с электрофоретической детекцией в камере трансилюминатора GelDocTM XR+ BioRad, США и использованием комплекта реаген-
тов «ООО НПФ Литех», РФ. ПЦР выполнена на амплификаторе термоциклере Applied Biosystems 2720 Thermal Cycler, США. Выявление полиморфного ло-куса T786C гена eNOS (rs2070744) осуществляли с применением набора реагентов «SNP-экспресс-РВ» «ООО НПФ Литех», РФ.
Статистический анализ данных выполнялся при помощи программы STATISTICA 10.0. Полученные результаты представлены в виде медианы, нижнего и верхнего квартилей (Ме [LQ; UQ]) при распределении, отличающемся от нормального (нормальность распределений проверялась при помощи критерия Лиллиефорса). Две независимые группы сравнивали по численному показателю с помощью U-критерия Манна-Уитни. При сравнении долей (относительных величин) бинарных переменных между 2 или более независимыми группами использовался точный критерий Фишера (ТКФ) либо критерий х2 с поправкой Йетса. При сравнении распределений бинарного показателя при последовательных измерениях использовался критерий Мак-Немара с коррекцией Эдвардса, с поправкой Холма-Бонферрони для pзна-чений. Соответствие распределения генотипов закону Харди-Вайнберга оценивали при помощи критерия X2. Для оценки риска развития ВОРТ при наличии му-тантной гетерозиготы или мутантной гомозиготы, либо при наличии гаплотипов изучаемых полиморфизмов производили оценку отношения шансов (ОШ) при помощи таблиц сопряжённости. Пороговый уровень статистической значимости был принят равным 0,05.
Результаты
В исследованной выборке распределение частот генотипов генов CYP2C19, P2RY12, ITGA2, ITGB3, eNOS3 соответствовало ожидаемому равновесию Харди-Вайнберга (х2 =0,25, р=0,61; х2=0,34, р=0,55; х2=0,07, р=0,79; х2=0,8, р=0,37; х2=0,16, р=0,69 соответственно).
Носители генотипа GG гена CYP2C19 составили 74,8% (n=299), GA - 23,7% (n=95), AA - 1,5% (n=6). Частота встречаемости аллеля G - 86,6%, аллеля A - 13,4%. Носители генотипа H1/H1 гена P2RY12 составили 60,0% (n=240), H1/H2 -34,2% (n=137), H2/H2 - 5,8% (n=23). Частота встречаемости локуса H1 - 77,1%, H2 - 22,9%. Носители генотипа ТТ гена ITGB3 составили 74,5% (n=298), генотипа ТС - 23,0% (n=92), генотипа СС - 2,5% (n=10). Частота встречаемости аллеля Т- 86,0%, аллеля С - 14,0%. Носители генотипа СС гена ITGA2 составили 34,2% (n=137), генотипа СТ - 48,0% (n=192), генотипа ТТ - 17,8% (n=71. Частота встречаемости аллеля С - 58,2%, алле-ля Т- 41,8,0%. Носители генотипа ТТгена eNOS3 составили 30,8% (n=1 23), генотипа TC - 48,5% (n=194), генотипа CC - 20,7% (n=83). Частота встречаемости аллеля T - 55,0%, аллеля C - 45,0%.
Таблица 1. Частота встречаемости высокой остаточной реактивности тромбоцитов у пациентов с инфарктом миокарда
Параметр Частота встречаемости ВОРТ р
Пациенты на 1-2-е сутки ИМ Пациенты на 12-14-е сутки ИМ Пациенты на 28-30-е сутки ИМ
ВОРТ к АСК, n (%) 103 (25,8) 1 55 (38,8) 100 (25,0) p1 <0,001 p2<0,001 p3=0,86
ВОРТ к клопидогрелу, n (%) 90 (22,5) 1 03 (25,8) 68 (17,0) p1 =0,24 p2=0,003 p3=0,074
ВОРТ к АСК+ клопидогрел, n (%) 43 (10,8) 67 (16,8) 41 (10,3) p1 =0,024 p2=0,011 p3=0,9
Всего ВОРТ, n (%) 1 50 (37,5) 191 (47,8) 127 (31,8) p1 =0,002 p2<0,001 p3=0,064
р1 — при сравнении результата на 1-2-е сутки с результатом на 12-14-е сутки; р2 — при сравнении результата на 12-14 с результатом на 28-30-е сутки; р3 — при сравнении результата на 1-2-е сутки с результатом на 28-30-е сутки; ВОРТ — остаточная реактивность тромбоцитов, ИМ — инфаркт миокарда, АСК — ацетилсалициловая кислота -е сутки высокая
Частота встречаемости ВОРТ к АСК, клопидогрелу, ДАТТ в разные сроки ИМ была различной (табл. 1). Обращает на себя внимание высокая встречаемость недостаточной эффективности АСК и клопидогрела у пациентов с ИМ в разные сроки наблюдения.
Для оценки ассоциации полиморфных вариантов исследуемых генов с показателями агрегометрии мы разделили пациентов на 2 подгруппы согласно рецессивной модели: подгруппу А (ПГА) составили носители «диких» генотипов, подгруппу В - носители мутантных гетерозиготы и гомозиготы.
Статистически значимые различия показателей агрегатограммы получены для полиморфного локуса G681A гена CYP2C19 для значений ADP-test1-3, для полиморфного локуса H1/H2 гена P2RY12 для значений ADP-test1 и TRAP-test1, для полиморфного локуса T1565C гена ITGB3 для значений ADP-test2 и для полиморфного локуса T786C гена eNOS для значений ASPI-test1 (табл. 2).
Для дальнейшего анализа пациенты с ИМ были разделены на 4 подгруппы в зависимости от наличия ВОРТ к АСК, клопидогрелу, к обоим препаратам одновременно (см. табл. 1) или отсутствия ВОРТ. Изучалась частота встречаемости аллелей и генотипов исследуемых генов в данных подгруппах. В табл. 3 выделены только статистически значимые различия. Более высокая частота встречаемости ал-леля 681A гена CYP2C19 выявлена у пациентов с ВОРТ к клопидогрелу исходно, на 12-14-е сутки ИМ и на 28-30-е сутки ИМ по сравнению с пациентами без ВОРТ. У пациентов с ВОРТ к клопидогрелу реже встречался генотип GG гена CYP2C19 исходно и на 28-30-е сутки ИМ, и чаще встречался генотип АА гена CYP2C19 исходно и на 28-30-е сутки имелась тенденция, по сравнению с пациентами без ВОРТ. Также выявлена более частая встречаемость локуса H2 гена P2RY12 у пациентов с ВОРТ к клопидогрелу на 1-2-е сутки ИМ, по сравнению с пациентами
без ВОРТ и более частая встречаемость аллеля 786C гена eNOS3 у пациентов с ВОРТ к АСК на 1 -2-е сутки ИМ по сравнению с пациентами без ВОРТ У пациентов с ВОРТ к АСК реже встречался генотип ТТгена eNOS3 на 1-2-е сутки ИМ, по сравнению с пациентами без ВОРТ
У носителей аллеля 681А гена CYP2C19 риск развития ВОРТ к клопидогрелу выше, по сравнению с носителями аллеля в681 на протяжении всего периода наблюдения: на 1-2-е сутки ИМ ОШ 1,8 (1,14-2,88), р=0,012, на 12-14-е сутки ИМ ОШ 1,7 (1,08-2,68), р=0,023 и на 28-30-е сутки ИМ ОШ 2,3 (1,42-3,81), р=0,0008. У носителей генотипа АА гена CYP2C19 риск развития ВОРТ к клопидогрелу выше, по сравнению с носителями генотипа 66, исходно ОШ 6,5 (1,16-36,4), р=0,033, на 28-30-е сутки ИМ ОШ 7,8 (1,26-48,0), р=0,027.
У носителей локуса N2 гена P2RY12 риск развития ВОРТ к клопидогрелу выше, по сравнению с носителями локуса Н1 на 1-2-е сутки ИМ ОШ 1,5 (1,022,22), р=0,039.
У носителей аллеля 786C гена eNOS3 риск развития ВОРТ к АСК выше, по сравнению с носителями аллеля Т786 на 1-2-е сутки ИМ ОШ 1,4 (1,02-1,96), р=0,036.
В результате анализа ассоциации полиморфизмов нами обнаружено мультигенное носительство минорных аллелей 2, 3 и более изучаемых полиморфизмов в гомо- и гетерозиготном состоянии: у 18 человек не было мутаций, у 76 человек встречалась одна мутация, у 147 - комбинация 2 мутаций, 109 - комбинация 3 мутаций, у 44 человек - комбинация 4 мутаций, у 6 человек - 5 мутаций. У пациентов с ВОРТ3 на 28-30-е сутки ИМ чаще встречались следующие гаплотипы минорных аллелей генов CYP2C19 + \TGA2 + P2RY12 + eNOS (у 7 человек с ВОРТ3 против 4 без ВОРТ, ТКФ=0,042) и генов €УР2а9 + \TGA2 + eNOS (у 11 человек с ВОРТ3
Таблица 2. Показатели агрегометрии у пациентов с инфарктом миокарда в подгруппах с различными генотипами
Показатели Полиморфный локус Полиморфный локус Полиморфный локус Полиморфный локус Полиморфный локус G681A Н1/Н2 С807Т Т1565С Т786С
гена СУР2С19 гена P2RY12 гена ТСА2 гена ТСВ3 гена eNOS3
ПГА (GG) n=299 ПГВ (GA+AA) n=101 ПГА (H1/H1) n=240 ПГВ (H1/H2+ H2/H2) n=160 ПГА (СС) n=137 ПГВ (CT+TT) n=263 ПГА (TT) n=298 ПГВ (TC+CC) n=102 ПГА (TT) n=123 ПГВ (TC+CC) n=277
ASPI-test 1, U 19,0 [11,0; 31,0] 18,0 [11,0; 31,0] 19,0 [11,0; 29,5] 18,5 [12,0; 38,5] 19,0 [12,0; 32,0] 18,0 [11,0; 29,0] 18,0 [11,0; 30,0] 20,5 [13,0; 33,0] 17,0 [11,0; 24,0] 20,0 [12,0; 36,0] *
ADP-test 1, U 29,0 [18,0; 45,0] 33,0 [23,0; 52,0] * 28,5 [19,0; 43,0] 33,5 [20,0; 54,0] * 31,0 [19,0; 45,0] 29,0 [19,0; 49,0] 29,0 [18,0; 47,0] 32,5 [21,0; 51,0] 29,0 [17,0; 46,0] 30,0 [20,0; 49,0]
TRAP-test 1, U 76,0 [58,0; 95,0] 79,0 [62,0; 98,0] 72,0 [58,0; 94,0] 81,0 [62,0; 99,5] * 77,0 [62,0; 98,0] 75,0 [57,0; 95,0] 76,0 [58,0; 95,0] 79,0 [63,0; 98,0] 72,0 [55,0; 94,0] 77,0 [61,0; 97,0]
ASPI-test 2, U 26,0 [19,0; 39,0] 26,0 [18,0; 42,0] 26,0 [19,0; 38,5] 27,5 [19,0; 41,0] 26,0 [19,0; 39,0] 26,0 [18,0; 40,0] 25,0 [19,0; 39,0] 29,0 [21,0; 41,0] 26,0 [19,0; 39,0] 26,0 [19,0; 40,0]
ADP-test 2, U 34,0 [25,0; 48,0] 41,0 [28,0; 57,0] * 36,0 [25,0; 51,0] 35,0 [26,5; 52,5] 37,0 [27,0; 52,0] 35,0 [25,0; 49,0] 35,0 [25,0; 48,0] 39,0 [28,0; 57,0] * 36,0 [25,0; 51,0] 35,0 [26,0; 51,0]
TRAP-test 2, U 97,0 [79,0; 116,0] 98,0 [82,0; 115,0] 97,0 [82,0; 115,0] 98,0 [77,0; 119,0] 99,0 [83,0; 117,0] 96,5 [79,0; 115,0] 96,0 [79,0; 115,0] 100,0 [84,0; 116,0] 97,0 [80,0; 116,0] 98,0 [81,0; 116,0]
ASPI-test 3, U 22,0 [17,0; 30,0] 22,0 [17,0; 33,0] 22,0 [16,0; 31,0] 23,0 [18,0; 30,5] 23,0 [16,0; 30,0] 22,0 [17,0; 31,0] 23,0 [17,0; 31,0] 21,0 [17,0; 30,0] 22,0 [16,0; 33,0] 22,5 [17,0; 30,0]
ADP-test 3, U 29,0 [21,0; 43,0] 36,0 [24,0; 51,0]** 31,0 [22,0; 43,0] 30,0 [21,0; 47,0] 31,0 [22,0; 40,0] 30,0 [21,5; 47,5] 30,0 [22,0; 45,0] 32,0 [21,5; 45,5] 28,0 [21,0; 44,0] 32,0 [22,0; 45,5]
TRAP-test 3, U 91,0 [73,0; 105,0] 91,0 [72,0; 106,0] 91,0 [73,0; 105,5] 90,0 [71,5; 107,0] 90,5 [75,5; 106,5] 91,0 [72,0; 105,0] 89,0 [72,0; 104,0] 92,0 [76,0; 107,0] 88,0 [66,0; 108,0] 91,0 [74,0; 105,0]
Данные представлены в виде Ме [25%; 75%].
* — статистически значимые различия между ПГА и ПГВ, где * — р<0,05; ** — р<0,01. Индексы в каждой группе означают: 1 — показатели на 1-2-е сутки инфаркта миокарда, 2 — показатели на 12-14-е сутки инфаркта миокарда, 3 — показатели на 28-30-е сутки инфаркта миокарда.
ПГА — подгруппа А, носители «диких» генотипов, ПГВ — подгруппа В, носители мутантных гетерозиготы и гомозиготы
против 5 без ВОРТ, ТКФ=0,0022). По остальным га-плотипам минорных аллелей исследованных генов статистически значимых различий получено не было. У носителей гаплотипов минорных аллелей генов СУР2С19 + №А2 + P2RY12 + eNOS (ОШ 3,9 (1,1313,65), р=0,032) и генов СУР2С19 + 1ГСА2 + eNOS (ОШ 5,1 (1,72-14,96), р=0,0032) риск развития ВОРТ к ДАТТ на 28-30-е сутки ИМ выше, по сравнению с остальной выборкой пациентов.
Обсуждение
В нескольких исследованиях продемонстрирована ассоциация сниженной эффективности клопидо-грела и носительства аллеля 681А гена СУР2С19 [5, 6] и наши результаты согласуются с этими работами. Однако есть публикации, в которых взаимосвязь полиморфизма G681A гена СУР2С19 с ВОРТ на клопи-догрел не выявлена [7, 8]. Растет число статей, свидетельствующих о связи носительства 681А аллеля гена
СУР2С19 с неблагоприятным прогнозом у пациентов с ИМ, перенесших ЧКВ и получавших клопидогрел, по сравнению с лицами, не являющимися носителями данного аллеля [9, 10]. С учетом редкого использования тикагрелора и прасугрела в Республике Беларусь, генотипирование пациентов с ИМ, имеющих ВОРТ на клопидогрел, может быть оправдано. При выявлении носительства 681А аллеля может быть рекомендована замена клопидогрела на блока-торы пуриновых рецепторов нового поколения, что уменьшит риск возникновения сердечно-сосудистых осложнений у данной категории пациентов. Данная схема находит подтверждение в фармакоэкономиче-ских исследованиях, так, по данным систематического обзора сделан вывод, что применение терапии, основанной на генотипировании СУР2С19, является экономически эффективным подходом при выборе антитромбоцитарных лекарственных средств у пациентов с ОКС, подвергающихся ЧКВ [11].
Литературные данные о влиянии полиморфизма Н1/Н2 гена P2RY12 на эффективность клопидогрела
Таблица 3. Распределение частот аллелей и генотипов изучаемых полиморфных локусов в зависимости от наличия высокой остаточной реактивности тромбоцитов в разные сроки инфаркта миокарда
Группы Генотипы Аллели
Полиморфный локус G681A (*2) гена CYP2C19
GG GA AA G A
без ВОРТ 1 (n=250) 195 (78,0%) 53 (21,2%) 2 (0,8%) 443 (88,6%) 57 (11,4%)
ВОРТ к клопидогрелу 1 (n=90) 60 (66,7%) Х2=3,9 p=0,047 26 (28,9%) 4 (4,4%) ТКФ=0,044 146 (81,1%) 34 (18,9%) Х2=5,8 p=0,017
без ВОРТ 2 (n=209) 161 (77,0%) 46 (22,0%) 2 (1,0%) 368 (88,0%) 50 (12,0%)
ВОРТ к клопидогрелу 2 (n=103) 68 (66,0%) Х2=3,7 p=0,053 32 (31,1%) 3 (2,9%) 168 (81,6%) 38 (18,4%) Х2=4,3 p=0,039
без ВОРТ 3 (n=273) 218 (79,9%) 53 (19,4%) 2 (0,7%) 489 (89,6%) 57 (10,4%)
ВОРТ к клопидогрелу 3 (n=68) 42 (61,8%) Х2=8,9 p=0,003 23 (33,8%) 3 (4,4%) ТКФ=0,056 107 (78,7%) 29 (21,3%) Х2=10,7 p=0,001
Полиморфный локус H1/H2 гена P2RY12
H1/H1 H1/H2 H2/H2 H1 H2
без ВОРТ 1 (n=250) 1 58 (63,2%) 80 (32,0%) 12 (4,8%) 396 (79,2%) 104 (20,8%)
ВОРТ к клопидогрелу 1 (n=90) 46 (51,1%) 37 (41,1%) 7 (7,8%) 129 (71,7%) 51 (28,3%) Х2=3,9 p=0,049
Полиморфный локус T786C гена eNOS3
ТТ ТС СС Т С
без ВОРТ 1 (n=250) 84 (33,6%) 118 (47,2%) 48 (19,2%) 286 (57,2%) 214 (42,8%)
ВОРТкАСК 1 (n=103) 22 (21,3%) Х2=4,6 p=0,032 56 (54,4%) 25 (24,3%) 100 (48,5%) 106 (51,5%) Х2=4,1 p=0,044
х2 — при сравнении с группой без ВОРТ; ТКФ — при сравнении с группой без ВОРТ; индексы в каждой группе означают: 1 — показатели
на 1-2-е сутки инфаркта миокарда, 2 — показатели на 12-14-е сутки инфаркта миокарда, 3 — показатели на 28-30-е сутки инфаркта
миокарда; АСК — ацетилсалициловая кислота, ВОРТ — высокая остаточная реактивность тромбоцитов
являются неоднозначными. Некоторые исследования подтверждают влияние полиморфизма P2RY12 на активацию тромбоцитов и эффективность клопи-догрела у пациентов с ОКС [12, 13], что согласуется с нашими данными, в то время как другие опровергают эти связи [14] или указывают на синергетический эффект с другими генетическими вариациями, такими как СТР2С19 и MDR1 [15, 16]. Исследования по оценке влияния полиморфизма генов на спонтанную агрегацию тромбоцитов малочисленны. Есть работа, в которой у здоровых добровольцев демонстрируется связь между носителями генотипа Н2/Н2 гена P2RY12 и сниженной спонтанной агрегацией тромбоцитов, определяемой при помощи TRAP-test [17], тогда как наши данные демонстрируют противоположные эффекты. Более того, в исследованиях продемонстрировано, что полиморфизм генов может лишь частично объяснить вариабельность ответа на антитромбоци-тарную терапию, некоторые клинические факторы, такие как курение, пол, возраст, воспаление и др. могут оказывать влияние не только на функциональную активность тромбоцитов [18, 19], но и на влияние полиморфизма P2RY12 на течение ишемической болезни сердца [20], поэтому исчезновение ассоциации между полиморфизмом P2RY12 и агрегацией тромбоцитов на более поздних сроках ИМ в нашей работе может быть объяснено большим вкладом других факторов нежели полиморфизм генов.
Результаты исследований о влиянии аллеля 1565С гена ITGB3 на эффективность клопидогрела противоречивые. Есть работы с похожими на наши
результатами, когда у пациентов были более высокие значения индуцированной агрегации тромбоцитов на разные стимулы, но не было разницы в распределении частот аллелей и генотипов в зависимости от наличия ВОРТ [21, 22]. Есть работы, в которых выявлена ассоциация между носительством аллеля 1565С гена ITGB3 и повышенной спонтанной агрегацией тромбоцитов [23], пониженной чувствительностью как к АСК [24-26], так и к клопидогрелу [23, 27]. Однако в большинстве работ сообщается об отсутствии связи между носительством данного аллеля и повышенной функцией тромбоцитов, а также развитием ВОРТ к АСК и клопидогрелу [28, 29].
По данным литературы показана связь между носительством аллеля 807Т гена ^А2 и нечувствительностью тромбоцитов к действию АСК [30, 31], есть ряд работ, в которых такой связи обнаружено не было [32, 33], что согласуется с нашими результатами. Более того, встречаются работы, в которых показано, что носительство аллеля 807Т гена ^А2 связано с уменьшением спонтанной агрегации тромбоцитов, выявляемой при помощи TRAP-test [34], что может быть обусловлено снижением перекрёстной активности PAR-рецепторов тромбоцитов.
Согласно публикациям, носители генотипа 786СС демонстрируют повышенную степень индуцированной агрегации тромбоцитов на фоне приема клопидогрела и препаратов АСК при стабильной ишемической болезни сердца [35]. Есть работы, показывающие подобные нашим результаты, где выявлена связь аллеля 786С гена e-NOS3 с ВОРТ на прием АСК
у пациентов с ОКС [3]. Однако работы по данному вопросу малочисленны, и требуются дополнительные исследования.
Ограничения исследования
Исследование было одноцентровым, что могло оказать влияние на мощность полученных результатов.
Заключение
У пациентов с ИМ выявлена ассоциация ВОРТ к клопидогрелу с полиморфизмом G681A гена СУР2С19 в течение всего периода наблюдения, с полиморфизмом Н1/Н2 гена P2RY12 в первые сутки ИМ, с полиморфизмом Т1565Сгена ITGB3 на 10-12-е сутки ИМ, и ассоциация ВОРТ к АСК с полиморфизмом Т786С гена eNOS в первые сутки ИМ. Гаплотипы минорных аллелей генов СУР2С19 + ^А2 + P2RY12
References/Литература
1. Kropacheva ES. Pharmacogenetics of antithrombotic drugs: status update on the problem. Atherothrombosis. 2018;(2):115-29 (In Russ.) [Кропачева Е.С. Фармакогенетика антитромботических препаратов: современное состояние проблемы. Атеротромбоз. 2018;(2):115-29]. DOI:10.21518/2307-1109-2018-2-115-129.
2. Strisciuglio T, Franco D, Di Gioia G, et al. Impact of genetic polymorphisms on platelet function and response to anti platelet drugs. Cardiovasc Diagn Ther. 2018;8(5):610-20. D0I:10.21037/cdt.2018.05.06.
3. Fatini C, Sticchi E, Bolli P, et al. eNOS gene influences platelet phenotype in acute coronary syndrome patients on dual antiplatelet treatment. Platelets. 2009;20(8):548-54. D0I:10.3109/09537100903337401.
4. Calatzis A, Spannagl M, Loreth R. Multiplate® platelet function analysis — application and interpretation. V2.0/07.2007. Monachium, Germany: Dynabyte Medical; 2007.
5. Jarrar M, Behl S, Manyam G, et al. Cytochrome allelic variants and clopidogrel metabolism in cardiovascular diseases therapy. Mol Biol Rep. 2016;43(6):473-84. D0I:10.1007/s11033-016-3983-1.
6. Huang S, Yang S, Ly S, et al. Clinical non-effectiveness of clopidogrel use for peripheral artery disease in patients with CYP2C19 polymorphisms: a systematic review. Eur J Clin Pharmacol. 2022;78(8):1217-25. D0I:10.1007/s00228-022-03346-7.
7. Pare G, Mehta SR, Yusuf S, et al. Effects of CYP2C19 genotype on outcomes of clopidogrel treatment. N Engl J Med. 2010;363(18):1704-14. D0I:10.1056/ NEJMoa1008410.
8. Chang R, Zhou W, Ye Y, et al. Relationship between CYP2C19 polymorphism and clopidogrel resistance in patients with coronary heart disease and ischemic stroke in China. Genet Res (Camb). 2022;2022:1901256. D0I:10.1155/ 2022/1901256.
9. Chernov AA, Mirzaev KB, Sychev DA. The first meta-analysis of domestic pharmacogenetic studies of clopidogrel. Pharmacogenetics and Pharmaco-genomics. 2015;(2):19-23 (In Russ.) [Чернов А.А., Мирзаев К. Б., Сычёв Д. А. Первый мета-анализ отечественных фармакогенетических исследований клопидогрела. Фармакогенетика и Фармакогеномика. 2015;(2):19-23].
10. Kantemirova BI, 0rlova EA, Polunina 0S, et al. Pharmacogenetic bases of individual sensitivity and personalized administration of antiplatelet therapy in different ethnic groups. Pharmacy & Pharmacology. 2020;8(6):392-404 (In Russ.) [Кантемирова Б.И., Орлова Е. А., Полунина О. С., и др. Фармакогенетические основы индивидуальной чувствительности и персонализированного назначения антиагрегантной терапии в различных этнических группах. Фармация и фармакология. 2020;8(6):392-404]. D0I:10.19163/2307-9266-2020-8-6-392-404.
11. AlMukdad S, Elewa H, Al-Badriyeh D. Economic evaluations of CYP2C19 genotype-guided antiplatelet therapy compared to the universal use of antiplatelets in patients with acute coronary syndrome: a systematic review. J Cardiovasc Pharmacol Ther. 2020;25(3):201-11. D0I:10.1177/1074248420902298.
12. Nie XY, Li JL, Zhang Y, et al. Haplotype of platelet receptor P2RY12 gene is associated with residual clopidogrel on-treatment platelet reactivity. J Zhejiang Univ Sci B. 2017;18(1):37-47. D0I:10.1631/jzus.B1600333.
+ eNOS и генов CYP2C19 + ITGA2 + eNOS ассоциировались с более высоким риском развития ВОРТ к ДАТТ на 28-30-е сутки ИМ. Носительство данных полиморфизмов может быть фактором риска развития тром-ботических осложнений у пациентов с ИМ ввиду снижения эффективности антитромбоцитарной терапии.
Отношения и Деятельность. Нет.
Relationships and Activities. None.
Финансирование. Исследование проведено при поддержке Гродненского государственного медицинского университета и ГНТП «Новые методы оказания медицинской помощи 2016-2020 годы», подпрограмма «Болезни системы кровообращения», договор 02.1 1/2017.
Funding. The study was supported by the Grodno State Medical University, SSTP "New methods of providing medical care 2016-2020", subprogram "Diseases of the circulatorysystem", agreement 02.1 1/2017.
13. Idrissi HH, Hmimech W, Khorb NEl, et al. Does i-T744C P2Y12 polymorphism modulate clopidogrel response among moroccan acute coronary syndromes patients? Genet Res Int. 2017;2017:9532471. D0I:10.1155/2017/9532471.
14. Cui G, Zhang S, Zou J, et al. P2Y12 receptor gene polymorphism and the risk of resistance to clopidogrel: a meta-analysis and review of the literature. Adv Clin Exp Med. 2017;26(2):343-49. D0I:10.17219/acem/63745.
15. Tang XF, Zhang JH, Wang J, et al. Effects of coexisting polymorphisms of CYP2C19 and P2Y12 on clopidogrel responsiveness and clinical outcome in patients with acute coronary syndromes undergoing stent-based coronary intervention. Chin Med J (Engl). 2013;126(6):1069-75.
16. Danielak D, Pawlak K, Gtowka F, et al. Influence of genetic and epigenetic factors of P2Y12 receptor on the safety and efficacy of antiplatelet drugs. Cardiovasc Drugs Ther. 2022. D0I:10.1007/s10557-022-07370-8. 0nline ahead of print.
17. 0estreich JH, Steinhubl SR, Ferraris SP, et al. Effect of genetic variation in P2Y12 on TRAP-stimulated platelet response in healthy subjects. J Thromb Thrombolysis. 2014;38(3):372-79. D0I:10.1007/s11239-014-1058-5.
18. Ge H, Zhou Y, Liu X, et al. Relationship between plasma inflammatory markers and platelet aggregation in patients with clopidogrel resistance after angioplasty. Angiology. 2012;63(1):62-6. D0I:10.1177/0003319711406432.
19. Gasperi V, Catani MV, Savini I. Platelet responses in cardiovascular disease: sex-related differences in nutritional and pharmacological interventions. Cardiovasc Ther. 2020;2020:2342837. D0I:10.1155/2020/2342837.
20. Cavallari U, Trabetti E, Malerba G, et al. Gene sequence variations of the platelet P2Y12 receptor are associated with coronary artery disease. BMC Med Genet. 2007;8(59):1-6. D0I:10.1186/1471-2350-8-5.
21. Floyd CN, Ferro A, Warner TD. Expression of the PlA2 allele of glycoprotein IIIa and its impact on platelet function. JRSM Cardiovasc Dis. 2015;4: 2048004015610252. D0I:10.1177/2048004015610252.
22. Semashchenko KS, Mongush TS, Kosinova AA, et al. Study the association of nucleotide polymorphisms in platelet receptor and cytochrome P450 genes with the development of resistance to antiplatelet drugs in patients with coronary artery disease. Rational Pharmacotherapy in Cardiology. 2022;18(3):289-96 (In Russ.) [Семащенко К.С., Монгуш Т. С., Косинова А. А., и др. Изучение ассоциации нуклеотидных полиморфизмов в генах тромбоцитарных рецепторов и цитохрома Р450 с развитием резистентности к антитромбоцитарным препаратам у пациентов с ишемической болезнью сердца. Рациональная Фармакотерапия в Кардиологии. 2022;18(3):289-96]. D0I:10.20996/1819-6446-2022-06-15.
23. Strambovskaya NN. Platelet functions in healthy persons with genetic polymorphisms GPIAK807T), GPIIIA(T1565С), GPIPaK434T), P2RY12(H1/H2), SELP(G1087A) platelet receptions. Acta Biomedica Scientifica. 2013;94(6):65-70 (In Russ.) [Страмбовская Н. Н. Агрегационная активность тромбоцитов у носителей генетического полиморфизма GPIA (С807Т), GPIIIA (Т1565С), GPIPa (С434Т), P2RY12 (Н1/Н2), SELP (G1087A) тромбоцитарных рецепторов. Бюллетень ВСНЦ СО РАМН. 2013;94(6):65-70].
24. Grinshtein YuI, Kosinova AA, Grinshtein IY, et al. Possible Genetic Predictors of Cardiovascular Events After Coronary Bypass Surgery. Kardiologiia. 2018;58(7):77-84 (In Russ.) [Гринштейн Ю.И., Косинова А. А., Гринштейн И. Ю.,
и др. Возможные генетические предикторы развития сердечно-сосудистых осложнений после коронарного шунтирования. Кардиология. 2018;58(7):77-84]. D0l:10.18087/cardio.2018.7.10148.
25. Karazhanova LK, Zhukusheva ShT, Esimbekova El, et al. The prevalence of polymorphisms of some genes associated with the function of plasma-platelet hemostasis, with aspirin resistance in the kazakh population. Science & Healthcare 2018;20(5):164-71 (In Russ.) [Каражанова Л.К., Жукушева Ш. Т., Есимбекова Э. И., и др. Распространенность полиморфизмов некоторых генов, связанных с функцией плазменно-тромбоцитарного звена гемостаза, при аспиринорезистентности в казахской популяции. Наука и Здравоохранение. 2018;20(5):164-71].
26. Jastrzebska M, Lisman D, Szelepajlo A, et al. Evaluation of platelet reactivity during combined antiplatelet therapy in patients with stable coronary artery disease in relation to diabetes type 2 and the GPIIB/IIIA receptor gene polymorphism. J Physiol Pharmacol. 2019;70(2):175-85. D0I:10.26402/jpp.2019.2.01.
27. Arya V, Mahajan P, Saraf A, et al. Association of CYP2C19, CYP3A5 and GPIIb/ IIIa gene polymorphisms with aspirin and clopidogrel resistance in a cohort of Indian patients with coronary artery disease. Int J Lab Hematol. 2015;37(6):809-18. D0I:10.1111/ijlh.12416.
28. Floyd CN, Ferro A. The PlA1/A2 polymorphism of glycoprotein IIIa in relation to efficacy of antiplatelet drugs: a systematic review and meta-analysis. Br J Clin Pharmacol. 2014;77(3):446-57. D0I:10.1111/bcp.12204.
29. Muslimova EF, Afanasiev SA, Rebrova TYu, et al. Association of ITGB3, P2RY12, and CYP2C19 gene polymorphisms with platelet functional activity in patients with coronary heart disease during dual antiplatelet therapy. Ter Arkhiv. 2017;89(5):74-8 (In Russ.) [Муслимова Э.Ф., Афанасьев С. А., Реброва Т. Ю., и др. Ассоциация полиморфизмов генов ITGB3, P2RY12, CYP2C19 с функциональной активностью тромбоцитов у пациентов с ишемической болезнью сердца на фоне двухкомпонентной антиагре-гантной терапии. Терапевтический Архив. 2017;89(5):74-8]. D0I:10.17116/ terarkh201789574-78.
30. Weng Z, Li X, Li Y, et al. The Association of four common polymorphisms from four candidate genes (C0X-1, C0X-2, ITGA2B, ITGA2) with aspirin insensitivity: a metaanalysis. PLoS 0NE. 2013;8(11):e78093. D0I:10.1371/journal.pone.0078093.
31. Wang H, Sun X, Dong W, et al. Association of GPIa and C0X-2 gene polymorphism with aspirin resistance. J Clin Lab Anal. 2018;32(4):e22331. D0I.10.1002/ jcla.22331.
32. Al-Azzam SI, Alzoubi KH, Khabour 0F, et al. The contribution of platelet glycoproteins (GPIa C807T and GPIba C-5T) and cyclooxygenase 2 (C0X-2G-765C) polymorphisms to platelet response in patients treated with aspirin. Gene. 2013;526(2):118-21. D0I:10.1016/j.gene.2013.04.083.
33. Mukarram 0, Akhtar N, Junaid A, et al. A study into the genetic basis of aspirin resistance in Pakistani patients with coronary artery disease. Pak J Pharm Sci. 2016;29(4):1177-82.
34. Shishkina EA, Khlynova 0V, Vasilets LM, et al. Role of C807T polymorphism of ITGA2 gene of collagen receptor and platelet aggregation activity in patients with arterial hypertension. Kazan Medical Journal. 2019;100(3):386-91 (In Russ.) [Шишкина Е.А., Хлынова О. В., Василец Л. М. и др. Значимость полиморфизма C807T гена рецептора к коллагену ITGA2 и агрегационной активности тромбоцитов у пациентов с артериальной гипертензией. Казанский медицинский журнал. 2019;100(3):386-91]. D0I:10.17816/KMJ2019-386.
35. Muslimova EF, Rebrova TYu, Afanasiev SA, et al. Genotype -786CC of the endothelial nitric oxide synthase gene N0S3 as a factor of adverse coronary heart disease course and increased on-treatment platelet aggregation. Russian Journal of Cardiology. 2017;(10):29-32 (In Russ.) [Муслимова Э.Ф., Реброва Т. Ю., Афанасьев С. А., и др. Генотип -786CC гена эндотелиальной N0-синтазы N0S3 как фактор неблагоприятного течения ишемической болезни сердца и риска повышенной агрегации тромбоцитов на фоне приема антиагрегантов. Российский кардиологический журнал. 2017;(10):29-32]. D0I:10.15829/1560-4071-2017-10-29-32.
Сведения об Авторах/About the Authors Пронько Татьяна Павловна [Tatyana P. Pronko] eLibrary SPIN 5384-1400, ORCID 0000-0003-2126-5246 Снежицкий Виктор Александрович [Viktor A. Snezhitskiy] eLibrary SPIN 1697-0116, ORCID 0000-0002-1706-1243
Степуро Татьяна Леонидовна [Tatsiana L. Stepuro] eLibrary SPIN3053-8474, ORCID 0000-0002-3337-4231 Копыцкий Андрей Витальевич [Andrei V. Kapytski] eLibrary SPIN 5247-4972, ORCID 0000-0002-1862-4300
