Ассоциация полиморфизма гена ADRB2 с морфофункциональными нарушениями у больных гипертрофической кардиомиопатией Текст научной статьи по специальности «Фундаментальная медицина»

Комиссарова С. М.1, Чакова H. Н.2, Крупнова Э. В.2, Михаленко Е. П.2, Чеботарева Н. В.2, Кругленко С. С.2, Арабей А. А.1, Мрочек А. Г.1

АССОЦИАЦИЯ ПОЛИМОРФИЗМА ГЕНА А0ЯВ2 С МОРФОФУНКЦИОНАЛЬНЫМИ НАРУШЕНИЯМИ У БОЛЬНЫХ ГИПЕРТРОФИЧЕСКОЙ КАРДИОМИОПАТИЕЙ

1РНПЦ «Кардиология», г. Минск, Беларусь 2 Институт генетики и цитологии НАН Беларуси, г. Минск, Беларусь

Komissarova S. M.1, Chakova N. N.2, Krupnova E. V.2, Mikhalenko E. P.2, Tchebotareva N. V.2, Kruglenko S. S.2, Arabey A. A.1, Mrochek A. G.1

ASSOCIATION OF ADRB2 GENE POLYMORPHISM WITH MORPHOFUNCTIONAL ALTERATIONS IN PATIENTS WITH HYPERTROPHIC CARDIOMYPATHY

1RSPC «Cardiology», Minsk, Belarus 2 Genetics and Cytology Institute of the NAN of Belarus, Minsk, Belarus

РЕЗЮМЕ

Цель. Анализ ассоциации клинической картины и функциональных нарушений с полиморфизмом гена АЭР!В2 у пациентов, страдающих ГКМП.

Материал и методы. В исследование были включены 89 пациентов с ГКМП (69 мужчин и 20 женщин, средний возраст 46,7±15,7 года), среди них у 56 диагностирована обструктивная форма, у 33 пациентов - необструктивная форма заболевания. В контрольную группу вошли 104 здоровых донора, сопоставимых по возрасту и полу с больными ГКМП.

Оценивали клиническую картину заболевания, определяли эхокардиографические показатели и параметры суточного мониторирования ЭКГ. У всех пациентов проводили анализ полиморфизма гена АОРВ2.

Результаты. Изучена ассоциация клинической картины, структурных и функциональных особенностей миокарда левого желудочка с полиморфизмом гена АЭР!В2 у больных с гипертрофической кардиомиопатией. Выявлено, что комбинация генотипов Агд16гд/С1п27С1п является

SUMMERY

Objective. Analysis of a clinical picture and functional dysfunctions with ADRB2 gene molymorphism in patients with PHCM.

Materials and methods. 89 patients with PHCM were included in the study (69 males and 20 females, mean age 46,7±15,7), among which 56 had been diagnosed with the obstructive form, 33 patients had a non-obstructive form of the disease. The control set included 104 healthy donors adequate in age, and gender with PHCM.

The clinical picture of the disease was assessed, echocardiographic indicators and daily ECG monitoring parameters were specified. The ADRB2 gene polymorphism analysis was made in all patients.

Results. The association of the clinical picture, structural and functional LV myocardial peculiarities with ADRB2 gene polymorphism in patients with PHCM. It was revealed that the combination of Arg16rg/Gln27Gln genotypes is a risk genotype and is associated with the appearance of adverse clinical manifestations of the disease. The combination of Gly16Gly/Glu27Glu genotypes is protective and is

генотипом риска и ассоциируется с возникновением неблагоприятных клинических проявлений заболевания. Комбинация генотипов С1у16С1у/ С1и27С1и является протективной и свидетельствует о благоприятном прогнозе заболевания.

Заключение. Полученные результаты выявили ассоциацию полиморфизма гена АЭР!В2 с клиническими, структурными и функциональными нарушениями у больных с ГКМП, что позволит не только прогнозировать риск возникновения неблагоприятных клинических проявлений заболевания, но и оптимизировать лечение р-адреноблокаторами пациентов с ГКМП.

Ключевые слова: гипертрофическая кардио-миопатия, полиморфизм гена АОР!В2.

Изучена ассоциация клинической картины, структурных и функциональных особенностей миокарда левого желудочка с полиморфизмом гена АЭР!В2 у больных с гипертрофической кар-диомиопатией (ГКМП). Выявлено, что комбинация генотипов Агд16гд/С1п27С1п является генотипом риска и ассоциируется с возникновением неблагоприятных клинических проявлений заболевания. Комбинация генотипов С1у16С1у/С1и27С1и является протективной и свидетельствует о благоприятном прогнозе заболевания.

indicative of favorable prognosis.

Conclusion. The results obtained have revealed the association of the ADRB2 gene polymorphism with clinical, structural and functional dysfunctions in patients with PHCM which will allow making prognoses of adverse clinical manifestations risk and improving p- adrenoblocker treatment of PHCM patients.

Key words: hypertrophic cardiomyopathy, ADRB2 gene polymorphism.

The association of clinical presentation, myocardial structural and functional characteristics with ADRB2 gene polymorphism in patients with hypertrophic cardiomyopathy has been studied.The Arg16rg/Gln27Gln gene combination was found to be risk genotype and is associated with unfavorable clinical manifestations of the disease. Gly 16Gly/ Glu27Glu genotype combination is protective and is indicative of a favorable prognosis of the disease

Контактная информация:

Комиссарова Светлана Михайловна1 вед. науч. сотр., к.м.н.

Чакова Наталья Николаевна2 вед. науч. сотр., к.б.н.

Крупнова Эвелина Вячеславовна2 ст. науч. сотр., к.б.н.

Михаленко Елена Петровна2 науч. сотр., к.б.н.

Чеботарева Наталья Вячеславовна2 м.н.с.

Кругленко Светлана Сергеевна2 Арабей Анастасия Анатольевна1 м.н.с.

Мрочек Александр Геннадьевич Академик 1

1 РНПЦ «Кардиология», ул. РЛюксембург, 110,220036 Минск, Беларусь. Функциональная группа клинической патофизиологии кровообращения. Kom_svet@mail.ru тел. 8 (017) 222-22-35

2 Институт генетики и цитологии НАН Беларуси, ул. Академическая д.27,

220070 Минск, Беларусь. Лаборатория генетики человека. Тел. 8 (017) 284-19-18 АННОТАЦИЯ

Основными факторами, определяющими течение гипертрофической кардиомиопатии (ГКМП), являются мутации в генах белков саркомера [1]. В настоящее время активно ведутся поиски генетических факторов, так называемых генов-мо-дификаторов, которые могут влиять на процесс фенотипической реализации этих мутаций [2]. Установлено, что гены-модификаторы имеют полиморфные аллели (вариации последовательности ДНК), которые кодируют белки с различной функциональной активностью. Идентифицирован ряд генов, претендующих на эту роль. Подтверждено влияние генов ренин-ангиотензин-альдо-стероновой системы (РААС): ангиотензиногена, ангиотензин-превращающего фермента, рецептора ангиотензина II типа 1 и синтетазы альдо-стерона на развитие гипертрофии левого желудочка (ГЛЖ). Большое значение в формирование фенотипических проявлений ГКМП имеет также высокая активность симпатического отдела вегетативной нервной системы (СОВНС). Его активация ведет к развитию ГЛЖ как непосредственно за счет активации рецепторов СОВНС, так и опосредованно за счет активации РААС. Поэтому гены, кодирующие элементы СОВНС, в первую очередь гены адренорецепторов, являются одними из основных генов-модификаторов, которые могут влиять на клиническую картину ГКМП [3].

В настоящее время большое внимание уделяется изучению полиморфизма гена АОРВ2, который находится в области 5д31-32 5-й хромосомы. В сердце р2-АР представлены как в желудочках, так и в предсердиях. В значительном количестве эти рецепторы экспрессируются на мембранах пейсмекерных клеток, что указывает на их важную роль в регуляции ритма сердца. В кодирующей части гена АЭРВ2 выявлено 12 полиморфизмов, 5 из которых приводят к замене аминокислоты: Агд16С1у, С1п27С1и, \Zal34Met, ТИг16411е и Бег220Су5. Все эти маркеры связывают с функциональными свойствами рецептора. В исследовании [4,5] показано влияние полиморфизмов Агд16С1у и С1п27С1и не только на уровень артериального давления, но и развитие гипертрофии ЛЖ.

Целью настоящего исследования был анализ ассоциации клинической картины и функциональных нарушений с полиморфизмом гена

ADRB2 у пациентов, страдающих ГКМП.

МАТЕРИАЛ И МЕТОДЫ

В исследование были включены 89 пациентов с ГКМП (69 мужчин и 20 женщин, средний возраст 46,7±15,7 года), среди них у 56 диагностирована обструктивная форма, у 33 пациентов - не-обструктивная форма заболевания. Семейная форма заболевания выявлена у 26 пробандов, отягощенный анамнез имели 44,3% больных с ГКМП (28,9% сочетание ГКМП и АГ, 15,4% сочетании ГКМП и ИБС). В контрольную группу вошли 104 здоровых донора, сопоставимых по возрасту и полу с больными ГКМП.

Оценивали клиническую картину заболевания, в частности такие параметры, как функциональные классы (ФК) сердечной недостаточности (СН), систолическое (САД) и диастолическое (ДАД) артериальное давление. Определяли следующие эхокардиографические (ЭхоКГ) параметры: толщину миокарда межжелудочковой перегородки (ТМЖП) и задней стенки левого желудочка (ТЗСЛЖ), конечный систолический и диастоличе-ски размеры (КСР и КДР) левого желудочка (ЛЖ), размер левого предсердия (ЛП), наличие обструкции выносящего тракта ЛЖ (ВТЛЖ), индекс массы миокарда (ИММ).

По данным суточного мониторирования ЭКГ анализировались следующие показатели: средняя ЧСС, уд/мин, общее количество желудочковой и суправентрикулярной эктопической активности за сутки, наличие сложных нарушений ритма. Оценивали показатели, характеризующие ишемию миокарда: количество эпизодов ишемии, суммарную длительность ишемии в течение суток, глубину депрессии сегмента ST.

У всех пациентов проводили анализ полиморфизма гена ADRB2. Выделение тотальной ДНК из лейкоцитов периферической крови выполняли методом Mathew [6]. Полиморфизмы A46G (Arg16Gly) и C79G (Gln27Glu) в гене ADRB2 изучали с использованием метода ПЦР-ПДРФ анализа. Последовательности использованных в работе праймеров и условия ПЦР представлены в таблице 1 [7]. Полимеразную цепную реакцию проводили на амплификаторе MyCyclerTM Termal cycler (BIORAD).

Таблица 1. Последовательность праймеров и программа проведения ПЦР

Ген Последовательность праймера Программа проведения ПЦР Размер продукта

ADRB2 F: 5'gaacggcagcgccttcttgctggcaccccat3' 940С-2мин, [940С-30С, 640С-45С, 720С-1мин1 х35 242 п.н.

R: 5'ctgccaggcccatgaccagatcag3' ИКЛ0В( 720С-7мин

Таблица 1. Распределение частот встречаемости различных генотипов Р2-адренорецептора у больных ГКМП

Генотипы 16(Arg> Gly) 27(Gln>Glu) Количество больных ГКМП

n %

Arg16Arg 21 23,3

Arg 16Gly 44 48,9

Glyl 6Gly 25 27,8

Аллель Arg 16 86 47,8

Аллель Gly 16 94 52,2

Gln27Gln 32 35,5

Gln27Glu 46 51,1

Glu27Glu 12 13,3

Аллель Gln27 110 61,1

Аллель Glu27 70 39,9

Амплифицированный фрагмент длиной 242 п.н. подвергали рестриктному расщеплению эндонуклеазами Ecol301 (Fermentas) и Satl (Fermentas) для выявления точечных нуклеотидных замен A46G и C79G, соответственно. Продукты амплификации фракционировали в 2,5% агарозном геле с бромистым этидием и визуали-ровали в УФ-свете (рис. 1).

Статистическая обработка материала проводилась с использованием программного пакета «Statistica for Windows 6.0» и «SPSS Statistics 17». Об ассоциации генотипов с возникновением клинических проявлений ГКМП судили по величине отношения шансов (OR), которую рассчитывали по стандартной формуле OR=(A/B)/(C/D), где А и В - количество больных, имеющих и не имеющих мутантный генотип, соответственно, и С и D - количество человек в контрольной группе, имеющих и не имеющих мутантный генотип. OR указан с 95%-ным доверительным интервалом (95% CI) [8]. Для сравнения значений клинических показателей между группами пациентов с различными генотипами использовали t-критерий Стьюдента.

РЕЗУЛЬТАТЫ И ОБСУЖДЕНИЯ

На первом этапе работы была проанализирована частота встречаемости различных генотипов Агд 16С1у и С1п27С1и р2-АР у обследованных нами пациентов с ГКМП. Распределение частот встречаемости различных генотипов р2-АР представлено в таблице 1.

В литературе описано неравновестное сцепление между 16 и 27 кодонами [9], т.е. неслучайное распределение частот аллелей по этим сайтам, которое может быть обусловлено не только тесным генетическим сцеплением генов, но и наличием адаптивного преимущества конкретной комбинации аллелей. Носители гомозиготного генотипа СІи27СІи практически всегда имеют гомозиготный генотип С1у16С1у, гаплотип Агд16С1и27 встречается чрезвычайно редко (менее 1% в популяции). В нашем исследовании все индивидуумы, гомозиготные по СІи27СІи, были гомозиготны по С1у16С1у (рис. 1), комбинации генотипов Агд16С1у/С1и27С1и и Агд16Агд/С1и27С1и отсутствовали.

GG GG AG АА AG АА М GC GC М GG СС GG

А) Б)

Рисунок 1. Электрофореграмма фрагментов рестрикции гена ß2-AP

А) электрофореграмма гидролиза эндонуклеазой Ecol301 (Styl);

Б) электрофореграмма гидролиза эндонуклеазой Satl (Fnu4HI).

Таблица 3. Клинические и эхокардиографические показатели у больных ГКМП с различными

генотипами 02-АР

Генотип Arg16Gly Генотип Gln27Glu

Показатели Arg/Arg Arg/Gly Gly/Gly Gln/GIn Gln/Glu Glu/Glu

ФК сн, п (%) 1 II III 9 (26,0%) 12(31,0%) 8 (67,0%) 16(47,0%) 16(41,0%) 4 (33,0%) 9 (26,0%) 11 (28,0%) 2(17,0%) 13 (38,0%) 15 (38,0%) 7 (58,0%) 18(53,0%) 19(49,0%) 3 (25,0%) 3 (9,0%) 5 (13,0%)

ЧСС, уд/мин 68,0±4,42 70,2±2,88 69,6±2,38 67,1 ±3,02 72,2±2,85 65,8±2,66

САД, мм рт. ст. 134,3±3,8 131,3±2,9 130,6±3,35 133,0±3,06 130,3±2,54 134,5±6,89

ДАД, мм рт.ст. 85,5±2,56 81,9± 1,65 83,0± 1,91 83,9± 1,91 82,4± 1,57 83,6±3,57

ЯП, см 44,5± 1,55 44,1 ±0,97 43,7± 1,21 44,2± 1,21 44,3±0,91 43,3±2,04

ТМЖП, см 19,3±0,80 20,1 ±0,65 18,7±0,80 19,1 ±0,63 19,9±0,68 19,3±0,87

КДР, см 51,4±2,22 50,3±0,90 50,9±1,00 50,9±1,70 51,0±0,81 49,1 ±1,75

КСР, см 32,4±2,12 31,0± 1,09 30,8± 1,14 31,9± 1,64 31,1 ±0,98 30,9±2,30

ФВ, % 61,4±1,91 5 9,8± 1,49 64,1 ±2,03 62,5±1,71 60,3± 1,44 62,1 ±2,98

ИММ, г/м2 182±13,2 174,9±8,8 173,0±10,8 171,0±9,96 186,5±8,74 148±11,4*

ГДВТЛЖ >30 63,5±4,53 61,9±4,48 73,2±7,00 64,87±4,05 65,6±4,78 61,3± 11,39

ГДВТЛЖ <30 15,0±2,58 9,7±1,56 10,2± 1,82 13,6±2,10 10,0± 1,50 9,12±2,51

Е/А 1,25±0,13 1,35±0,10 1,45±0,22 1,28±0,12 1,27±0,09 1,86±0,39

ВИР, мс 118,1 ±6,7 118,1 ±8,2 115,3±10,2 115,33±5,9 121,53±8,9 107,18±6

DT, мс 192±14,5 165,5±6,6 186,2±20,4 190,7±11,6 170,6±11,2 171,3± 16,5

* - значимые различия по критерию t-Стьюдента, р<0,05

Анализ связи клинической картины, гемодина-мических и эхокардиографических показателей с генетическим полиморфизмом р2-АР в 16 и 27 кодонах представлен в таблице 3. Было выявлено, что средние уровни таких показателей, как ЧСС, САД, ДАД, а также величина ЯП, ТМЖП, КДР, КСР, ФВ и ГДВТЛЖ не зависят от генотипа р2-АР в исследуемых кодонах. Достоверные различия наблюдались лишь в отношении показателя ИММ:

у носителей генотипа С1и27С1и среднее значение этого показателя (148,1 ±11,39 г/м2) было ниже, чем у индивидуумов с другими вариантами генотипов, при этом различия с носителями генотипа С1п27С1и были достоверными (1 =2,67, р<0,05). У больных, имеющих комбинацию генотипов Агд16Агд/С1п27С1п, величина ИММ составила 182,0± 13,2 г/м2, тогда как у пациентов с комбинацией генотипов С1у16С1у/С1и27С1и значение это-

Arg16Gly/Gln27Glu

38%

Рис. 1. Распределение частот встречаемости различных комбинаций генотипов 1б(Агд>С1у)

и 27(С1п>С1и) гена 02-АР у больных ГКМП

Таблица 4. Незначимые нарушения ритма сердца по данным суточного мониторирования у

больных ГКМП с различными генотипами 02-АР

Генотип Arg16Gly Генотип Gln27Glu

Показатель Arg/Arg Arg/Gly Gly/Gly Gln/GIn Gln/Glu GIh/GIh

ЖЭ 64,9±21,0* (17 чел.) 26,8±7,6 (35 чел.) 29,6± 12,1 (23 чел.) 53,0±15,0* (11 чел.) 32,3±9,4** (39 чел.) 12,3±3,31 (25 чел.)

нэ 41,1 ±13,4 (19 чел.) 33,1 ±6,9 (37 чел.) 39,4±10,8 (19 чел.) 34,4±9,34 (28 чел.) 33,5±7,0 (37 чел.) 55,2±18,2 (10 чел.)

*- значимые различия по критерию t-Стьюдента, р<0,05

го параметра было 148,1 ±11,39 г/м2.

Выявлено, что у больных с I ФК СН не встречался генотип Arg16Arg, а генотип Gln27Gln встречался реже, чем у пациентов из II и III ФК СН.

У 12,4% пациентов с ГКМП по данным суточного мониторирования ЭКГ были выявлены жизнеугрожающие нарушения ритма: пароксизмы неустойчивой желудочковой тахикардии (ЖТ), частая желудочковая одиночная и групповая экс-трасистолия (ЖЭ), сочетание желудочковой и су-правентрикулярной эктопической активности. У 87,6 % при суточном мониторировании ЭКГ регистрировалась непатологическая желудочковая и суправентрикулярная активность. На основании клинической значимости этих результатов нами были выделены две группы больных ГКМП с различными типами аритмий: 1 группа - клинически значимые аритмии (групповая или одиночная ЖЭ более 300 экстрасистол в сутки, пароксизмальные желудочковые и суправентрикулярные нарушения ритма), 2 группа - незначимые желудочковые и суправентрикулярные аритмии (одиночные экстрасистолы до 300 в сутки), не имеющие клинического значения и не влияющие на прогноз. В этих группах определяли влияние генотипов в 16 и 27 кодонах на значимость нарушений ритма сердца (таблица 4,5).

Анализ генетического полиморфизма в 27 кодоне показал, что в группе больных с незначимыми аритмиями у носителей генотипа Gln27Gln

наблюдалось наибольшее среднее значение ЖЭ, у носителей С1и27С1и - наименьшее, а у гетерозиготных носителей С1п27С1и - промежуточное (таблица 4). При исследовании генетического полиморфизма в 16 кодоне было показано, что у носителей генотипа Агд16Агд среднее значение ЖЭ было выше в 2,2-2,4 раза, чем у больных с другими вариантами генотипов, при этом различия с носителями генотипа Агд 16С1у были достоверными.

У пациентов со значимыми аритмиями (таблица 5), которые ассоциируются с риском внезапной смерти у данной категории больных, не встречался генотип С1и27С1и, а генотип С1у16С1у был выявлен только у одного пациента.

В отношении показателей ишемии миокарда по данным суточного мониторирования ЭКГ (таблица 6) выявлено достоверное повышение продолжительности депрессии сегмента БТ у пациентов с генотипами Агд16Агд по сравнению с носителями гетерозиготного генотипа Агд 16С1у.

ОБСУЖДЕНИЕ

Ген р2-АР характеризуется выраженным природным полиморфизмом, обусловленным различиями в последовательности нуклеотидов. Полученные результаты по изучению влияния генетического полиморфизма р2-АР на клинические и морфофункциональные параметры сердца у больных ГКМП указывают на наличие связи по-

Таблица 5. Значимые нарушения ритма сердца по данным суточного мониторирования у больных ГКМП с различными генотипами 02-АР

Показатель Генотип Arg16GI] 1 Генотип Gln27Glu

Arg/Arg Arg/Gly Gly/Gly Gln/GIn Gln/Glu GIh/GIh

ЖЭ 2691,0±1649,1 (4 чел.) 2025,8±820,3 (6 чел.) 9090,0±9090 (1 чел.) 2388,6±1312,7 (5 чел.) 3344,3 ±1401,7 (6 чел.) -

НЭ 2000,0± 1697,0 (2 чел.) 538,0±±98,5 (3 чел.) 901,0±901,0 (1 чел.) 2000,0± 1697,0 (2 чел.) 628,0± 114,39 (4 чел.) -

Таблица б. Показатели ишемии миокарда по данным суточного мониторирования у больных ГКМП с различными генотипами АгдІбЄІу гена 02-АР

1 1 I Ж «к л А п 1— Генотип Arg16Gly Генотип Gln27Glu

1 ЮКсяЗсяТбЛ Ь Arg/Arg Arg/Gly Gly/Gly Gln/GIn Gln/Glu GIh/GIh

Количество эпизодов ишемии 3,6±0,50 3,2±0,48 4,1 ±1,10 3,8±0,54 3,5±0,41 2,7±0,70

Продолжительность эпизодов ишемии, мин 95,5±13,0* 60,5 ±10,2 89,3±19,3 80,7±10,9 77,0±12,9 64,3 ±17,3

* - значимые различия по критерию t-Стьюдента, р<0,05

лиморфных вариантов в 16 и 27 кодонах с такими показателями, как ФК СН по классификации ЫУНА, ИММ, нарушения ритма и степень выраженности ишемии миокарда при суточном мониторирова-нии ЭКГ. Анализ комбинаций аллельных вариантов полиморфизмов генов А0РВ2 показал, что комбинация генотипов С1у16С1у/С1и27С1и ассоциирована с более благоприятной клинической картиной заболевания и степенью выраженности ГЛЖ, тогда как комбинация Агд16Агд/С1п27С1п связана с более тяжелой клинической картиной, более выраженным ремоделированием ЛЖ и наличием значимых нарушений ритма.

ЗАКЛЮЧЕНИЕ

Исходя из вышеизложенного, можно предположить, что генотип Агд16Агд/С1п27С1п является генотипом «риска» и ассоциируется с возникновением неблагоприятных клинических проявлений заболевания. Комбинация генотипов С1у16С1у/С1и27С1и является протективной и свидетельствует о благоприятном прогнозе заболевания.

Поскольку известно [9], что полиморфные варианты генов р-АР связаны не только с фенотипическими особенностями заболевания, но и с эффективностью лечения р-адреноблокаторами, то очень важно провести исследование ассоциации генетического полиморфизма р-АР с чувствительностью пациентов к лекарственным препаратам, что позволит оптимизировать лечение р-адреноблокаторами у пациентов с ГКМП.

СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ

Практический врач. Прил. к журн «Медикал маркет» 1996; 4:4 -> 10.

3. Brodde О.Е. Beta-1 and beta-2 adrenoreceptor polymorphisms: functional impotance, impact on cardiovascular disease and drug responses. Pharmacol Ther. 2008; 117:1-29.

4. Dishy V., Sofowora G.G., Xie H-G et al. The effect of common polymorphisms of the beta-2-adrenergic receptor on agonist-mediated vascular desensitization. N Eng J Med 2001; 345:1030~> 1035.

5. Reihsaus E., Innis М., MacIntyre N., Liggett S.B. Mutations in the gene encoding for the beta 2-adrenergic receptor in normal and asthmatic subjects. Am J Respir Cell Mol Biol. 1993; 8: 334~> -339.

6. MathewC.C. Theisolationofhighmolecularweight eucaryotic DNA. in Walker JMNJ (ed): Methods in Molecular Biology, Clifton: Human Press 1984; 2, № 4:31-34.

7. Aynacioglu A.S., Cascorbi I., Gungor K. and al. Population frequency, mutation linkage and analytical methodology for theArg 16Gly, Gln27Glu and Thr 164lle polymorphisms in the b2-adrenergic receptor among Turks. Br.J. Clin. Pharmacol., 1999; 48, №5:761-764.

8. Флетчер P., Флетчер С., Вагнер Э. Клиническая эпидемиология: Основы доказательной медицины. М.: Медиа Сфера; 2004.347.

9. Johnson J.A., Terra S.G. Beta-adrenergic receptor polymorphisms: cardiovascular disease associations and pharmacogenetics. Pharm Res. 2002; 19, №12: 1779-1787.

1. Sipola P, Vanninen E.,Aronen H.J. et al. Cardiac adrenergicactivityisassociatedwithleftventricular hypertrophy in genetically homogeneous subject with hypertrophic cardiomyopathy. J Nucl Med. 2003; 44:487^493.

2. Моисеев B.C. Достижения и спорные вопросы в изучении кардиомиопатии и миокардитов.

Курбанов Р. Д., Срожидинова Н. 3.

ЗНАЧЕНИЕ Р1Ю12А1.А ПОЛИМОРФИЗМА ГЕНА РРА11Г ПРИ АРТЕРИАЛЬНОЙ ГИПЕРТОНИИ И МЕТАБОЛИЧЕСКОМ СИНДРОМЕ

Республиканский Специализированный Центр Кардиологии,

г. Ташкент, Узбекистан

Kurbanov R. D., Srojidinova N. Z.

ROLE OF THE PPARr PROI2ALA POLYMORPHISM IN HYPERTENSION AND METABOLIC SYNDROME

Republic Specialized Centre of Cardiology, Tashkent, Uzbekistan

РЕЗЮМЕ

Цель исследования. Изучение Рго12А1а полиморфизма гена РРАРу среди здоровых лиц и больных АГ узбекской популяции и оценка ассоциации Рго12А1а полиморфизма гена РРАРу с уровнем АД и процессами сердечно-сосудистого ремоделирования.

Материалы и методы. Обследованы 163 больных АГ и 50 здоровых лиц мужского пола узбекской национальности. Метаболический синдром (МС) устанавливали согласно классификации ЮВ 2005г. Проводились исследования: пероральный тест толерантности к глюкозе, ЭхоКГ с допплерографией, тест с реактивной гиперемией, определение толщины КИМ общей сонной артерии, липидный спектр крови и микроальбуминурии. Рго12А1а полиморфизм гена РРАРу определялся с помощью ПЦР с применением специфических праймеров и рестриктазы.

Результаты. Изучение распространенности Рго12А1а полиморфизма гена РРАРу показало достоверно большее накопление Рго-аллеля как среди больных с АГ (89,9%), так и среди здоровых лиц (83%). У больных с АГ и МС не выявлено связи между Рго12А1а полиморфизм гена РРАРу и уровнем АД, ММЛЖ, липидов и гликемии. При этом у больных с АГ и МС-носителей Рго-аллеля

SUMMERY

Aim. To study prevalence of Pro12Ala polymorphism of the PPARy gene in Uzbek hypertensive patients and healthy men and its association with blood pressure and cardiovascular remodeling process.

Methods. We observed 169 hypertensive patients and 50 healthy men Uzbek nationality. Metabolic syndrome (MS) was defined according to IDF, 2005. It has been performed oral glucose tolerance test, echocardiography, reactive hyperemia test,definition of common carotid intima-media thickness, lipids, microalbuminuria (MAU). Genotyping of Pro12Ala polymorphism of the PPARy gene was determined by PCR amplification with allele-specific primers.

Results. Analysis of frequency distribution of Pro12Ala polymorphism of the PPARy gene has shown significantly greater accumulation of Proallele both among hypertensive patients (89.9%) and healthy subjects (83%).There was no association between Pro12Ala polymorphism of the PPARy gene and blood pressure, left ventricular mass lipid and glucose levels in hypertensive patients with MS. It has been revealed higher heart rate and MAU in hypertensive patients with MS-carriers of Proallele as compared with Ala-allele carriers. Genetic risk assessment of MS by multiplicative model of