CC BY
9
Павлова И. Е., Глазанова Т. В., Шилова Е. Р., Чубукина Ж. В., Розанова О. Е., Бубнова Л. Н.
ФГБУ Российский НИИ Гематологии и трансфузиологии, г. Санкт-Петербург
АССОЦИАЦИЯ ГЕНОВ HLADRB1 С РАЗВИТИЕМ ПАРОКСИЗМАЛЬНОЙ НОЧНОЙ ГЕМОГЛОБИНУРИИ
Pavlova I. E., Glazanova T. V., Shilova E. R., Chubukina Zh. V., Rozanova O. E., Bubnova L. N. Russian
Research Institute of Hematology and Transfusiology, St.-Petersburg, Russian Federation
ASSOCIATION OF HLADRB1 GENES WITH THE DEVELOPMENT OF PAROXYSMAL NOCTURNAL HEMOGLOBINURIA
Резюме. Роль иммунной системы в развитии пароксизмальной ночной гемоглоби-нурии (ПНГ) подтверждается обнаружением ассоциации между ПНГ и определенными аллельными вариантами генов Главного комплекса гистосовместимости (НЬА-генов). При этом механизмы таких ассоциаций остаются неясными. Возможно, это зависит от функциональных свойств определенных молекул НЬА-генов.
Целью настоящего исследования являлось изучение особенностей распределения НЬА-DRB1 аллелей у больных ПНГ, проживающих в европейской части России. На основании результатов иммуногенетического обследования 77 пациентов: 55 — с апластической анемией (АА), 6 — с миелодиспластическим синдромом (МДС) и 16 — с ПНГ, образцы периферической крови, которых направлялись в лабораторию иммуногематологии ФГБУ РосНИИГТ ФМБА России из различных регионов европейской части России для выявления ПНГ-клона, получены данные о частотном распределении групп аллелей гена HLA-DRB1 у больных с выявленным ПНГ-клоном. Установлено, что частота HLA-DRB1*15:01 значимо повышена как в группе больных ПНГ, так у больных АА/ПНГ и МДС/ПНГ, Величина патологического клона не связана с DRB1*15:01, так как у пациентов как с большим, так и с малым клоном с высокой частотой (58,54% и 81,25 % соответственно) выявлялся этот аллель. К протективным иммуногенетиче-ским факторам развития ПНГ-клона можно отнести такие иммуногенетические маркеры, как Н^^В1*01 и Н^^В1*16.
Полученные сведения об иммуногенети-ческих маркерах развития ПНГ-клона можно использовать в качестве дополнительных
Abstract. The role of the immune system in the development of paroxysmal nocturnal hemoglobinuria (PNH) is confirmed by the discovery of an association between PNH and certain allelic variants of the genes of the Major Histocompatibility Complex (HLA genes). Moreover, the mechanisms of such associations remain unclear. Perhaps this depends on the functional properties of certain molecules of the major histocompatibility complex.
The aim of this study was to study the characteristics of the distribution of HLA-DRB1 alleles in PNH patients living in the European part of Russia. Based on the results of HLA-typing of 77 patients: 55 — with aplastic anemia (AA), 6 — with myelodysplastic syndrome (MDS) and 16 — with PNH, peripheral blood samples, which were sent to the laboratory of the immunohema-tology of the Russian Research Institute of hematology and transfusiology from various regions of the European part of Russia. To identify the PNH clone, we obtained data on the frequency distribution of HLA-DRB1 in patients with the established PNH clone. It was found that the frequency of HLA-DRB1*15:01 was significantly increased both in the group of PNH patients, as in patients with AA/PNH and MDS/PNH. The magnitude of the pathological clone is not associated with DRB1*15:01, since in patients with both large and small clones, this allele was detected with a high frequency (58,54% and 81,25 %, respectively). The protective immunogenetic factors of PNH-clone development include HLA-DRB1*01 and HLA-DRB1*16. The information obtained on the immunogenetic markers of PNH clone development can be used as additional criteria for differential diagnosis, especially in cases of detection of a minor PNH clone.
Key words. Paroxysmal nocturnal hemoglobinuria, HLA-DRB1
критериев прогнозирования течения заболевания, особенно в случаях выявления минорного клона ПНГ.
Ключевые слова. Пароксизмальная ночная гемоглобинурия, НЬА^НВ!
Введение. Пароксизмальная ночная гемоглобинурия (ПНГ) представляет собой редкое клональное заболевание крови, характеризующееся хроническим внутрисосудистым гемолизом с рядом осложнений и наклонностью к рецидивирующим тромбозам. В основе заболевания лежит приобретенная соматическая мутация PIG A гена в гемопоэтических стволовых клетках, что приводит к появлению одного или нескольких ПНГ-клонов с нарушенным синтезом гликозил-инозитоловых (GPI — glycosylphosphatidylinositol) якорных структур, осуществляющих фиксацию на мембране клеток GPI-связанных протеинов, защищающих собственные эритроциты от агрессивного действия активированного комплемента и комплемент-зависимого лизиса. В настоящее время для выявления ПНГ-клона используется метод высокочувствительной проточной цитометрии (ПЦ) с использованием скрининговой панели с маркерами CD55 и CD59 (для ретикулоци-тов и эритроцитов), CD24/FLAER (для грану-лоцитов), CD14/FLAER (для моноцитов) [1; 2].
Для ПНГ характерно также наличие ци-топении различной степени выраженности и нередко ассоциация с другими заболеваниями, связанными с костномозговой недостаточностью. По данным А. Д. Кулагина с соавторами моно- или билинейные цитопении встречаются у 2/3 больных с классической гемолитической ПНГ [3]. ПНГ-клон различной величины закономерно встречается также у определённой части больных апла-стической анемией (АА) (до 70 % больных) и миелодиспластическим синдромом (МДС) (10-25 %), реже — при других окогемато-логических заболеваниях [4; 5-7]. При этом размер клона может варьировать в широком диапазоне — от минорного клона до сочетан-ных вариантов АА/ПНГ, реже МДС/ПНГ с наличием признаков клинически значимого гемолиза и гемолитических кризов. Имеются многочисленные наблюдения, описывающие прогрессию с переходом АА в классическую гемолитическую ПНГ, сопровождающуюся нарастанием размера патологического клона,
преимущественно при достижении ремиссии АА [8-11]. В то же время, имеются сведения о случаях выявлении ПНГ-клона небольшого размера без каких-либо клинических и лабораторных признаков патологии [12]. При этом большинство исследователей сходятся во мнении, что клинически значимым, как правило, является размер клона 10% и более от общего числа клеток крови [8; 10; 13]
Несмотря на то, что молекулярно-генети-ческие особенности и патогенетические механизмы ПНГ подробно изучены, отдельные аспекты остаются недостаточно освещенными. Так, нет ясности в понимании тесной связи данной патологии с другими синдромами костномозговой недостаточности и причин прогрессии с экспансией ПНГ-клонов. Высказывается обоснованное мнение о наличии внутренних факторов эволюции ПНГ-клона [14]. Определенное значение в развитии и прогрессии заболевания придается имму-нообусловленным механизмам. Если в патогенезе АА ведущим механизмом признается иммунообусловленная депрессия кроветворения, то в развитии ПНГ, по мнению ряда исследователей, играет роль иммунная атака и клональная экспансия через иммуноселек-цию [15]. Значимым можно считать и утвердившееся в последние годы представление о том, что наличие ПНГ-клона у пациентов с АА является подтверждением иммуноо-посредованного заболевания и фактором, прогнозирующим положительный ответ на стандартную иммуносупрессивную терапию [16-18].
Роль иммунной системы в развитии ПНГ подтверждается обнаружением ассоциации между ПНГ и определенными аллельными вариантами генов Главного комплекса гисто-совместимости (НЬА-генов). Наиболее часто в литературе упоминается ассоциация развития ПНГ клона с определенными аллелями НЬА-генов класса II. В исследованиях, выполненных в разных популяциях — в Польше, Японии, Италии — была выявлена повышенная частота НЬА^ЯВ1*15:01, НЬЛ^В1*04:01 и гаплотипа DRB1*15:01-DQA1*01:02-
DQB1*06: 02 [17-19]. В тоже время, есть сведения об особенностях НЬА-генов класса
I при этом заболевании — среди итальянских пациентов с пароксизмальной ночной гемо-глобинурией была выявлена повышенная частота гаплотипа НЬА-В *14:02-С*08:02 [19]. В одноцентровом исследовании, выполненном в Польше, у пациентов с апластической анемией и наличием ПНГ клона была выявлена ассоциация с аллелем НЬА-В*18:01, тогда как для аллеля НЬА-А*24:02 установлена протективная роль [20]. При этом механизмы ассоциации аллелей Главного комплекса гистосовместимости с ПНГ остаются неясными. Возможно, это зависит от функциональных свойств определенных молекул Главного комплекса гистосовместимости.
Таким образом, полученные зарубежными исследователями данные свидетельствуют о возможной роли НЬА-генов класса I и класса
II в развитии ПНГ. При этом в РФ изучение особенностей распределения аллелей НЬА-генов
Демографическая и клиническ
у пациентов с наличием ПНГ-клона не проводилось.
Целью настоящего исследования являлось изучение особенностей распределения НЬА-DRB1 аллелей у больных пароксизмальной ночной гемоглобинурией (ПНГ), проживающих в европейской части России.
Материалы и методы. В исследование были включены 77 пациентов, образцы периферической крови которых направлялись в лабораторию иммуногематологии ФГБУ РосНИИГТ ФМБА России из различных регионов европейской части России для выявления ПНГ-клона. Основными диагнозами направления были: апластическая анемия (АА), ПНГ, миелодиспластический синдром (МДС). У подавляющего большинства пациентов (71,4%) диагнозом направления на обследование являлся АА/ПНГ. Демографическая и клиническая характеристика пациентов представлены в таблице 1.
Таблица 1.
я характеристика пациентов
Количество пациентов 77
Медиана возраста, лет 42 (16-74)
Пол:
Мужской, чел. ( %) 31 (40,3 %)
Женский, чел. ( %) 46 (59,7 %)
Диагнозы направления
АА / ПНГ ( %) 55 (71,4 %)
ПНГ ( %) 16 (20,8)
МДС / ПНГ ( %) 6 (7,8 %)
В качестве популяционного контроля использовалась группа доноров крови, жителей европейской части России, из 1456 человек в возрасте от 18 до 60 лет: мужчин — 871 (59,8 %), женщин — 585 (40,2 %), выразивших добровольное согласие на проведение имму-ногенетического обследования для включения в регистр доноров костного мозга.
Диагностика наличия ПНГ-клона осуществлялась с помощью проточной цитометрии по общепринятой методике с использованием стандартного протокола, рекомендованного Международным Обществом Клинической Цитометрии (ICCS) [2].
ПНГ-клон определяли в периферической крови среди эритроцитов, гранулоцитов и моноцитов, используя проточный цитоф-луориметр Beckman Coulter (США). Использовали следующий набор реагентов: для выяв-
ления ПНГ клеток на эритроцитах — CD235a -FITC/ CD59-PE; на гранулоцитах — CD45-PC7/CD15-PC5/ CD24-PE/ FLAER-Alexa 488; на моноцитах — CD45-PC7/CD64-PC5/CD14-PE / FLAER-Alexa 488. Окрашивание лейкоцитов проводили по стандартной методике феноти-пирования для цельной крови, для моноцитов и гранулоцитов в разных пробирках: после добавления к образцу цельной крови антител в объеме, предлагаемом производителем, и 20-ти минутной инкубации в темноте проводили лизирование эритроцитов с последующей отмывкой. Для выявления эритроцитов с ПНГ-фенотипом, цельную кровь предварительно разбавляли в 100 раз, затем инкубировали с антителами в отдельной пробирке с последующей обязательной двойной отмывкой.
Для проведения HLA-типирования гена DRB1 геномную ДНК выделяли из ядросо-
держащих клеток периферической крови с использованием набора реагентов DNA BOX 500 производства «Protrans» (Германия). HLA-типирование гена DRB1 проводилось на уровне базового разрешения, т.е. выполнялось определение групп аллелей с помощью полимеразной цепной реакции с сиквенс-специфичными праймерами (PCR-SSP) производства "Protrans" (Германия). В случае выявления группы аллелей HLA-DRB1*15 выполнялось высокоразрешающее типиро-вание с помощью PCR-SSP с сиквенс-специ-фичными праймерами производства "Olerup" (Германия).
Статистическую обработку проводили при помощи пакета программ Arlequin software package, version 3.5. Достоверность различий определяли с помощью критерия х 2 с поправкой Йейтса.
Результаты. На основании результатов, полученных с помощью проточной цитометрии, патологический клон среди гранулоцитов и/ или моноцитов был выявлен у 57 (74,03 %) обследованных лиц; у 20 (25,97 %) пациентов,
При последующем высокоразрешающем типировании группы аллелей HLA-DRB1*15 установлено, что в 100 % случаев в этой группе аллелей определялся HLA-DRB1*15:01.
На фоне столь значимого увеличения частоты HLA-DRB1*15:01 у пациентов с наличием ПНГ-клона установлено достоверное снижение частоты групп аллелей HLA-DRB1*01-10,75% против 23,7% и HLA-
направленных на обследование, ПНГ-клон не был обнаружен.
Величина ПНГ-клона варьировала от 0,1 % до 99,9 %, при этом клинически значимым считали клон более 10%, т.н. «большой клон», а содержание клеток с ПНГ-фенотипом от 0,1 до 10 % расценивали как «малый клон». Большой клон был определен у 41 человека (73,2 %), малый клон — у 16 человек (26,8 %).
По результатам иммуногенетического обследования (^А-типирования) определено, что из 13 установленных в настоящее время групп аллелей HLA-DRB1 в общей группе пациентов с наличием ПНГ-клона выявлены практически все, за исключением групп ^А-DRB1*10 и НЬА^В1*12, что объясняется достаточно редкой их частотой у жителей европейской части нашей страны. Анализ распределения групп аллелей показал, что среди пациентов с наличием ПНГ-клона значительно повышена частота группы аллелей HLA-DRB1*15-66,07 % против 28,37 % в группе контроля (таблица 2).
Таблица 2.
DRB1*16-1,75 % против 8,65 % по сравнению с группой здоровых лиц.
У пациентов с отсутствием ПНГ-клона также было установлено 11 групп аллелей HLA-DRB1 (не выявлены НЬА^В1*09 и HLA-DRB1*12). Распределение групп аллелей гена HLA-DRB1 незначительно отличалось от такового в группе популяционного контроля за исключением группы аллелей HLA-DRB1*14,
Частота групп аллелей HLA-DRB1 у пациентов с наличием ПНГ-клона
Группы аллелей Частота в группе пациентов с ПНГ клоном ( %), n = 57 Частота в группе популяционного контроля ( %), n = 1456 X 2 Р
HLA-DRB1*01 10,53 23,70 6,10 < 0,005
HLA-DRB1*03 21,05 16,28 0,70 > 0,05
HLA-DRB1*04 17,54 20,40 0,40 > 0,05
HLA-DRB1*07 21,05 25,69 0,76 > 0,05
HLA-DRB1*08 1,75 5,91 2,53 > 0,05
HLA-DRB1*09 3,51 2,47 0,01 > 0,05
HLA-DRB1*10 0,00 1,79 2,35 > 0,05
HLA-DRB1*11 22,81 22,94 0,01 > 0,05
HLA-DRB1*12 0,00 3,85 3,45 > 0,05
HLA-DRB1*13 19,30 25,00 1,14 > 0,05
HLA-DRB1*14 5,26 3,16 0,28 > 0,05
HLA-DRB1*15 64,91 28,37 34,89 < 0,0001
HLA-DRB1*16 1,75 8,65 4,26 < 0,005
частота которой существенно превосходила частоту в контрольной группе: 20 % против 3,16 % (таблица 3), что может быть связано
В этой группе пациентов высокоразрешающее типирование группы аллелей HLA-DRB1*15 также выявило HLA-DRB1*15:01 в 100 % случаев.
Изучение частоты групп аллелей HLA-DRB1 среди пациентов в зависимости от величины патологического клона не показало
с большой разницей в численности обследованных групп.
Таблица 3.
каких-либо значимых различий (таблица 4). Однако необходимо отметить, что в группе пациентов с малым ПНГ-клоном не выявлено лиц, имеющих в генотипе HLA-DRB1*01, а частота HLA-DRB1*15:01 существенно превосходила таковую в группе пациентов с большим ПНГ-клоном (81,25 % против 58,54 %).
Таблица 4.
Частота групп аллелей HLA-DRB1 у пациентов с ПНГ-клоном в зависимости от величины клона
Группы аллелей/ аллель Частота в группе пациентов с большим ПНГ клоном ( %), n = 41 Частота в группе пациентов с малым клоном ПНГ клоном ( %), n = 16 X 2 Р
HLA-DRB1*01 14,63 0,00 1,29 > 0,05
HLA-DRB1*03 19,51 25,00 0,67 > 0,05
HLA-DRB1*04 17,07 18,75 0,29 > 0,05
HLA-DRB1*07 19,51 25,00 0,67 > 0,05
HLA-DRB1*08 0,00 6,25 3,49 > 0,05
HLA-DRB1*09 2,44 6,25 2,26 > 0,05
HLA-DRB1*10 0,00 0,00 -
HLA-DRB1*11 29,27 12,50 0,96 > 0,05
HLA-DRB1*12 0,00 0,00 -
HLA-DRB1*13 21,95 12,50 0,19 > 0,05
HLA-DRB1*14 4,88 6,25 0,75 > 0,05
HLA-DRB1*15:01 58,54 81,25 3,70 > 0,05
HLA-DRB1*16 4,88 6,25 0,75 > 0,05
Частота групп аллелей HLA-DRB1 у пациентов с отсутствием ПНГ-клона
Группы аллелей Частота в группе пациентов без ПНГ клона ( %), n = 20 Частота в группе популяционного контроля ( %), n = 1456 X 2 Р
HLA-DRB1*01 15,00 23,70 1,38 > 0,05
HLA-DRB1*03 10,00 16,28 1,13 > 0,05
HLA-DRB1*04 10,00 20,40 2,04 > 0,05
HLA-DRB1*07 15,00 25,69 1,81 > 0,05
HLA-DRB1*08 5,00 5,91 0,42 > 0,05
HLA-DRB1*09 0,00 2,47 2,08 > 0,05
HLA-DRB1*10 5,00 1,79 0,05 > 0,05
HLA-DRB1*11 25,00 22,94 0,00 > 0,05
HLA-DRB1*12 0,00 3,85 2,20 > 0,05
HLA-DRB1*13 30,00 25,00 0,06 > 0,05
HLA-DRB1*14 20,00 3,16 12,34 < 0,05
HLA-DRB1*15 45,00 28,37 1,92 > 0,05
HLA-DRB1*16 5,00 8,65 0,79 > 0,05
Изучение частоты групп аллелей HLA-DRB1 у пациентов с выявленным ПНГ-клоном в зависимости от диагноза (АА, МДС, ПНГ) показало, что наибольшая частота HLA-DRB1*15:01 наблюдалась в группе больных с АА (73,53 %), несколько реже этот аллель определялся
Заключение. В ходе выполненной работы нами впервые получены данные о распределении частот групп аллелей гена HLA-DRB1 у больных с установленным методом проточной цитометрии ПНГ-клоном, проживающих на территории европейской части России.
Установлено, что частота иммуногенетиче-ского маркера HLA-DRB1*15:01 значимо повышена как в группе больных пароксизмаль-ной ночной гемоглобинурией, так у больных АА/ПНГ и МДС/ПНГ, что согласуется с данными других авторов о сильных ассоциативных связях аллеля HLA-DRB1*15:01 с развитием ПНГ-клона [18-22]. Полученные нами данные свидетельствуют о том, что клональная селекция гемопоэтических стволовых клеток с мутацией PIG A гена ассоциирована именно HLA-DRB1*15:01. В тоже время, согласно результатам наших исследований, наличие DRB1*15:01 не является фактором, определяющим величину патологического клона т.к. у пациентов как с большим, так и с малым клоном с высокой частотой выявлялся этот аллель. К протективным иммуногенетиче-
у пациентов с МДС (62,5%) и ПНГ (53,33%), однако во всех группах больных частота аллеля HLA-DRB1*15:01 существенно превышала этот показатель в группе популяционного контроля (таблица 5).
Таблица 5.
ским факторам развития ПНГ-клона, согласно результатам наших исследований, можно отнести такие иммуногенетические маркеры, как НЬА^В1*01 и НЬА^В1*16.
Несмотря на то, что в настоящее время для диагностики ПНГ-клона успешно применяется стандартный протокол с использованием проточной цитометрии, полученные нами новые сведения об иммуногенетических маркерах развития ПНГ-клона можно использовать в качестве дополнительных критериев дифференциальной диагностики, особенно в случаях выявления минорного клона ПНГ.
Учитывая тот факт, что по данным некоторых зарубежных авторов развитие ПНГ-клона ассоциировано с определенными генами ^А не только класса II, но и класса I, представляется интересным продолжить эту работу и провести иммуногенетическое обследование, включающее изучение аллелей генов HLA как класса I (HLA-A, В, С), так и класса II (НЬА^В1, DQA1) пациентов с ПНГ-клоном, проживающих на территории европейской части РФ.
Частота групп аллелей HLA-DRB1 у пациентов с ПНГ-клоном в зависимости от диагноза
Группы аллелей/аллель Частота в группе пациентов с АА ( %), n = 34 Частота в группе пациентов МДС ( %), n = 8 Частота в группе пациентов ПНГ ( %), n = 15
HLA-DRB1*01 5,88 12,50 20,00
HLA-DRB1*03 20,59 12,50 26,67
HLA-DRB1*04 8,82 25,00 33,33
HLA-DRB1*07 29,41 12,50 6,67
HLA-DRB1*08 2,94 0,00 0,00
HLA-DRB1*09 5,88 0,00 0,00
HLA-DRB1*10 0,00 0,00 0,00
HLA-DRB1*11 32,35 12,50 13,33
HLA-DRB1*12 0,00 0,00 0,00
HLA-DRB1*13 5,88 37,50 40,00
HLA-DRB1*14 0,00 12,50 6,67
HLA-DRB1*15:01 73,53 62,50 53,33
HLA-DRB1*16 5,88 12,50 0,00
Конфликты интересов отсутствует
Источник финансирования
Исследование не имело источника финансирования Вклад авторов
Концепция и дизайн: Павлова И. Е., Глазанова Т. ВШилова Е. Р.
Сбор и обработка данных: Павлова И. Е., Глазанова Т. В., Шилова Е. Р, Розанова О. Е., Чубуки-на Ж. В.
Предоставление материалов исследования: Глазанова Т. В., Шилова Е. Р., Розанова О. Е., Чубу-кина Ж. В., Павлова И. Е.
Анализ и интерпретация: Павлова И. Е., Глазанова Т. В., Шилова Е. Р. Подготовка рукописи: Павлова И. Е., Глазанова Т. В., Шилова Е. Р. Окончательное одобрение рукописи: Павлова И. Е., Шилова Е. Р., БубноваЛ. Н.
СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ
1. Borowitz M. J., Craig. F. E., Digiuseppe J. A. et al. Guidelines for the diagnosis and monitoring of paroxysmal nocturnal hemoglobinuria and related disorders by flow cytometry // Cytometry B. Clin. Cytom.— 2010.— Vol. 78, N4.— P. 211-230.
2. Sutherland D. R., Keeney M., Illingworth A. Practical Guidelines for the high-sensitivity detection and monitoring of Paroxysmal Nocturnal Hemoglobinuria (PNH) clones by flow cytometry // Cytometry Part
B.— 2012.—Vol. 82B.— P. 195-208.
3. Кулагин А. Д., Климова О. У, Добронравов А. В. и др. Клиническая манифестация и ошибки диагностики классической пароксизмальной ночной гемоглобинурии: Анализ 150 наблюдений // Клиническая онкогематология. Фундаментальные исследования и клиническая практика.— 2017.— Т. 10, № 3.— С. 333-341.
4. De LatourR.P., MaryJ.Y., Salanoubat C. et al. Paroxysmal nocturnal hemoglobinuria: natural history of disease subcategories // Blood.— 2008.— Vol. 112.— P. 3099-3106.
5. Glazanova T. V., Chubukina Z. V., Rozanova O. E. et al. Detection of PNH-clone in patients with depression of hemopoiesis // Haematologica.— 2013.— Vol. 98, suppl. 1.— P. 579.
6. Глазанова Т. В., Чубукина Ж. В., Розанова О. Е. и др. Выявление ПНГ-клона у пациентов с апластиче-ской анемией и миелодиспластическим синдромом // Вестник гематологии.— 2012.— Т. 8, № 4.—
C. 41.
7. Кулагин А. Д., Лисуков И. А., Птушкин В. В. и др. Национальные клинические рекомендации по диагностике и лечению пароксизмальной ночной гемоглобинурии // Онкогематология.— 2014.— Т. 9, № 2.— С. 20-28.
8. Kulagin A, Lisukov I, Ivanova M, et al. Prognostic value of paroxysmal nocturnal haemoglobinuria clone presence in aplastic anaemia patients treated with combined immunosuppression: results of two-centre prospective study. // Br.J. Haematol.— 2014.— Vol. 164, N4.— P. 546-54.
9. Wanachiwanawin W., Siripanyaphinyo U., Piyawattanasakul N., et al. A cohort study of the nature of paroxysmal nocturnal hemoglobinuria clones and PIG-A mutations in patients with aplastic anemia. // Eur. J. Haematol.— 2006.— Vol. 76, Vol. 6.— P. 502-509.
10. Фидарова З. Т., Михайлова Е. А., Гальцева И. В. и др. Динамика ПНГ-клона у больных апластической анемией в процессе иммуносупрессивной терапии // Клиническая лабораторная диагностика.— 2016.— Т. 21, № 8.— С. 490-494.
11. Шилова Е. Р., ГлазановаТ. В., ЧубукинаЖ.В. и др. Пароксизмальная ночная гемоглобинурия у пациентов с апластической анемией: проблемы, особенности, анализ клинического наблюдения // Клиническая онкогематология.— 2019.— Т. 12, № 3.— С. 319-328.
12. Hu R., Mukhina G., Piantadosi S. PIG-A mutations in normal hematopoiesis // Blood — 2005.— Т. 105, № 10 — P. 3848-54с.
13. Bessler M., Mason P., Hillmen P. et al. Paroxysmal nocturnal haemoglobinuria (PNH) is caused by somatic mutations in the PIG-A gene // EMBO J.— 1994.— Vol. 13, N1.— P. 110-117.
14. Inoue N., Iziu-Sarumaru T., Murakami Y. et al. Molecular basis of clonal expansion of hematopoiesis in 2 patients with paroxysmal nocturnal hemoglobinuria (PNH) // Blood.— 2006.— Vol. 108, N13.— P. 4232-4236
15. Кулагин А. Д., Лисуков И.А., Козлов. Апластическая анемия: иммунопатогенез, клиника, диагностика, лечение — Новосибирск: Изд-во "Наука", 2008.— 236 с.
16. Narkao S., Gale R. P. Are mild/moderate аcquired idiopathic aplastic anaemia and low-risk myelodysplastic syndrome one or two diseases or both and how should it/they be treated? // Leukemia.— 2016.— Vol. 30, N11.— P. 2127-2130.
17. Maciejewski J. P, Follmann D., Nakamura R. et al. Increased frequency of HLA-DR2 in patients with paroxysmal nocturnal hemoglobinuria and the PNH/aplastic anemia syndrome // Blood.— 2001.— Vol 98.— P. 3513-3519.
18. Shichishima T., Okamoto M., Ikeda K. et al. HLA class II haplotype and quantitation of WT1 RNAin Japanese patients with paroxysmal nocturnal hemoglobinuria // Blood.— 2002.— Vol. 100.— P. 22-28.
19. Lombardi M. L., Terrazzano G., Cosentini E. et al. Paroxysmal nocturnal hemoglobinuria: significant association with specific HLA-A, -B, -C, and -DR alleles in an Italian population // Human Immunology.— 2008.— Vol. 69.— P. 202-206.
20. Nowak J., Mika-Witkowska R., Mendek-Czajkowska E. et al. The patterns of MHC association in aplastic and non-aplastic paroxysmal nocturnal hemoglobinuria // Archivum Immunologiae et Therapiae Experimental.— 2011.— Vol. 59.— P. 231-238.
21. Абдулкадыров К. М., БессмельцевС.С.Апластическая анемия — СПб: Изд-во "Наука"; "Издательство KN", 1995.— 232 с.
22. West A., Godley L., ChurpekJ. E. Familial myelodysplastic syndrome/acute leukemia syndromes: a review and utility for translational investigations // Ann. NY Acad. Sci.— 2014.— Vol. 1310, N1.— P. 111-118.
