АПРОБАЦИЯ ОДНОРАЗОВЫХ КОНЦЕНТРАТОРОВ PARASEP ДЛЯ КОПРОЛОГИЧЕСКОГО ИССЛЕДОВАНИЯ
Хроменкова Е.П. *, Гузеева Т.М.**
*ФГУН «Ростовский НИИ микробиологии и паразитологии»
Роспотребнадзора
**Федеральная служба по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека
Введение. В настоящее время готовится к пересмотру МУК 4.2. 735-99 «Паразитологические методы лабораторной диагностики гельминтозов и протозоозов». В соответствии с Постановлением Главного государственного врача РФ от 25.12.2007 года № 94 «Об усилении мероприятий по предупреждению паразитарных заболеваний и элиминации малярии» следует внедрять в работу паразитологов современные методы лабораторной диагностики паразитозов, в том числе эфир - формалиновое осаждение и седиментацию. Однако применение этого метода несколько осложнено в связи с использованием труднодоступного реактива (эфир), который к тому же требует специального учета, хранения и ведения соответствующей документации. Существуют современные модификации методов, основанные на этом же принципе, но не апробированные в работе лабораторий. В 2009 году в ФГУН РНИИМП Роспотребнадзора в соответствии с запросом ФС Роспотребнадзора проведена апробация модифицированного метода осаждения и седиментации с применением одноразовых концентраторов PARASEP.
Материалы и методы. Одноразовые концентраторы PARASEP для копрологического исследования представлены ЗАО «Кормей - Русланд» с соответствующими инструкциями по использованию.
Проведено 5 сравнительных опытов. Для исследования в заведомо «чистые» от возбудителей паразитозов фекалии внесено в каждый 1 г образца по 300 яиц свиной аскариды и широкого лентеца. Обработка копроматериала проведена в соответствии с формалин - эфирным методом (МУК 4.2.735-99) с использованием стеклянных центрифужных пробирок и соответствующих ходу исследования реактивов. А также с применением одноразовых пластиковых концентраторов, содержащих формалин + тритон Х с добавлением прилагаемого к набору этилацетата. Ход исследования во втором случае соответствовал прилагаемой инструкции.
Результаты. Эффективность выявления яиц стандартным методом (МУК 4.2. 735-99) была от 71,3 до 94,0%. Затраты времени составили от 24 до 26 минут (в соответствии с МУК 5.1.973-00 - 25 минут). Предлагаемая
модификация показала эффективность выявления паразитарных патогенов от 83,3 до 98,3% при затратах времени от 15 до 20 минут. Средний показатель выявляемости яиц гельминтов в первом случае составил 82,9±4,8%, во втором
496
93,6±3,2%. Затраченное на исследование время при использовании одноразовых концентраторов в среднем составило 18,2±1,1, в сравнении с затратами при стандартном методе - 25,0±0,4 минут.
Следует отметить, что при микроскопическом исследовании полученного для просмотра материала нами использовались предметные и покровные стекла. Для исключения стекол из процесса исследования, как рекомендуется по предлагаемой модификации, необходима специальная аппаратура, в настоящее время отсутствующая в составе оборудования паразитологических лабораторий. Однако использование специального аппарата для просмотра, по-видимому, позволит еще в большей степени оптимизировать процесс исследования. Помимо повышения эффективности выявления яиц гельминтов, снижения затрат времени на исследование, отмечено как несомненное преимущество модификации облегчение просмотра препаратов за счет более светлого поля зрения микроскопа (предлагаемая унификация позволяет наиболее полно освобождать субстрат от посторонних включений, детрита, жиров). Имеет значение и возможность снижения непосредственного контакта персонала с потенциально опасным субстратом при выполнении исследований. Наряду с несомненным преимуществом апробированной модификации метода следует отметить следующее: нет данных о безопасном способе утилизации концентраторов в соответствии с соблюдением правил безопасности работы с возбудителями 3-4 группы патогенности; требуется уточнение о том, как следует вести исследование, если копроматериал доставлен в консерванте (например, Турдыева); исключение из процесса исследования предметных и покровных стекол возможно лишь при использовании дополнительного оборудования (рабочая станция FE - 5). Следует представить экономическое обоснование
рациональности применения модификации метода.
С учетом сделанных замечаний и представления дополнительной информации, целесообразно внесение в новую редакцию МУК по паразитологическим методам исследования модификации формалин -эфирного метода. Необходимо инструкцию по осуществлению модификации разработать соответственно общепринятой схеме изложения методов исследования.
Заключение. Предлагаемая модификация метода копродиагностического исследования с применением одноразовых концентраторов PARASEP оценивается положительно. Она эффективна в отношении выявления яиц гельминтов на 93,6%. Имеет преимущество перед стандартным методом и в минимизации затрат времени на исследование. Обеспечивает более надежную работу в отношении исключения контакта персонала с потенциально опасным субстратом. Облегчает идентификацию, качественное и количественное определение возбудителей паразитозов. Исключает необходимость дополнительного приобретения реактивов, в том числе находящихся на специальном учете и требующих ведения специальной документации. Облегчает визуализацию искомых паразитарных патогенов в конечном
497
субстрате исследования, обеспечивая повышение достоверности и эффективности анализа, то есть оптимизирует работу паразитологов.
Литература: 1. МУК 4.2.735 - 99 «Паразитологические методы
лабораторной диагностики гельминтозов и протозоозов». 2. МУК 5.1.973 - 00 «Расчетные затраты времени на основные виды паразитологических исследований в центрах госсанэпинадзора».
Testing of once-used concentrators “Parasep” for coprological examinations. Chromenkova E.P., Guzeeva T.M. Rostov Scientific Research Institute of Microbiology and Parasitology.
Summary. The suggested modified procedure for coprodiagnosis of helminthoses using concentrators “Parasep” was evaluated positively. It’s efficacy appeared to be 93,6%. The procedure was advantageous in relation of minimization of time expenditures, reliability at work with dangerous material and simplification of quantitative and qualitative determination of causative agents of parasitoses.
СЕЗОННАЯ И ВОЗРАСТНАЯ ДИНАМИКА ЗАРАЖЕННОСТИ ОВЕЦ И КОЗ ТРИХОЦЕФАЛАМИ В ГОРНОЙ ЗОНЕ ДАГЕСТАНА
Шамхалов М.В., Махиева Б.М., Адзиева Х.М.,
Магомедов О.А., Шамхалов В.М.
ГНУ«Прикаспийский научно-исследовательский ветеринарный институт»
Введение. Среди желудочно-кишечных нематодозов
сельхозяйственных животных, трихоцефалез является экономически и социально значимым среди гельминтозов. В горной зоне (отгоняемое и неотгоняемое поголовье) овец и коз выпасают в течение лета и осени и при этом зараженные взрослые животные выделяют большое количество яиц стронгилят (миллионами) во внешнюю среду, которые развиваются до инвазионной стадии личинок.
Данные сезонной и возрастной динамики зараженности животных трихоцефалами в горной зоне Дагестана отсутствуют.
Изучение этих вопросов имеет важное значение, как в теоретическом, так и практическом отношениях при разработке мероприятий по борьбе с гельминтозами в конкретных климата - географических условиях.
Материалы и методы. Сезонную и возрастную динамику инвазированности овец и коз трихоцефалами в хозяйствах горной зоны изучали на основании гельминтокопрологических исследований, а также с учетом данных отчетности ветеринарных районов Республики. Исследования проводили методом флотации (Фюллеборна) в течение 3-х лет (2006-2009
498