CC BY
70
2. Chandler S.H., Alexander E.R., Holmes K.K. Epidemiology of cytomegaloviral infection in a heterogeneous population of pregnant women. J. Infect. Dis. 1985; 152(2): 249-56.
3. Ershov F.I., Kasyanova N.V. Cytomegaloviral infection: modern epidemiological, clinical, diagnosis and therapy data. Infektsii i antimikrobnaya terapiya. 2002; 4: 116-9. (in Russian)
4. Hammitt D.G., Aschenbrenner D.W., Williamson R.A. Culture of cytomegalovirus from frozen-thawed semen. Fertil. Steril. 1988; 49(3): 554-7.
5. Ryumin D.V. The problems of etiology end pathogenesis of
mixed urogenital infection. Rossysky zhurnal kozhnykh i vene-richeskikh bolezney. 2009; 2: 63-71. (in Russian)
6. Chernova N.I., Perlamutrov Yu.N. Therapy of reactivated forms of cytomegaloviral infection urogenital tract women. Zhurnal Doktor.ru. Ginekologiya. 2013; 7(85): 52-7. http://medicina-journal.ru. (in Russian)
7. Chernova N.I., Perlamutrov Yu.N., Olkhovskaya K.B., Moskvin S.V. In vain laser radiation of blood in treatment of cytomegaloviral infection of urogenital tract among sexually active women. Fizioterapiya, balneologiya i reabilitatsiya. 2013; 5: 19-23. (in Russian)
Received 18.01.14
ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНАЯ ДЕРМАТОЛОГИЯ
© ПАЛКИНА Н.В., РУКША Т.Г., 2014 УДК 616.5-006.81.04-092:612.015.1
Антипролиферативное действие матриксных металлопротеиназ 9 и 13 на модели меланомы кожи in vivo
Палкина Н.В., Рукша Т.Г.
ГБОУ ВПО Красноярский государственный медицинский университет им. проф. В.Ф. Войно-Ясенецкого Минздрава России, Красноярск
Представлены данные о влиянии селективного ингибирования матриксной металлопротеиназы-9 (ММП-9) и сочетанного ингибирования ММП-9 и ММП-13 на опухолевый рост, полученные в эксперименте на модели меланомы кожи in vivo. Выявлено, что при сочетанном ингибировании ММП-9 и ММП-13 при меланоме кожи статистически значимо снижается уровень клеточной пролиферации по сравнению с таковым в группе, в которой селективно ингибирована ММП-9, что может указывать на регуляторную роль металлопротеиназ в процессах опухолевого роста.
Ключевые слова: матриксные металлопротеиназы; меланома; клеточная пролиферация.
ANTIPROLIFERATIVE EFFECT OF MATRIX METALLOPROTEINASES 9 AND 13 IN EXPERIMENTAL CUTANEOUS MELANOMA IN VIVO
PalkinaN.V., Ruksha T.G.
V.F. Voino-Yasenetsky State Medical University, 660022, Krasnoyarsk, Russia
Selective inhibition of matrix metalloproteinase-9 (MMP-9) and combined inhibition of MMP-9 and MMP-13 has modulated tumor growth in experimental cutaneous melanoma in vivo. Combined inhibition of MMP-9 and MMP-13 in cutaneous melanoma has reduced significantly the cell proliferation in comparison with that in the group with selective MMP-9 inhibition. This presumably indicates the regulatory role of metalloproteinases in tumor growth.
Key words: matrix metalloproteinases; melanoma; cell proliferation.
Меланома кожи относится к наиболее агрессивно протекающим злокачественным новообразованиям, характеризующимся быстрым развитием метастази-рования. При этом в ряде случаев возникают затруднения в дифференциальной диагностике меланомы кожи и доброкачественных меланоцитарных новообразований, отсутствует эффективная терапия дис-
семинированных форм меланомы кожи, что обусловливает актуальность дальнейшего изучения аспектов патогенеза и поиск новых молекулярных мишеней для возможного терапевтического воздействия.
В последнее время особый интерес в онкологии представляют исследования ферментов протеолити-ческой системы, в частности семейства матриксных
Сведения об авторах:
Палкина Надежда Владимировна - аспирант ([email protected]); Рукша Татьяна Геннадьевна - доктор мед. наук (1а1уапа_ [email protected]).
металлопротеиназ (ММП) [1]. ММП - это структурно связанные эндопептидазы, функционально связанные с обменом белков межклеточного матрикса [2]. Семейство ММП состоит более чем из 20 ферментов, способных расщеплять почти все компоненты внеклеточного матрикса соединительных тканей [3, 4]. Известно, что ММП играют центральную роль в обмене белков соединительной ткани, в процессах нормального развития и ремоделирования клеточного матрикса, эмбриогенезе, репарации тканей, нео-ангиогенезе, а также в процессах опухолевой трансформации и метастазирования [1, 5, 6].
Есть ряд исследований [7, 8], подтверждающих важную роль ММП в развитии злокачественных новообразований, в частности меланомы кожи. ММП играют важную роль в инвазии и метастазировании меланомы, они участвуют в разрушении компонентов внеклеточного матрикса, например фрагментов коллагена IV типа, обеспечивая подвижность опухолевых клеток. Помимо участия в деградации внеклеточного матрикса, ММП могут влиять на микроокружение опухоли путем высвобождения ростовых факторов и факторов ангиогенеза. Они выполняют важные регуляторные функции, активируя, инактивируя и модифицируя свойства целого ряда биологически активных молекул [9]. При этом не все биологические механизмы и эффекты данных эндопептидаз являются установленными. Особые функции в канцерогенезе выделяют у ММП-9 и ММП-13. ММП-9 (желатиназа В) секретируется как профермент массой 92 кД, ее источниками являются кератиноциты, моноциты, лейкоциты, макрофаги и фибробласты. Субстраты для ММП-9 включают денатурированный коллаген I типа (желатин), на-тивные коллагены IV, V, VII, X и XI типов, фибриноген, витронектин и энтактин, который соединяет ламинин и коллаген IV типа [10]. ММП-9 обеспечивает ангиогенез в опухолевой ткани, тем самым способствуя ее росту [8]. ММП-13, также известная как коллагеназа-3, обладает широкой субстратной специфичностью и играет важную роль в инвазии и метастазировании опухолей [1]. Повышенная экспрессия ММП-13 наблюдалась при раке молочной железы и дыхательных путей, опухолях головы и шеи, раке простаты [7, 8]. Кроме того, повышенную активность ММП-13 связывают с агрессивным течением меланомы [8].
Ретроспективный анализ исследований экспрессии ММП у онкологических больных показывает, что повышение экспрессии многих ММП, включая также ММП-9 и ММП-13, в первичной опухоли и/или метастазах позитивно связан с такими характеристиками, как низкая дифференцировка опухолевых клеток, высокая инвазивность, высокая метастатическая активность, неблагоприятный прогноз, сокращение продолжительности жизни [11, 12].
Имеются данные о том, что ММП за счет своих множественных биологических эффектов способны регулировать клеточную пролиферацию в злокачественных новообразованиях [13-16].
Нарушения клеточной пролиферации и прогрессивный рост малигнизированных клеток, индуциро-
ванный изменениями экспрессии про- и онкогенов, являются одними из ключевых событий в развитии опухолевого заболевания [17]. Помимо этого, клеточная пролиферация играет важную роль в оценке метастатического потенциала и клинического прогноза меланомы кожи. В связи с этим изучение регуляции клеточной пролиферации необходимо для понимания процессов развития и прогрессии онкологических заболеваний, а также для оптимизации методов их терапии [17].
Цель данного исследования - установление биологических эффектов ММП-9 и ММП-13 в отношении роста меланомы кожи in vivo.
Материалы и методы
Эксперимент проводили на лабораторных мышах линии C57B16. Перед проведением экспериментальной работы с животными было получено разрешение локального этического комитета и биоэтической комиссии ГБОУ ВПО Красноярский государственный медицинский университет им. проф. В.Ф. Войно-Ясенецкого (№ 44/2012 от 15.11.12). Все исследования проводили в соответствии с требованиями и условиями, изложенными в Международных рекомендациях по проведению медико-биологических исследований с использованием животных и приказом Минздрава РФ № 708н от 23.08.10 "Об утверждении правил лабораторной практики".
В эксперименте использовали половозрелых самок мышей линии C57B16 в возрасте 8-10 нед, массой от 19 до 26 г, с перевитой меланомой B16, которые были разделены на 3 группы -контрольную (n = 5) и две опытные (n = 7 в каждой группе). Животных содержали при естественном режиме освещения со свободным доступом к воде и пище.
На 14-й день после трансплантации опухолевых клеток животным опытных групп начинали терапию ингибитором ММП-9 (MMP-9 Inhibitor I, "Calbiochem", США) в различных дозировках - для селективного ингибирования ММП-9 в 1-й опытной группе и неселективного ингибирования ММП-9 и ММП-13 во 2-й опытной группе. Препарат вводили внутримышечно 1 раз в день в течение 7 дней.
Для оценки динамики увеличения роста опухолевого узла 1 раз в 3 дня вычисляли объем опухолевого узла с 5-го дня трансплантации меланомы и вплоть до окончания терапии ингибитором путем измерения длины и ширины узла.
Приблизительный объем опухоли рассчитывали по формуле: (длина, мм х ширина2, мм)/2. Сравнение динамики объема опухолевого узла в каждой группе по дням проводили с использованием непараметрического дисперсионного анализа Фридмана. При получении p < 0,05 переходили к парным сравнениям для зависимых групп, используя критерий Вилкоксона с поправкой Бонферрони. Межгрупповые сравнения по каждому дню наблюдения проводили с помощью непараметрического дисперсионного анализа Краскела-Уоллиса, при получении p < 0,05 переходили к многогрупповым сравнениям. Различия между сравниваемыми показателями считали статистически значимыми при p < 0,05. После 7-дневной терапии животных во всех группах выводили из эксперимента путем эвтаназии.
При вскрытии животного извлекали опухолевый узел (рис. 1), проводили определение массы и объема узла. Объем узла вычисляли по формуле: длина х ширина х высота (в мм3).
При сравнении объемов опухолевых узлов в исследуемых группах использовали непараметрический дисперсионный анализ Краскела-Уоллиса для трех независимых групп. При получении p < 0,05 переходили к многогрупповым сравнениям. Различия между сравниваемыми показателями считали статистически значимыми приp < 0,05.
Постановка зимографии. Часть ткани выделенных опухолевых узлов брали для постановки зимографии желатиназ в по-лиакриламидном геле (ПААГ) с целью проверки эффективности ингибирования ММП-9. Образцы ткани меланомы В16 из первичного опухолевого узла подвергали гомогенизации, далее из гомогенатов получали супернатанты. В супернатантах опре-
1400
Рис. 1. Выделенный опухолевый узел меланомы В16.
Рис. 2. Иммуногистохимическое окрашивание ткани опухолевого узла на маркер клеточной пролиферации PCNA. Ядра пролиферирующих клеток окрашены в коричневый цвет. Ув. 400.
л
Б
о х m s
£ <
1200
1000
800
600
400
200
деляли количество белка по методу Бредфорд. Образцы уравнивали по белку. Супернатант наносили в лунку в объеме, содержащем 50 мкг белка, добавляя равное количество буфера для образцов, содержащего 0,125 моль трис-HCl, pH 6,8, 4% (w/v) SDS, 0,01% бромфеноловый синий и 20% глицерол. Электрофорез проводили в 6% ПААГ с 0,1% желатином. После электрофореза SDS вымывали из геля в растворе 2,5% тритон X, погружая гель в раствор на 30 мин, затем раствор меняли на свежий и оставляли еще на 15 мин. Далее гель погружали в раствор инкубационного буфера, содержащий 50 ммоль/л трис-HCl, 0,2 моль/л NaCl, 10 ммоль/л CaCl2, pH 7,5, инкубировали в термостате при температуре 370С в течение 16 ч.
Гель промывали в дистиллированной воде и погружали в раствор, содержащий 0,01% Кумасси G-250, 30% изопропанол, 10% ледяную уксусную кислоту, выдерживали в течение 1 ч, затем гель отмывали в растворе, содержащем 10% метиловый спирт, 5% ледяную уксусную кислоту, в течение нескольких минут, а после - дистиллированной водой. Получали зоны просветления на темном фоне геля - результат протеолитической активности ММП-9. Эффективность протеолиза оценивали с помощью гель-документирующей системы ChemiDoc™ XRS+ ("Bio-Rad Laboratories", США) с программным обеспечением Image Lab™. Окрашенную зимограмму сканировали, на изображении определяли яркость и площадь лизиса. Обработку цифровых данных проводили методом вариационной статистики для двух независимых групп с применением U-теста Манна-Уитни. Различия между сравниваемыми показателями считали статистически значимыми приp < 0,05.
Иммуногистохимическое исследование. Выделенный опухолевый узел фиксировали в 10% нейтральном формалине, заклю-
Контроль ММП-9
' Медиана
25-75%
Мин.-Макс.
Рис. 3. Активность фермента ММП-9 в исследуемых группах по результатам зимографии.
чали в парафин и изготавливали гистологические срезы, которые подвергали
иммуногистохимическому окрашиванию на маркер клеточной пролиферации - PCNA (Novocastra) с помощью моноклональных антител в разведении 1:200, для визуализации использовали хромоген 3-amino-9-ethylcarbazol (АЕС).
Уровень экспрессии PCNA определяли путем вычисления процента пролиферирующих клеток, имеющих положительно окрашенные ядра (рис. 2). При сравнении уровней клеточной пролиферации для исследуемых групп использовали непараметрический дисперсионный анализ Краскела-Уоллиса. При получении р < 0,05 переходили к многогрупповым сравнениям. Различия между сравниваемыми показателями считали статистически значимыми при р < 0,05.
Результаты и обсуждение
Зимография образцов опухолевой ткани подтвердила эффективность ингибирования ММП в экспериментальных группах.
Как видно на рис. 3, активность ММП-9 в группе образцов, в которых активность данного фермента была ингибирована, статистически значимо ниже активности этого фермента в контрольной группе.
1800 и
п-1-1-1
5-й день 8-й день 11-й день 14-й день 17-й день
Контроль
ММП-9
ММП-9+ММП-13
Рис. 4. Динамика изменения среднего объема опухоли в исследуемых группах.
ММП-9 - р < 0,05 - различия статистически значимы на 8, 11, 14, 17-й день по сравнению с 5-м днем в группе ММП-9;
ММП-9 + ММП-13 - р < 0,05 - различия статистически значимы на 8, 11, 14, 17-й день по сравнению с 5-м днем в группе ММП-9 + ММП-13; Контроль -р < 0,05 - различия статистически значимы на 8, 11, 14, 17-й день по сравнению с 5-м днем в группе контроля.
3,5-, 3,02,52,0-L 1,5-
о 1,0-о ' СО
2 1,00,0-0,5-1,0-1,5-
А<?
' Сред.
У У
| Сред.±СО
Сред.±ДИ
Рис. 5. Показатели массы опухолевых узлов в исследуемых группах.
8000 7000 6000 5000 4000 3000
2
2 2000 о 1000 о
-1000 -2000 -3000
4-° ' Сред.
| Сред.±СО ZE Сред.±ДИ
Рис. 6. Показатели объемов опухолевых узлов в исследуемых группах.
< 90 п О 80
О.
я 70 Н
Q.
6050-
а. а 2 5 5 Ü
§. зо Н
с
го
40
20 10 0-10
У
■ Сред.
| Сред.±СО Щ Сред.±ДИ
Рис. 7. Уровни экспрессии маркера клеточной пролиферации (PCNA) в исследуемых группах.
* р < 0,05 - статистически значимо по отношению к группе ММП-9.
При измерении объема опухолевых узлов в экспериментальных группах получены статистически значимые различия в изменении объема опухоли по каждому дню наблюдения в каждой группе (р < 0,05). Однако статистически значимых различий в объеме опухоли на каждый день наблюдения при межгрупповых сравнениях не получено даже после начала терапии ингибитором ММП-9 (рис. 4). Имелась отчетливая тенденция к увеличению объема опухоли в группе животных, получающих терапию ингибитором в дозе, селективно ингибирующей ММП-9.
При сравнении исследуемых групп по массе первичного опухолевого узла статистически значимых различий не выявлено (р = 0,49), но также имелась тенденция к увеличению массы первичного опухолевого узла в группе мышей, получавших терапию ингибитором в дозе, селективно ингибирующей ММП-9 (рис. 5).
Аналогичные результаты получены при анализе объема опухолевых узлов - статистически значимых различий между группами не выявлено (р = 0,4), но также определялась тенденция к увеличению объема первичного опухолевого узла в группе с ингибиро-ванной ММП-9 (рис. 6).
Исследуя клеточную пролиферацию, мы анализировали процент пролиферирующих клеток в каждой группе. Статистически значимых различий уровней клеточной пролиферации в опухолевых узлах у мышей, получавших терапию ингибитором ММП, в обеих группах по сравнению с контрольной группой не выявлено. Однако установлено статистически значимое увеличение клеточной пролиферации меланомы в группе мышей, у которых селективно ингибирована ММП-9, по сравнению с группой, в которой ингибированы и ММП-9, и ММП-13 (рис. 7).
Предполагалось, что в группах животных, которые получали терапию ингибитором, опухолевый
рост и клеточная пролиферация в опухолевых узлах будут заторможены либо будут иметь слабоположительную динамику в отличие от животных, не получавших терапию. Однако полученные результаты свидетельствуют об обратном. При этом в группе животных, получавших селективную терапию ингибитором ММП-9, в отличие от группы, в которой ингибированы ММП-9 и ММП-13, показатели клеточной пролиферации статистически значимо выше, а также наметилась тенденция к увеличению массы и объемов первичных опухолевых узлов.
Таким образом, ингибирование ММП-9 и ММП-13 не дает выраженного противоопухолевого эффекта, что может быть связано с активацией в данном случае других металлопротеиназ либо иных молекулярных механизмов, компенсирующих недостаточность эффектов ингибированных ферментов. Поэтому требуется дальнейшее изучение механизмов действия металлопротеиназ при меланоме кожи для оценки возможности использования их ингибиторов в качестве молекулярных терапевтических мишеней.
Исследование выполнено при поддержке Российского фонда фундаментальных исследований (№ 13-04-01381).
-ЛИТЕРАТУРА -
1. Ярмолинская М.И., Молотков А.С., Денисова В.М. Матрикс-ные металлопротеиназы и ингибиторы: классификация, механизм действия. Журнал акушерства и женских болезней. 2012; 1: 113-25.
2. Nagase H., Woessner J.F. Matrix metalloproteinases. J. Biol. Chem. 1999; 274(31): 21491-4.
3. Сидоренко Ю.С., Непомнящая E.M., Гудцкова Т.Н. Современные направления изучения механизмов метастазирова-
ния опухолей. Известия высших учебных заведений. СевероКавказский регион. 2004; 2: 17-20.
4. Рогова Л.Н., Шестернина Н.В., Замечник Т.В., Фастова И.А. Матриксные металлопротеиназы, их роль в физиологических и патологических процессах. Вестник новых медицинских технологий. 2011; 2: 86-9.
5. Egeblad M., Werb Z. New functions for the matrix metalloproteinases in cancer progression. Nat. Rev. Cancer. 2002; 2(3): 161-74.
6. Алекперов Э.З., Наджафов Р.Н. Современные концепции о роли воспаления при атеросклерозе. Кардиология. 2010; 6: 88-91.
7. Strand S., Vollmer P., Abeelen L., Gottfried D., Alla V., Heid H., et al. Cleavage of CD95 by matrixmetalloproteinase-7 induces apoptosis resistance in tumour cells. Oncogene. 2004; 23(20): 3732-6.
8. Клишо Е.В., Кондакова И.В., Чойнзонов Е.Л. Матриксные металлопротеиназы в онкогенезе. Сибирский онкологический журнал. 2003; 2: 62-70.
9. Рыжакова О.С., Завалишина Л.Э., Андреева Ю.Ю., Соловьева Н.И. Интерстициальная коллагеназа, желатиназы А и B и их эндогенные ингибиторы при плоскоклеточной карциноме шейки матки. Биомедицинская химия. 2013; 1: 55-64.
10. Xue M., March L., Sambrook P.N., Jackson C.J. Differential regulation of matrix metalloproteinase 2 and matrix metallopro-teinase 9 by activated protein C: relevance to inflammation in rheumatoid arthritis. Arthritis Rheum. 2007; 56(9): 2864-74.
11. Ганусевич И.И. Роль матриксных металлопротеиназ (ММП) при злокачественных новообразованиях. Онкология. 2010; 2: 108-17.
12. Brinckerhoff C.E., Rutter J.L., Benbow U. Interstitial collage-nases as markers of tumor progression. Clin. Cancer Res. 2000; 6(12): 4823-30.
13. Meierjohann S., Hufnagel A., Wende E., Kleinschmidt M.A., Wolf K., Friedl P., et al. MMP13 mediates cell cycle progression in melanocytes and melanoma cells: in vitro studies of migration and proliferation. Mol. Cancer. 2010; 9: 201. http://www. molecular-cancer. com/content/9/1/201.
14. Cheng K., Xie G., Raufman J.P. Matrix metalloproteinase-7-cat-alyzed release of HB-EGF mediates deoxycholyltaurine-induced proliferation of a human colon cancer cell line. Biochem. Pharmacol. 2007; 73(7): 1001-12.
15. Deng H., Guo R.F., Li W.M., Zhao M., Lu Y.Y. Matrix metal-loproteinase 11 depletion inhibits cell proliferation in gastric cancer cells. Biochem. Biophys. Res. Commun. 2005; 326(2): 274-81.
16. Jiang Z.Q., Zhu F.C., Qu J.Y., Zheng X., You C.L. Relationship between expression of matrix metalloproteinase (MMP-9) and tumor angiogenesis, cancer cell proliferation, invasion, and metastasis in invasive carcinoma of cervix. Ai Zheng. 2003; 22(2): 178-84.
17. Гарькавцева Р.Ф., Гарькавцев И.Ф. Молекулярно-генетиче-ские аспекты злокачественных новообразований. Вестник РАМН. 1999; 2: 38-44.
Поступила 25.11.13
REFERENCES
1. Yarmolinskaya M.I., Molotkov A.S., Denisova V.M. Matrix metalloproteinases and inhibitors: classification, mechanism of
action. Zhurnal akusherstva i zhenskikh bolezney. 2012; 61(1): 113-5. (in Russian)
2. Nagase H., Woessner J.F. Matrix metalloproteinases. J. Biol. Chem. 1999; 274(31): 21491-4.
3. Sidorenko Yu.S., Nepomnyashchaya E.M., Gudtskova T.N. Modern trends in the study of the mechanisms of tumor metastasis. Izvestiya vysshikh uchebnykh zavedeniy. Severo-Kavkazskiy region. 2004; 2: 17-20. (in Russian)
4. Rogova L.N., Shesternina N.V., Zamechnik T.V., Fastova I.A. Matrix metalloproteinases and their role in physiological and pathological processes. Vestnik novykh meditsinskikh tekhnologiy. 2011; 2: 86-9. (in Russian)
5. Egeblad M., Werb Z. New functions for the matrix metalloproteinases in cancer progression. Nat. Rev. Cancer. 2002; 2(3): 161-74.
6. Alekperov E.Z., Nadzhafov R.N. Modern concepts of the role of inflammation in atherosclerosis. Kardiologiya. 2010; 6: 88-91. (in Russian)
7. Strand S., Vollmer P., Abeelen L., Gottfried D., Alla V., Heid H., et al. Sleavage of CD95 by matrix metalloproteinase-7 induces apoptosis resistance in tumour cells. Oncogene. 2004; 23(20): 3732-6.
8. Klisho E.V., Kondakova I.V., Choynzonov E.L. Matrix metalloproteinases in cancerogenesis. Sibirskiy onkologicheskiy zhurnal. 2003; 2: 62-70. (in Russian)
9. Ryzhakova O.S., Zavalishina L.E., Andreeva Yu.Yu., Soloveva N.I. Interstitial collagenase, gelatinase A and B and their endogenous inhibitors in squamous cell carcinoma of the uterine cervix. Biomeditsinskaya khimiya. 2013; 1: 55-64. (in Russian)
10. Xue M., March L., Sambrook P.N., Jackson C.J. Differential regulation of matrix metalloproteinase 2 and matrix metalloproteinase 9 by activated protein C: relevance to inflammation in rheumatoid arthritis. Arthritis Rheum. 2007; 56(9): 2864-74.
11. Ganusevich I.I. The role of matrix metalloproteinases (MMPs) in malignant tumors. Onkologiya. 2010; 2: 108-17. (in Russian)
12. Brinckerhoff C.E., Rutter J.L., Benbow U. Interstitial collagenases as markers of tumor progression. Clin. Cancer Res. 2000; 6(12): 4823-30.
13. Meierjohann S., Hufnagel A., Wende E., Kleinschmidt M.A., Wolf K., Friedl P., et al. MMP13 mediates cell cycle progression in melanocytes and melanoma cells: in vitro studies of migration and proliferation. Mol. Cancer. 2010; 9: 201. doi: 10.1186/14764598-9-201. http://www.molecular-cancer.com/content/9/1/201.
14. Cheng K., Xie G., Raufman J.P. Matrix metalloproteinase-7-catalyzed release of HB-EGF mediates deoxycholyltaurine-induced proliferation of a human colon cancer cell line. Biochem. Pharmacol. 2007; 73(7): 1001-12.
15. Deng H., Guo R.F., Li W.M., Zhao M., Lu Y.Y. Matrix metalloproteinase 11 depletion inhibits cell proliferation in gastric cancer cells. Biochem. Biophys. Res. Commun. 2005; 326(2): 274-81.
16. Jiang Z.Q., Zhu F.C., Qu J.Y., Zheng X., You C.L. Relationship between expression of matrix metalloproteinase (MMP-9) and tumor angiogenesis, cancer cell proliferation, invasion, and metastasis in invasive carcinoma of cervix. Ai Zheng. 2003; 22 (2): 178-84.
17. Garkavtseva R.F., Garkavtsev I.F. Molecular genetic aspects of malignant tumors. Vestnik RAMN. 1999; 2: 38-44. (in Russian)
Received 25.11.13
