CC BY
4Ветеринарный врач. 2023. № 2. С. 47 - 54. The Veterinarian. 2023; (2): 47 - 54
Научная статья УДК 579.0
DOI: 10.33632/1998-698Х 2023 2 47
Антибиотикочувствительность аэробных представителей кишечной нормобиоты домашних питомцев, обитающих в г. Челябинск
Хайдаршина Наиля Эмильевна1, Даллакян Карен Вачаганович2, Тимербаева Разалия Рустамовна3
1 Челябинский государственный университет, кафедра микробиологии, иммунологии и общей биологии, Челябинск, Россия.
2 Фонд зоозащиты «Спаси меня», Челябинск, Россия.
3 Казанская государственная академия ветеринарной медицины им. Н.Э. Баумана, Казань, Россия.
Автор, ответственный за переписку: Хайдаршина Наиля Эмильевна, neh-74@ya.ru
Аннотация. Состав нормобиоты организма человека и животных активно изучается. Отдельные представители аэробной микробиоты толстого отдела кишечника являются условно-патогенными микроорганизмами, которые все чаще переходят в группу возбудителей с приобретенной антибиотикоустойчивостью. Изучение частоты встречаемости антибиотикорезистентных штаммов на региональном уровне, важно для создания списка высокоэффективных препаратов для стартовой терапии инфекционных патологий у людей и животных. В нашем исследовании были получены результаты антибиотикочувствительности аэробных представителей кишечной нормобиоты домашних питомцев (кошек и собак). Для выделенных культур стафилококков, энтерококков и отдельных видов энтеробактерий частота встречаемости штаммов чувствительных к клинически значимым препаратам составила более 75%.
Ключевые слова: домашние питомцы, аэробная нормобиота кишечника, условно-патогенные бактерии, антибиотикочувствительность, механизмы устойчивости к антимикробным препаратам.
Antibiotic sensitivity of aerobic representatives intestinal normobiota of pets living in Chelyabinsk
Nailya E. Khaidarshina1, Karen V. Dallakyan2, Razaliya R. Timerbaeva3
1 Chelyabinsk State University, Chelyabinsk, Russia
2 Animal Protection Fund "Save Me", Chelyabinsk, Russia
3 Kazan State Academy of Veterinary Medicine, Kazan, Russia
Corresponding author: Nailya E. Khaidarshina, neh-74@ya.ru
Abstract. The composition of the normobiota of the human and animal organisms is being actively studied. Some representatives of the aerobic microbiota of the large intestine are opportunistic microorganisms that are increasingly moving into a group of pathogens with acquired antibiotic resistance. Monitoring the circulation of antibiotic-resistant strains in various human and animal populations is one of the main tasks regulated by the Strategy of the WHO, the European Union, and the Russian Federation. The study of the frequency of occurrence of antibiotic-resistant strains at the regional level is important for creating a list of highly effective drugs for the initial treatment of infectious pathologies in humans and animals. In our study, the results of antibiotic sensitivity of aerobic representatives of the intestinal normobiota of pets (cats and dogs) were obtained. For the studied cultures of staphylococci, enterococci and certain types of enterobacteria, the frequency of occurrence of strains sensitive to clinically significant drugs was more than 75%.
Keywords: pets, intestinal aerobic normobiota, opportunistic bacteria, antibiotic sensitivity, mechanisms of resistance to antimicrobial drugs
Введение. После открытия в 1940 году пенициллина в науку и повседневную жизнь людей вошло понятие «антибиотик». Эти соединения стали основой ценных лекарственных препаратов для лечения большого числа бактериальных инфекций [1]. Одновременно с данными открытиями ученые пришли
к пониманию, что существует определенная часть возбудителей, в отношении которых эти соединениям не активны.
В настоящее время устойчивость к антимикробным препаратам делят на природную (встречается у подавляющего большинства штаммов вида) и приобретенную (регистрируется у части штаммов бактериального вида, который в норме обладает чувствительностью к антибиотику) [2].
Природная антибиотикорезистентность, согласно наиболее популярной теории, возникла у микроорганизмов сразу после появления способности продуцировать антимикробные соединения около 3,5 миллиардов лет назад [3]. У продуцентов антибиотиков устойчивость вырабатывалась по мере формирования путей биосинтеза этих соединений как система защиты от негативного влияния собственных продуктов. У непродуцентов резистентность формировалась как защитный механизм от антимикробных соединений, поступающих в среду их обитания. А вот клинические изоляты, согласно предположений, получали гены от общих предшественников из состава продуцентов и непродуцентов антимикробных соединений [1]. Таким образом, длительный период времени эволюция генов резистентности шла под воздействием селективных факторов, присутствовавших в окружающей среде. В результате этого в естественных микроценозах сформировались и присутствует до настоящего времени в невысоких титрах популяции микробиоты с природной антибиотикоустойчивостью.
В период «антибиотической эры» с 70-х годов 20 века по настоящее время в областях антропогенной активности регистрируется быстрое нарастание микробиоты (до 70% и более) с признаками приобретенной устойчивости, преимущественно из состава условно-патогенных видов бактерий [4].
Нормативная документация международного и российского уровня описывает следующие сферы деятельности человека, в которых активно формируются штаммы микроорганизмов с приобретенной антибиотикорезистентностью - это медицина с ее амбулаторной и госпитальной средой, животноводство, рыбоводство [5-7]. Выделение этих сфер в особую категорию связано с их активным, часто нерациональным оборотом антибактериальных препаратов. Кроме того, объекты этих сфер являются потенциальными источником контаминации антибиотикоустойчивой микробиотой почвы, водных источников, продуктов питания, диких животных.
Домашние непродуктивные животные (животные-компаньоны) не входят в группу объектов «особого контроля» на наличие антибиотикоустойчивых штаммов бактерий. Между тем, их можно отнести к потенциальным источникам антибиотикорезистентных микроорганизмов для людей, т.к. они имеют тесный механический контакт с хозяином. Наличие устойчивой к определенным антибиотикам микробиоты описано у различных видов домашних непродуктивных животных. Это метициллинрезистентные З.аитет, обнаруженные у домашних кошек; устойчивые к бета-лактамам БаШопеПа 8рр. и к фторхинолонам Е.еоН, выделенные при инфекциях мочевых путей у домашних собак [8-10] и др. Периодический обмен такой микробиотой между питомцем и хозяином может создавать благоприятные условия для обмена генетической информацией между бактериями животного и хозяина.
Мониторинг за циркуляцией антибиотикорезистентных штаммов в различных популяциях людей и животных является одной из основных задач, регламентируемых Стратегией ВОЗ, Евросоюза, РФ [5-7]. Изучение частоты встречаемости антибиотикорезистентных штаммов на региональном уровне, а также механизмов встречающейся устойчивости, важно для создания списка высокоэффективных препаратов для стартовой (эмпирической) терапии инфекционно-воспалительных процессов как у людей, так и животных.
Цель: установить антибиотикочувствительность и механизмы устойчивости у аэробных представителей кишечной нормобиоты животных-компаньонов, обитающих в г. Челябинск.
Задачи. Для достижения цели были поставлены следующие задачи.
1. Выделить и идентифицировать изоляты аэробных видов кишечной нормобиоты домашних питомцев.
2. Определить антибиотикочувствительность выделенных бактериальных культур.
3. Установить механизм антибиотикорезистентности у исследованных штаммов.
Материалы и методы. Исследования проводились в учебной лаборатории микробиологии и иммунологии биологического факультета ФГБОУ ВО «Челябинский государственный университет».
Материалом для выделения микробиоты являлись испражнения здоровых домашних кошек и собак различных пород, проходивших профилактический осмотр у ветеринарного врача в частной клинике «Спаси меня» (г. Челябинск). Всего обследовано 49 животных в возрасте 1-4 года, которые не принимали антибиотики последние 3 месяца.
Клинический материал объемом 3-4 г собирался в стерильные контейнеры хозяевами животных. Собранные образцы доставляли в лабораторию в течении 2 ч с момента получения; при отсутствии возможности доставки в эти сроки, материал переносили в консервирующую среду.
Из 49 клинических образцов выделено 102 штамма аэробных условно-патогенных бактерий.
Выделение аэробных представителей кишечной нормобиоты выполняли путем посева испражнений количественным методом по Lindsey [11]. Для этого отмеряли 1 г материала, добавляли 9 мл физиологического раствора, смесь разбивали с помощью стерильных стеклянных бус, полученную гомогенную суспензию высевали с помощью калиброванной бактериологической петли (5 мм) на следующие питательные среды: 5%-ый кровяной агар, Эндо, желточно-солевой агар. Чашки с посевами инкубировали при температуре 37°С в течение 24-48 ч.
Идентификацию полученных культур выполняли с помощью тест-систем «СТАФИтест 24», «ЭНКОККУСтест», «ЭНТЕРОтест 24 Н» («LaChema» Чехия).
Определение чувствительности к антибиотикам у изучаемых штаммов выполняли диско-диффузионным методом согласно клиническим рекомендациям «Определение чувствительности микроорганизмов к антимикробным препаратам» (Версия 2018) [12]. Контрольными штаммами являлись следующие тест-культуры: S.aureus ATCC 29213, E.faecalis ATCC 29212, E.coli ATCC 25922.
Фенотипическую детекцию устойчивости к бета-лактамам у представителей Staphylococcus spp. выполняли при использовании диска с цефокситином [12, 13], контрольный штамм - S.aureus NCTC 12493 (mecA). Продукцию индуцибельных метилаз стафилококками изучали при постановке D-теста [12] Синтез бета-лактамаз расширенного спектра (БЛРС) у энтеробактерий обнаруживали с помощью «Метода двойных дисков» [14], контрольные штаммы - K.pneumoniae АТСС 700603 (SHV-18), E.coli АТСС 35218 (ТЕМ-1). Возможность продукции карбапенемаз устанавливали, применяя «Метод двойных дисков» [15] и QM [16]
Генотипирование антибиотикорезистентных штаммов выполняли методом ПЦР-real-time при использовании амплификатора «iCycler IQ5» («BioRad», США) [17]. Для выполнения теста использовали наборы one-step «Резистентность к цефалоспоринам - 1 РВ. Выявление генов CTX-M», «Резистентность к цефалоспоринам - 2 РВ. Выявление генов MecA» («Литех», Россия).
Статистическая обработка полученных данных заключалась в расчете доли штаммов (в %), которую снабжали 95%-ным доверительным интервалом (95% ДИ) для оценки точности измерений, вычисления выполняли методом Джеффриса [18]. Расчёты получали в пакете PAST (version 4.06) [19].
Результаты исследований и обсуждение
1. Видовой состав аэробных представителей кишечной нормобиоты домашних питомцев. В состав нормобиоты кишечника домашних животных входят различные группы и виды микроорганизмов. Мы остановились на изучении аэробных представителей бактериальной микробиоты, т.к. большинство из них относится к условно-патогенным микроорганизмам, которые имеют особую роль в накоплении и распространении детерминант антибиотикоустойчивости среди клинических изолятов.
В ходе выделения и идентификации бактериальных культур из состава просветной микробиоты толстой кишки домашних питомцев были обнаружены следующие аэробные виды бактерий (табл. 1): представители рода Staphylococcus - 26 изолятов, рода Enterococcus - 28 культур, порядка Enterobacterales - 48 штаммов. Наибольшее число видов относилось к Escherichia coli - 43 изолята (42,0%) и Enterococcus durans - 13 культур (12,7%).
Таблица 1 — Частота выделения аэробных представителей кишечной нормобиоты у домашних
животных (n=1 02)
№ Группа УПМ Вид ми Частота Частота 95% ДИ по
п/п абс., шт. отн., % Джеффрису
1 Род Staphylococcus (26 штаммов) S.hominis 8 7,8 [3,8; 14,3]
S.cohnii 7 6,9 [3,1; 13,0]
S.epidermidis 7 6,9 [3,1; 13,0]
S.hyicus 2 2,0 [0,4; 6,1]
S.haemolyticus 1 1,0 [0,1; 4,5]
S.aureus 1 1,0 [0,1; 4,5]
2 Род Enterococcus spp. (28 штаммов) E.durans 13 12,7 [7,3; 20,2]
E.gallinarum 5 4,9 [1,9; 10,4]
E.dispar 4 3,9 [1,3; 9,1]
E.faecalis 2 2,0 [0,4; 6,1]
E.faecium 2 2,0 [0,4; 6,1]
E.avium 2 2,0 [0,4; 6,1]
3 Порядок Enterobacterales (48 штаммов) Escherichia coli 43 42,0 [32,9; 51,8]
Klebsiella oxytoca 3 2,9 [0,8; 7,6]
Citrobacter freundii 1 1,0 [0,1; 4,5]
Hafnia alvei 1 1,0 [0,1; 4,5]
Итого 102 100,0
2. Антибиотикочувствительность выделенных штаммов стафилококков, энтерококков и энтеробактерий. Согласно клиническим рекомендациям «Определение чувствительности к антимикробным препаратам» [12] для разных видов одного рода/ порядка прокариот применяется единый набор антибиотиков, которые природно активны в отношении этой группы. Этот список содержит большое число препаратов, поэтому нами были выбраны единичные наименования, которые наиболее характерно описывают антибиотикочувствительность.
Для Staphylococus spp. были выбраны диски с цефокситином (маркер чувствительности ко всем препаратам группы бета-лактамов), эритромицином и клиндамицином (маркеры чувствительности ко всем соединениям группы макролидов и линкозамидов), норфлоксацином (скрининговый препарат в отношении всех фторхинолонов), амикацином, линезолидом (один из самых молодых антибиотиков, разработанных в отношении грамположительных возбудителей). Полученные результаты (табл. 2) свидетельствуют о том, что от домашних питомцев с наибольшей частотой выделялись штаммы стафилококков чувствительные к цефокситину (92,3%), норфлоксацину (84,6%), линезалиду (76,9%) Наименьшая число чувствительных культур обнаружено в отношении эритромицина (38,5%).
Для ЕШегососсш spp. были использованы диски с ампициллином (маркер чувствительности к пенициллинам и ингибитор-защищенным средствам), имипенемом (единственный препарат выбора из состава бета-лактамов в случае устойчивости к пенициллинам), гентамицином, норфлоксацином (скрининговый препарат в отношении всех фторхинолонов), ванкомицином, линезолидом (современный антибиотик, разработанный против грамположительных возбудителей). Наибольшее число чувствительных штаммов энтерококков обнаруживалось в отношении ванкомицина (100,0%), норфлоксацина (92,9%), ампициллина и гентамицина (по 89,3%). Остальные антибактериальные препараты (имипенем и линезолид) проявляли сниженную активность.
Для представителей порядка ЕШ;егоЬаС;ега^ применяли диски, нагруженные следующими антибактериальными соединениями: амоксицилин-клавуланат, цефотаксим, цефтазидим (три перечисленных препарата позволяют обнаруживать устойчивость ко всем бета-лактамам, кроме карбапенемов), меропенем (предварительный индикатор устойчивости ко всем бета-лактамам), левофлоксацин (скрининг чувствительности ко всем фторхинолонам), амикацин. В нашем исследовании получены результаты чувствительности более 90% культур в отношении цефотаксима, цефтазидима, меропенема. Остальные препараты (амоксиклав, левофлоксацин, амикацин) проявляли активность для более 80-89% штаммов.
Таблица 2 — Частота встречаемости антибиотикочувствительных штаммов из состава _представителей нормобиоты кишечника домашних животных_
№ п/п Группа УПМ Антибактериальный препарат Частота абс., шт. Частота отн., % 95% ДИ по Джеффрису
1 Staphylococcus spp. (n=26)
Цефокситин 24 92,3 [77,5; 98,4]
Эритромицин 10 38,5 [21,8; 57,6]
Клиндамицин 14 53,8 [35,1; 71,8]
Норфлоксацин 22 84,6 [67,5; 94,6]
Амикацин 12 46,2 [28,2; 64,9]
Линезолид 20 76,9 [58,5; 89,7]
2 Enterococcus spp. (П=28)
Ампициллин 25 89,3 [74,1; 96,9]
Имипенем 20 71,4 [53,2; 85,5]
Гентацицин 25 89,3 [74,1; 96,9]
Норфлоксацин 26 92,9 [79,0; 98,5]
Ванкомицин 28 100,0 [91,5; 100,0]
Линезолид 20 71,4 [53,2; 85,5]
3 Enterobacteriaceae (П=48)
Амоксиклав 43 89,6 [78,7; 95,9]
Цефотаксим 46 95,8 [87,3; 99,1]
Цефтазидим 45 93,8 [84,3; 98,2]
Меропенем 47 97,9 [90,7; 99,8]
Левофлоксацин 42 87,5 [76,0; 94,6]
Амикацин 41 85,4 [73,5; 93,2]
3. Характеристика механизмов антибиотикоустойчивости исследованной микробиоты. Бета-лактамные антибиотики являются одними из ведущих препаратов для лечения инфекций различной локализации, вызванных широким спектром возбудителей. К настоящему времени описано 4 биохимических механизма устойчивости к этим соединениям: ферментативная инактивация, модификация мишени действия, снижение проницаемости клеточных структур, избыточный синтез белков-переносчиков. Каждый из этих механизмов обеспечивается большим числом способов реализации устойчивости, от которых в конечном итоге зависит выбор препаратов для терапии [2].
Поэтому следующую задачу, которую мы решали в ходе нашего исследования, было установление эпидемически значимых механизмов устойчивости к бета-лактамам с помощью фенотипических (выявление на агаре) и молекулярно-генетических методов (обнаружение генов резистентности в ПЦР). При использовании первой группы методов мы устанавливали наличие возможного механизма антибиотикоустойчивости, т.е. выполняли скрининг; а в процессе изучения генотипа устанавливали точный механизм резистентности.
В исследование были включены только культуры стафилококков и энтеробактерий, т.к. эти микроорганизмы отличаются наличием механизмов, обеспечивающих устойчивость почти ко всем препаратам бета-лактамов, а также имеют склонность к быстрому распространению резистентных популяций. Полученные результаты представлены в таблице 3.
В нашем эксперименте выявлено 7,7% культур стафилококков (2 штамма S.epidermidis), обладающих метициллинрезистентностью, у которых обнаружен ген тесА Метициллинустойчивость стафилококков - механизм, известный ученым уже более 20 лет. Обеспечивается наличием гена тесА, который кодирует в клетке бактерий дополнительный пенициллинсвязывающий белок ПСБ2а, обладающий низкой аффиностью к бета-лактамам. В случае инфекции, вызванной возбудителем с таким типом резистентности, лечение любым препаратом из группы бета-лактамных антибиотиков становится не эффективным.
В ходе изучения чувствительности к бета-лактамам у энтеробактерий было установлено, что 4,2% культур (5 штаммов E.coli) показали устойчивость к цефалоспоринам 3 поколения (цефотаксим, цефтазидим). Такой результат является показанием для изучения возможного синтеза бета-лактамаз расширенного спектра (БЛРС). С помощью фенотипического метода было установлено, что все 5 штаммов продуцируют эти ферменты, а генотипически установлен тип фермента - blacтx-м. Энтеробактерии, которые обладают таким механизмом устойчивости, клинически становятся нечувствительны ко всем препаратам группы бета-лактамов, кроме карбапенемов.
Еще 1 штамм Е.соН показал устойчивость к меропенему, что является показанием для дальнейшего изучения механизма резистентности. При постановке фенотипических тестов («метод двойных дисков» и С1М) было установлено отсутствие такого опасного механизма, как синтез карбапенемаз, который приводит к устойчивости культуры почти ко всем бета-лактамным соединениям. В связи с получением отрицательного результата при изучении фенотипа, генотипическое исследование этого штамма не выполнялось.
Таблица 3 - Частота встречаемости антибиотикорезистетных штаммов, выявленных фенотипическим и генотипическим методом
№ п/п Группа УПМ Механизм устойчивости, клиническое значение Количество фенотипически выявленных устойчивых штаммов, % Название гена/ число выявленных устойчивых штаммов, %
1 Staphylococcus spp. (n=26) Метициллин устойчивость; неэффективность всех бета-лактамов 7,7 mecA 7,7
2 Enterobacteriaceae (n=48) Синтез БЛРС; неэфективность пенициллинов, цефалоспоринов, монобактамов 4,2 CTX-M 4,2
Синтез карбапенемаз; неэффективность пенициллинов, цефалоспоринов, карбапенемов, монобактамов 0,0
Заключение. Состав нормобиоты организма человека и животных активно изучается. В нашем исследовании рассматривался состав просветной кишечной аэробной нормобиоты домашних животных, которых нередко также называют животные-компаньоны или питомцы. Нами обнаружены представители родов Staphylococcus 25,5% (виды S.hominis, S.cohnii, S.epidermidis, S.hyicus, S.haemolyticus, S.aureus); Enterococcus 27,5% (виды E.durans, E.gallinarum, E.dispar, E.faecalis, E.faecium, E.avium); порядка Enterobacterales 47,0% (Escherichia coli, Klebsiella oxytoca, Citrobacter freundii, Hafnia alvei). Большинство этих представителей также входят в состав транзиторной или об лигатной микробиоты человека.
Выделенные из состава нормобиоты аэробные представители относятся к группе условно-патогенных бактерий, которым отводится все более пристальное внимание ученых в связи с нарастающим числом популяций с признаками приобретенной антибиотикрезистентности. Мониторинг антибиотикочувствительности условно-патогенных возбудителей человека и животных - одна из важных задач лабораторной службы. В нашей работе установлена чувствительность к антимикробным препаратам у стафилококков в отношении цефокситина 92,3%, норфлоксацина 84,6, линезолида 76,9, клиндамицина 53,8, амикацина 46,2, эритромицина 38,5%. Для энтерококков наблюдалось чувствительность к ванкомицину у 100,0% штаммов, норфлоксацину 92,9, ампициллину и гентамицину 82,3, имепенему и линезолиду 71,4%. Энтеробактерии показали чувствительность у 97,9% изолятов к меропенему, 95,8 цефотаксиму, 93,8 к цефтазидиму, 89,6 амоксиклаву, 87,5 левофлоксацину, 85,4% амикацину.
Остальные исследованные штаммы относились к категории резистентных. Значение их устойчивости для клиники и эпидемиологии зависит от механизма, который заложен в геноме бактериальных клеток. Большинство этих изолятов были не опасны, т.к. частота их встречаемости слишком низка, либо скорость распространения детерминант устойчивости очень медленная. Между тем в нашем исследовании выявлены два наиболее опасных механизма резистентности - это метициллинустойчивость у 7,7% стафилококков (2 штамма S.epidermidis), которая обеспечивает этим культурам отсутствие активности всех бета-лактамов. А также синтез blaCTX.M у 4,2% энтеробактерий (5 штаммов E.coli), которые клинически считаются нечувствительными ко всем препаратам группы пенициллинов, цефалоспоринов, монобактамов.
Литература
1. Устойчивость микроорганизмов к антибиотикам: резистома, её объём, разнообразие и развитие/ К. А. Виноградова, В. Г. Булгакова, А. Н. Полин, П. А. Кожевин // Антибиотики и химиотерапия. - 2013. - Т. 58, № 5-6. - С. 38-48.
2. Сидоренко, С. В. Механизмы резистентности микроорганизмов / С. В. Сидоренко, М. В. Эйдельштейн // Практическое руководство по антиинфекционной химиотерапии. - Смоленск : МАКМАХ, 2007. - С. 19-32.
3. Martinez, J. L. The role of natural environments in the evolution of resistance traits in pathogenic bacteria // Proc Biol Sci. - 2009. - Vol. 276, № 1667. - P. 2521-2530. - DOI 10.1098/rspb.2009.0320.
4. Chait, R. What counters antibiotic resistance in nature? / R. Chait, К. Vetsigian, R. Kishony // Nature Chem. Biol. - 2012. - Vol. 8, No 1. - P. 2-5. - DOI 10.1038/nchembio.745.
5. Глобальная стратегия ВОЗ по сдерживанию устойчивости к противомикробным препаратам. - URL: https://apps.who.int/iris/handle/10665/66872?locale-attribute=ru&mode=full/ (дата обращения: 20.09.2022).
6. Борьба с устойчивостью к антибиотикам с позиций безопасности пищевых продуктов в Европе. - URL: https://apps.who.int/iris/handle/10665/326399/ (дата обращения: 20.09.2022).
7. Стратегия предупреждения распространения антимикробной резистентности в РФ на период до 2030 г. : Распоряжение правительства РФ от 25.09.2017 № 2045. - URL: https://www.garant.ru/products/ipo/prime/doc/71677266/ (дата обращения: 20.09.2022).
8. Pitout JD. Enterobacteriaceae that produce extended-spectrum p-lactamases and AmpC P-lactamases in the community: the tip of the iceberg? Curr Pharm Des. 2012 Aug 29 // Curr Pharm Des. 2013. - No 19(2). - Р. 257-63.
9. Раджабова, А. С. Микробиоценоз кишечника домашних собак и кошек при гастрите и колите / А. С. Раджабова // Стратегии и тренды развития науки в современных условиях. - 2017. - № 1 (3). -С.32-35.
10. Dogs are a reservoir of ampicillin-resistant Enterococcus faecium lineages associated with human infections / Damborg P [et al.] // Appl Environ Microbiol. - 2009. - No 75. -Р. 2360-2365.
11. Рабочая тетрадь для лабораторных занятий по дисциплине «Клиническая микробиология» / Сост. А. Л. Бурмистрова, Л. И. Бахарева, Н. Э. Хайдаршина. - Челябинск : Изд-во Челябинского государственного университета, 2021. - С. 8.
12. Определение чувствительности микроорганизмов к антимикробным препаратам: клинические рекомендации. - URL: https://www.antibiotic.ru/files/321/clrec-dsma2018.pdf (дата обращения: 20.09.2022).
13. Гостев, В. В. SCCmec кассеты, эволюция и генетические линии метилциллинрезистентных золотистых стафилококков / В. В. Гостев, С. В. Сидоренко. - URL: https://www.antibiotics-chemotherapy.ru/jour/article/view/456/456 (дата обращения: 20.09.2022).
14. Коробова, А. Г. Мониторинг энтеробактерий с продукцией бета-лактамаз расширенного спектра, выделенных у больных гемобластозами при химиотерапии : специальность 14.01.21 «Гематология и переливание крови», 03.02.03 «Микробиология» : дис. ... канд. мед. наук / Коробова Анна Геннадьевна ; Национальный медицинский исследовательский центр гематологии. - Москва, 2018. - 109 с.
15. Шевченко, О. В. Металло-Р-лактамазы: значение и методы выявления у грамотрицательных неферментирующих бактерий / О. В. Шевченко, М. В. Эйдельштейн, М. Н. Степанова // Клиническая микробиология и антимикробная химиотерапия. - 2007. - Т. 9, № 3. - С.197-288.
16. Clinical and Laboratory Standards Institute. Perfomance Standards for Antimicrobial Susceptibility Testing; Twenty-Third Information Supplement. CLSI document M100-S23. - 2013. - P. 53-56.
17. Проведение ПЦР с детекцией результата в режиме реального времени при помощи системы детекции продуктов ПЦР в режиме реального времени «iCycler iQ5» (BioRad): руководство пользователя.
18. Ausvet. EpiTools epidemiological calculators. 2018. - URL: http://epitools.ausvet.com.au/content.php?page=CIProportion (дата обращения: 15.11.2018).
19. Hammer, О. PAST: Paleontological Statistics Software Package for Education and Data Analysis / О. Hammer, D. А. Т. Harper, P. D. Ryan // Palaeontologia Electronica. - 2001. - No 1. - P. 1-9.
References
1. Resistance of microorganisms to antibiotics: resistome, its volume, diversity and development / K. A. Vinogradova, V. G. Bulgakov, A. N. Polin, P. A. Kogevin // Antibiotics and chemotherapy. - 2013. -T. 58, No. 5-6. - P. 38-48.
2. Sidorenko, S. V. Mechanisms of resistance of microorganisms / S. V. Sidorenko, M. V. Eidelstein // Practical guide to anti-infective chemotherapy. - Smolensk : MACMAH, 2007. - Р. 19-32.
3. Martinez, J. L. The role of natural environments in the evolution of resistance traits in pathogenic bacteria // Proc Biol Sci. - 2009. - Vol. 276, № 1667. - P. 2521-2530. - DOI: 10.1098/rspb.2009.0320.
4. Chait, R. What counters antibiotic resistance in nature? / R. Chait, К. Vetsigian, R. Kishony // Nature Chem. Biol. - 2012. - Vol. 8, No 1. - P. 2-5. - DOI 10.1038/nchembio.745.
5. WHO global strategy to contain antimicrobial resistance. - URL: https://apps.who.int/iris/handle/10665/66872?locale-attribute=en&mode=full/ (accessed 09/20/2022).
6. Combating antibiotic resistance from a food safety perspective in Europe. - URL: https://apps.who.int/iris/handle/10665/326399/ (accessed 20.09.2022).
7. Strategy for preventing the spread of antimicrobial resistance in the Russian Federation for the period up to 2030: Decree of the Government of the Russian Federation of September 25, 2017 No 2045. -URL: https://www.garant.ru/products/ipo/prime/doc/71677266/ (date of access: 20.09.2022).
8. Pitout JD. Enterobacteriaceae that produce extended-spectrum p-lactamases and AmpC P-lactamases in the community: the tip of the iceberg? Curr Pharm Des. 2012 Aug 29 // Curr Pharm Des. 2013.
- No 19 (2). - Р. 257-63.
9. Radzhabova A.S. Intestinal microbiocenosis of domestic dogs and cats with gastritis and colitis / A. S. Radjabova // Strategies and trends in the development of science in modern conditions. - 2017. - No 1 (3).
- Р.32-35.
10. Dogs are a reservoir of ampicillin-resistant Enterococcus faecium lineages associated with human infections / Damborg P [et al.] // Appl Environ Microbiol. - 2009. - No 75. -Р. 2360-2365
11. Workbook for laboratory studies in the discipline «Clinical Microbiology» / Comp. A. L. Burmistrova, L. I. Bakhareva, N. E. Khaidarshina. - Chelyabinsk : Publishing house of the Chelyabinsk State University, 2021. - P. 8.
12. Determination of the sensitivity of microorganisms to antimicrobial drugs: clinical guidelines. URL : https://www.antibiotic.ru/files/321/clrec-dsma2018.pdf (date of access: 20.09.2022).
13. Gostev, V. V. SCCmec cassettes, evolution and genetic lines of methylcillin-resistant Staphylococcus aureus / V. V. Gostev, S. V. Sidorenko. - URL: https://www.antibiotics-chemotherapy.ru/jour/article/view/456/456 (date of access: 20.09.2022).
14. Korobova, A. G. Monitoring of enterobacteria with the production of extended-spectrum beta-lactamases isolated from patients with hemoblastoses during chemotherapy : specialty 14.01.21 «Hematology and blood transfusion», 03.02.03 «Microbiology» : dissertation for the degree of Candidate of Medical Sciences / Korobova Anna Gennadievna ; National Medical Research Center for Hematology. - Moscow, 2018. - 109 p.
15. Shevchenko, O. V. Metallo-P-lactamases: significance and methods of detection in gram-negative non-fermenting bacteria / O. V. Shevchenko, M. V. Eidelstein, M. N. Stepanova // Clinical microbiology and antimicrobial chemotherapy. - 2007. - Vol. 9, No 3. - P. 197-288.
16. Clinical and Laboratory Standards Institute. Perfomance Standards for Antimicrobial Susceptibility Testing; Twenty-Third Information Supplement. CLSI document M100-S23. - 2013. - P. 53-56.
17. Conducting PCR with real-time result detection using the iCycler iQ5 real-time PCR product detection system (BioRad): user manual.
18. Ausvet. EpiTools epidemiological calculators. 2018. - URL: http://epitools.ausvet.com.au/content.php?page=CIProportion (дата обращения: 15.11.2018).
19. Hammer, О. PAST: Paleontological Statistics Software Package for Education and Data Analysis / О. Hammer, D. А. Т. Harper, P. D. Ryan // Palaeontologia Electronica. - 2001. - No 1. - P. 1-9.
© Хайдаршина Н.Э, Даллакян К.В., Тимербаева Р.Р. 2023
