30Анализ современного природного фона почв и донных осадков разных биоклиматических зон Якутии по результатам микробиологических исследований
Ерофеевская Лариса Анатольевна,
кандидат биологических наук, старший научный сотрудник, Институт проблем нефти и газа СО РАН, доцент, Горный институт СВФУ им. М.К. Аммосова, кафедра техносферной безопасности, lora-07.65@mail.ru
Салтыкова Анастасия Леонидовна,
магистрант, ФГБОУ ВО «Арктический государственный агротехнологический университет», ny94@list.ru Вит Алина Александровна,
аспирант, ФИЦ «Якутский научный центр Сибирского отделения Российской академии наук», alina_vit@list.ru
Представлены результаты исследования микробных комплексов почв и донных осадков арктической, субарктической и умеренной зон Республики Саха (Якутия). Показано, что в почвах и донных осадках Арктической зоны общая численность психрофильной группы микроорганизмов доминирует над численностью мезофильной группы. В умеренной зоне наоборот численность численность мезофильной группы доминирует над численностью психрофильной группы. Это связано с особенностями почвенно-климатических условий исследуемых районов. Пейзаж выделенных культур представлен микроорганизмами различных таксономических принадлежностей. Доля отдельных групп микроорганизмов от общей идентифицированной микрофлоры распределена следующим образом: 54,7% - аэробные бактерии с доминированием родов: Bacillus; Acinetobacter, Pseudomonas; 18,3% - актинобактерии с доминированием Streptomyces и Rhodococcus; 14,7% - дрожжеподобные грибы c доминированием родов: Сandida и Rodotorula; 12,6% -энтеробактерии с доминированием Serrathia, Citrobacter, Klebsiella, Enterobacter; 4,2% - анаэробные спо-рообразующие бактерии с доминирующим родом Clostridium; 2,1% - плесневые грибы с доминированием родов: Aspergillus; Penicillium. Что свидетельствует о том, что низкие температурные условия окружающей среды не являются лимитирующим фактором для микробоценоза почв и донных отложений криолитозоны. Ключевые слова: Арктика, микроорганизмы, нефтезагрязнение, экология, почва, криолитозона.
Работа выполнена в рамках государственного задания Министерства науки и высшего образования Российской Федерации по теме АААА-А21-121011490054-0, рег. № 122011200369-1, FWRS-2021-0002 с использованием научного оборудования ЦКП Федерального исследовательского центра Якутского научного центра СО РАН в рамках реализации мероприятий по гранту № 13.ЦКП.210016.
Введение. В настоящее время ситуацию с состоянием почвенного покрова Якутии нельзя назвать благополучной. Причиной тому являются как антропогенные, так и естественные процессы, которые, тем не менее, усугубляются деятельностью человека. Практически все почвы территории Якутии в той или иной степени загрязнены. Чистыми (правильнее сказать - условно чистыми) остаются совсем незначительные участки, которые, как правило, расположены в районах особо-охраняемых природных территориях (ООПТ) [1]. Что касается микробиологической активности мерзлотных почв Якутии, то они проводится эпизодически, поэтому сих пор нет целостной картины численного и качественного состава микрофлоры почв мерзлотных ландшафтов [24]. Вместе с тем почвенные микроорганизмы очень чутко реагируют на изменения
окружающей среды, что определяет целесообразность использования их в мониторинге почв, подверженных загрязнению различными поллютантами [3]. Характеристика микробных сообществ разных мест обитания особенно актуальна в связи с изучением и сохранением биоразнообразия экосистем [2].
Из числа всех обитателей почвы, на микроорганизмы приходится 85%. Особенно богато населены микроорганизмами поверхностные горизонты (до 20 см), а с углублением их число становится все меньше и меньше, хотя не редки случаи, когда они обнаруживаются и на значительных глубинах [5].
Характеризуя микробное население различных типов почв, следует указать на большую его изменчивость не только в течение года, но и небольших отрезков времени [6]. Численность микроорганизмов в почвах изменяется не только в связи с сезонными изменениями экологических условий, но и в силу внутренних закономерностей развития микробных популяций [7]. Исторические абиотические факторы: pH, ГС, влажность, химические превращения в почвах не биотического характера могут быть первоочередными регуляторами встречаемости для многих грибов, но имеются доказательства, что регулирование может быть связано, в первую очередь, с состоянием микробного сообщества и в настоящее время не поддается описанию [8]. Исследование качественного и количественного состава почвенной микрофлоры дают во многом условные результаты, однако, если применять в работе одни и те же методики исследований, то можно добиться показательных значений [9].
Относительно региональных почв можно сказать, что в последнее время стало уделяться внимание исследованиям микробиологической активности почв Центральной и Южной Якутии. Уникальные геолого-геохимические вечно-мерзлотные проявления Якутии и обнаруживаемые в них сообщества психрофильных и мезофильных микроорганизмов являются великолепными моделями для исследования взаимодействия биологических систем с экстремальными физикохимическими условиями среды их обитания или захоронениями [10-14]. Особенно впечатляют микроорганизмы, развивающиеся в условиях постоянной смены физикохимических факторов окружающей среды в широком диапазоне низких температур [15].
Несмотря на многочисленность современных публикаций, имеющиеся в литературе данные по изменению численности и биомассы почвенных микроорганизмов содержат немало противоречий и пока не позволяют сделать однозначных выводов [16]. Тем не менее, имеющиеся сведения о микробиологическом состоянии почв арктической зоны Якутии, в частности дельты реки Лена (остров Самой-ловский: органо-аккумулятивные, альфегумусовые, криотурбированные, торфяные, глеевые и стратоземы) свидетельствуют, что наиболее высокая микробиологическая активность протекает в почвах, где выражены процессы торфообразова-ния и торфонакопления, расположенные на более дренированных территориях. При возрастании обводненности и застоя влаги микробиологическая активность падает, наименьшие показатели отмечаются в стратоземах, где ежегодно происходят сезонные подтопления речными водами, размыв гумусоаккумулятивных горизонтов и переотложенные материала, что в большинстве случаем неблагоприятно для биологической активности почв [17]. В исследованиях [16] показано, что арктическая тундра является наиболее крайним случаем с очень малым содержанием грибных пропагул и с выраженным уменьшением его по направлению к вечной мерзлоте (на 18-20 см под поверхностью). Субарктическая тундра имеет очень высокую продуктивность, которая превосходит продуктивность степи. В бедных пустынных почвах грибной рост ингибирован высушиванием в нескольких верхних
см и количество колониеобразующих единиц достигает максимума на глубине 1020 см. Таким образом, климатические особенности экосистемы тундры (низкие температуры воздуха и почвы, близкое залегание вечной мерзлоты и связанное с этим малое испарение влаги) не исключают, разнообразия почвенной микробиоты в достоверных количествах [18].
Цель настоящей работы - изучить современный природный фон мерзлотных почв и донных осадков разных биоклиматических зон Якутии по мезофильной и психро-фильной группам микроорганизмов.
Объекты исследования: арктическая зона Якутии (море Лаптевых, дельта р. Лена, Устье р. Индигирка, Восточно-Сибирское море, р. Колыма правый берег, п. Тикси, Булунского района, п. Нижнеянск, Усть-Янского района), субарктическая зона (с. Хонуу, Момский район, северо-восточная часть Якутии), умеренная зона (Якутский городской округ, Ленский район, Вилюйский район (р. Вилюй)).
Материалы и методы исследований.
Материалом для исследований служили фоновые и техногенные (нефтезагряз-ненные) почвы и донные осадки, отобранные из различных климатических зон Республики Саха (Якутия).
Выделение микроорганизмов из почв и донных осадков проводили по общепринятым в микробиологии классическим методом посева на дифферинциальные и диагностические питательные среды [19]
Оценку степени обогащенности почв и донных осадков микроорганизмами проводили в соответствии с общепринятой в микробиологии шкале Звягинцева [20].
Результаты исследований.
Из почв и донных осадков выделено большое разнообразие микроорганизмов различных таксономических принадлежностей. По степени обогащенности гетеротрофными микроорганизмами региональный фон почв и донных осадков оценивается в арктической зоне - от бедных до очень бедных; в субарктической зоне - от бедных до средне обогащенных; в умеренной зоне - от средне обогащенных до очень богатых.
Донные осадки. В арктической зоне наиболее обеспеченные микрофлорой донные осадки р. Колыма и Восточно-Сибирского моря. По численности психрофиль-ными (холодоустойчивыми) бактериями более богаты донные осадки Восточно-Сибирского моря.
В умеренной зоне донные осадки р. Вилюй по мезофильным микроорганизмам классифицируются, как средне обогащенные; по психрофильным микроорганизмам -очень бедные.
Относительно групповой принадлежности микроорганизмов стоит обратить внимание, что в донных осадках р. Колыма (арктическая зона) численность микроскопических грибов выше, чем бактерий и актинобактерий в то время, как в р. Вилюй (умеренная зона), наоборот, численность бактерий на порядок выше, чем грибов и актинобактерий. Связано это вероятно с почвенными условиями, почвенные грибы предпочитают подкисленный субстрат, в то время, как актинобактерии и грибы лучше развиваются в нейтральной и слабощелочной среде.
Почвы.
Численный состав микрофлоры исследуемых образцов почв Якутии распределился следующим образом:
- арктическая зона: бактерии ^ актинобактерии ^ микроскопические грибы.
-умеренная зона: бактерии ^ микроскопические грибы ^ актинобактерии.
Арктическая зона Якутии.
В арктической зоне почвы острова Самойловский и поселка Тикси по мезофильной группе почвы классифицируются как бедные и очень бедные; по психрофильной группе - очень бедные и средне обогащенные.
Из микроорганизмов, принимающих участие в трансформации и иммобилизации питательных веществ в мерзлотных почвах арктической зоны выделены дрожжи двух родов (рр.) Candida и Rodotorulla и непатогенные микроскопические грибы Pénicillium notatum, Trichoderma viride и несколько видов патогенных грибов рр. Mucor, Phytophthora, Aspergillus (A. fumigatus, A. niger, A. flatus), формирующих темный мицелий и растительные патогены Acremonium gramineum (Cephalosporium); Alternaria ssp. В группе актинобактериальной линии доминировали всего два рода: Streptomyces и Nocardia.
По численности аммонифицирующих бактерий в почвах доминировал род (р.) Proteus; в донных осадках - Pseudomonas. Роль выделенных микроорганизмов заключался в активации процессов разложения белков и мочевины, поступающих в субстрат на начальном этапе распада отмирающих растений и животных до аминокислот, которые в процессе дезаминирования образуют различные органические соединения и аммиак.
Активность азотфиксирующих микроорганизмов в почвах арктической зоны Якутии очень слабая (не более 4%). Это свидетельствует о низком плодородии почв и обусловлено абиотическими факторами, в частности температурой окружающей среды, поскольку развитие бактерий, участвующих в фиксации азота в почве происходит в диапазоне температур +10...+45 °C, оптимум роста +20...+35 °C.
Из микроорганизмов, усваивающих минеральные формы азота выделены преимущественно спорообразующие аэробные бактерии р. Bacillus. Коэффициент минерализации в среднем - 0,8 усл.ед.
Целлюлозолитические микроорганизмы представлены грибами р.Aspergillus и миксобактериями.
Из группы углеводородокисляющих микроорганизмов (УОМ) из почв и донных осадков арктической и субарктической зон Якутии выделены бактерии рр. Exiguobacterium, Brevundimonas, Pseudomonas, Planomikrobium, Bacillus; плесневые грибы рр. Trichodуrma, Aspergillus и Penicillium.
Умеренная зона Якутии.
Почвы умеренной зоны Якутии по группе мезофильных микроорганизмов относятся к очень богатым, по группе психрофильных микроорганизмов - к средне обогащенным. Результаты исследований физиологических групп микроорганизмов показали значительное увеличение численности почвенной микрофлоры в сравнении с арктической зоной. Численность бактерий выше, чем микроскопических грибов и ак-тинобактерий. Коэффициент минерализации органических соединений в почвах умеренной зоны в среднем составил 2,5 усл.ед., что выше в 2,5 раза, чем в почвах и донных осадках арктической зоны. Из почвогрунтов умеренной зоны выделены
плесни рр: Penicillium chrysogenum, Fusarium solani, Aspergillus niger, Trichoderma viride, Mucor sp., Acremonium sp. Все выделенные грибы по характеру питания являются сапрофитами. Penicillium играет важную роль в минерализации органических остатков. Trichoderma, Aspergillus и Fusarium, активно окисляют углеводородные (УВ) субстраты. Mucor активируют распад растительных остатков в почве и характеризуются как быстрорастущие плесени, способствующие колонизации и разложению органических веществ. В качестве доминантов в почвах умеренной зоны Якутии отмечены: Mucor sp., Acremonium sp. Penicillium chrysogenum, Aspergillus niger.
В бактериальной группе доминирующее положение заняли спорообразующие бактерии рр. Bacillus и Clostridium, и грамотрицательные неферментирующие бактерии р. Acinetobacter и Pseudomonas, энтеробактерии р. Klebsiella. Все выделенные бактериальные культуры обладают свойством криофильности. Это позволяет им благополучно переживать низкие температуры окружающей среды.
По общей численности микроорганизмов, используемых различные формы азота почвы умеренной зоны Якутии оцениваются, как средне обогащенные. Активность и степень накопления в почвах бактериальной азотфиксации в среднем составляет 60%, что свидетельствует об ассоциативных взаимодействиях почвенных микроорганизмов и растительного покрова. В качестве азотфиксаторов в почвах выступают бактерии рода Clostridium.
Актинобактерии представлены рр. Streptomyces, Nocardia, Exyguobacterium, Rhodococcus, Kocuria, Micromonospora.
Группу аммонификаторов представляют бактерии рр. Bacillus и Pseudomonas. В результате деятельности этих групп микроорганизмов в почвах органический азот переходит в минеральные формы.
Вывод.
По результатам исследований установлено, что микробиологическая активность в почвах и донных осадках в умеренной зоне Якутии выше, чем в арктической зоне. Это можно объяснить влиянием абиотических факторов. Микробная минерализация органических веществ в почвах арктической зоны ниже в 2,5 раза, чем в почвах умеренной зоны, что обусловлено более низкой численностью микроорганизмов, усваивающих минеральные формы азота, а также отсутствием или очень незначительной активностью азотфиксирующих бактерий (не выше 4%).
Литература
1. Новгородов А.А., Евдохарова К.И., Пухова С.П. Общая характеристика экологического состояния почв Якутии // Материалы XII Международной студенческой научной конференции «Студенческий научный форум-2020» URL: https://scienceforum.ru/2020/article/2018023300">https://scienceforum.ru/2020/article/201 8023300 (дата обращения: 23.09.2022).
2. Иванова Т.И. Структура и динамика активности микробных сообществ мерзлотных почв Центральной и Южной Якутии: Автореф. дис. канд. биол. наук. Улан-Удэ: БГУ, 2006. - 22 с.
3. Кузьмина Н.П. Микробиоценозы аласных и антропогенно-трансформированных почв Центральной Якутии: Автореф. дис. канд. биол. наук. УланУдэ: БГУ, 2010. - 22 с.
4. Стручкова Л.К. Микрофлора мерзлотных лугово-степныхпочв Центральной Якутии и влияние на неё разных доз тяжелых металлов: Автореф. дис. канд. биол. наук. Благовещенск - 2011. - 18 с.
5. Методы почвенной микробиологии и биохимии / под ред. Д.Г. Звягинцева. - М.: Изд-во МГУ им. М.В. Ломоносова, 1991. - 304 с.
6. Паринкина О.М. Микрофлора тундровых почв. Экологические особенности и продуктивность. JL: Наука, 1989. - 159 с.
7. Karl D.M. Determination of in situ microbial biomass, viability, metabolism, and growth, / Bacteria in Nature. V. 2. Methods and Special applications in Bacterial Ecology. / Y.S.Peinelexter and E.K.Leadbetter, eds. / Plenum Press. New York and London. 1986. -P, 55-89,
8. Christensen M. A. View of fungal ecology // Mycologia. 1989. Vol. 81, N 1. - P. 1-19.
9. Мишустин Е. Н. Биологический азот и его значение в сельском хозяйстве / Е. Н. Мишустин // Вестн. АН СССР. - 1979. - № 3. - С. 59-68.
10. Мазилкин И. А. Микробиологическая характеристика дерново-лесных и пере-гнойно-карбонатных почв Олекминского района ЯАССР // Материалы о природных условиях и сельском хозяйстве юго-запада Якутской АССР. - М.: Изд-во АН СССР, 1956. - С. 135-176.
11. Напрасникова Е.В., Макарова А.П., Данилова А.А. Биологическая активность мерзлотнотаежной палевой слабоосолоделой почвы Центральной Якутии // Биол. науки. 1988. № 7. - С. 93-97.
12. Иванова Т.И., Кононова Н.П., Николаева Н.В., Чевычелов А.П. Микроорганизмы лесных почв Центральной Якутии // Почвоведение. 2006. № 6. - С. 735- 740.
13. Иванова Т.И., Кононова Н.П., Саввинов Д. Д. Микробоценозы мерзлотных почв долины Туймаада Центральной Якутии // Известия РАН. Серия Биологическая, 2014, № 6. - С. 573-585.
14. Иванова Т.И., Кузьмина Н.П., Чевычелов А.П. Численность микроорганизмов и уровни микробиологи ческой активности мерзлотных антропогеннотрансформиро-ванных палевых почв Якутии // Почвоведение. 2008. № 11. - С. 1371-1380.
15. Иванова Т.И., Кузьмина Н.П., Чербунина М.Ю. Микробное сообщество активного слоя почвы из обнажения Мамонтовой горы (Центральная Якутия) // Вестник Северо-Восточного научного центра ДВО РАН, 2017, № 4. - С. 95-102.
16. Гейдебрехт В.В. Распределение микроорганизмов по профилю почв разных типов: Дис. канд. биол. наук. Москва. МГУ им. М.В. Ломоносова, 1999. - 136 с.
17.Орлова К.С., Поляков В.И. Микробиологическая активность почв дельты реки Лена // XXIV Международная научная конференция студентов, аспирантов и молодых ученых: Секция «Почвоведение»; 10-14 апреля 2017 г., Москва, МГУ имени М.В. Ломоносова, факультет почвоведения: Тезисы докладов / Сост. Л.А. Поздняков. - М.: МАКСПресс, 2017. - С. 42.
18. Панюков А.Н. Биологическое разнообразие и продуктивность антропогенных экосистем Крайнего Севера / А.Н. Панюков, Н.С. Котелина, И.Б. Арчегова, Ф.М. Ха-бибуллина. - Екатеринбург, 2005. - 120 с.
19. Методы почвенной микробиологии и биохимии / Под ред. Д.Г. Звягинцева. - М.: Изд-во МГУ, 1980. - 224 с.
20. Звягинцев Д.Г. Биологическая активность почв и шкалы для оценки некоторых ее показателей // Почвоведение, 1978.- № 6.- С. 48-54.
Analysis of the modern natural background of soils and bottom sediments of different bioclimatic zones of Yakutia based
on the results of microbiological studies Erofeevskaya L.A., Saltykova A.L., Vit А.A.
Institute of Oil and Gas Problems of Siberian Branch of RAS, Arctic State Agrotechnological University, Yakut Scientific Center SB RAS
The results of the study of microbial complexes of soils and bottom sediments of the Arctic, subarctic and temperate zones of the Republic of Sakha (Yakutia) are presented. It is shown that in the soils and bottom sediments of the Arctic zone, the total number of the psychrophilic group of microorganisms dominates over the number of the mesophilic group. In the temperate zone, on the contrary, the number of the mesophilic group dominates the number of the psychrophilic group. This is due to the peculiarities of the soil and climatic conditions of the studied areas. The landscape of the isolated cultures is represented by microorganisms of various taxonomic accessories. The proportion of individual groups of microorganisms from the total identified microflora is distributed as follows: 54.7% - aerobic bacteria with the dominance of genera: Bacillus; Acinetobacter; Pseudomonas; 18.3% - Actinobacteria with the dominance of Streptomyces and Rhodococcus; 14.7% - yeast-like fungi with the dominance of genera: Candida and Rodotorula; 12.6% - Enterobacteria with the dominance of Serrathia, Citrobacter, Klebsiella, Enterobacter; 4.2% - anaerobic spore-forming bacteria with the dominant genus Clostridium; 2.1% - mold fungi with the dominance of genera: Aspergillus; Penicillium. This indicates that low ambient temperature conditions are not a limiting factor for the microbial cenosis of soils and bottom sediments of the cryolithozone. Keywords: Arctic, microorganisms, oil pollution, ecology, soil, cryolithozone. References
1. Novgorodov A.A., Evdokharova K.I., Pukhova S.P. General characteristics of the ecological state of the soils of Yakutia //
Proceedings of the XII International Student Scientific Conference "Student Scientific Forum-2020" URL: https://scienceforum.ru/2020/article/2018023300">https://scienceforum.ru/2020/article/ 2018023300 (date of access: 09/23/2022).
2. Ivanova T.I. Structure and activity dynamics of microbial communities in permafrost soils of Central and Southern Yakutia:
Abstract of the thesis. dis. cand. biol. Sciences. Ulan-Ude: BSU, 2006. - 22 p.
3. Kuzmina N.P. Microbiocenoses of alas and anthropogenically transformed soils of Central Yakutia: Abstract of the thesis. dis.
cand. biol. Sciences. UlanUde: BSU, 2010. - 22 p.
4. Struchkova L.K. Microflora of permafrost meadow-steppe soils in Central Yakutia and the influence of different doses of heavy
metals on it: Abstract of the thesis. dis. cand. biol. Sciences. Blagoveshchensk - 2011. - 18 p.
5. Methods of soil microbiology and biochemistry / ed. D.G. Zvyagintsev. - M .: Publishing house of Moscow State University. M.V.
Lomonosov, 1991. - 304 p.
6. Parinkina O.M. Microflora of tundra soils. Ecological features and productivity. JL: Nauka, 1989. - 159 p.
7. Karl D.M. Determination of in situ microbial biomass, viability, metabolism, and growth, / Bacteria in Nature. V.2. Methods and
Special applications in Bacterial Ecology. / Y.S. Peinelexter and E.K. Leadbetter, eds. / Plenum Press. New York and London. 1986. - P, 55-89,
8. Christensen M. A. View of fungal ecology // Mycology. 1989 Vol. 81, No. 1. - P. 1-19.
9. Mishustin E. N. Biological nitrogen and its importance in agriculture / E. N. Mishustin // Vestn. Academy of Sciences of the
USSR. - 1979. - No. 3. - S. 59-68.
10. Mazilkin I. A. Microbiological characteristics of soddy-forest and humus-calcareous soils of the Olekminsky district of the Yakut Autonomous Soviet Socialist Republic // Materials on natural conditions and agriculture of the south-west of the Yakut ASSR.
- M.: Publishing House of the Academy of Sciences of the USSR, 1956. - S. 135-176.
11. Naprasnikova E.V., Makarova A.P., Danilova A.A. Biol. science. 1988. No. 7. - S. 93-97.
12. Ivanova T.I., Kononova N.P., Nikolaeva N.V., Chevychelov A.P. Microorganisms of forest soils of Central Yakutia // Eurasian soil science. 2006. No. 6. - P. 735-740.
13. Ivanova, T.I., Kononova, N.P., and Savvinov, D.D., Microbocenoses of permafrost soils in the Tuymaada valley of Central Yakutia, Izv. Series Biological, 2014, No. 6. - P. 573-585.
14. Ivanova T.I., Kuzmina N.P., Chevychelov A.P. Abundance of microorganisms and levels of microbiological activity in permafrost
anthropogenically transformed pale yellow soils of Yakutia, Eurasian Soil Sci. 2008. No. 11. - S. 1371-1380.
15. Ivanova T.I., Kuzmina N.P., Cherbunina M.Yu. Microbial community of the active soil layer from the outcrop of Mammoth Mountain (Central Yakutia) // Bulletin of the North-Eastern Scientific Center of the Far Eastern Branch of the Russian Academy of Sciences, 2017, No. 4. - P. 95-102.
16. Heidebrecht V.V. Distribution of microorganisms along the profile of soils of different types: Dis. cand. biol. Sciences. Moscow. Moscow State University M.V. Lomonosov, 1999. - 136 p.
17. Orlova K.S., Polyakov V.I. Microbiological activity of soils in the Lena River Delta // XXIV International Scientific Conference of
Students, Postgraduates and Young Scientists: Section "Soil Science"; April 10-14, 2017, Moscow, Moscow State University named after M.V. Lomonosov, Faculty of Soil Science: Abstracts / Comp. L.A. Pozdnyakov. - M.: MAKSPress, 2017. - P. 42.
18. Panyukov A.N. Biological diversity and productivity of anthropogenic ecosystems of the Far North / A.N. Panyukov, N.S. Kotelina, I.B. Archegova, F.M. Khabibullin. - Yekaterinburg, 2005. - 120 p.
19. Methods of soil microbiology and biochemistry, Ed. D.G. Zvyagintsev. - M.: Publishing house of Moscow State University, 1980.
- 224 p.
20. Zvyagintsev D.G. Biological activity of soils and scales for evaluating some of its indicators // Soil Science, 1978.- No. 6.- P.
48-54.
