CC BY
56
КЛИНИЧЕСКАЯ ФАРМАКОЛОГИЯ
АКТУАЛЬНЫЕ АСПЕКТЫ ПЛАНИРОВАНИЯ ДИЗАЙНА ИССЛЕДОВАНИЙ БИОЭКВИВАЛЕНТНОСТИ ПРЕПАРАТОВ АТОРВАСТАТИНА
Д.П. Ромодановский, Д.В. Горячев
Федеральное государственное бюджетное учреждение «Научный центр экспертизы средств медицинского применения» Министерства здравоохранения Российской Федерации, Москва
Резюме: Проанализированы требования органов, контролирующих обращение лекарственных препаратов в различных странах, к проведению исследований биоэквивалентности. Рассмотрены исследования биоэквивалентности воспроизведенных препаратов аторвастатина отечественного и зарубежного производства с целью унификации требований (подходов) к проведению исследований биоэквивалентности аторвастатина в РФ. Это связано с тем, что в настоящее время имеются значительные различия в дизайне планируемых или проведенных исследований (набирается разное количество здоровых добровольцев, определяют концентрацию либо только исходного вещества, либо совместно с активным метаболитом, что имеет непосредственное влияние на результаты исследований). Проведенный анализ позволяет заключить, что рекомендуемым количеством добровольцев для проведения исследований биоэквивалентности аторвастатина должно быть не менее 24 здоровых добровольцев; необходимо определять фармакокинетические параметры как аторвастатина, так и его основного активного метаболита (ортогидроксилированный метаболит).
Ключевые слова: исследование биоэквивалентности, аторвастатин, ортогидроксилированный метаболит аторвастатина.
CURRENT ASPECTS OF PLANNING BIOEQUIVALENCE STUDIES DESIGN FOR ATORVASTATIN PREPARATIONS
D.P. Romodanovsky, D.V. Goryachev
Federal State Budgetary Institution «Scientific Centre for Expert Evaluation of Medicinal Products» of the Ministry of Health of the Russian Federation, Moscow
Abstract: The article presents the analysis of the requirements for conducting bioequivalence studies certified by the authorities, responsible for the control of drug circulation in different countries. It considers bioequivalence studies of Atorvastatin generic drugs by domestic and foreign manufacturers in order to harmonize the requirements (approaches) to Atorvastatin bioequivalence studies in the Russian Federation. The reason is because at present there are significant differences in planned or completed research design (different number of healthy volunteers involved, concentration is measured only for initial material, or in conjunction with an active metabolite, which impacts directly the results of the studies). The performed analysis allows to infer that the recommended number of volunteers for bioequivalence studies of Atorvastatin should not be less than 24 healthy volunteers. It is necessary to determine the pharmacokinetic parametersfor both Atorvastatin and it’s main active metabolite (hydroxilated metabolite).
Key words: bioequivalence study, Atorvastatin, Atorvastatin ortho-hydroxilated metabolite.
ВВЕДЕНИЕ
В настоящее время одной из основных причин высокой смертности в развитых странах являются заболевания сердечно-сосудистой системы. Одним из главных факторов их развития является нарушение липидного обмена. Общепризнанно, что стандартом гиполипидемической терапии в настоящее время являются ингибиторы ГМГ-КоА-редуктазы.
Аторвастатин является одним из наиболее известных и широко применяющихся ингибиторов ГМГ-КоА-редуктазы. В настоящее время регистрируется большое количество воспроизведенных препаратов аторвастатина. Как известно, требованием к регистрации для большинства воспроизведенных препаратов является проведение исследований биоэквивалентности в сравнении с зарегистрированным препаратом аналогом (за исключением препаратов, для которых проведение данного исследования невозможно) [1].
В исследованиях для определения биоэквивалентности после однократного приема исследуемой дозы, параметрами для анализа являются АиС^ (площадь под кривой «концентрация-время» в интервале времени 0—^), или, в соответствующих случаях, АиС72ч (площадь под кривой «концентрация-время» в интервале времени 0—72 часа) и Стах (максимальная концентрация лекарственного вещества). В исследованиях с длительностью отбора проб плазмы крови в течение 72 ч, и где концентрация вещества в 72 часа еще определяется, АиСет и остаточная площадь не рассчитываются, достаточно определения АиС усеченного на 72 часа, АиС72ч. Критерием для установления биоэквивалентности (БЭ) лекарственных препаратов для применения внутрь является отношение фармакокинетических параметров Стах и АиС исходного вещества или активного метаболита исследуемого препарата к таковым препарата сравнения, которое должно
лежать в интервале 80,00—125,00% при 90-процентном доверительном интервале. Однако требования к проведению исследований биоэквивалентности атор-вастатина несколько различаются в разных странах, главным образом, по критерию необходимости изучения фармакокинетики активных метаболитов.
Регулирующие органы, такие как Американский комитет по контролю за пищевыми продуктами и лекарствами (Food and Drug Administration — FDA), Европейское агентство по лекарственным препаратам (European Medicines Agency — EMA) и Управление по терапевтическим продуктам Министерства здравоохранения Канады (Health Canada’s Therapeutic Products Directorate — TPD) обычно рекомендуют, чтобы определялась концентрация исходного вещества [2—5]. Основанием для этой рекомендации является то, что AUC исходного вещества является более чувствительна к изменениям, чем метаболиты, которые в большей степени отражают метаболизм, распределение и выведение. В случае с лекарственными препаратами, чьи метаболиты вносят значительный вклад в безопасность и/или эффективность применения препарата, некоторые регулирующие органы, такие как FDA и TPD требуют для подтверждения биоэквивалентности определения помимо исходного активного компонента, также определения и метаболитов в качестве дополнительной информации [6]. Так как в ряде случаев активные метаболиты превосходят по своей фармакологической активности исходные вещества, т.е. эффективность и безопасность препарата в большей степени обусловлены концентрацией метаболита, чем концентрацией исходного вещества. Поэтому определение концентрации активных метаболитов может иметь большое клиническое значение. Как известно, аторвастатин метаболизируется в печени изоферментом CYP3A4 до активных метаболитов: орто- и парагидрокси-лированные метаболиты аторвастатина. Около 70% ингибирующей активности в отношении ГМГ-КоА-редуктазы связано с этими активными метаболитами. Ортогидроксилированный метаболит аторвастатина преобладает в системном кровотоке по сравнению с парагидроксиметаболитом.
Тем не менее, позиция EMA в отношении рассмотрения активных метаболитов для оценки БЭ отличается от позиций FDA и TPD в отношении того, что требуется только анализ исходного вещества при проведении исследований БЭ. В текущем руководстве EMA по проведению исследований БЭ, четко указывается, что Cmax исходного соединения, как правило, более чувствительна в обнаружении различий между сравниваемыми препаратами в скорости поглощения, а не C метаболита. Также уточняется,
’ max J ’
что нет необходимости в определении активных метаболитов, если есть возможность определения концентрации исходного вещества.
EMA и TPD не имеют специальных общих руководств по проведению исследований БЭ для аторвастатина, т.е. строго регламентирующих необходимость определения концентрации метаболитов аторвастатина или выбор дозы для исследования биоэквивалентности. В руководстве FDA по проведению исследований биоэквивалентности для аторва-статина рекомендовано проведение исследования с определением дополнительно активных метаболитов (орто- и парагидроксиметаболитов) [7].
МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ
Нами был проведен анализ 18 отчетов и протоколов исследований биоэквивалентности по материалам дел, поступивших в ФГБУ «НЦЭСМП» Министерства здравоохранения РФ с целью регистрации, на основании результатов исследований биоэквивалентности аторвастатина или с целью получения разрешения на проведение клинических исследований биоэквивалентности за период с 2006 по 2012 г. (Табл. 1, 2, 3).
РЕЗУЛЬТАТЫ И ОБСУЖДЕНИЕ
Таким образом, проанализировано 18 дел (Табл. 4).
В исследованиях биоэквивалентности изучались дозы аторвастатина — 20, 40 и 80 мг. Выбор различных доз, по всей видимости, обусловлен возможностью метода определения концентраций аторвастатина (четкого обоснования выбора доз для исследований, например в зависимости от линейности фармакокинетики, приведено не было).
Количество здоровых добровольцев в различных исследованиях сильно варьировало от 18 и более, однако в большинстве случаев количество здоровых добровольцев или было равно 24 или превышало данное значение. В связи с этим можно судить о целесообразности проведения исследований биоэквивалентности у 24 добровольцев или больше. Выбор указанного числа добровольцев был основан на значениях коэффициента вариации аторвастатина в опубликованных исследованиях.
В большинстве случаев длительность забора образцов крови для фармакокинетического анализа была 48 часов и более.
В нескольких исследованиях было указано, что внутрииндивидуальная вариация фармакокинетических показателей (C , AUC) не превышает 30%, однако в ряде исследований для Cmax была показана большая внутриндивидуальная вариабельность.
Также нами было проанализировано 6 исследований биоэквивалентности аторвастатина по данным литературы и из поисковых систем в интернете (Табл. 5).
По данным литературы можно сделать вывод, что коэффициент внутрииндивидуальной вариабельности аторвастатина по С различен и может превы-
г max г г
шать 30%. Коэфициент вариации для AUC также раз-
КЛИНИЧЕСКАЯ ФАРМАКОЛОГИЯ
КЛИНИЧЕСКАЯ ФАРМАКОЛОГИЯ
СРАВНИТЕЛЬНЫЙ АНАЛИЗ ЗА ПЕРИОД с 2006 по 2008 г.
Производитель Не ЕС Не ЕС Россия Россия Не ЕС
Рефенс-препарат Липитор (в России Липримар) Липитор Липримар Липримар Липитор
Доза 20 мг 80 мг 40 мг 20 мг 40 мг
Количество добровольцев 24 80 18 18 24
Длительность забора образцов плазмы крови/ количество временных точек 24 ч/12 48 ч/21 58 ч/11 36 ч/12 48 ч/16
Период «отмывки» - 7 дней 7 дней 7 дней 30 дней
Метод определения ЖХ-МС/МС (жидкостная хроматография с масс-спектрометрией) -//- -//- -//- -//-
Аторвастатин + + + + +
Орто-гидрокси метаболит - — - — +
Пара-гидрокси метаболит - — - — -
Исследование в 2 этапа (натощак, после еды) - — - — -
Вариабельность - Указано, что С мах находилось в диапазоне 70—143%, что может говорить о высокой индивидуальной вариабельности - Указан коэффициент вариации по данным литературы 12—29% -
личен, но в большинстве случаев указан как невысокий — менее 30%. Однако «низкий» коэффициент вариации для АиС, по данным литературы, не рекомендуется брать за основу при проведении исследований биоэквивалентности, т.к. в каждом случае необходим индивидуальный подход. Так, по данным АтИ МикИагуа [14], в исследованиях биоэквиавлент-
ности препаратов аторвастатина разных серий было показано, что содержание вспомогательного вещества — полисорбата (Твин® 80) может значительно влиять на фармакокинетику аторвастатина (внутрииндивидуальный коэффициент вариации АиС значительно увеличивался). Поэтому необходимо всесторонне оценивать возможную внутрииндивидуальную
Таблица 1 вариабельность фармакокинетических параметров аторвастатина (AUC и C ).
max
Количество добровольцев во всех случаях, по данным литературы, было более 24, длительность определения аторвастатина и его метаболитов превышала 48 часов во всех случаях. Дозы исследовались различные — от 20 до 40 мг.
Таким образом, анализ материалов дел поступавших в ФГБУ «НЦЭСМП» с 2006 по 2012 г., а также данных литературы и поисковых систем в интернете, позволяет судить о том, что рекомендуемым количеством добровольцев для исследования биоэквивалентности аторвастатина должно быть не менее 24 (при этом следует принимать в расчет высокую внутриндивиду-альную вариабельностью по C
max
(более 30%), что может потребовать включения и большего количества добровольцев для получения статистически значимых результатов). Длительность забора образцов плазмы крови должна быть не менее 48 часов, период отмывки — не менее 7 дней. Определять в плазме крови необходимо не только аторва-статин, но и дополнительно его метаболиты (главным образом ортогидроксиметаболит).
Таблица 2
СРАВНИТЕЛЬНЫЙ АНАЛИЗ ЗА ПЕРИОД с 2008 по 2010 г.
Производитель Не ЕС Не ЕС Не ЕС Россия Россия Не ЕС
Рефенс-препарат Липитор Липитор Липитор Липримар Липримар Липитор
Доза 40 мг 80 мг 20 мг 20 мг 80 мг 80 мг
Количество добровольцев 82 44 18 18 18 44
Длительность забора образцов плазмы крови/ количество временных точек 48 ч/21 60 ч/17 40 ч/10 48 ч/10 48 ч/10 120 ч/21
Период «отмывки» 7 дней 14 дней 7 дней 7дней 7 дней 14 дней
Метод определения ЖХ-МС/ МС -//- -//- -//- -//- -//-
Аторвастатин + + + + + +
Орто-гидрокси метаболит + - - - + + (только наличие)
Пара-гидрокси метаболит + - - - - +(только наличие)
Исследование в 2 этапа (натощак, после еды) + - - - - +
Вариабельность - - - - - -
ВЫВОДЫ
Учитывая, что активные метаболиты аторвастатина обусловливают до 70% ингибирующей активности в отношении ГМГ-КоА-редуктазы и, следовательно, влияют на эффективность и безопасность применения препаратов аторвастатина, можно рекомендовать определение концентрации также и активных метаболитов (главным образом 2-гидроксиме-таболита) в дополнение к определению исходного вещества при проведении исследований биоэквивалентности препаратов аторва-статина.
Выбор дозы для исследований биоэквивалентности должен
основываться на особенностях фармакокинетики аторвастатина, в частности, на ее линейности. Согласно инструкции по применению оригинального препарата Липримар® аторвастатин обладает линейной зависимостью между степенью всасываемости и дозой, что говорит в пользу необходимости изучения биоэквивалентности только одной дозы изучаемого препарата. При этом рекомендуется проведение исследования для максимально заявленной дозы препарата, так как двукратное применение аторвастатина здоровыми добровольцами в максимальной суточной дозе 80 мг/сут с длительным интервалом времени
между приемами не связано с каким-либо определенным риском, за исключением развития нежелательных явлений.
Значения вну-трииндивидуаль-ного коэффициента вариабельности
(CV) для Cmax у аторвастатина достаточно противоречивы, имеются данные, подтверждающие высокую вариабельность (CV С более
max
30%), а также сведения о невысокой вариабельности. CV по AUC также различается и в некоторых случаях может превышать 30% (что может
быть обусловлено
вспомогательными веществами, которые могут оказать влияние на
фармакокинетику аторвастатина). Учитывая, что вариабельность по С и AUC может
max
превышать 30%, необходимо подходить к определению количества добровольцев для достижения 80% мощности исследования более обосновано. Проведенный анализ показал, что в большинстве случаев количество добровольцев превышало 18 человек (в 17 из 24 случаев). Поэтому в исследование биоэквивалентности аторвастати-на рекомендуется включение не менее 24 здоровых добровольцев.
Длительность определения концентрации аторвастатина в плазме крови, учитывая данные по фармакокинетике препаратов аторвастатина, должна быть не менее 48 часов, но не превышать 72 часа.
КЛИНИЧЕСКАЯ ФАРМАКОЛОГИЯ
КЛИНИЧЕСКАЯ ФАРМАКОЛОГИЯ
Таблица 3
СРАВНИТЕЛЬНЫЙ АНАЛИЗ ЗА ПЕРИОД С 2010 Г. ПО 2012 Г.
Производитель ЕС (Европейский союз) Не ЕС Россия ЕС Россия Россия ЕС
Рефенс-препарат Сортис (в России Липримар) Липримар Липримар Липримар Липримар Липримар Липримар
Доза 40 мг 40 мг 20 мг 80 мг 40 мг 40 мг 80 мг
Количество добровольцев 56 18 24 32-64 18 24 92
Длительность забора образцов плазмы крови/ количество временных точек 36 ч/21 60 ч/17 48 ч/10 72 ч/13 48 ч/17 48 ч/10 72 ч/23
Период «отмывки» 7 дней 7 дней 7 дней 7 дней 7 дней 7 дней 7 дней
Метод определения -//- -//- -//- -//- -//- -//- -//-
Аторвастатин + + + + + + +
Орто-гидрокси метаболит + - - +(наличие) - - -
Пара-гидрокси метаболит - - - +(наличие) - - -
Исследование в 2 этапа (натощак, после еды) - - - - - - -
Вариабельность - АиС =17,5% С =15% мах - - - - АиС=20- 24%; С =40- тах 49%
Таблица 4 ЗАКЛЮЧЕНИЕ
Изучение сравнительной биоэквивалентности препаратов атор-вастатина, также как и других представителей ингибиторов ГМГ-КоА-редуктазы, должно проводиться не менее чем на 24 здоровых добровольцах в максимально заявленной дозе исследуемого препарата. Рекомендуется определение не только концентрации аторвастатина, но и его активных метаболитов с длительностью их определения не менее 48 часов и не более 72 часов.
ОБОБЩЕННЫЕ ДАННЫЕ
Дозы Количество добровольцев Длительность забора образцов крови для анализа Период «отмывки»
20 мг 18 добровольцев
в 5 случаях (чаще отечественные в 7 случаях (чаще отечественные Менее 48 часов — 4 случая Чаще всего 7 дней в 14 случаях
производители) производители);
40 мг 24 добровольца 48 часов —
в 7 случаях в 4 случаях 8 случаев
80 мг в 6 случаях Более 24 добровольцев в 7 случаях Более 48 часов 6 случаев
Таблица 5
ИССЛЕДОВАНИЯ БИОЭКВИВАЛЕНТНОСТИ ПРЕПАРАТОВ АТОРВАСТАТИНА ПО ДАННЫМ ЗАРУБЕЖНОЙ ЛИТЕРАТУРЫ И ИЗ ПОИСКОВЫХ СИСТЕМ В ИНТЕРНЕТЕ
Номер ссылки в списке литературы Shen Y. et al. [8] Yan-Mei Liu et al. [9] Koytchev R. et al. [10] Kim Y. et al. [11] Mendosa. et al. [12] Public Assessment Report Scientific discussion Torvacard [13]
Рефенс- препарат - - - - Липитор Сортис (Липримар)
Доза 20 мг 20 мг 40 мг 20 мг - 40 мг
Количество добровольцев 24 45 24 52 52 46
Длительность забора образцов плазмы крови/количество временных точек 72 ч/- 48 ч/13 48 ч/- 48 ч/- 72 ч/- 72 ч/18
Период «отмывки» 7 дней 14 дней 7 дней 14 дней 14 дней -
Метод определения ЖХ-МС/МС -//- -//- -//- -//- -//-
Аторвастатин + + + + + +
Орто- гидрокси метаболит + + - - + +
Пара- гидрокси метаболит + - - - - -
Исследование в 2 этапа (натощак, после еды) - - - - - -
Вариабель- ность Интервал для С 70%- max 143%, т.е. вну-трииндивиду-альная вариабельность по С более 30% max Интервал для С 70%—143%, max т.е. внутриин- дивидуальная вариабельность по С max более 30% Внутриинди-видуальная вариабельность для C max не более 30% Внутриинди-видуальная вариабельность для C max не более 30% - Внутриинди-видуальная вариабельность для C max не более 30%
ЛИТЕРАТУРА
1. Федеральный закон от 12.04.2010 г. № 61-ФЗ «Об обращении лекарственных средств».
2. European Medicines Agency (2008). Guideline on the investigation of bioequivalence (CPMP/EWP/QWP/1401/98 Rev. 1).
3. US FDA (2000). Guidance on waiver of in vivo bioavailability and bioequivalence studies for immediate-release solid oral dosage forms based on a biopharmaceutics classification system. August 2000.
4. US FDA (2003) Guidance on bioavailability and bioequivalence studies for orally administered drug products - general considerations.
5. Health Canada TPD (1992) Guidance for industry on conduct and analysis of bioavailability and bioequivalence studies Part A: Oral dosage formulations used for systemic effects.
6. Kuan Gandelman et all. Analytes of Interest and Choice of Dose: Two Important Considerations in the Design of Bioequivalence Studies with Atorvastatin // JBioequiv Availab. 2011. № 3(4). P. 062-068.
7. US FDA (2008). Office of generic drugs guidance on atorvastatin calcium.
8. Shen Y., Zhang Y.F., Chen X.Y., Guo L.X., Zhong D.F. Pharmacokinetics and bioequivalence of atorvastatin calcium tablets in healthy male Chinese volunteers // Zhongua Xin Xue Guan Bing Za Zhi. 2012. № 40. P. 243-7.
9. Yan-Mei Liu et al. Pharmacokinetics and bioequivalence evaluation of two different atorvastatin calcium 10mg tablets. A singledose, randomized-sequence, open-label, two-period crossover study in healthy fasted Chinese volunteers // Clin. Therap. 2010.
№ 32. P. 1396-1407.
10. Koytchev R. et al. Bioequivalence study of atorvastatin tablets // Arzneimittelforschung. 2004. № 54. P. 573-7.
11. Kim Y. et al. Evaluation of bioequivalence of two atorvastatin tablet formulations after single oral administration in healthy male volunteers // AAPS Journal. 2008.
P. 1052.
12. Mendosa. et al. Pharmacokinetic and bioequivalence testing of atorvastatin formulations in healthy male volunteers // Pharmazie. 2006. № 61. P. 805.
13. Public Assessment Report Scientific discussion. Torvacard. 2005.
14. Amit Mukharya et al. Stable and Bioequivalent Formulation of HMG-CoA reductase inhibitor: Atorvastatin Calcium // International Journal of Pharmaceutical Sciences Letters. 2012. № 2. P. 12-20.
КЛИНИЧЕСКАЯ ФАРМАКОЛОГИЯ
