Активность орнитиндекарбоксилазы в слизистой желудка при атрофических гастритах Текст научной статьи по специальности «Фундаментальная медицина»

© КОЛЛЕКТИВ АВТОРОВ, 1991 УДК 616.329-18.73:612.015.6(575-772)

Фу Давай, В. А. Драудин-Крыленхо, А. М. Нечипай, Д. Г. За-ридзе, Ю. В. Букин

АКТИВНОСТЬ ОРНИТИНДЕКАРБОКСИЛАЗЫ В СЛИЗИСТОЙ ЖЕЛУДКА ПРИ АТРОФИЧЕСКИХ ГАСТРИТАХ

НИИ канцерогенеза, НИИ клинической онкологии

В Советском Союзе и КНР рак желудка занимает ведущее место в структуре заболеваемости и смертности от злокачественных опухолей [2, 3, 22]. В связи с этим изучение этиологии и возможных путей профилактики рака желудка имеет большое научное и практическое значение. Многочисленные эпидемиологические исследования и клинические наблюдения указывают на полиэтиологическую природу рака желудка. Помимо генетической предрасположенности, к, числу, факторов, повышающих риск этого заболевания, относят наличие хронических гастритов (в особенности атрофических гастритов с диспластическими изменениями слизистой), высокий уровень содержания в потребляемой пище и воде нитратов и нитритов, поваренной соли, дефицит в рационе аскорбиновой кислоты, витамина А (ретинола), бета-каротина и, возможно, некоторых других витаминов [5—7, 11, 14, 18, 21]. Разработка рациональных мер химиопрофилактики рака желудка требует, однако, уточнения, а в ряде случаев детального изучения возможных экзогенных и эндогенных факторов риска в генезе заболевания. В свою очередь для успешной работы в этом направлении желательно располагать биохимическими маркерами, позволяющими следить за процессом канцерогенеза в слизистой желудка. К числу такого рода маркеров,, характеризующих наличие процесса промоции в инициированных канцерогеном клетках, относят фермент орни-тиндекарбоксилазу [17], активность которой при воздействии промоторов канцерогенеза возрастает в тканях-мишенях в 20—200 раз и более [12, 20]. Орнитиндекарбоксилаза является ключевым ферментом, участвующим в биосинтезе полиаминов, которые контролируют пролиферацию тканей. Важно подчеркнуть, что в малигнизированных тканях активность орнитиндекарбоксилазы намного выше, чем даже в таких активно пролиферирующих нормальных тканях, как слизистая желудочно-кишечного тракта [1, 20]. В эксперименте показано, что активность промоторов канцерогенеза коррелирует с их способностью индуцировать высокую активность орнитиндекарбоксилазы, а хи-миопрофилактическое действие антипромоторов (ретиноидов, индометацина, являющегося ингибитором обмена арахидоновой кислоты, а-дифтор-метилорнитина, блокирующего ферментативное декарбоксилирование орнитина) связано с подавлением активности орнитиндекарбоксилазы и со стимуляцией процесса дифференцировки клеток [17].

В клинических условиях показано, что резкое повышение активности орнитиндекарбоксилазы наблюдается при некоторых предопухолевых состояниях слизистой пищевода [10] и толстой кишки [16, 19]. В эксперименте найдено, что 14-метил-Ы'-нитро-ГЯ-нитрозогуанидин (МННГ), вызывающий у грызунов рак желудка, индуцирует в сли-

зистой желудка резкое повышение активности орнитиндекарбоксилазы [8, 9]. Однако в клинике возможность использования показателя активности орнитиндекарбоксилазы в качестве маркера процесса малигнизации в слизистой желудка при атрофических гастритах до настоящего времени не исследовалась.

Материалы и методы. Активность орнитиндекарбоксилазы определяли в образцах слизистой желудка, полученных при биопсии во время гастроскопического обследования больных в отделении эндоскопии НИИ клинической онкологии. Морфологическую картину слизистой сопоставляли с результатами гистологического и цитологического анализа биопсийного материала. Образцы ткани, полученные для биохимического анализа, немедленно замораживали и сохраняли при —20 °С. Активность орнитиндекарбоксилазы определяли в экстрактах ткани радиоизотопным методом [13], используя в качестве субстрата L-(1-‘1С)орнитин (хлоргидрат) фирмы «Amersham» (Англия) с удельной радиоактивностью 58,6 мКи/ммоль. Конечная концентрация орнитина в пробах составляла 6,7 -Ю-4 М при соотношении горячего и холодного орнитина 1:9, конечная концентрация пиридоксаль-5'-фосфата — 5-10—5 М. Для измерения радиоактивной СОг, образовавшейся в процессе ферментативной реакции и поглощенной насыщенным раствором Ва(ОН)2, нанесенным на фильтровальную бумагу, использовали сцинтилляционную жидкость «Unisolve» (фирма «Koch-Light», Англия) и счетчик «Mark-II» (фирма «-Nuclear Chicago», США). За одну единицу (1 Е) активности орнитиндекарбоксилазы принимали, образование в стандартных условиях инкубации 1 пмоль ’’ССЬ за 1 ч. Активность фермента в ткани выражали в Е в расчете на 1 мг белка. Содержание белка в экстрактах ткани определяли по Лоури [15]. Результаты анализов подвергали статистической обработке стандартными методами [4], вычисляя средние значения величины (х), доверительные интервалы средних (±ÍS¿) при р=0,05 и достоверность различий между средними величинами, используя критерий СтьюДен-та (/-тест). ,

Результаты и.обсужден и е. Данные определения активности орнитиндекарбоксилазы в слизистой желудка при атрофических гастритах представлены в табл. 1. По сравнению с активностью фермента у лиц с неизмененной слизистой (норма) активность орнитиндекарбоксилазы при ^атрофических гастритах статистически достоверно 'повышена в среднем в 5 раз. Наиболее высокие значения активности фермента в слизистой при атрофических гастритах превышают активность * фермента в норме по крайней мере в 10 раз. По предварительным данным, наиболее высокие величины активности орнитиндекарбоксилазы наблюдаются в слизистой желудка в случае резко выраженной гиперплазии и дисплазии. Следует отме-' тить, что анализ единичных случаев выявил также весьма высокую активность орнитиндекарбоксилазы в ткани полипов желудка (до 82 Е) и в опухолевой ткани желудка при раке (до 167 Е). При этом на фоне атрофического гастрита индивидуальные показатели активности орнитиндекар-

Таблица 1

Сравнительная активность орнитиндекарбоксилазы в слизистой желудка в норме и при атрофических гастритах

Параметры I — норма (п=5) II — атрофический гастрит ("=? 4)

Границы колебаний индиви-

дуальных показателей 5,3—9,8 16,2—95,5

*±15* при р=0,05 7,1 ±1,0 35,9+7,9

Рп—I (/-тест) <0,001

Примечание, п — число случаев.

Таблица 2

Индивидуальные показатели активности орнитиндекарбокси-лазы в тканях полипов, опухолей и слизистой желудка при атрофическом гастрите

№ п/п Новообразование Окружающая ткань слизистой

Полип Атрофический гастрит

і 36,3 16,6

2 81,9 60,6

3 73,2 22,0

Рак

1 166,5 35,6

2 58,8 22,8

3 35,6 23,1

4 144,8 34,3

5 134,0 26,0

боксилазы в ткани полипа или опухоли были, как правило, значительно выше, чем в окружающей ткани (табл. 2). ^ '

В целом полученные данные свидетельствуют, что в процессе гастроканцерогенеза наблюдается резкое и, по-видимому, прогрессивное повышение активности орнитиндекарбоксилазы. Существенное повышение активности орнитиндекарбоксилазы при атрофических гастритах позволяет предположить, что активность указанного фермента может служить чувствительным биохимическим маркером гастроканцерогенеза. Как было отмечено выше, при атрофических .гастритах наиболее высокая активность фермента выявляется при выраженных явлениях гиперплазии и дисплазии слизистой. Однако для окончательных выводов необходимо более детально изучить связь между активностью орнитиндекарбоксилазы при атрофических гастритах и характером очаговых изменений слизистой, что и является задачей наших дальнейших исследований.

ЛИТЕРАТУРА

1. Бердинских Н. К-, Залеток С. П., Бобро Л. И., Игнатенко Н. А. // Экспер. онкол.— 1988.— Т. 10, № 6.— . С. 39—41.

2. Злокачественные новообразования в СССР и союзных республиках: (Статистический справочник) / Под ред.

Н. Н. Трапезникова и др.— Ч. 1—2,— М., 1989.

3. Клименков А. А., Патютко Ю. И., Губина Г. И. Опухоли желудка,— М., 1988.-— С. 5—10.

4. Лакин Г. Ф: Биометрия.— М., 1973.

5. Burr М. L., Samloff ¡. М., Bates С. Holiday R. М. Ц Brit. J. Cancer.— 1987,— Vol. 56, N 2,— P. 163—167.

6. Correa P. ¡I Cancer Res.— 1988.— Vol. 48, N 7.— P. 3554—3560.

7. DeWys W. II Gastrointestinal Oncology: Basic and Clinical Aspects / Ed. J. S. McDonald.— Boston, 1987.— P. 41—73.

8. Furihata C., Yoshida S., Sato Y„ Matsushima T. // Gann: Jap. J. Cancer Res.— 1987,— Vol. 78,— P. 1363—1369.

9. Furihata C., Sato Y., Hosaka M. et al. // Biochem. Biophys. Res. Commun.— 1984,— Vol. 121, N 3.— P. 1027—1032.

10. Garewal H. S., Gerner E. W. Sampliner R. E., Roe'D. // Cancer Res;— 1988,— Vol. 48, N 6,— P. 3288—3291.

11. Geboers J. E. F., Joossens J. V., Kestloot H. // Diet and Human Carcinogensis / Ed. J. V. Joossens et al.— Amsterdam, 1985,— P. 81—85.

12. Gilmour S. K., Advalovic N.. Madars Т., O’Brien Т. C. // J. Biol. Chem.— 1985,— Vol. 260,— P. 16 439—16 444.

13. Hayashi S., Kameji T. // Meth. Enzymol.— 1983.— Vol. 94,— P. 154—158.

14. Kent P. Ц Int. J. Epidem.— 1988.— Vol. 17, N г.-p. 281—286.

15. Lowry О. H., Rosebrough N. J., Farr Л. L., Randall R. J. // J. Biol. Chem.— 1951.— Vol. 193,— P. 265—275.

16. Luk C. D., Baylyn S. B. // New Engl. J. Med.— 1984,— Vol. 331,— P. 80—83.

17. Pegg A. E. Ц Biochem. J.— 1986,— Vol. 234,— P. 249—262.

18. Pitenbahgh С. K., Meyskens F. L. Jr. // A Year in Nutritional Medicine.— 1986.— P. 263—291.

19. Porter C. W., Herrera-Ornelas L., Pera P. et al. // Cancer.— 1987,— Vol. 60,— P. 1275—1281,

20. Rhozin J., Wilson P. S., Bull A. W., Nigro N. D. // Cancer Res — 1984,— Vol. 44,— P. 3226—3230.

21. Wald N. J. II Brit. J. Cancer.— 1988.— Vol. 57.— P. 428—433.

22. Waterhouse J., Muir C., Shanmugaratnam K. et al: // Cancer Incidence in Five Continents (IARC Scientific Publication No 42. International Agency for Research on Cancer).— Lyon, 1982,— Vol. 4.— P. 384—385.

Поступила. 03.07.90

© КОЛЛЕКТИВ АВТОРОВ. 199! .7

УДК 616.33-G06.6-089-097:615.83&

A. И. Лактионова, И. А. Деревни на, Т. К. Бескова, Г. Г. Кныров,

B. В. Фролов, В. Д. Макаренко, А. И. Раев

ИММУНОЛОГИЧЕСКАЯ ОЦЕНКА ВЛИЯНИЯ ВОССТАНОВИТЕЛЬНОГО И КУРОРТНОГО ЛЕЧЕНИЯ НА ОРГАНИЗМ БОЛЬНЫХ, РАДИКАЛЬНО ОПЕРИРОВАННЫХ ПО ПОВОДУ РАКА ЖЕЛУДКА

НИИ клинической онкологии, базовый санаторий «Дорохово»

В настоящее время одной из актуальных задач является решение вопроса о взаимосвязи между иммунной системой больного и развитием злокачественного новообразования [5, 6] i

Снижение иммунологических показателей у онкологических больных, в том числе и у больных раком желудочно-кишечного тракта, отмечали в своих работах многие исследователи [1—4]

В задачу нашего исследования входило выяснение влияния восстановительной и курортной терапии на иммунологические показатели до и после лечения больных с постгастрорезекционными расстройствами, в частности с демпинг-синдромом.

Проведено иммунологическое обследование 94 больных, радикально оперированных по поводу рака желудка в I, II и III стадиях заболевания. Обследовали 3 группы больных: 1-я — больные, получившие курс восстановительной терапии в стационаре ВОНЦ АМН СССР (в течение 3 нед);

2-я — больные, направленные на курортное долечивание в санаторий «Дорохово» (на 24 дня);

3-я — больные, направленные на курорт в Желез-новодск (срок 1 мес).

Состояние клеточного иммунитета оценивали тестами in vivo постановкой кожных реакций гиперчувствительности замедленного типа (РГЗТ) при накожной ^аппликации динитрохлоробензола (ДНХБ) и внутрикожном введении очищенного деривата туберкулина (PPD) и тестами in vitro: количество Т-лимфоцитов определяли реакцией

Таблица!

Изменение показателей РБТ у больных, оперированных по поводу рака желудка, в результате восстановительной терапии

Этап обследования больных Число боль- ных сргп р ис. р

До лечения 61 11 159±2417 0,05 33,0±2,7 0,05

После Ле-

чения 61 25 702±5347 50,3±9,4 і