CC BY
31
М. И. Евгеньев, Ле Фыок Кыонг, И. И. Евгеньева АКТИВНОСТЬ N-АЦЕТИЛТРАНСФЕРАЗЫ И ЦИТОХРОМА Р450
У ВЬЕТНАМЦЕВ
Ключевые слова: N-ацетилтрансфераза, цитохром Р450, вьетнамцы, активность. N-acetyltransferase, the cytochrome Р450, vietnamese, activity.
Проведен сопоставительный анализ фенотипов N-ацетилирования и окисления у здоровых вьетнамских добровольцев
The comparative analysis of phenotypes of N-acetilation and oxidations at healthy Vietnamese volunteers is lead.
При изучении генетически детерминированных процессов биотрансформации веществ в организме человека играет важное место играет оценка активности ферментативных систем метаболизма [1]. В процессах метаболизма ксенобиотиков выделяют две фазы [2, 3]. Цитохромы P450 ответственны приблизительно за 75% метаболизма лекарственных препаратов и различных химических агентов. По активности NAT в организме люди делятся на группы с фенотипом быстрого и медленного N-ацетилирования. Распределение по фенотипам в разных расовых и этнических группах различно [2,4,5]. Для жителей вьетнамской популяции такие данные отсутствовали.
Целью данной работы явилась определение активности N-ацетилтрансферазы и цитохрома Р450 у вьетнамцев, проживающих в России.
Экспериментальная часть
Определение фенотипа окисления и ацетилирования осуществляется на основе оценки содержание тест-маркеров в биологических жидкостях у 20 вьетнамских добровольцев, обучащающихся в России. В качестве тест-препаратов использовались изониазид в виде таблеток по 0,3 г и антипирин в виде порошка.
Фенотип ацетилирования определялсяется по количеству несвязанного тест-препарата, выведенного с мочой испытуемого (6 часов), а фенотип окисления - со слюной (12 часов) по методикам [6,7]. Спектры поглощения соединений регистрировали на спектрофотометре СФ-26. Использовали центрифугу К-23 (Janetszki).
Результаты и их обсуждение
В рамках данной работы проводилось исследование фенотипа ацетилирования у вьетнамцев. Было исследовано 13 здоровых добровольцев и оценено распределение их на медленный и быстрый фенотипы (табл. 1).
Таблица 1 - Параметры выведения изониазида с мочой при пероральном приеме 0,3 г лекарственного вещества (п=13)
Кинетические параметры Быстрые ацетиляторы Медленные ацетиляторы
(б человек) (7 человек)
Уровень содержания ГИНК через 2 часа, мг 4,78±1,00 11,74±3,20
Уровень содержания ГИНК через 4 часа, мг 13,30±1,30 2б,34±3,00
Уровень содержания ГИНК через 6 часов, мг 19,21±1,40 33,23±2,00
Фенотип окисления определяли по количеству выведенного со слюной антипирина суммарно за 12 часов (табл. 2).
Таблица 2 - Фармакокинетические параметры экскреции антипирина слюной у вьетнамцев (п=13)
Фенотип окисления Количество антипирина, выведенного за 12 часов, мкг Вероятность распределения
Быстрый 2,52±0,79 Р<0,001
Средний 10,75±1,21
Медленный 23,45±2,15 Р<0,001
Данные о содержании антипирина в трехчасовых пробах в слюне пациентов после его перорального введения в дозе 0,6 г представлены в таблице 3.
Таблица 3 - Данные о содержании антипирина в слюне человека после его перорального введения в дозе 0,6 г (п=13)
Время после принятия тест-маркера, часы Концентрация антипирина в слюне, мкг/мл
Быстрые (п=5) Средние(п=6) Медленные (п=4)
3 0,48±0,06 2,46±0,20 5,24±0,70
6 1,52±0,02 3,25±0,30 8,32±1,10
9 0,33±0,05 1,52±0,50 4,89±0,50
12 0,19±0,07 3,52±0,20 5,00±0,20
Распределение вьетнамских добровольцев по активности цитохромов Р450 при определении фенотипа окисления антипирина показало наличие трех групп: быстрого (30,8%), среднего (46,1%) и медленного типа (23,1%).
С клинической точки зрения интересна взаимосвязь между способностью быстрых ацетиляторов медленно окислять лекарственные препараты и, наоборот - медленных ацетиляторов быстро окислять лекарства [5].
Большинство лекарственных средств инактивируются посредством ферментов системы цитохромов Р 450. В связи с этим существует возможность выделить «группу риска», для которой вероятна степень возникновения побочных эффектов вследствие передозировки ЛВ, подвергающихся биотрансформации путем ферментативного окисления. Проведено фенотипирование 13 индивида по типу ацетилирования и 13 индивидов по типу окисления и произведен сопоставительный анализ активности ферментных систем ацетилирования и окисления (табл. 4). Как видно из
экспериментальных данных, медленному типу окисления соответствует быстрый тип ацетилирования, а быстрому типу окисления - медленный тип ацетилирования, причем среднему типу окисления характерно распределение как в сторону высоких активностей КАТ, так и в сторону низких.
Таблица 4 - Активность ГМ-ацетилтрансферазы в группах медленных, средних и быстрых фенотипов окисления (здоровые вьетнамские добровольцы, П = 6)
Фенотип окисления Количество антипирина, выведенного за 12 часов, мкг Вероятность распределения Активность N-ацетил-трансферазы , % Вероятность распределения
Быстрый 2,5±0,8 Р<0,001 9,4±1,2 Р<0,05
Средний 10,75±1,21 7,1±1,2
Медленный 23,45±2,15 P<0,001 4,5±1,2 Р<0,05
Экспериментальные данные показывают, таким образом, несоответствие
активности N-ацетилтрансферазы у вьетнамцев с ближайшими популяциями (китайцы, японцы и корейцы). Возможной причиной этого, по-видимому, является малая численность обследованных вьетнамцев.
Литература
1. Куценко, С.А. Основы токсикологии / С.А. Куценко. - СПб.: Фолиант, 2004. - 720 с.
2. Nebert D. W., Roe A.L. // Sci. Total Environ. 2001. -Vol.274. -P. 93
3. ЕвгеньевМ.И., Евгеньева И.И. // Вестник ТО РЭА. - 2002. - № 3-4. - С. 91-99.
4. Ляхович, В.В. Индукция ферментов метаболизма ксенобиотиков / В.В. Ляхович, И.Б. Цырлов. -
Новосибирск: Наука, 1981. - 242 с.
5. Холодов, Л.Е. Клиническая фармакокинетика / Л.Е. Холодов, В.П. Яковлев. - М.: Медицина, 1985. - 464 с.
6. Семенюк, А.В. [и др.] //Лаб. дело. - 1982. - № 10. - С. 31
7. Гребенник, Л.И. //Проблемы туберкулеза. - 1961. - № 4. - С. 69
© М. И. Евгеньев - д-р хим. наук, проф. каф. аналитической химии, сертификации и менеджмента качества КГТУ; Ье РЬиое Сио^ - асп. той же кафедры, И. И. Евгеньева - канд. хим. наук, доц. той же кафедры, evgenev@kstu.ru.
