CC BY
35
уникального ветеринара, должно позволять обеспечить благополучие по болезням животных и поддерживать санитарный осмотр в Республике Чад.
VETERINARY MANAGEMENT IN REPUBLIC CHAD
Mayo Mahamat Arab Summary
The purpose of given article is the description of work of veterinary management in Republic Chad. Article is devoted following questions: the supreme body of executive power in the field of animal industries. Veterinary service in Republic Chad. Veterinary sanitary inspection in the markets.
УДК 616.441-008.64:615.1:619
АКТИВНОСТЬ ФАГОЦИТАРНОГО ЗВЕНА ИММУНИТЕТА ПРИ КОРРЕКЦИИ ТИРЕОИДНОЙ ДИСФУНКЦИИ В ЭКСПЕРИМЕНТЕ
Мамцев А.Н., Кузнецова Е.В., Ковалец С.П.
г. Мелеуз, Республика Башкортостан филиал ГОУ ВПО Московский государственный университет технологий
и управления (МГУТУ)
Ключевые слова: активность, иммунитет, дисфункция, эксперимент.
Key words: activity, immune dysfunction, experiment.
Сокращения: СРО - свободнорадикальное окисление, ХЛ -хемилюминесценция; МТ - масса тела; АФК - активные формы кислорода.
Введение. По мнению специалистов в области клинической тиреоидологии в технологиях производства йодобогащенных продуктов питания и кормов предпочтительнее использовать органически связанные формы йода, отличающиеся от неорганических его соединений лучшей усвояемостью, стабильностью как на технологических этапах производства, так и в процессе хранения продукта. И, наконец, более весомый аргумент в пользу органически связанных форм йода - меньшая вероятность развития явлений гиперйодизации, имеющих место при использовании неорганических соединений йода [4].
В научно-исследовательской лаборатории «Пищевые технологии» филиала МГУТУ в г. Мелеузе предложен способ «встраивания»
неорганических соединений йода в органическую матрицу, представляющую собой комплекс полимеров - хитозан +НМ-В геллановая камедь [3]. К числу аналогов данного соединения относится «йодказеин», представляющий собой соединения йода с белком молока.
Цель настоящего исследования - изучить влияние «йод-хитозана» и его аналога «йодказеина» на состояние гуморально-клеточного иммунитета и гематологические показатели гипотиреоидных крыс в эксперименте.
Материалы и методы исследования. Моделирование гипотиреоза осуществляли на половозрелых крысах самцах массой 180-220 г, находившихся на общевиварном питании, путем внутрижелудочного введения фармокопейного тиреостатика - мерказолила. Животные были разделены на 5 групп по 12 в каждой: 1-я группа контрольная, крысам 2-й, 3-й, 4-й и 5-й групп внутрижелудочно через специальный зонд вводили фармокопейный тиреостатик мерказолил в течение 21-го дня ежедневно из расчета 2,5 мг/100 г МТ. Крыс 2-й группы декапитировали под эфирным наркозом на 22-е сутки с начала исследования, крыс 3-й, 4-й и 5-й групп -на 30-е сутки со дня последнего введения тиреостатика. При этом животных первых трех групп содержали на общевиварном питании в течение всего периода исследования, а крысы 4-й и 5-й групп после окончания введения тиреостатика получали корм, обогащенный соответственно «йод-хитозаном» и «йодказеином». Содержание йода в ежедневном рационе крыс 4-й и 5-й групп обеспечивало среднесуточную потребность животных в данном биомикроэлементе, а именно 2,5 мкг/100 г МТ.
На этапах эксперимента - на 22-е и 52-е сутки от начала исследования - проводили гематологические исследования. Дополнительно исследовали люминол-зависимую ХЛ цельной крови [5]. Люминол-зависимое свечение крови главным образом связано с генерацией АФК клетками при фагоцитозе и характеризует состояние гуморально-клеточного иммунитета. Изучение процессов СРО в гепаринизированной крови крыс проводили методом хемилюминесцентного анализа на хемилюминомере ХЛ-003, предназначенного для автоматизированного измерения и регистрации спонтанного и индуцированного свечения (хемилюминесценции), сопровождающего процессы СРО. Для изучения ХЛ кровь отбирали в пластиковую пробирку (в стеклянной активируется дыхательный взрыв фагоцитов) с предварительно налитым раствором гепарина. Гепарин готовили разведением стандартного раствора (5 тыс. ед. в 1 мл) в 10 раз физиологическим раствором. На 1 мл крови брали 0,1 мл приготовленного раствора. Кровь использовали немедленно. Перед исследованием отбирали необходимое количество рабочего раствора люминола из расчета 2 мл на 1 пробу и нагревали в термостате до 370С.
Заранее разливали по 2 мл раствора в стаканчики для измерения ХЛ, которые также выдерживались в термостате. Гепаринизированная кровь в объеме 0,1 мл добавлялась в 2 мл теплого рабочего раствора люминола, тщательно размешивалась и помещалась в камеру прибора, настроенного на исследование по программе «КРОВЬ» (Термостат включен, мешалка выключена, время измерения 5 мин).
Полученные данные статистически обрабатывали с использованием стандартных методов по программе «^аЙБЙса - 5,0» "^пёоБ 95. Значимость различий среднеарифметических оценивали с использованием ^критерия Стьюдента. Статистически значимыми считали различия при Р < 0,05.
Результаты и обсуждение. После окончания введения тиреостатика, на 22-е сутки от начала исследования, отмечали изменение состава периферической крови у крыс 2-й группы: содержание гемоглобина у гипотиреоидных животных составило 126,75±0,86 г/л против 136,75±1,76 г/л в контроле (Р < 0,05). При подсчете числа эритроцитов, лейкоцитов и тромбоцитов у животных 2-й группы установлено, что среднеарифметические значения количества названных форменных элементов входят в коридор нормы, существенно не отличаясь от аналогичных показателей клинически здоровых крыс. У крыс в состоянии гипотиреоза (2-я гр.) процентное соотношение различных видов лейкоцитов достоверно не изменялось по отношению к лейкограмме клинически здоровых крыс.
На втором этапе, при оценке биологических эффектов йодосодержащих рационов, отдельные гематологические показатели крыс общевиварного рациона претерпевали значительные изменения, отклоняясь от нормативных значений: содержание гемоглобина у крыс 4-й и 5-й групп составило соответственно 112,65 ± 1,87 г/л и 112,90 ± 2,25 г/л против 106,3 ± 2,55 г/л в 3-й группе. Кроме того, в 3-й группе крыс усматривалась тенденция к уменьшению числа эритроцитов: при содержании на йодобогащенном рационе количество эритроцитов
составило 6,19 ± 0,17-1012/л (4-я гр.) и 6,23 ± 0,19 1012/л (5-я гр.), на
12
общевиварном - 5,94 ± 0,22-10 /л. При подсчете общего числа лейкоцитов и тромбоцитов в сравниваемых группах существенных различий не выявлено. Анализируя динамические изменения лейкограмм, мы получили следующие данные: число лимфоцитов в периферической крови животных 4-й гр. составляло 70,65 ± 2,2, в 5-й гр. - 70,4 ± 1,95, а в 3-й - 61,3 ± 2,45 (Р < 0,03). Следовательно, исследуемые йодосодержащие рационы способствовали восстановлению уровня содержания форменных элементов крови, в частности Т- и В-лимфоцитов, обеспечивающих формирование гуморального звена иммунитета.
Дальнейшие исследования позволили утверждать, что исследуемые йодосодержащие соединения оказывают стимулирующее влияние на факторы, формирующие реакции клеточного иммунитета. Известно, что способность к генерации таких активных форм кислорода, как супероксид-анион кислорода (02 ), гидроксильный (ОН^) и гидропероксильный (О2Н^) радикалы, гипохлорит-анион (ОСЬ ), пероксид водорода (Н2О2) и N0-радикал, отражает состояние и функциональные возможности фагоцитарного звена иммунитета [1]. Светосумма свечения за время измерения ХЛ цельной крови является интегральным показателем генерации АФК.
Исследования, проведенные на 22-е сутки от начала введения тиреостатика, позволили получить данные, свидетельствующие об активации процессов СРО в цельной крови гипотиреоидных крыс 2-й группы. Так, среднеарифметическое значение светосуммы свечения в контроле (1-я группа) составило 4,1 ± 0,13 у.е. против 4,44 ± 0,1 у.е. во 2-й группе (Р < 0,03). Наблюдаемые явления следует рассматривать как результат активации фагоцитоза, направленного на окисление ксенобиотического субстрата - мерказолила, а также продуктов распада клеточных и субклеточных структур, образующихся при мерказолиловом гипотиреозе. Так, в ходе собственных гистологических исследований было установлено, что экспериментальный гипотиреоз, вызванный мерказолилом, сопровождается развитием деструктивно-дегенеративных процессов в таких органах как печень, щитовидная железа и почки. Остальные органы менее подвержены гистологическим трансформациям при введении антитиреоидных препаратов [2].
Содержание животных на общевиварном рационе сопровождалось снижением функциональных резервов нейтрофилов и моноцитов к генерации АФК. Показатели светосуммы свечения цельной крови резко снижались у крыс 3-й группы (на 27,5 % по отношению к контролю), а у животных, содержавшихся на йодобогащенных рационах, достигали нормативных значений: в 4-й гр. - 4,26 ± 0,06 у.е., 5-й гр. - 4,18 ± 0,08 у.е. против 2,93 ± 0,09 у.е. в 3-й гр. (Р <0,06). Величина светосуммы хемилюминесценции возрастает при содержании на йодобогащенном рационе на 33 %, увеличиваясь с 2,93 ± 0,09 у.е. (3-я гр.) до 4,26 ± 0,06 у.е. в 4-й гр.
В настоящее время признается важная роль свободнорадикальных процессов в механизмах выживаемости клеток и формировании иммунного статуса организма [1]. Так, широким спектром биологического действия обладает оксид азота (N0), имеющий свободнорадикальную природу. Оксид азота проявляет цитоксическую функцию как один из компонентов клеточного иммунитета. Кроме того, N0 рассматривается как регулятор пролиферации лимфоцитов. Как показали проведенные
исследования, йодосодержащие соединения способствовали восстановлению показателей, отражающих состояние гуморально-клеточного иммунитета: восстанавливалась численность лимфоцитов и функциональные резервы системы свободнорадикального окисления.
ЛИТЕРАТУРА: 1. Жеребцов Н.А., Попова Т.Н., Артюхов В.Г. Биохимия: Учебник. - Воронеж: Из-во Воронежского гос. ун-а, 2002. - С. 372. 2. Козлов В.Н. Тиреоидная трансформация при моделировании эндемического эффекта у белых крыс в эксперименте // Сибирский медицинский журнал. - 2006. - № 5. - С. 27-30. 3. Пат. RU 2380984 C1 Биологически активная пищевая добавка для профилактики йодной недостаточности и способ ее получения / Мамцев А.Н., Байматов В.Н., Камилов Ф.Х, Пономарев Е.Е., Нестерова А.М., Васильев Л.И., Пономарева Л.Ф., Лобырева О.А., Козлов В.Н., Заявл. 08.07.08; Опубл. 10.02.10. // Бюл. - 2010. - № 4. 4. Терпугова О.В. Эндокринологические аспекты проблемы пищевых дисэлементозов и других пищевых дисбалансов / Учебное пособие - Ярославль: Александр Рутман, 2001. - С. 37-38. 5. Фархутдинов Р.Р. Методики исследования хемилюминесценции биологического материала на хемилюминомере ХЛ-003 / Фархутдинов Р.Р., Тевдорадзе С.И. // Методы оценки антиоксидантной активности биологически активных веществ лечебного и профилактического назначения: Сб. докл. - М.: Изд-во РУДН, 2005. - С. 147-154.
АКТИВНОСТЬ ФАГОЦИТАРНОГО ЗВЕНА ИММУНИТЕТА ПРИ КОРРЕКЦИИ ТИРЕОИДНОЙ ДИСФУНКЦИИ В ЭКСПЕРИМЕНТЕ
Мамцев А.Н., Кузнецова Е.В., Ковалец С.П.
Резюме
В работе приведены данные по изучению влияния органически связанных форм йода на состояние гуморально-клеточного иммунитета и гематологические показатели гипотиреоидных крыс в эксперименте.
IMMUNITY PHAGOCYTIC LINK ACTIVITY AT CORRECTION OF THYROID
DYSFUNCTION IN EXPERIMENT
Mamtsev A.N., Kuznetsova Ye.V., Kovalets S.P.
Summary
The research reviles the data on studying the influence of integrally connected forms of iodine on the condition of gumoralno-cellular immunity as well as the haematological indicators of hypoterioid rats during the experimental period.
