CC BY
38
128 Евразийский Союз Ученых (ЕСУ) # 7 (16), 2015 | БИОЛОГИЧЕСКИЕ НАУКИ
Чествование Э.Г. Беккера в связи с его 80-летием, профессорская столовая в Главном здании МГУ на Ленинских горах (1954 г.); на заднем плане слева направо - Б.С. Матвеев, Е.С. Смирнов, Л.Г. Воронин, Э.Г. Беккер
[фото А.А. Панова]
Чайка С.Ю. Таксон и имя: Антропонимические названия таксонов членистоногих / Учебное пособие. М.: МАКС Пресс, 2005. 100 с.
Любарский Г.Ю. История Зоологического музея МГУ: Идеи, люди, структуры. М.: Товарищество научных изданий КМК, 2009. 744 с.
О нём в Интернете:
К 130-летию со дня рождения Э.Г. Беккера // www.entomology.ru
Беккер Эрнест Георгиевич // www.school-collection.edu.ru
О людях. Беккер Эрнест Георгиевич // www.rasinicin.narod.ru
Выражаю глубокую благодарность доктору биологических наук, главному научному сотруднику ИПЭЭ им. А.Н. Северцова РАН Алексею Алексеевичу Панову и кандидату биологических наук, старшему научному сотруднику Научно-исследовательского Зоологического музея МГУ имени М.В. Ломоносова Андрею Валентиновичу Свиридову за любезно предоставленные уникальные фотографии Э.Г. Беккера.
Семейные фотографии предоставлены внучкой Эрнеста Георгиевича З.А. Турковой А.В. Свиридову и скопированы для архива кафедры энтомологии.
АКТИВНОСТЬ АКОНИТАТГИДРАТАЗЫ И СОДЕРЖАНИЕ ЦИТРАТА В ПЕЧЕНИ И СЫВОРОТКЕ КРОВИ КРЫС С ТОКСИЧЕСКИМ ГЕПАТИТОМ ПРИ ВВЕДЕНИИ 6-ГИДРОКСИ-2,2,4 - ТРИМЕТИЛ - 1,2 ДИГИДРОКСИХИНОЛИНА
Эссафир Жалал
аспирант кафедры медицинской биохимии и микробиологии, г. Воронеж
Горбенко Марина Владимировна Канд. биол наук, ассистент кафедры медицинской биохимии и микробиологии, г. Воронеж
Шульгин Константин Константинович
Канд. биол наук, доцент кафедры медицинской биохимии и микробиологии, г. Воронеж
АННОТАЦИЯ
Проведено исследовано действия 6-гидрокси-2,2,4 - триметил - 1,2 дигидроксихинолина на активность акони-татгидратазы и уровень цитрата в печени и сыворотке крови крыс на фоне развития токсического гепатита. Введение 6-гидрокси-2,2,4 - триметил - 1,2 дигидроксихинолина животным с токсическим поражением печени приводило к изменению активности аконитатгидратазы и концентрации цитрата в сторону нормы, что, по-видимому, связано с позитивным действием данного соединения на оксидативный статус организма при развитии токсического гепатита, сопряженным с его антиоксидантным действием.
Ключевые слова: токсический гепатит, 6-гидрокси-2,2,4 - триметил - 1,2 дигидроксихинолин, аконитатгидра-таза, цитрат.
Токсический гепатит (ТГ) - это заболевание печени, острого или хронического течения, развивающееся в результате попадания в организм гепатотропных ядов (лекарственные препараты, алкоголь, токсины грибов), токсического действия их на клетки печени, сопровождающееся воспалением и гибелью клеток. В механизмах токсического повреждения печени большое значение имеет возникновение свободных радикалов (СР) в мем-
бранах эндоплазматического ретикулума при биотрансформации микросомальными оксигеназами ксенобиотиков [4]. Имеются данные, что одной из мишеней действия СР является аконитатгидратаза (АГ, К.Ф.4.2.1.3) [3]. Снижение активности данного фермента может приводить к накоплению цитрата, являющегося эффективным низкомолекулярным антиоксидантом, вследствие хелатирующих свойств по отношению к ионам Fe2+ [5].
Евразийский Союз Ученых (ЕСУ) # 7 (16), 2015 | БИОЛОГИЧЕСКИЕ НАУКИ
129
Значительный интерес представляет исследование действия биологически активных веществ, обладающих антиоксидантными свойствами. Ряд исследований свидетельствуют, что некоторые гидроксихинолины оказывают положительное влияние при окислительном стрессе и обладают антиоксидантной активностью. В рамках нашего исследования был проведен поиск производных гидрокси-хинолинов с целевой биологической активностью с помощью программы прогноза «структура-свойство» PASS и отобран - 6-гидрокси-2,2,4 - триметил - 1,2 дигидрокси-хинолин.
В этой связи целью настоящей работы явилась оценка содержания цитрата и активности АГ в тканях печени и сыворотке крови крыс при введении 6-гидрокси-2,2,4 - триметил - 1,2 дигидроксихинолина на фоне экспериментального токсического гепатита.
В качестве объекта исследования использовали самцов белых лабораторных крыс (Rattus rattus L.) массой 150-200 г. Животные были разделены на следующие экспериментальные группы: 1-я группа (контроль) содержалась на стандартном режиме вивария; 2-ая группа - животные, которым для создания модели экспериментального токсического гепатита вводили четыреххлористый углерод, являющейся органоспецифичным токсином, обладающим гепатотропным действием. После суточной пищевой депривации животным однократно вводили четыреххлористый углерод в дозе 0,064 мл в виде раствора в 1 мл вазелинового масла на 100 г веса животного [7]. Забой животных производили на 4 сутки, когда наблюдался максимальный цитолиз гепатоцитов; в 3-й группе животным после индуцирования ТГ вводили внутрибрюшинно 6-гидрокси-2,2,4 - триметил - 1,2 дигидрок-сихинолин в дозе 50 мг/кг веса животного в виде раствора в 0,9% NaCl, ежедневно в течение 3-х дней.
Навески тканей печени крысы гомогенизировали в 4-х кратном объеме охлажденной среды выделения (0,1М
А
трис-НС1-буфер (рН 7,8), содержащий 1мМ ЭДТА, 1% р-меркаптоэтанол) и центрифугировали при 10000g в течение 12 мин. Активность АГ определяли на спектрофотометре Hitachi U-1900 с программным обеспечением при 233 нм в среде, содержащей 0,05 мМ трис-НС1-буфер (рН 7,8), 4 мМ цитрат. За ферментативную единицу (Е) принимали количество фермента, необходимого для превращения 1 мкмоля субстрата в 1 мин при 25оС. Количество цитрата определяли по методу Нательсона [6]. Данные обрабатывали с использованием t - критерия Стьюдента, различия считали достоверными при p < 0,05.
Показано, что при введении 6-гидрокси-2,2,4 - три-метил - 1,2 дигидроксихинолина, происходило возрастание активности АГ и снижение уровня цитрата по сравнению со значениями при патологии.
Так, активность АГ в печени, выраженная в виде Е на грамм сырой массы, уменьшающаяся в патологическом состоянии в 1,6 раза, возрастала в 1,5 раза при введении 6-гидрокси-2,2,4 - триметил - 1,2 дигидроксихинолина в дозе 50 мг/кг. В сыворотке крови крыс активность фермента, снижающаяся при развитии патологии в 1,6 раза, увеличивалась в 1,5 раза (p<0,05) при введении протектора.
Очевидно, наблюдаемые изменения активности фермента при ТГ, связаны с тем, что в данных условиях происходит активация свободнорадикального окисления (СО), что приводит к разрушению железо-серных кластеров АГ и переводит фермент в неактивную форму [2]. Положительное влияние 6-гидрокси-2,2,4 - триметил - 1,2 дигидроксихинолина, вероятно, взаимосвязано с тем, что он, проявляя свое антиоксидантное действие, приводил к детоксикации СР, что способствовало уменьшению степени повреждения молекулы фермента и изменению активности АГ в сторону контроля.
Б
Рисунок 1. Активность аконитатгидратазы в печени (A) и сыворотке крови (Б) крыс, в норме (1), при токсическом гепатите (2), при введении 6-гидрокси-2,2,4 - триметил - 1,2 дигидроксихинолина в дозе 50 мг/кг (3).
Согласно полученным результатам, при введении 6-гидрокси-2,2,4 - триметил - 1,2 дигидроксихинолина на фоне развития токсического гепатита в тканях животных отмечается снижение содержания цитрата по сравнению с данными при патологии. Установлено, что содержание цитрата в печени крыс, увеличивающееся при ТГ в 2,0 раза, снижалось при введении 6-гидрокси-2,2,4 - триме-тил - 1,2 дигидроксихинолина в дозе 50 мг/кг в 1,9 раза
(p<0,05). Уменьшение данного параметра наблюдалось и в сыворотке крови крыс, которым вводили протектор, в 1,4 раза (p<0,05), уровень которого возрастал в 2,1 раза при ТГ.
В заключение можно отметить, что введение 6-гид-рокси-2,2,4 - триметил - 1,2 дигидроксихинолина на фоне развития ТГ приводило к снижению активности АГ в пе-
130
Евразийский Союз Ученых (ЕСУ) # 7 (16), 2015 | БИОЛОГИЧЕСКИЕ НАУКИ
чени и сыворотке крови крыс, что сопровождалось увеличением содержания цитрата. Изменение исследуемых показателей в сторону контрольных значений, возможно, связано с уменьшением интенсивности СО при введении исследуемого протектора. Известно, что производные гидроксихинолинов снижают формирование супероксид-анион радикала и гидроксильного радикала. Кроме того,
А
эти вещества приводят к снижению уровня пероксидного окисления липидов [1]. Реализация данных эффектов действия может способствовать снижению количества СР, повреждающих молекулу АГ, что приводит к возрастанию ферментативной активности и снижению содержания цитрата.
Б
1,4
1 2 3
Группы животных
Рисунок 2. Содержание цитрата в печени (A) и сыворотке крови (Б) крыс, в норме (1), при токсическом гепатите (2), при введении 6-гидрокси-2,2,4 - триметил - 1,2 дигидроксихинолина в дозе 50 мг/кг (3).
Список литературы
1. Anti-dyslipidemic and antioxidative activities of 8-hydroxyquinoline derived novel keto-enamine Schiffs bases / K. V. Sashidhara [et. al.] // Eur J Med Chem. -2009, - V 44, № 4. - 1813-1821.
2. Bulteau A.L. Redox-dependent modulation of aconitase activity in intact mitochondria / A.L. Bulteau, M. Ikeda-Saito, L.I. Szweda // Biochemistry. - 2003. -V 42, № 50. - P. 14846- 14855.
3. Gardner P.R., Nguyen D.M., White C.W. Aconitase is a sensitive and critical target of oxygen poisoning in cultured mammalian cells and in rat lungs // Proc. Nat. Acad. Sci. 1994. V. 91. № 25. P. 12248-12252.
4. Intrasplenic hepatocellular transplantation corrects hepatic encephalopathy in portacaval-shunted rats / J.
Ribero [et al.] // Hepatology.- 1992. - V. 15. - P. 1218.
5. Microstructure and magnetic properties of Al-doped barium ferrite with sodium citrate as chelate agent / D. Chen [et al.] // Journal of Magnetism and Magnetic Materials. - 2013. - V. 337-338. - P. 65-69.
6. Афанасьев В.Г. К микрометоду определения лимонной кислоты в сыворотке крови с помошью фотоэлектроколориметра / В.Г. Афанасьев, В.С. Зайцев, Т.И. Вольфсон // Лаб. дело. - 1973. - №4. - С. 115-116.
7. Сидорова В.Ф. Регенерация печени у млекопитающих. / В.Ф. Сидорова, З.А. Рябинина, Е.М. Лейкина. - М.:Медицина, 1966. - 240с.
