УДК 636:612.002.636.2
Желавський М.М., кандидат ветеринарних наук, доцент ® (E-mail: docgmm@mail.ru)
Подтьський державный аграрно-техшчний утверситет, м. Кам 'янець-Подтьський
ЗМ1НИ ФАГОЦИТАРНОГО ЗАХИСТУ ОРГАН1ЗМУ КОР1В ПРИ СУБКЛ1Н1ЧНОМУ МАСТИТ
В робот1 вивчено змти неспециф1чного ¡мунобюлог1чного захисту оргашзму коргв при субклтгчному мастит1. Встановлено, що субклтгчний мастит коргв проявляеться актив1зац1ею протимжробног реактивност1 нейтрофшьних гранулоцит1в кровг в НСТ-тест1 та супроводжуеться зростанням реактивност1 ттралейкоцитарного л1зоциму фагоцит1в секрету молочног залози.
Ключовi слова: корови, лактац1я, субклтгчний мастит, ¡муттет, фагоцитарний захист, НСТ-тест, ттралейкоцитарний л1зоцим.
Вступ. 1мунна система оргашзму включае в себе обширну групу iмунокомпетентних кл^ин, яю виконують важливу роль у формуванш iмунноl вщповда [1,2]. Фагоцитоз - це один i3 ушверсальних механiзмiв захисту, який сформувався в органiзмi тварин i людини в процес тривалого фшогенетичного розвитку. На сьогоднiшнiй день вже детально вивчена ультраструктура i функщя фагоцитарних клiтин, проте механiзми реалiзацil 1х протимiкробного потенцiалу ще дос залишаеться центральним об'ектом вивчення кшшчно1 iмунологil [2,3].
Метою дослiдження було вивчити показники фагоцитарного захисту оргашзму корiв при субклмчному маститi.
Матер1ал i методи. Експериментальнi дослiдження проводили на коровах-аналогах украшсько! чорно-рябо! породи. Для проведення дослщу було сформовано контрольну та дослщну групи. Контролем слугували клмчно-здоровi тварини (n=17) 3-5-го мiсяця лактаци. Дослiдну групу (n=17) було сформовано iз корiв, хворих на субклiнiчний мастит.
При iмунологiчному тестуваннi визначали стан Оксигензалежних механiзмiв захисту фагоцитiв кровi за цитохiмiчною реакцiею iз нiтросинiм тетразолiем (НСТ-тест).Оксигеннезалежний протимiкробний потенцiал фагоцитiв секрету молочно! залози оцiнювали за реактившстю iнтралейкоцитарного лiзоциму (1ЛЛ) у дослвд iз мiкробною тест-культурою Micrococcus lysodecticus. При визначенш iнтенсивностi запально! реакци визначали також iндекс м^раци нейтрофшв (1МН) та лейкоцитарний iндекс штоксикаци (Л11). Бiометричну обробку отриманих результат проводили за допомогою статистичного софту Statistica v. 5.5 A.
® Желавський М.М., 2010
93
Результати дослщження. Нейтрофшьш гранулоцити сама динамiчна популящя фагоцитарних кл^ин. Цi мiкрофаги, пiсля виходу iз червоного кiсткового мозку, перебувають у периферичному кровоносному руслi лише до 12 год, а над^ м^рують у рiзнi тканини оргашзму, де й виконують свою основну функцш. Нейтрофiли входять також до складу соматичних кл^ин молочно! залози, кiлькiсть яких рiзко збiльшуeться при розвитку запального процесу [4,5]. Загальновщомо, що фагоцити е ефекторами запалення, якi не тiльки здiйснюють фагоцитоз, а й активно регулюють iмунну реакцiю органiзму [6,7]. Тому у сучасному розумшш фагоцитоз слiд розглядати штегральний пусковий механiзм каскаду iмунобiологiчних фракцiй [8,9], зрушення якого може призвести до iмунологiчних зрушень [7,10].
1мунолопчними дослiдженнями встановлено, що в периферичнш кровi клiнiчно-здорових корiв на 3-5 мкяць лактаци НСТ-реактивнiсть нейтрофшв вiдповiдае фiзiологiчним значенням. Субклiнiчний мастит проявився ктотними змiнами в системi фагоцитарного захисту. Запальний процес супроводжувався збшьшенням в периферичнiй кровi хворих корiв фракци сегментоядерних нейтрофiлiв, яю проявляли виражену цитохiмiчну реактивнiсть в метаболiчнiй редукци нiтросинього тетразолiю (рис. 1). Зростаюча протимiкробна активнiсть мжрофапв при цьому проходила iз збшьшенням ЛИ, що засвщчуе про наростаючу ендогенну iнтоксикацiю.
20 18 16 14 12 10 8 6 4 2 0
0,7 0,6 -- 0,5 -- 0,4 -- 0,3 -- 0,2 -- 0,1 0
□ НСТ+,% ♦ Л11
Клш1чно-здоров1 тварини Хвор1 на субкшшчний
мастит
Гiстограма 2. Протшупкробна реактившсть нейтрофнльних гранулоцит1в кров1 кор1в та значения Л11 при субклшчному мастит
При цитологiчному дослщжеш секрету молочно! залози пiддослiдних корiв було виявлено, що субклiнiчний мастит також супроводжуеться посиленою мiграцiею нейтрофшьних гранулоцитiв в зону патологiчного
94
процесу (1МН 2,15±0,17, р<0,05), що проходило на rai зростання реактивност 1ЛЛ (рис. 2).
□ Здоровi тварини
□ XBopi на субклМчний мастит
Рис. 2. Протшупкробна реактивн1сть фагоцит1в секрету молочноУ залози кор1в при субкл1н1чному мастит1
У мжропрепаратах дiагностували рiзке збiльшення (до 66,47±1,73%) кiлькостi фагоцитарних клiтин i3 специфiчними фагосомами в цитоплазмi. Знищення Micrococcus lysodecticus вiдбувалось, як поодинокими фагоцитами, так i зосередженими асоцшованими групами фагоцитарних клiтин (нейтрофiльнi гранулоцити, моноцити, гiстiоцити).
В перспективнi плануеться дослiдити динамiку клiтинних та гуморальних факторiв iмунобiологiчного захисту при розвитку субклмчного маститу корiв.
Висновки:
1.Субклмчний мастит корiв характеризуеться активiзацiею протимжробно! реактивностi нейтрофiльних гранулоцитiв периферично! кровi в НСТ-тестi. Патологiчний процес супроводжувався зростанням Л11, що е одшею iз ознак ендогенно! iнтоксикацiï метабол^ами запалення.
2.Субклiнiчний запальний процес супроводжувався зростанням (1МН 2,15±0,17, р<0,05) та активiзацiею iнтралейкоцитарного лiзоциму фагоцитiв секрету молочноï залози та, що також е одшею iз раннiх ознак мобшзаци локального iмунiтету.
3.Дослiдження кл^инних та гуморальних механiзмiв iмунного захисту молочноï залози корiв при субклмчному маститi дозволяе бiльш глибше дослщити патогенетичнi механiзми розвитку цiеï патологи, прогнозувати ïï вислiд та адекватшсть лiкування.
Л1тература
1.Маслянко Р.П. Основи iмунобiологiï / Р.П. Маслянко. - Львiв. -Вертикаль, 1999. - 472 с.
2.Mehrzad J. Viability of milk neutrophils and severity of bovine coliform mastitis / J.Mehrzad, L. Duchateau, C. Bürvenich // J. Dairy Sci. - 2004. - Vol. 87. -P. 4150-4162.
3.Lippolis J. D. Neutrophil extracellular trap formation is not inhibited by milk / J.D. Lippolis, T.A. Reinhardt, J.P. Goff, R.L. Horst // Vet. Immunol. Immunopathol. - 2006. - Vol. 113. - P. 248-255.
95
4.Burvenich C. Cumulative Physiological Events Influence the Inflammatory Response of the Bovine Udder to Escherichia coli Infections During the Transition Period / C. Burvenich, D. D. Bannerman, J. D. Lippolis, L. Peelman et al. // J. Dairy Sci. - 2007. - Vol. 90. - P. 39-54.
5.Яблонский В.А. Локальный иммунитет и апоптоз иммунокомпетентных клеток при субклиническом мастите у коров / В.А.Яблонский, Н.Н. Желавский // Современные проблемы ветеринарного обеспечения репродуктивного здоровья животных: Материалы Международной научно-практической конференции, посвященной 100-летию со дня рождения проф. В.А. Акатова, 27-29 мая, 2009 года, Истоки. - Воронеж, 2009. - С. 393 -397.
6.Фггзпартж Д.Л. Кл^ини - яка !х функщя // Ветеринарна практика. -2008. - №6. - С. 30-32.
7.Дослщження цитохiмiчноl реактивност нейтрофшв корiв в перюд лактаци : (Науковi доповда НАУ) [Електронний ресурс] / В.А. Яблонський, М.М. Желавський // Науковi доповда НАУ. - 2008. - №2 (10). - Режим доступу до журн. : http://www.nbuv.gov.ua/e-Journals/nd/2008-2/08yvatol.pdf
8. Gill J.J. Efficacy and Pharmacokinetics of Bacteriophage Therapy in Treatment of Subclinical Staphylococcus aureus Mastitis in Lactating Dairy Cattle / J.J. Gill, J.C. Pacan, M.E. Carson, K.E. Leslie et all // Antimicrobial Agents and Chemotherapy. - 2006. - Vol. 50. - N. 9 - P. 2912-2918.
9.Ерскш Рон Дж. Пщвищення iмунiтету в сухостшний перюд: труднощi та можливост / Рон Дж. Ерскш // Ветеринарна практика. - 2010. - №1. - С. 26 -29.
10. Lorraine M. Mammary Gland Immunity and Mastitis Susceptibility / M. Lorraine, N.Sordillo, L.Katie, L.Streicher // Journal of Mammary Gland Biology and Neoplasia. - 2002. - Vol. 7. - N. 2 - P. 135-141.
Summary Zhelavskyi M. Ph.D., docent Agrarian and engenirreng universitet on Podila THE CHANGES OF PHAGOCYTES DEFENCE OF ORGANISM OF COWS
AT SUBCLINICAL MASTITIS The changesof nonrospecific immunobiological defence of organism of cows are in-process investigation at subclinical venerable. It is set that subclinical mastitis of cows shows up activation of antimicrobial reactivity of neutrophils of blood in NBT-test and accompanied by the increase of reactivity of inraleucocytes lyzocyme of phagocytes of secret of suckling gland.
Key words: cows, lactation, subclinical mastitis, immunity, phagocitosis, inraleucocytes lyzocyme.
Стаття надшшла до редакцИ 16.04.2010
96