CC BY
16
11. Балакирев Н.А., Юдин В.К. Методические указания проведения научно-хозяйственных опытов по кормлению пушных зверей. М., 1994. 31 с.
12. Меркулов Г.А. Курс патолого-гистоло-гической техники. Л.: Медицина, 1969. 326 с.
13.Правила проведения работ с использованием экспериментальных животных. При-
ложение к Приказу МЗ СССР № 755 от 12.08.1977.
14.Новикова Н.Н., Егорова А.Г., Эрнст Л.И., Романенко Г.М. Изменение внутренних органов и тканей щенят песцов при введении в рацион ПАБК // Вестник Российской академии с.-х. наук. 1999. Вып. 7. С. 152.
Influence of succinic acid in liver histology of red fox Kokorina A., Okulova I., Bespyatykh O.
The experiment was carried out on young growth of red foxes in age from 2 months to market. To study the influence of succinic acid at the micro picture of the liver in red foxes succinic acid in a dose of 5 mg/kg body weight was added into the diet of the experimental group in the first 10 days of each month. Material obtained after the slaughter was fixed at 5% neutral formalin. Paraffin sections of the liver were stained with Mayer's hematoxylin and eosin. Histological examination of the liver in animals of the experimental group compared to control shown a decrease of intensity of vascular pathological processes, restoration of trabeculae with the conservation of small droplets of fat, which indicates that the structure of the liver tissue is restored. Succinic acid has detoxifying, hepatoprotective action. Its use on the selected scheme reduces effects of negative factors on liver.
Keywords: succinic acid, red fox, liver histology
УДК 619:619.995.132.6:599.3
Внутриутробный путь передачи Trichinella spp.
Лидия Александровна Букина, кандидат биол. наук, доцент ФГБОУ ВПО ЕЯтская ГСХА, г. Киров, Россия
E-mail: l.bukina5@gmail.com
Цель исследований - изучить возможность внутриутробного пути передачи личинок трихинелл у некоторых видов лабораторных животных. Результаты экспериментального заражения показали, что морские свинки и монгольские песчанки наиболее восприимчивы к арктическому изоляту трихинелл, менее восприимчивыми оказались сирийские хомяки и белые беспородные крысы. Доказана возможность передачи личинок трихинелл потомству внутриутробным путем у 44,4% экспериментально зараженных морских свинок. Зараженность потомства у монгольских песчанок составила 31,3%, а у сирийских хомяков - 21,0%. Отрицательный результат получен при исследовании вертикальной передачи у белых беспородных крыс.
Таким образом, доказана возможность вертикальной передачи трихинеллеза у некоторых видов грызунов (семейств Caviidae и Muridae) и плотоядных (семейство Felidae). Число случаев внутриутробного заражения потомства наиболее высоко у морских свинок, но показатели зараженности потомства у всех видов лабораторных животных значительно ниже по сравнению с взрослыми особями.
Ключевые слова: трихинеллез, лабораторные животные, вертикальная передача, трихинеллоскопия
Трихинеллез - широко распространенное антропозоонозное заболевание, имеющее важное эпизоотическое и эпидемиологическое значение. Трихинеллы имеют сложный цикл развития, при котором онтогенез заканчивается в одном организме хозяина без выхода во внешнюю среду. Поэтому передача трихинеллезной инвазии протекает тремя основными экологическими факторами - хищничество, некрофагия и каннибализм.
Представляет научный интерес малоизученный до настоящего времени внутриутробный путь передачи инвазии. Среди ученых нет единого мнения по этому во-
просу. Ряд авторов отрицает вероятность передачи личинок трихинелл во время внутриутробного развития [1, 2, 3]. Другие исследователи высказывают предположение о возможности передачи их плодам [4]. Описаны случаи обнаружения личинок трихинелл как у плодов, так и у новорожденных детенышей морской свинки [5]. По данным K. Podhajecky и O. Tomasovicova [6], 50,6% приплода морских свинок и 7,5% приплода кроликов были заражены, но обнаружить передачу трихинеллеза у кошек, собак и хорьков им не удалось. B. Hartmannova и K. Chroust [7] сообщают, что вертикальная
передача у крыс и кроликов возможна на протяжении всего периода беременности, а I. Cosoraba и N. Orjanu [8] выдвигают предположение о том, что большинство личинок проходят через плаценту крыс в течение третьей недели беременности. Вследствие значимости трихинеллеза, как потенциальной угрозы здоровью человека и теоретической возможности вертикальной передачи его от животного к животному, считаем, что тема исследований актуальна.
Цель исследований - изучить возможность внутриутробного пути передачи личинок трихинелл у некоторых видов лабораторных животных.
Материал и методы. В качестве инвазионного материала использовали арктические изоляты ТпеЫпвПа ярр., выделенные из нерпы, добытой в Мечигменском заливе (Чукотский район, Чукотский автономный округ). Вирулентность изолятов поддерживалась последовательным пассированием на лабораторных животных - сирийских хомяках (5 пассаж). Животные (беременные самки): морские свинки - 18 голов, песчанки -16 голов и сирийские хомяки - 33 головы, белые беспородные крысы - 14 голов. Всего исследовано: новорожденных детенышей и плодов - 276, плацент - 14, маток - 11.
Исследования проводили по общепринятым гельминтологическим методам: компрессорная трихинеллоскопия и переваривание мышц в искусственном желудочном соке (ИЖС). Заражение производили перо-
Таблица 1
Экспериментальное заражение лабораторных животных (среднее количество и экстенсивность инвазии)
рально. Доза на голову лабораторных животных составила: для морских свинок -1000 личинок трихинелл, для песчанок и сирийских хомяков - по 130, а белых беспородных крыс - 200 экземпляров (табл. 1). Скармливание личинок производили на 6-20 день беременности. Убой лабораторных животных и их потомства производили в разные сроки в зависимости от вида: морских свинок забивали на 42-56 дни после заражения, а убой остальных видов лабораторных животных и их потомства осуществляли на 36-40 день после заражения. У морских свинок исследовали отдельно каждую особь (новорожденных детенышей или плоды), у остальных видов лабораторных животных исследовали весь помет как одну объединенную пробу от одной самки. Для расчета количества личинок на 1 г (далее лич./г) мышечной ткани животных каждого помета взвешивали отдельно. Плаценты и матки исследовали отдельно. Из тушек животных делали костно-мышечный фарш, который заливали изотоническим раствором и помещали в термостат на 2-3 часа. При исследовании тушек детенышей морских свинок изотонический раствор смешивали с ИЖС в соотношении 1:1 и переваривали на магнитной мешалке ПЭ-6110М в течение 3-4 часов. Определяли интенсивность и экстенсивность инвазии (ИИ и ЭИ). Статистическую обработку материалов производили с использованием прикладных компьютерных программ Statistica [9].
Вид животного Кол-во взрослых опытных животных, особь Доза, экз. личинок Среднее кол-во лич/г мышечной ткани Экстенсивность инвазии, ЭИ, %
Морская свинка 18 1000 3979±1673 100
Песчанка 16 130 983±476 100
Сирийский хомяк 33 130 854±264 87,88
Белая беспородная крыса 14 200 0,21±0,07 14,28
Результаты и их обсуждение. Анализ результатов экспериментального заражения показал, что взрослые морские свинки заразились все, однако две особи были исключены из опыта, так как они пали в ходе эксперимента. Две самки абортировали, но их плоды удалось исследовать. В общей
сложности было исследовано 27 особей (21 новорожденный детеныш и 6 плодов), полученных от девяти пометов (табл. 2). Личинки трихинелл были обнаружены у 44,44% лабораторных животных. При этом интенсивность инвазии у новорожденных детенышей составила 1,91±1,70, а у плодов
0,89±0,81 лич/г костно-мышечного фарша соответственно. Зараженность животных из одного помета оказалась различной, не все особи были заражены. Также было исследовано 14 плацент и 11 маток. Личинок трихинелл обнаружили в 2-х (14,29%) и 4-х (36,36%) органах соответственно. Следует отметить, что песчанки, как и морские свинки, оказались хорошо восприимчивы к арктическому изоляту трихинелл: все взрослые особи заразились. Потомство удалось получить от 15 самок. Всего исследовано 76 особей (58 новорожденных детенышей и 18 плодов), полученных от 16 пометов. Личинки трихинелл были обнаружены у 31,25% пометов животных. В среднем по группе ИИ составила 0,83±0,77 лич/г костно-мышечно-го фарша, что соответствовало 1 -17 личинок на обследуемую особь. Сирийские хомяки оказались менее восприимчивы к этому
изоляту трихинелл. В ходе эксперимента заразилось 29 (87,88%) из 33 взрослых самок. Потомство было получено от 26 самок. В общей сложности было исследовано 115 особей (92 новорожденных детеныша и 23 плода), полученных от 19 пометов. Личинки трихинелл обнаружены у 21,05% обследованных пометов сирийских хомяков с ИИ 0,62±0,59 лич/г костно-мышечного фарша, что соответствовало 0,5-9 личинок на детеныша. Взрослые белые беспородные крысы оказались маловосприимчивыми к арктическому изоляту, при этом ЭИ составила 14,28%, а интенсивность заражения была на уровне 0,21±0,07 лич/г костно-мышечного фарша. Потомство удалось получить от 6 самок. В общей сложности исследовано 58 особей (47 новорожденных детенышей и 11 плодов). Ни в одной пробе личинок трихинелл обнаружено не было.
Таблица 2
Показатели экспериментального заражения личинками трихинелл беременных самок лабораторных животных
Вид лабораторного животного Кол-во исследованных детенышей и плодов Число зараженных пометов Экстенсивность инвазии, % Кол-во исследованных плацент Диапазон интенсивности заражения (лич/г мышц)
Морская свинка 27 9 44,44 14 0,08-3,61
Песчанка 76 5 31,25 - 0,06-1,60
Сирийский хомяк 115 4 21,05 - 0,03-1,21
Белая беспородная крыса 58 - - - -
Нами впервые зарегистрирована вертикальная передача личинок трихинелл у спонтанно зараженной одичавшей кошки, которая в течение нескольких лет жила на территории зверофермы с. Лорино (Чукотский район, Чукотский автономный округ). При вскрытии у нее было обнаружено 6 плодов, которых после измельчения (навеска составила 168 г) исследовали на мешалке в ИЖС. При микроскопировании осадка обнаружено 14 личинок (6 спиралей и 8 полуспиралей). У взрослой особи ИИ составила 36,73 лич/г мышечной ткани, при этом наиболее сильно заселенными личинками трихинелл оказались мышцы передней конечности и массетеры. В среднем по группе ИИ плодов составила 0,08±0,03 лич/г кост-но-мышечного фарша.
Проведенное исследование выявило наличие вертикальной передачи трихинелл у
песчанок и у морских свинок и подтвердило наше исследование по сирийским хомякам
[10]. Мы не обнаружили вертикальную передачу у белых беспородных крыс. Закономерно возникает вопрос: почему внутриутробная передача личинок трихинелл возможна у одних видов животных и невозможна у других. По мнению зарубежных авторов, причина заключается в типе плаценты. Так, у животных с гемохориальной плацентой (морских свинок, кроликов и мышей) трофобласт и эндотелий плода имеют прямой контакт с кровью матери, а, следовательно, и с мигрирующими личинками
[11]. Ученые подчеркивают, что у человека также формируется плацента гемохориально-го типа. Обнаружение нами личинок в переваренных плацентах и матках морских свинок подтверждает, что личинки трихинелл достигают плацентарного барьера и таким
образом входят в тесный контакт с плодом. У плотоядных с эндотелиохориальным типом плаценты также присутствует тесный контакт с трофобластом и эндотелием плода. Возможно, это объясняет факт обнаружения нами личинок трихинелл у эмбрионов спонтанно зараженной кошки. Помимо структуры плацентарного барьера и срока беременности, на котором происходит заражение, успешность передачи инвазии, по-видимому, может зависеть от дозы и продолжительности кишечной стадии заболевания. Полученные нами низкие показатели ЭИ и ИИ у потомства лабораторных животных согласуются с данными зарубежных авторов, полученными как у экспериментально зараженных, так и спонтанно заразившихся плотоядных.
Заключение. Таким образом, у некоторых видов грызунов (семейства Caviidae и Muridae) и плотоядных (семейство Felidae) доказана вертикальная передача трихинеллеза среди животных с гемохориальным и эн-дотелиохориальным типами плаценты. Число случаев внутриутробного заражения потомства наиболее высоко у морских свинок, но показатели зараженности потомства у всех видов лабораторных животных значительно ниже в сравнении с взрослыми особями.
Список литературы 1. Дубницкий А.А. К вопросу о возможной интраутеринной инвазии при трихинеллезе плотоядных животных: Материалы науч. конф. Все-союзн. общ-ва гельминтологов. М., 1965. С. 70-73.
2. Митникова О.А., Сапунов А.Я. Приживаемость личинок и инвазионность половозрелых трихинелл разных видов//Теория и практика борьбы с паразитарными болезнями: материалы докл. науч. конф. М., 1999. С.162-166.
3. Catron L. Non-transmissibility in utero of Trichinosis in the rat//Proc. Soc. Exp. Biol. Med., 1937. V. 36. Р. 721-723.
4. Ромашов Б.В., Ромашова Н.Б., Сапель-ников С.Ф. Обнаружение трихинелл у щенков обыкновенной лисицы (Vulpes vulpes) // Материалы седьмой науч. конф. по трихинеллезу. М., 1996. С. 68-69.
5. Roth H. Ein Beitrag zur Frage der prenatalen Trichinen Infektion//Acta Pathol. Microbiol. Scand., 1935. V.11. Р. 203-215.
6. Podha'jecky' K., Tomasovicova' O. Intrauterine Trichinellen Infektions. // Fol. Vet., 1968. V.12. Р.151—152.
7. Hartmannova B., Chroust K. Congenital Trichinellosis//Acta Univ. Agric., Brno, 1968. № 37. Р. 93-103.
8. Cosoraba I., Orjanu N. Congenital trichinellosis in the rat//Vet. Parasitol., 1998. № 77. Р. 147-151.
9. Боровиков В. STATISTICA. Искусство анализа данных на компьютере: Для профессионалов. СПб.: Питер, 2003. 688 с.
10. Букина Л.А., Матвеева Н.А., Плетнева Е.А., Венских К.В., Суслова Н.Л. Случай внутриутробного заражения золотистого хомячка Trichinella nativа//Биологические ресурсы. Ч.1 Охотоведение. Сборник научных трудов, Киров: Вятская ГСХА, 2010. С.102-103.
11. Kuitunen-Ekbaum E. The incidence of Trichinosis in humans in Toronto //Can. Pub. Health J., 1941. № 32. Р. 569-573.
Intrauterine transmission of Trichinella spp. Bukina L.
The aim of this paper was to study whether Trichinella larvae may be transmitted in utero in some species of laboratory animals. The results of the experimental infestation showed that guinea pigs and Mongolian gerbils were the species that were most susceptible to the Arctic Trichinella isolate, while Syrian hamsters and white outbred rats were the species that were least susceptible to the Arctic Trichinella isolate. It has been shown that 44.4% of the experimentally infected guinea pigs were able to transmit Trichinella larvae to their offspring in utero. The number of infected animals in the litters of Mongolian gerbils was 31.3%, and in the hamster litters 21.0%. The results for the vertical transmission in white outbred rats were negative.
Thus, it has been shown that vertical transmission of trichinellosis does occur in some rodent species (from the Caviidae and Muridae families), as well as in some carnivores (the Felidae family). Infection rates in the offspring were significantly lower than those in the adult animals, for all laboratory animals tested.
Key words: trichinellosis, laboratory animals, vertical transmission, trichinelloscopy
