CC BY
84
О КОЛЛЕКТИВ АВТОРОВ, 2015
УДК 616.155.392.8-036.11-085.361.4-013.3]-07:575.08
влияние генов киллерных иммуноглобулинподобных рецепторов и их hla-лигандов на выживаемость больных острыми миелоидными лейкозами после трансплантации аллогенных гемопоэтических стволовых клеток
Хамаганова Е.Г., Паровичникова Е.Н., Кузьмина Л.А., Куликов С.М., Кузьминова Е.П.,
Юшкова А.А., Савченко В.Г.
ФГБУ Гематологический научный центр Минздрава РФ, 125167, Москва, Россия
Резюме. Трансплантация аллогенных гемопоэтических стволовых клеток (алло-ТГСК) ассоциирована с самым низким риском развития рецидива, однако до сих пор рецидивы являются одной из основных причин смертности пациентов. Среди заболеваний, в терапию которых входит алло-ТГСК, острые миелоидные лейкозы (ОМЛ) наиболее чувствительны к действию натуральных киллерных клеток. Их функция контролируется широким спектром рецепторов, включая киллерные иммуноглобулинподобные рецепторы (KIR). Изучено влияние генов kIr и их HLA-лигандов на общую и бессобытийную выживаемость у больных ОМЛ после алло-ТГСК. В проспективное исследование были включены 35 больных ОМЛ в возрасте 19-60 лет (медиана возраста 36 лет), период наблюдения от 5 до 56 мес после алло-ТГСК (медиана наблюдения 18 мес). Выявлено, что основным фактором, влияющим на выживаемость после алло-ТГСК у больных ОМЛ, является группа риска, к которой относили больного перед трансплантацией. У больных из группы стандартного риска трансплантация от HLA-совместимого неродственного донора способствует улучшению бессобытийной выживаемости по сравнению с трансплантацией от HLA-идентичного родственного донора. Иммуногенетические факторы системы KIR/HLA оказывают влияние на результаты алло-ТГСК у больных со стандартным риском. Гомозиготность больного по генам HLA-d-лигандов сопровождается улучшением бессобытийной выживаемости. Для больных без гомозиготности по генам HLA-С2-лигандов предпочтительнее выполнение ТГСК от доноров-носителей гена теломерного конца KIR-B-гаплотипов - KIR2DS1, поскольку такая комбинация ассоциируется с улучшением бессобытийной выживаемости. На основании полученных данных разработан показатель, учитывающий благоприятные факторы KIR/HLA у донора и реципиента и позволяющий выделить группу больных, у которых маловероятно развитие рецидива после алло-ТГСК.
Ключевые слова: трансплантация аллогенных гемопоэтических стволовых клеток; KIR-гены;
HLA-лиганды; общая выживаемость; бессобытийная выживаемость.
Для цитирования: Хамаганова Е.Г., Паровичникова Е.Н., Кузьмина Л.А., Куликов С.М., Кузьминова Е.П., Юшкова А.А., Савченко В.Г. Влияние генов киллерных иммунотобулинподобных рецепторов и их HLA-лигандов на выживаемость больных острыми миелоидными лейкозами после трансплантации аллогенных гемопоэтических стволовых клеток. Гематология и трансфузиология. 2015; 60(3): 16-21.
EFFECTS OF KILLER IMMUNOGLOBULIN-LIKE RECEPTOR GENES AND THEIR HLA LIGANDS ON SURVIVAL OF PATIENTS WITH ACUTE MYELOID LEUKEMIAS AFTER ALLOGENIC HEMOPOIETIC STEM CELL
TRANSPLANTATION
Khamaganova E.G., Parovichnikova E.N., Kuzmina L.A., KulikovS.M., Kuzminova E.P., Yushkova A.A., Savchenko V.G.
Hematological Research Center, 125167, Moscow, Russia Summary. Allogeneic hematopoietic stem cell transplantation (allo-HSCT) is associated with the lowest risk of leukemia relapse, but until now a relapse is one of the main factors of mortality after HSCT. Acute myelogenous leu-kemias (AML) are the most sensitive to natural killer (NK)-cell reactivity among the blood malignancies treated with allo-HSCT. The function of NK cells is regulated by their inhibitory and activating surface receptors, including killer-cell immunoglobulin-like receptors (KIRs). This prospective study investigated the influence of KIR and HLA-ligand genes on overall survival (OS) and event-free survival (EFS) of AML patients treated with allo-HSCT. A total of 35 AML patients (median age 36 (19-60) years) were included in the study. The patients were followed up during an average of 18 (5-56) months. Our findings indicate that the pre-transplantation risk category was the main factor essential for OS and EFS after allo-HSCT. The standard risk group patients exhibited a trend to better EFS after HSCT from unrelated HLA-matched donors in comparison with the patients who received HSCT from related HLA-identical donors. Standard risk patients with HLA-C1/C1 homozygosity exhibited a trend to better EFS in comparison with patients having either C1/C2 or C2/C2 ligands. A trend to better EFS was observed in HLA-C1/x recipients of KIR2DS1 -positive allografts. These data served the base for defining the favorable KIR/HLA factors in the donor and recipient. Use of this complex indicator allows selection of a group of patients with low risk of relapse after allo-HSCT. Key words: allo-HSCT; KIR genes; HLA-ligands; OS; EFS. Citation: Gematologiya i transfuziologiya. 2015; 60(3): 16-21. (in Russian)
Острые миелоидные лейкозы (ОМЛ) являются основным показанием к выполнению транспланта-
Для корреспонденции:
Хамаганова Екатерина Георгиевна, доктор биологических наук, ведущий научный сотрудник лаборатории молекулярной гематологии ФГБУ Гематологический научный центр Минздрава России. Адрес: 125167, Москва, Новый Зыковский проезд, д.4а. Телефон: +7(495) 612-65-11. E-mail: ekhamag@mail.ru.
Corresponding author:
Khamaganova Ekaterina, BD, PhD, DSc (ekhamag@mail.ru).
ции аллогенных гемопоэтических стволовых клеток (алло-ТГСК). Алло-ТГСК ассоциирована с самым низким риском развития рецидива, который обусловлен в основном развитием реакции трансплантат против лейкоза [1]. Однако рецидивы заболевания до сих пор являются одной из основных причин смертности больного после ТГСК [2]. Среди заболеваний, в терапию которых входит алло-ТГСК, ОМЛ наиболее чувствительны к действию натуральных киллерных ^К) клеток. Функция NK-клеток
контролируется широким спектром ингибиторных и активационных рецепторов, включая киллерные иммуноглобулинподобные рецепторы (KIR). Инги-биторные KIR-рецепторы распознают полиморфные эпитопы HLA-молекул класса 1 (С1, С2, Bw4), что ведет к толерантности NK-клеток к клеткам, которые экспрессируют подобные HLA-молекулы [3].
Аллели локуса HLA-С с аспарагином в позиции 80 пептидсвязывающей бороздки относятся к группе HLA-C1 и являются лигандами KIR2DL2/3; аллели HLA-С, несущие лизин, относятся к группе HLA-C2 и являются лигандами KIR2DL1 и KIR2DS1. Молекулы HLA-Bw4 - лиганды KIR3DL1/3DS1, HLA-A3/11 -лиганды KIR3DL2. HLA-С2-эпитоп также распознается активационным рецептором KIR2DS1. Лиганды других активационных KIR окончательно не установлены [3]. KIR-A-гаплотипы имеют постоянное количество KIR-генов, из которых только один актива-ционный (KIR2DS4). Число генов в KRB-гаплотипах варьирует, обычно в них входит несколько KIR-генов активационных рецепторов [4].
Отсутствие HLA-лиганда для ингибиторного KIR-рецептора сопровождается развитием аллоре-активности NK-клеток и уменьшением частоты рецидива после алло-ТГСК как частично, так и полностью совместимых [5-7]. ТГСК от донора с KIRB-гаплотипами снижает частоту рецидива [8], при этом «протективным» эффектом обладают как гены центромерной части В-гаплотипов, так и теломерной [9]. Наибольшее «протективное» действие связывают с трансплантацией от донора-носителя двух и более В-мотивов - лучший ("better") донор, донор с двумя и более В-мотивами, из которых два центро-мерных, рассматриваются как наилучшие ("best") [8]. Меньшая частота рецидива после алло-ТГСК наблюдается у больных с отсутствием гомозиготности по HLA-С2-лигандам, донор которых имел ген тело-
Таблица 1
Характеристика больных, включенных в исследование
Характеристика Группа стандартного риска (n = 22) Группа высокого риска(п = 13)
Возраст, годы
медиана (разброс) 38 (18-54) 35(19-60)
Донор женщина - реципиент мужчина 8 (36%) 4 (31%)
Другие комбинации 14 (54%) 9 (69%)
Доноры:
НЬА-идентичные сиблинги 12 (55%) 8 (62%)
НА-совместимые (10/10) неродственные доноры 10 (45%) 5 (38%)
Источник стволовых клеток:
костный мозг 14 (64%) 6 (46%)
периферическая кровь 8 (36%) 7 (54%)
Режим кондиционирования:
миелоаблативный 9 (41%) 2 (15%)
пониженной интенсивности 12 (55%) 11 (85%)
без предтрансплантационного кондиционирования 1 (4%) -
л
S3 о г ш га m s
д m к со 3 ю О
1,0
0,8
0,6
0,4
0,2
0,0
0 10 20 30 40 50
Время набгнодения, мес
Рис. 1. ОВ у больных ОМЛ после алло-ТГСК.
мерного конца В-гаплотипов KIR2DS1 [10]. У больных с HLA-С2-лигандами чаще развивается рецидив после трансплантации по сравнению с больными с HLA-d-лигандами [10, 11]. Следовательно, вероятность развития рецидива ОМЛ после алло-ТГСК связана как с генами KIR-рецепторов донора, так и с HLA-лигандами реципиента для KIR-рецепторов.
Цель данного проспективного исследования - изучить влияние генов KIR- и их HLA -лигандов на общую и бессобытийную выживаемость (БСВ) у больных ОМЛ после алло-ТГСК и на основании полученных данных попытаться разработать показатель, учитывающий эти иммуногенетические факторы, и оценить ассоциацию этого показателя с увеличением выживаемости у больных ОМЛ после алло-ТГСК.
Материалы и методы
В исследование включены 35 больных ОМЛ (18 мужчин и 17 женщин) в возрасте от 19 до 60 лет (медиана возраста 36 лет), которым в 2010-2014 гг. в отделении трансплантации костного мозга Гематологического научного центра (ГНЦ, Москва) была выполнена алло-ТГСК. Период наблюдения от 5 до 56 мес, медиана 17,5 мес. Больные были разделены на группы стандартного и высокого риска. Группу стандартного риска (ТГСК в первой полной ремис-
1,0
0,8
* 0,6-
0,4 -
ю о
О) LQ
0,2
0,0
Р=0,12
0 10 20 30 40 50
Длительность наблюдения, мес
Трансплантация от родственного донора Трансплантация от неродственного донора
Рис. 2. БСВ у больных ОМЛ со стандартным риском в зависимости от типа донора ГСК.
Таблица 2
Влияние генов КШ-рецепторов донора и КШ-лигандов на БСВ после алло-ТГСК у больных ОМЛ со стандартным риском (п = 22)
Показатель n 3-летняя БСВ, % Р
KIR-лиганды реципиента:
HLA-C1/C1 10 80
HLA-C1/C2 + HLA-C2/C2 12 42 0,09
Донор KIR B/х 15 64
Донор KIR А/А 7 42 0,2
KIR-cen B/x донора:
есть 11 63
нет 11 53 0,7
KIR-tel B/x донора:
есть 10 70
нет 12 50 0,2
KIR B-контент донора:
нейтральный (0-lB-Momue) 15 51
лучший (не менее 2B-Momueoe без Cen-B/B) 3 67 0,6
наилучший (не менее 2B-Momueoe с Cen-B/B) 4 75
Комбинация донор KIR2DS1+-больной HLA-Cl/x
есть 7 86
нет 15 43 0,09
Отсутствие HLA-лиганда для любого ингибиторного KIR-рецептора донора:
есть 14 67
нет 8 Не достигнута 0,3
сии) составили 22 (63%) больных, группу высокого риска (ТГСК вне первой ремиссии и трансплантация у больных «вторичным» ОМЛ, связанным с терапией предшествующего онкологического заболевания) - 13 (37%) больных. Алло-ТГСК была выполнена от ЖА-идентичного си-блинга 19 (54%) больным, от ЖА-совместимого неродственного донора (совпадение по генам НЬА на уровне высокого разрешения 10/10) - 16 (46%) больным. Источ-
1,0
0,8-
* 0,6-
0,4
ю о о о (И ш
0,2
0,0-1
р=0,05
0 10 20 30 40 50
Длительность наблюдения, мес
Суммарный показатель КИЗ/НЬА^З Суммарный показатель К1К/Н1_А0-2
Рис. 3. БСВ у больных ОМЛ со стандартным риском в зависимости от баллов суммарного показателя КШ/НТА.
Таблица 3
Влияние генов НА-лигандов и присутствия комбинации донор К1К2081+-больной НЬА-С1/х на ОВ и БСВ после алло-ТГСК в общей группе больных ОМЛ (стандартный риск + высокий риск)
Фактор n 3-летняя ОВ 3-летняя БСВ
% Р % Р
HLA-C1/C1 13 82 92
HLA-C1/C2 + HLAC2/C2 22 52 0,3 20 0,001
Присутствие комбинации донор KIR2DS1+- больной HLA-C1/x:
да 8 87,5 87,5
нет 27 58 0,2 29 0,01
ником трансплантата у 20 (57%) больных был костный мозг, периферические стволовые клетки (у реципиентов неродственных трансплантатов) - у 15 (43%). Применяли миелоаблативный режим кондиционирования у 11 (31%) больных, режим кондиционирования пониженной интенсивности - у 23 (66%). У 1 (3%) больного длительная аплазия и инфекционные осложнения не позволили выполнить предтрансплантационное кондиционирование с проведением стандартной иммуносупрессии, которая была проведена только с использованием циклофосфамида в дозе 50 мг/кг на +3-й день после трансплантации и мезенхи-мальных стромальных клеток при восстановлении показателей гемограммы. При алло-ТГСК от неродственного донора при кондиционировании дополнительно применяли анти-Т-лимфоцитарный глобулин. Все доноры (как и больные) относились к европеоидам. Характеристики больных по группам риска представлены в табл. 1.
Геномную ДНК получали из периферической крови с использованием наборов для выделения ДНК ("Invitrogen", США). При родственной ТГСК HLA-идентичность больного и сиблинга устанавливали HLA-типированием генов HLA-A*-B*-C* при среднем разрешении методом полиме-разной цепной реакции с аллель-специфическими прай-мерами (Polymerase Chain Reaction with Sequence Specific Primers, PCR-SSP), с праймерами ("Olerup", Швеция) в соответствии с рекомендациями производителя, которое дополняли типированием с высоким разрешением в случаях гомозиготности и обязательным типированием с высоким
л
Б
о г о
CD m
s
*
л ш
ю
8 о
CD Ш
1,0 i 0,8 0,6 0,40,20,0
3
р=0,005
10
20
30
40
50
I I Суммарный показатель KIR HLA^3 Суммарный показатель KIR HLA 0-2
Рис. 4. БСВ у больных ОМЛ общей группы в зависимости от баллов суммарного показателя KIR/HLA.
разрешением генов HLA-DRB1*-DQB1*. При неродственной ТГСК подтверждающее HLA-генотипирование донора и больного проводили методом PCR-SBT (sequence based typing) c высоким разрешением на наборах Protrans S4/S3 (Германия).
KIR--генотипирование геномной ДНК проводили наборами KIR Genotyping SSP Kit ("Invitrogen", США) в соответствии с рекомендациями производителя. Выявлялось присутствие KIR-генов: 2DL1,2DL2, 2DL3, 2DL4, 2DL5A, 2DL5B, 2DS1, 2DS2, 2DS3, 2DS4, 2DS5, 3DL1, 3DL2, 3DL3, 3DS1, 2DP1, 3DP1. KIR-генотип определялся в зависимости от присутствия KIR-генов: А/А (гомозиготы по А-гаплотипам) или В/х (т.е. гомозиготы по В-гаплотипам -В/В + гетерозиготы - А/В).
ОВ и БСВ рассчитывали по методу Каплана-Мейе-ра. Значимые события: для ОВ - летальный исход, для БСВ - рецидив (как молекулярный, так и гематологический), отторжение трансплантата и смерть от любых причин. Точка цензурирования - дата последней информации о пациенте. Для оценки статистической значимости различий выживаемости использовали лог-ранговый критерий. Пороговый уровень статистической значимости - 0,05.
Статистическая обработка полученных данных выполнена с помощью статистического пакета SAS 9.3
Результаты
ОВ 3-летняя у больных после алло-ТГСК составила 66% (рис. 1). На время проведения анализа были живы 25 больных, 12 больных умерли. БСВ 3-летняя составила 43%.
Группа риска больного является основным фактором, влияющим на выживаемость после алло-ТГСК [12]. У включенных в наше исследование больных из группы стандартного риска ОВ и БСВ были статистически значимо выше, чем у больных, относящихся к группе высокого риска. ОВ 3-летняя в стандартной группе достигла 86% против 0% в группе высокого риска (р = 0,0001), БСВ 3-летняя - 57% против 0% в группе высокого риска (р = 0,005). Ни один из больных с высоким риском не прожил больше 15 мес (медиана ОВ 7 мес, медиана БСВ 4 мес).
Поскольку воздействия иммуногенетических факторов менее существенны по сравнению с таким биологическим фактором, как фаза лейкозного процесса, влияние генов HLA-лигандов реципиентов и KIR-доноров на БСВ после алло-ТГСК проанализировано у больных из группы стандартного риска (табл. 2).
Хотя формально не обнаружено зависимости БСВ от изученных иммуногенетических показателей, наиболее близки к пороговому уровню значимости (р = 0,05) были следующие два фактора. Выявлена тенденция к увеличению показателей БСВ у больных-гомозигот по генам HLA-С!-лигандов KIR-рецепторов по сравнению с больными-носителями генов HLA-С2-лигандов (HLA-C1/C2 + HLA-C2/C2) - 80% против 42%; р = 0,09. Вторая отчетливая тенденция к улучшению БСВ у реципиентов KIR2DS1-позитивных трансплантатов с отсутствием гомозиготности по НЬА-С2 (86% против 43%; р = 0,09).
БСВ у больных, доноры которых имели KIR-B/x-гаплотипы, была несущественно выше, чем у больных, доноры которых были носителями KIR-А/А-гаплотипов. Статистически значимого влияния на увеличение показателей БСВ не выявлено для генов центромерной (cen B/x) или теломерной (tel B/x) части KIR-B-гаплотипов, так же как и для KIR-В-контента (нейтральный - с 0-1 В-мотивами, лучший - не менее 2 B-мотивов без Cen-B/B, наилучший - не менее 2 B-мотивов с Cen-B/B). Отсутствие генов HLA-лигандов для любого ингибиторного KIR-рецептора донора сопровождалось статистически незначимым улучшением БСВ, при этом ни один из больных, у которых присутствовали все HLA-лиганды для ингибиторного KIR-рецептора донора, не прожил более 2 лет.
Из неиммуногенетических факторов на результаты алло-ТГСК у больных ОМЛ со стандартным риском повлиял тип донора стволовых клеток: БСВ у больных после алло-ТГСК от неродственного донора была несколько выше, чем БСВ у больных, которым трансплантация была выполнена от родственного донора (р = 0,12) (рис. 2).
В общей группе больных также прослеживалось положительное влияние на БСВ наиболее приближенных к пороговому уровню значимости иммуно-генетических показателей - это гомозиготность по HLA-C1 и присутствие комбинации донор KIR2DS1-позитивный - больной HLA-C1/x (табл. 3).
Единственный иммуногенетический фактор, влиявший не только на БСВ, но и на ОВ в общей группе, -отсутствие HLA-лиганда для любого ингибиторного KIR-рецептора донора: 3-летняя ОВ у больных с отсутствующим HLA-лигандом составила 86% против 28% у больных со всеми HLA-лигандами для KIR-рецептора донора (p = 0,02); 3-летняя БСВ - 61% против 14% (p = 0,02).
Итак, проведенное исследование показало, что с высокой вероятностью развития рецидива после алло-ТГСК ассоциирован как KIR-генотип донора, так и генотип HLA-лигандов больного для KIR-рецепторов донора, а также для комбинации донорских KIR с HLA-лигандами больных.
Конечно, вклад каждого фактора, обусловливающего аллореактивность NK-клеток в отношении лейкоза - развитие эффекта «трансплантат против лейкоза» (graft-versus-leukemia, GVL), и тем самым в улучшение выживаемости после алло-ТГСК, в настоящее время оценить сложно. Однако на основании проведенного исследования и анализа данных литературы мы все же предприняли попытку суммировать данные системы KIR/HLA в один показатель, который позволил бы оценить влияние KIR/HLA на вероятность развития рецидива или его отсутствия после алло-ТГСК у больных ОМЛ. Факторы, ассоциирующиеся с тенденцией к повышению БСВ у больных ОМЛ после алло-ТГСК - гомозиготность больного по HLA-C1, носительство донором KIR2DS1 при отсутствии у больного гомозиготности по HLA-C2 - условно оценили в 1 балл, отсутствие у больного этих факторов - в 0 баллов. Учитывая результаты многоцентровых наблюдений и определенное совпа-
дение с ними полученных нами данных (отсутствие статистической значимости можно объяснить недостаточной выборкой в нашем исследовании), наличие у больного таких показателей, как «наилучший» KIR 5-контент донора, мы условно оценили в 1 балл, а отсутствие у больного HLA-лиганда для ингиби-торного KIR-рецептора донора - в 0 баллов. Таким образом, сумма баллов у больного варьировала от 0 до 4. Сумма баллов у больного со всеми четырьмя благоприятными факторами, ассоциирующимися с повышением выживаемости после алло-ТГСК, - 4, у больного с тремя благоприятными факторами - 3, с двумя - 2, с одним - 1, у больного без благоприятных факторов - 0 баллов.
Проведенный анализ показал, что в группе больных со стандартным риском 3-летняя БСВ была статистически значимо выше у больных с суммарным показателем KIR/HLA не менее 3 баллов, чем у больных с суммарным показателем 0-2 балла - 87,5% против 40%; p = 0,05 (рис. 3). Единственным событием у больных с суммарным показателем KIR/HLA не менее 3 баллов стала смерть больной П. от инфекционных осложнений на фоне резистентной к терапии реакции трансплантат против хозяина (РТПХ) на 5-м месяце после алло-ТГСК.
У больных общей группы (стандартный риск + высокий риск) 3-летняя ОВ имела тенденцию к повышению, у больных с суммарным показателем KIR/HLA не менее 3 баллов, по сравнению с больными с суммарным показателем 0-2 балла - 89% против 57%; p = 0,17. 2-летняя БСВ больных с суммарным показателем KIR/HLA не менее 3 баллов была статистически значимо выше, чем у больных с суммарным показателем 0-2 балла - 89% против 27%; p = 0,005. (рис. 4). Рецидивов лейкоза у больных с суммарным показателем не менее 3 баллов за время исследования не наблюдалось.
Таким образом, предложенный суммарный показатель благоприятных факторов KIR/HLA, ассоциирующихся с улучшением БСВ после алло-ТГСК у больных ОМЛ, позволяет выделить больных с низким риском развития рецидива после трансплантации. Конечно, эти данные требуют проверки и уточнений на более значительной выборке больных, особенно в общей группе больных и у больных с высоким риском развития рецидива.
Обсуждение
Проведенное исследование показало, что, хотя основным фактором, влияющим на выживаемость после алло-ТГСК у больных ОМЛ, является группа риска, к которой относили больного перед трансплантацией, у пациентов со стандартным риском представляется возможным проследить влияние на выживаемость иммуногенетических факторов, относящихся к системе KIR/HLA.
К факторам, положительно влияющим на БСВ после алло-ТГСК, относятся: гомозиготность больного по HLA-d-лигандам, носительство донором гена активационного KIR2DS1 (картируется в тело-мерном конце B-гаплотипов) в отсутствие у реципиента гомозиготности по HLA-С2-лигандам, отсут-
ствие у больного HLA-лиганда для ингибиторных КЖ-рецепторов донора, а также трансплантация от неродственного донора.
Вероятно, что через взаимодействие с молекулой HLA-C2 NK-клетки получают более сильный ин-гибиторный сигнал по сравнению с NK-клетками, сигналы которых генерируются через HLA-C1 [13], что сопровождается более сильной блокировкой NK-клеток с КЖ-рецепторами для HLA-C2 и менее выраженным эффектом «трансплантат против лейкоза».
К1К2БВ1 - единственный активационный КЖ-рецептор, для которого установлено наличие HLA-лиганда (С2). Предполагается, что при созревании NK-клеток с активационным KIR2SD1-рецептором гомозиготность по HLA-C2 ведет к развитию ги-пореактивности KIR2SD1+-NK-клеток (в отличие от процесса лицензирования ингибиторных КЖ-рецепторов) [14]. Однако при трансплантации реципиентам без гомозиготности по HLA-C2 (ИЬЛ-С1/х) NK-клетки донора, обладающие этим активационным рецептором (KIR2SD1), способны распознавать и уничтожать лейкемические клетки, тем самым способствуя улучшению безрецидивной выживаемости [10].
Отсутствие HLA-лиганда для ингибиторного КЖ-рецептора донора ассоциируется с повышением безрецидивной выживаемости не только при гапло-и частично совместимых ТГСК, но даже при трансплантации от HLA-идентичных родственных [6] и HLA-совместимых неродственных доноров [7], несмотря на то что в этих случаях NK-клетки с отсутствующим HLA-лигандом теоретически являются функционально некомпетентными. Функционально компетентными (лицензированными) становятся только NK-клетки с КЖ-рецепторами, для которых имелся соответствующий HLA-лиганд в геноме собственного организма [3, 15]. Однако после ТГСК не-лицензированные NK-клетки приобретают на время функциональную компетентность - способность распознавать отсутствие HLA-лиганда и проявлять аллореактивность[3, 16].
Показатель благоприятных факторов К1К/^А, равный 3 баллам и более, в нашем исследовании ассоциировался у больных с улучшением ОВ и БСВ по сравнению с выживаемостью больных, у которых количество благоприятных факторов не превышало 2. Этот показатель дает возможность выделить группу больных, у которых маловероятно развитие рецидива после алло-ТГСК.
Из неиммуногенетических факторов на исход алло-ТГСК оказывает влияние тип донора ГСК -БСВ у больных после трансплантации от HLA-совместимого неродственного донора была выше БСВ у больных-реципиентов ГСК от HLA-идентичного сиблинга.
Заключение
Основным фактором, влияющим на выживаемость после алло-ТГСК у больных ОМЛ, является группа риска, к которой относится больной перед трансплантацией.
Трансплантация от HLA-совместимого неродственного донора способствует улучшению БСВ у больных ОМЛ из группы стандартного риска.
У больных ОМЛ стандартного риска на результаты алло-ТГСК оказывают влияние иммуногене-тические факторы системы KIR-HLA-лиганды. Го-мозиготность больного по генам HLA-d-лигандов сопровождается улучшением БСВ. Для больных без гомозиготности по HLA-С2-лигандам предпочтительнее выполнение ТГСК от доноров-носителей гена теломерного конца KIR B-гаплотипов - KIR2DS1, так как эта комбинация ассоциируется с улучшением БСВ.
Показатель, учитывающий благоприятные факторы KIR/HLA, равный 3 баллам и более, позволяет выделить группу больных, у которых маловероятно развитие рецидива после алло-ТГСК.
ЛИТЕРАТУРА [REFERENCES]
1. Савченко В.Г., Паровичникова Е.Н., Афанасьев Б.В., Грицаев С.В., Семочкин С.В., Бондаренко С.Н. и др. Клинические рекомендации российских экспертов по лечению больных острыми миелоидными лейкозами в возрасте моложе 60 лет. Терапевтический архив. 2014; 7: 4-13.
[Savchenko V.G., Parovichnikova E.N., Afanasiev B.V., Gritsaev S.V., Semochkin S.V., Bondarenko S.N., et al. Russian experts' clinical guidelines for acute myeloid leukemia treatment in patients less than 60 years of age. Terapevticheskiy arkhiv. 2014; 7: 4-13]. (in Russian)
2. Кузьмина Л.А., Любимова Л.С., Менделеева Л.П., Желнова Е.И., Петинати Н.А., Богданов Р.Ф. и др. Экстрамедуллярные рецидивы после трансплантации аллогенных гемопоэтиче-ских клеток и трансфузий лимфоцитов донора. Клиническая онкогематология. 2011; 3: 191-5.
[Kuzmina L.A., Lyubimova L.S., Mendeleeva L.P., Zhelnova E.I., Petinati N.A., Bogdanov R.F., et al. Extramedullary relapse after allogeneic stem cell transplantation and transfusion of donor lymphocytes. Klinicheskaya onkogematologiya. 2011; 3: 191-5]. (in Russian)
3. Leung W. Use of NK cell activity in cure by transplant. Br. J. Haematol. 2011; 155(1): 14-29. doi: 10.1111/j.1365-2141.2011.08823.x.
4. Uhrberg M., Parham P., Wernet P. Definition of gene content for nine common group B haplotypes of the Caucasoid population: KIR haplotypes contain between seven and eleven KIR genes. Immunogenetics. 2002; 54(4): 221-9.
5. Davies S.M., Ruggieri L., DeFor T., Wagner J.E., Weisdorf D.J., Miller J.S., et al. Evaluation of KIR ligand incompatibility in mismatched unrelated donor hematopoietic transplants. Killer immunoglobulin-like receptor. Blood. 2002; 100(10): 3825-7.
6. Hsu K.C., Keever-Taylor C.A., Wilton A., Pinto C., Heller G., Arkun K., et al. Improved outcome in HLA-identical sibling hematopoietic stem-cell transplantation for acute myelogenous
leukemia predicted by KIR and HLA genotypes. Blood. 2005; 105(12): 4878-84.
7. Miller J.S., Cooley S., Parham P., Farag S.S., Verneris M.R., McQueen K.L., et al. Missing KIR ligands are associated with less relapse and increased graft-versus-host disease (GVHD) following unrelated donor allogeneic HCT. Blood. 2007; 109(11): 5058-61.
8. Cooley S., Weisdorf D.J., Guethlein L.A., Klein J.P., Wang T., Le C.T., et al. Donor selection for natural killer cell receptor genes leads to superior survival after unrelated transplantation for acute myelogenous leukemia. Blood. 2010; 116(14): 2411-9.
9. Stringaris K., Adams S., Uribe M., Eniafe R., Wu C.O., Savani B.N., Barrett A.J. Donor KIR genes 2DL5A, 2DS1 and 3DS1 are associated with a reduced rate of leukemia relapse after HLA-identical sibling stem cell transplantation for acute myeloid leukemia but not other hematologic malignancies. Biol. Blood Marrow Transplant. 2010; 16(9): 1257-64.
10. Venstrom J.M., Pittari G., Gooley T.A., Chewning J.H., Spellman S., Haagenson M., et al. HLA-C-dependent prevention of leukemia relapse by donor activating KIR2DS1. N. Engl. J. Med. 2012; 367(9): 805-16.
11. Cooley S., Weisdorf D.J., Lisbeth A., Klein J.P., Wang T., Marsh S.G., et al. Donor killer cell Ig-like receptor B haplotypes, recipient HLA-C1, and HLA-C mismatch enhance the clinical benefit of unrelated transplantation for acute myelogenous leukemia. J. Immunol. 2014; 192(10): 4592-600.
12. Савченко В.Г., Любимова Л.С., Паровичникова Е.Н., Менделеева Л.И., Момотюк К.С., Демидова И.А., и др. Трансплантации аллогенных и аутологичных гемопоэтических стволовых клеток при острых лейкозах (итоги 20-летнего опыта). Терапевтический архив. 2007; 7: 30-5.
[Savchenko V.G., Lyubimova L.S., Parovichnikova E.N., Mendeleeva L.I., Momotyuk K.S., Demidova I.A., et al. Transplantation of allogeneic and autologous hematopoietic stem cells in acute leu-kemias (results of 20 years experience). Terapevticheskiy arkhiv. 2007; 7: 30-5]. (in Russian)
13. Moesta A.K., Parham P. Diverse functionality among human NK cell receptors for the C1 epitope of HLA-C: KIR2DS2, KIR2DL2, and KIR2DL3. Front. Immunol. 2012; 3: Article 336. doi: 10.3389/fimmu.2012.00336. Available at: http://journal. frontiersin.org/article/10.3389/fimmu.2012.00336/full.
14. Fauriat C., Ivarsson M.A., Ljunggren H.G., Malmberg K.J., Michaelsson J. Education of human natural killer cells by activating killer cell immunoglobulin-like receptors. Blood. 2010; 115(6): 1166-74.
15. Babor F., Fischer J.C., Uhrberg M. The role of KIR genes and ligands in leukemia surveillance. Front. Immunol. 2013; 4: Article 27. doi: 10.3389/fimmu.2013.00027.
Available at: http://journal.frontiersin.org/article/10.3389/ fimmu.2013.00027/full.
16. Yu J., Venstrom J.M., Liu X.R., Pring J., Hasan R.S., O'Reilly R.J., Hsu K.C. Breaking tolerance to self, circulating natural killer cells expressing inhibitory KIR for non-self HLA exhibit effector function after T cell-depleted allogeneic hematopoietic cell transplantation. Blood. 2009; 113(16): 3875-84.
Поступила 14.05.15 Received 14.05.15
