CC BY
67
страненности и заболеваемости болезнями органов дыхания территориях, указанных выше, за исключением Отрадненского района, при экспозиции населения имеет место техногенное воздействие на воздушную среду (рис. 3-6).
Данная методика может быть использована для изучения любой нозологической единицы (МКБ 10) при наличии достоверных данных о превалентности и инцидентности заболеваний среди населения.
ЛИТЕРАТУРА
1. Черкасский Б. Л. Риск в эпидемиологии. - М.: Практическая медицина, 2008. - 480 с.: ил.
2. Шабунова А. А. Здоровье населения в России: состояние и динамика: Монография. - Вологда: ИСЭРТ РАН, 2010. - 408 с.
3. О санитарно-эпидемиологической обстановке в Краснодарском крае в 2004 году: Государственный доклад. - Краснодар: ТУ Роспотребнадзора по Краснодарскому краю, 2005. - 81 с.
4. Рекомендации по качеству воздуха в Европе: Пер с англ. -М.: издательство «Весь мир», 2004. - 312 с.
5. ЭиЬгске М., Мс Кее М., Иоссо Ь. Инвестиции в здоровье: ключевое условие успешного экономического развития стран Восточной Европы и Центральной Азии. - Копенгаген: Всемирная Организация Здравоохранения, 2008. - 274 с.
Поступила 20.01.2011
Т. А. КУНЦ1, Г. М. ВАКУЛИН1, А. В. ЕФРЕМОВ2, Е. В. ОВСЯНКО3, М. Г. ПУСТОВЕТОВА1, И. П. ЖУРАКОВСКИЙ1
УЛЬТРАСТРУКТУРНЫЕ ПАРАМЕТРЫ КЛЕТОК ПЕЧЕНИ КРЫС НА РАННИХ СТАДИЯХ РАЗВИТИЯ КАРЦИНОСАРКОМЫ WALKER 256
Центральная научно-исследовательская лаборатория,
2кафедра патофизиологии с курсом клинической патофизиологии,
3кафедра анатомии, гистологии, биологии стоматологического факультета ГОУ ВПО Новосибирского государственного медицинского университета Росздрава,
Россия, 630091, г. Новосибирск, Красный проспект, 52. E-mail: tkunts@ngs.ru
На 3-е и 5-е сутки после имплантации клеток карциносаркомы крысам Wistar найдены метастазные клетки в синусоидах и пространствах Диссе печени. Обнаружены микроциркуляторные застойные нарушения кровотока. Показано, что дистантные и короткодистантные воздействия паранеопластической интоксикации и непосредственно метастазных апоптозных клеток вызывают дистрофические и единичные некротические изменения, субклеточные проявления апоптоза клеток паренхимы и стромы, тормозят синтетические и энергетические процессы в гепатоцитах, приводят к их липидной инфильтрации, внутриклеточному холестазу и повреждению межклеточных контактов. Выявлен комплекс субклеточных компенсаторно-приспособительных реакций в гепатоцитах, частично реализованных через 3 суток, но сниженных к 5-м суткам развития опухоли.
Ключевые слова: печень, ультраструктура, карциносаркома Walker 256.
Т. А. KUNTS1, G. M. VAKULIN1, А. V. EFREMOV2,
Е. V. OVSYANKO3, М. G. PUSTOVETOVA1, I. P. ZHURAKOVSKY1
ULTRASTRUCTURAL RAT LIVER CELLS PARAMETERS IN EARLY STAGES OF WALKER 256 CARCINOSARCOMA
1Central research laboratory,
2cathedra of pathophysiology,
3cathedra of anatomy, histology, biology of dentists’ faculty SES HPE Novosibirsk state medical university of Roszdrav,
Russia, 630091, Novosibirsk, Krasny prospect, 52. E-mail: tkunts@ngs.ru
Metastatic cells and microcirculatory stagnant disturbances are revealed in liver sinusoids and spaces of Disse on the 3d and 5th days after carcinosarcoma cells transplantation in Wistar rats. It was shown distant paraneoplastic intoxication influence and metastatic apoptotic cells result in dystrophy, necrosis and apoptosis of parenchyma and stroma cells that inhibit synthetic and energetic processes in hepatocytes, leads to lipid infiltration, intracell holestasis and cell contacts injury. Complex subcell compensatory-adaptive reactions in hepatocytes was revealed particularly realized on the 3d day but decreased to the 5th day of tumor growth.
Key words: liver, morphometry, ultrastrucrure, сarcinosarcoma Walker 256.
Введение
Рост злокачественных опухолей и, в частности, карциносаркомы Walker 256 (W256) сопровождается продукцией неопластических медиаторов и протеоли-тических агентов [14, 17]. Это связано с повышением
генной экспрессии медиаторов цитокинов - трансформирующего фактора роста р, интерлейкина-12, гамма-интерферона и фактора некроза опухоли а, уровень которой различается в обнаруженных двух типах клеток карциносаркомы: регрессивного (начинающейся
Кубанский научный медицинский вестник № 3 (126) 2011 УДК 616.36-006.68-0918-092.9
Кубанский научный медицинский вестник № 3 (126) 2011
деградации) и прогрессивного роста (преимущественной гиперплазии клеток) [16], имеющих ультраструктурно и стереологически тестируемые различия в диффе-ренцировочном потенциале и темпах деградации [7].
Деградация опухолевых клеток и их разрушение с высвобождением неопластических цитокинов и факторов лизиса лежат в основе синдрома неспецифической эндогенной интоксикации (НЭИ) продуктами распада, приводящими к разрушению мембран нормальных клеток различных органов при росте уровня свободных радикалов и активации перекисного окисления липидов (ПОЛ), что вызывает также гемолиз эритроцитов, развитие анемии [3] и нарушает реологические свойства крови [4, 8]. Возникает при росте злокачественной опухоли и паранеопластическая токсическая нагрузка на печень в виде протеолитической гиперферментемии и воздействия образующихся среднемолекулярных пептидов [3].
В связи с тем, что печень является центральным органом метаболизма и детоксикации организма, целью настоящей работы было исследовать субклеточные показатели клеток паренхимы и стромы органа в условиях влияния факторов НЭИ на ранее не изучен-
ных сроках (3-и и 5-е сутки) развития карциносаркомы W256.
Методика исследования
В опыте использовали крыс-самцов Wistar массой 180-200 г. Работу проводили с соблюдением принципов гуманности, изложенных в директивах Европейского сообщества (86/609/ЕЕС) и Хельсинкской декларации. Суспензию клеток перевиваемой карциносаркомы W256 вводили крысам в мышцу бедра в дозе 106 клеток [10]. Животных выводили из эксперимента декапитацией под эфирным наркозом. Для электронно-микроскопических исследований образцы печени фиксировали в 4%-ном параформальдегиде (Эегуа) на 0,1 М фосфатном буфере Миллонига (рН 7,4) при комнатной температуре в течение 2 ч с дополнительной дофиксацией в 1%-ном растворе четы-рехокиси осмия на том же буфере на льду в течение 1 ч. После дегидратации образцы заключали в эпо-новую смесь и полимеризовали. Полученные на уль-тратоме 1_КВ-8800 срезы (35-45 нм) контрастировали насыщенным водным раствором уранилацетата и
Рис. 1. Ультраструктура клеток печени через 3 суток развития W256:
а - фрагмент застойного синусоида с минимально свободным пространством, не занятым подвергнутыми адгезии к эндотелиальной выстилке тромбоцита и гранулоцита; дисфункциональные изменения митохондрий, гранулярной цитоплазматической сети, хроматина ядра и ядрышка; б - метастатический занос опухолевой клетки регрессивного роста в синусоид; фрагмент гепатоцита с липидной инфильтрацией, расширенной гранулярной сетью, деэнергезированными митохондриями, дезинтегративными изменениями ядра и сегрегацией ядрышка; в - апоптозно измененный диплокариоцит без плазмалеммы в синусоиде со сладжированными эритроцитами; г - фрагмент гепатоцита с гиперплазией структур гранулярной и агранулярной цитоплазматической сети и конденсированной энергетической конфигурацией митохондрий, х12 000 (а, б, г), х10 000 (в)
цитратом свинца, напыляли слоем углерода и изучали в электронных микроскопах иЕМ-7А и иЕМ-100Э.
Результаты исследования
В печени крыс через 3 суток после имплантации клеток карциносаркомы гистологически отмечены явления застоя в междольковых, изредка в центральных венах и чаще в синусоидах из-за адгезии тромбоцитов и гра-нулоцитов к эндотелию (рис. 1а). В неравномерно расширенных синусоидах наблюдаются сладжированные эритроциты, видимые и электронно-микроскопически (рис. 1в). Лимфатические пространства Малла нередко расширены и содержат лимфоидные элементы, которые в виде мелких инфильтратов видны и в паренхиме как признак повышения проницаемости микрососудов. Некоторые гепатоциты имеют признаки белковой дистрофии, ядра части клеток пикнотически изменены, наблюдается некроз единичных гепатоцитов.
Электронно-микроскопически выявлено, что уже через 3 суток развития карциносаркомы происходит метастатический занос опухолевых клеток с током крови в синусоиды печени (рис. 1б) из компактной массы первичной опухоли. Субклеточные особенности таких клеток соответствуют определенным ранее [7] признакам 4-й стадии дифференцировки клеток карциносаркомы ^56 II типа регрессивного роста, для которых характерны вытянутое ядро с маргинальным гетерохроматином, увеличение количества лизосом с повышением их объемной плотности, удлинение микроворсинок (рис. 1б).
Интересно, что в зонах клеток, прилежащих к эндотелию синусоидов, не везде прослеживается непрерывность плазмалеммы опухолевой клетки, что
предполагает возможность выхода наружу фактора некроза опухоли а и других цитокинов, а в самой выстилке видны необычно сильно расширенные фенестры решетчатых пластинок эндотелия, сквозь которые многие микроворсинки метастатической клетки достигают гепатоцита (рис. 1б). При этом не удается выявить наличия плазмалеммы у гепатоцита, которая, возможно, лизировалась с образованием обилия гладких мембран эргастоплазмы. В цитоплазме видны везикулярно расширенные каналы гранулярной сети, деэнергизи-рованные митохондрии с очень плотным матриксом и расширенными кристами, скопления липидных капель, выявляются дезинтегративные изменения хроматина ядра и сегрегация ядрышка (рис. 1б). Подобные дисфункциональные субклеточные изменения гепатоцитов выявлены и в зонах застойного полнокровия синусоидов с адгезией к эндотелию тромбоцитов и гранулоцитов и сужением просветов синусоидов (рис. 1а, 2а, в).
Паранеопластические и гипоксические воздействия на клетки печени приводят к гибели апоптозом части двухъядерных гепатоцитов, разрушенные остатки которых выявляются в просветах синусоидов с агрегированными эритроцитами (рис. 1в). Для сохранной части диплокариоцитов характерно развитие субклеточных признаков гиперплазии гранулярной эндоплазматичес-кой сети с удлинением ее каналов и образованием их пакетов, скомпонованных параллельно и близко прилежащих к митохондриям (рис. 1 г).
Митохондрии в двухъядерных гепатоцитах вопреки обычной ортодоксальной энергетической конфигурации, свойственной им в норме, имеют конденсированную конфигурацию со значительно уплотненным
Рис. 2. Субклеточные особенности клеток печени через 3 суток развития W256:
а - в зауженном синусоиде на поперечном срезе апоптозно измененный эндотелиоцит с конденсацией хроматина и уплотнением цитоплазмы отростков; во фрагментах гепатоцитов отсутствуют гранулы гликогена, сегрегация ядрышка в ядре; б - фрагмент гепатоцита с начальными признаками апоптоза, деэнергизированными митохондриями, конденсацией хроматина и сегрегацией ядрышка; в желчном капилляре видны набухшие микроворсинки и осадки желчных кислот, замыкают этот капилляр удлиненные комплементарные составляющие десмосом повышенной осми-офилии; в - фрагменты смежных гепатоцитов с холестатическим изменением желчного капилляра между ними, удлинением десмосомальных составляющих и фрагментацией плотных контактов (стрелки). х12 000 (а, в), х15 000 (б)
Кубанский научный медицинский вестник № 3 (126) 2011
Кубанский научный медицинский вестник № 3 (126) 2011
матриксом и частично расширенными кристами; в цитоплазме таких клеток появляются скопления агра-нулярной эндоплазматической сети (рис. 1г). В значительно суженных синусоидах обнаруживаются апоп-тозно измененные эндотелиоциты с конденсацией хроматина ядер и уплотнением отростков эндотелиальной стенки (рис. 2а).
Между гепатоцитами нередко выявляются аномально измененные межклеточные плотные контакты и де-смосомальные комплексы с повышенной осмиофилией комплементарных составляющих десмосом и увеличенной протяженностью вдоль смежных мембран соседних гепатоцитов; наблюдается фрагментация плотных контактов. В сжатых просветах желчных капилляров видны набухшие микроворсинки и осмиофильные осадки желчных кислот - свидетельства застоя желчи (рис. 2б, в).
Встречаются гепатоциты с начальными признаками апоптотических субклеточных изменений митохондрий в виде уплотнения их матрикса и расширения крист (рис. 2б), когда еще не выражено уплотнение основного вещества цитоплазмы, но уже конденсирован хроматин ядра и произошла сегрегация ядрышка с утратой гранулярного компонента. В гепатоцитах отсутствуют гранулы гликогена (рис. 1а, 2а, в).
Через 5 суток развития карциносаркомы в печени выявлены более выраженные микроциркуляторные изменения: спазмированные междольковые вены, чаще наблюдаемый сладж-синдром в центральных венах, сосудах триад печеночных долек, а также в неравномерно расширенных синусоидах, заполненных клеточным детритом. Появляются очаги дистрофии гепатоци-тов, более выражена лимфоцитарная инфильтрация в области триад, а также в зонах мелких некротических
фокусов. В перипортальных зонах печеночных долек видны скопления тучных клеток.
В синусоидах обнаружены метастазные клетки карциносаркомы с ундулирующими плазмалеммами чаще регрессивного роста как I, так и II типа диффе-ренцировки [7] с выраженной апоптотической конденсацией хроматина ядер (рис. 3а, б), скоплениями в цитоплазме лизосом (рис. 3а). Эти клетки, видимо, обладают высокой пенетрационной способностью и перемещаются из синусоидного пространства в пространство Диссе, содержащее фибриллы коллагена (рис. 3б).
Для цитоплазмы гепатоцитов, прилежащих к ме-тастазной клетке, проникшей в пространство Диссе (рис. 3а), характерно обилие везикул с хлопьевидным материалом, которые обычно наблюдаются на обменных полюсах гепатоцитов при активации трофического обмена, что предполагает короткодистантное взаимодействие с клетками паренхимы. Дезинтегративный характер такого взаимодействия подчеркивают нарушения ультраструктуры митохондрий с появлением в них полостей, очаговых просветлений матрикса и расширением каналов гранулярной эндоплазматической сети с утратой части прикрепленных рибосом и полисом в цитоплазме (рис. 3а).
Тесный контакт метастазных клеток с клетками Ито, как правило, сопровождается апоптозной трансформацией этих клеток с конденсацией хроматина ядер и уплотнением цитоплазмы (рис. 3б). Даже вне прямого контакта с опухолевыми клетками они подвергаются апоптозным изменениям (рис. 4а).
Для увеличенных в размерах клеток Купфера характерны наличие в цитоплазме крупных скоплений
Рис. 3. Метастазные клетки W256 регрессивного роста с апоптозной конденсацией хроматина в синусоиде и пространстве Диссе через 5 суток развития опухоли:
а - в цитоплазме гепатоцита, прилежащего к метастазной клетке, обилие везикул с хлопьевидным материалом, дезинтегративные изменения митохондрий и гранулярной цитоплазматической сети; б - апоптозная трансформация клетки Ито, находящейся в тесном контакте с метастазной клеткой. х10 000 (а), х12 000 (б)
Рис. 4. Изменения субклеточных особенностей клеток печени через 5 суток развития W256:
а - апоптозная трансформация клетки Ито с выраженной конденсацией хроматина ядра и дезинтеграцией ядрышка; б - фрагмент увеличенной в размере клетки Купфера с гиперплазией лизосом и других органоидов цитоплазмы и кольчатыми пластинками у ядра (стрелка); в - фрагмент гепатоцита с чертами апоптозных изменений - плотной компоновкой митохондрий и уплотненным ядрышком в конденсированном хроматине ядра, но дезинтегративными изменениями цитоплазматических органоидов; г - фрагмент диплокариоцита с липидной инфильтрацией цитоплазмы и дезинтеграцией гранулярной цитоплазматической сети, митохондрий, хроматина
ядра и ядрышка. х12 000 (а, б, в), х10 000 00 (г)
первичных лизосом, большого числа митохондрий и компонентов белок-синтезирующей системы, гиперплазии компонентов комплекса Гольджи и появление у ядер кольчатых пластинок (рис. 4б).
Обнаружены гепатоциты с признаками апоптоза: плотная компоновка митохондрий и уплотнение ядрышек с утратой гранулярного компонента (рис. 4в), но дезинтеграционные изменения митохондрий с набуханием матрикса и редукцией крист, а также нарушение ультраструктуры гранулярной цитоплазматической сети с частичной редукцией рибосом указывают на повреждаемость, вызванную, видимо, уже после вхождения клеток в апоптозный цикл.
В диплокариоцитах обнаружены признаки жировой дистрофии в виде липидной инфильтрации цитоплазмы и дезинтеграции структуры компонентов белок-синтезирующей системы и митохондрий (рис. 4г), что также свидетельствует об их повреждении паранеоп-ластическими факторами, снижающими регенерационные потенции паренхимы по сравнению с 3-ми сутками опыта. Для гепатоцитов характерно отсутствие гранул гликогена (рис. 3а, б, 4в, г).
Обсуждение
Выявленные субклеточные особенности отражают две тенденции происходящих изменений в печени под воздействием развивающейся карциносаркомы. С од-
ной стороны, оказывают влияние повреждающие факторы НЭИ и найденные нами признаки гипоксии, как это демонстрируют субклеточные изменения клеток паренхимы и стромы (снижение синтетических и энергетических потенций и апоптозное устранение части клеток), с другой стороны, возрастают регенераторные потенции гепатоцитов, проявляющиеся в виде компенсаторного увеличения площади ядер и деспирализа-ции хроматина - показателей стимуляции экспрессии генов и повышения транскрипции генома, определяемой биохимически [11].
Отмечаемое в условиях отрицательного воздействия факторов НЭИ и энергетического дефицита в связи с гипоксией увеличение количества и объема каналов гранулярной сети и митохондрий в части гепатоцитов, рассматриваемое как процесс регенерационной гипертрофии, отражающей гиперплазию субклеточных структур [9], является компенсаторным следствием накопления в поврежденных и погибших клетках недоокисленных токсичных продуктов метаболизма, приводящих к дезинтегративным субклеточным нарушениям.
Наблюдаемый нами факт уплотнения матрикса митохондрий в двухъядерных гепатоцитах уже на 3-и сутки опыта не только отражает такую известную тенденцию в апоптозно изменяющихся клетках [6], но и свидетельствует о том, что в гепатоцитах в исследуемые сроки
Кубанский научный медицинский вестник № 3 (126) 2011
Кубанский научный медицинский вестник № 3 (126) 2011
опыта возрастает дефицит энергии, видимо, в связи с исчезновением из них гликогена - энергетического субстрата, ввиду чего ортодоксальная энергетическая конфигурация митохондрий трансформируется в конденсированную с расширенными кристами, что сопровождается отсутствием отвода электронов за их пределы, как это впервые было показано с применением методов электронной микроскопии и полярографической оценки энергетического состояния митохондрий [13].
Очевидно, апоптозно гибнущие метастазные клетки карциносаркомы напрямую воздействуют на клетки паренхимы и стромы. Высвобождающийся из них через дефекты плазмалемм фактор некроза опухоли а, видимо, оказывает инактивирующее влияние и на ядерный фактор 1а (ИЫР-1а), регулирующий в гепатоцитах экспрессию генов, кодирующих липопротеинлипазу и ферменты синтеза жирных кислот [11], что и могло привести к наблюдаемой нами липидной инфильтрации гепатоцитов в результате задержки выведения из них р-липопротеинов.
Наличие субклеточных признаков холестаза в части гепатоцитов может указывать на начинающиеся в них апоптозные сдвиги, т. к. показано, что даже небольшое повышение содержания в гепатоцитах желчных кислот приводит к их апоптозу из-за происходящей при этом активации каспазы-3 и каспазы-9, транслокации белка Вах проапоптозного действия из цитозоля гепатоцитов в митохондрии [18].
Компенсаторную направленность некоторых обнаруженных субклеточных изменений демонстрируют особенности межклеточных контактов в гепатоцитах и появление в клетках Купфера кольчатых пластинок. Изменение межклеточных контактов можно связать с действием паранеопластического литического фактора, разобщающего между собой гепатоциты, в ответ на которое компенсаторно происходит усиление структур десмосом, высокопрочных зон слипания и плотных соединений, входящих в гепатоцитарный межклеточный соединительный комплекс [12]. Реже наблюдаемая нами фрагментация плотных контактов, видимо, является более значимым повреждением, нарушающим их функцию. В печени выявлены факторы адгезии - контактины, которые могут временно усиливать в 2-2,5 раза сцепление гепатоцитов, индуцируя появление дополнительных участков адгезии [12]. Кроме того, установлено, что изменение ультраструктуры плотных контактов меняет механизмы сигнальной трансдукции, регулирующие пролиферацию, генную экспрессию, дифференцировку и морфогенез в связи с двойной локализацией особых белков в самих плотных соединениях и в ядрах клеток, участвующих в разных ступенях генной экспрессии от регуляции транскрипции и структуры хроматина до процессинга мРНК и трансляции [15]. Так как показано, что появление кольчатых пластинок сопряжено со значительным расширением литичес-ких возможностей клеток Купфера - появлением большого количества лизосом, что соответствует предложенной гипотезе о компенсаторном их появлении, связанном с дерепрессией определенных участков генома клетки [2], видимо, в связи с возросшей потребностью фагоцитоза и лизиса фрагментов разрушаемых внеклеточно апоптоз-ных клеток.
Итак, на 3-и и 5-е сутки опыта дистантные и короткодистантные воздействия факторов НЭИ и непосредственно метастазных апоптозных клеток приводят к дистрофии, некрозу и апоптозу клеток паренхимы и стромы печени, тормозят синтетические и энергетиче-
ские процессы в гепатоцитах, приводят к их липидной инфильтрации, внутриклеточному холестазу и повреждению межклеточных контактов, а также запускают комплекс компенсаторно-приспособительных изменений в гепатоцитах, частично реализованных через 3 суток, но сниженных через 5 суток развития опухоли.
ЛИТЕРАТУРА
1. Бродский В. Я., Урываева И. В. Клеточная полиплоидия. Пролиферация и дифференцировка. - М.: Наука, 1981. - 260 с.
2. Вакулин Г. М., Казанин В. И. Взаимоотношения между органоидами клеток и кольчатыми пластинками в печени крыс при аутолизе in vitro и при некоторых экспериментальных состояниях in vivo. Рукопись депонирована в ВИНИТИ 25.38.80. - № 2126-80 (редколлегия ж. «Бюл. экспер. биол. и мед.», 1980).
3. Ганцев Ш. Х. Онкология. - М., 2004. - 516 с.
4. Ганцев Ш. Х., Карабанов Г. Н., Огий Н. Н. Гемореологичес-кие нарушения и их коррекция у онкологических больных // Рос. онкол. журн. - 1996. - № 1. - С. 48-52.
5. Гланц С. Медико-биологическая статистика. - М., 1999. - 459 с.
6. Лушников Е. Ф., Абросимов А. Ю. Гибель клетки (апоптоз). -М., 2001. - 160 с.
7. Овсянко Е. В., Ефремов А. В., Мичурина С. В. с соавт. Уль-траструктурный и стереологический анализ клеток карциносаркомы WALKER 256 на разных стадиях их дифференцировки // Бюл. эксп. биологии и медицины. - 2009. - Т. 148. № 9. - С. 337-342.
8. Плотников М. Б., Маслов М. Ю., Алиев О. И. с соавт. Нарушения реологических свойств крови у крыс с карциносаркомой 256 Уокер и при химиотерапии циклофосфаном // Вопросы онкологии. -2001. - Т. 47. № 3. - С 335-337.
9. Саркисов Д. С., Аруин Л. Н., Туманов В. П. Морфология компенсаторно-приспособительных процессов // Итоги науки и техники. Сер. «Пат. анатомия». ВИНИТИ. - М., 1983. - Т. 4. - С. 46-55.
10. Хегай И. П., Попова Н. А., Иванова Л. Н. Влияние экспрессии гена вазопрессина на рост карциносаркомы Walker 256 у крыс // Генетика. - 2000. - Т. 42. № 7. - С. 993-995.
11. Akiyama T. E., Ward J. M., Gounzalez F. J. Regulation of the liver fatty acid-binding protein gene by hepatocyte nuclear factor 1alpha (HNF1alpha). Alterations in fatty acid homeostasis in HNF1alpha-deficient mice // J. biol. chem. - 2000. - № 1. V. 275 (35). -P. 27117-27122.
12. Balda M. S., Matter K. Tight junctions // J. Cell Sci. - 1998. -V. 111 (5). - P. 541-547.
13. Chanse E. The energy-linked reaction calcium with mitochondria// J. biol. chem. - 1965. - V. 240. № 6. - P. 27-29.
14. Keller H., Eggli P. Protrusive activity, cytoplasmic compartmentalization, and restriction rings in locomoting blebbing Walker carcinosarcoma cells are related to detachment of cortical actin from the plasma membrane // Cell motil. cytoskeleton. - 1998. - V. 41. № 2. - P. 181-193.
15. MatterK., Balda M. S. Epithelial tight junctions, gene expression and nucleo-junctional interplay // J. cell sci. - 2007. - V. 120 (9). -P. 1505-1511.
16. Perroud A. P. A. S., Ashimine R., Castro G. M. et al. Cytokine gene expression in Walker 256: A comparison of variants A (aggressive) and AR (regressive) // Cytokine. - 2006. - V. 36 (3-4). - P. 123-133.
17. Rebeca R., Bracht L., Noleto G. R. et al. Production of cachexia mediators by Walker 256 cells from ascitic tumors // Cell biochem. funct. - 2008. - V. 26. № 6. - P. 731-738.
18. Webster C. R. L., Usechak P., Anwer M. S. cAMP inhibits bile acidinduced apoptosis by blocking caspase activation and cytochrome c release // Am. j. physiol. gastrointest. liver physiol. - 2002. - V. 283. -P. 727-738.
Поступила 01.02.2011
