CC BY
99
УДК 579. 842. 22. 861. 2:616-002. 3-022. 7
© Н.Х. Насибуллин, Ю.З Габидуллин, З.Г. Габидуллин, Р.С Суфияров, Р.Р. Суфияров, 2008
Н.Х. Насибуллин, Ю.З Габидуллин,
З.Г. Габидуллин, Р.С Суфияров, Р.Р. Суфияров СРАВНИТЕЛЬНАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА НЕКОТОРЫХ БИОЛОГИЧЕСКИХ СВОЙСТВ У БАКТЕРИЙ РОДА PROTEUS И КУЛЬТУР STAPHYLOCOCCUS AUREUS, ВЫДЕЛЕННЫХ ПРИ ГНОЙНОВОСПАЛИТЕЛЬНЫХ ЗАБОЛЕВАНИЯХ У БОЛЬНЫХ, НАХОДЯЩИХСЯ НА СТАЦИОНАРНОМ ЛЕЧЕНИИ В ОНКОЛОГИЧЕСКИХ ОТДЕЛЕНИЯХ И РЕСПУБЛИКАНСКОЙ КЛИНИЧЕСКОЙ БОЛЬНИЦЕ Г.Г. КУВАТОВА
Г. УФЫ
ГОУВПО «Башкирский государственный медицинский университет Росздрава», г. Уфа
Результаты исследований показали, что штаммы, изолированные в отделениях онкологического диспансера чаще проявляли а-гемолитическую, лецитиназную ДНК-азную, ЛТ - энтеротоксигенную активностей, которые значительно ярче проявлялись у культур, изолированных при ассоциированных протейностафилококковых инфекциях.
Результаты ПЦР бактерии рода Proteus с праймерами Staphylococcus показали наличие филогенетических сходств у изучаемых бактерий, кодирующих продукцию ЛТ -энтеротоксина.
Ключевые слова: бактериальные ассоциации, протеи, стафилококки, гемолизины, лецитиназы, ДНКазы, ЛТ-энтеротоксины, ПЦР.
N.Kh. Nasibullin, Yu.Z. Gabidullin, Z.G. Gabidullin, R.S. Sufiyarov, R.R. Sufiyarov A COMPARATIVE ANALYSIS OF SOME BIOLOGICAL PROPERTIES OF THE GENUS PROTEUS AND STAPHYLOCOCCUS AUREUS CULTURES ISOLATED IN PYO-INFLAMMATORY DISEASES OF PATIENTS TREATED
IN
AN INPATIENT SETTING OF ONCOLOGY DEPARTMENTS AND KUVA-TOV REPUBLICAN CLINICAL HOSPITAL OF THE CITY OF UFA
The results of the studies carried out showed that strains isolated in the units of the Oncology Centre often had a-hemolytic, lecithinase DNA-ase, LT- enterotoxigenic activities that were more intensive in cultures isolated in associated proteus-staphylococcal infections. PCR results of the genus Proteus with Staphylococcus primers indicated the presence of phylogenetic similarities in the bacteria studied that could code LT- enterotoxin production.
Key words: bacterial associations, protei, staphylococci, hemolysins, lecithinases, LT-enterotoxins, PCR.
Повсеместное загрязнение окружающей среды, отсутствие эффективных методов контроля за использованием химиотерапевтических средств, привело к изменению этиологической структуры гнойно-воспалительных заболеваний [3,4,5,10,11,18,17.].
Способность различных бактерий размножаться в макроорганизме и при этом вызывать инфекционный процесс зависит в первую очередь от наличия определенных факторов патогенности, нейтрализующих или повреждающих барьерные системы организма человека [7,12,13,19].
Из литературных данных следует, что бактерии семейства Е^егоЬайепасеае
и рода Staphylococcus, выделенные в ассоциации, чаще обладают различными факторами патогенности, чем изолированные в виде монокультур О.В. Бухарин (1986). По данным А.З. Смолянской (1986), инфекции у онкологических больных полиэтиологичны и часто при этом преобладают бактерии родов Proteus, Klebsiella и Staphylococcus. Ассоциированные инфекции часто сопровождаются изменением клинического течения гнойно-воспалительных процессов
[6,8,9,15,20,21,22, 23].
В этой связи, целью наших исследований явилось сравнительное изучение некоторых биологических свойств бактерий рода Proteus и культур Staphylococcus
aureus, выделенных от больных, находящихся на стационарном лечении в отделениях онкологического диспансера и Республиканской клинической больнице Г.Г. Куватова г. Уфы, в виде моно- и ассоциированных культур.
При этом планировалось решение следующих задач:
1. Провести сравнительное изучение некоторых биологических свойств моно- и ассоциированных культур бактерий рода Proteus и культур Staphylococcus aureus выделенных от больных, находящихся на стационарном лечении в отделениях онкологического диспансера и Республиканской клинической больнице им. Г. Г. Ку-ватова г. Уфы.
2. На ПЦР у бактерий рода Proteus и культур Staphylococcus aureus изучить наличие генетических структур, кодирующих продукцию ЛТ-энтеротоксина.
Материалы и методы
В качестве материала были использованы 30 штаммов бактерий рода Proteus и 31 культур Staphylococcus aureus выделенные от 210 больных, находящихся на стационарном лечении в отделениях хирургического, урологического и гинекологического профиля Республиканского онкологического диспансера, а также 21 штамм бактерий рода Proteus и 24 культур Staphylococcus aureus, выделенных от 216 неонкологических больных, находящихся на стационарном лечении в Республиканской клинической больнице им. Г. Г. Ку-ватова г. Уфы.
Биохимическую идентификацию бактерий рода Proteus проводили по общепринятой методике описанной В.И. Покровским (1985), (11) изучение а-гемолитической активности проводили на мясопептонном агаре содержащем 5% концентрацию эритроцитов 0 - группы человека. Штаммы считали высокоактивными при появлении через 24 часа с момента посева зоны гемолиза диаметром 68 мм, средней 4-5 мм, слабой 1-2 мм и отрицательным при отсутствии зоны гемолиза. (17)
Лецитиназную активность определяли на желточном агаре Ю.Н. Чистовича (1961) (17)
ДНК-азную активность определяли по методу Jeffries C.D. et al (1957)
ЛТ - энтеротоксигенности по методу Вартанян Ю.П. с соавторами 1978 (5).
Праймеры к генам «островов патогенности» подобраны по данным Gene-Bank (www.ncbi.nih.gov) и использованы пакетом прикладных программ фирмы Lasergene на базе лаборатории молекулярной биологии Уфимского научного центра РАН.
Для статистической обработки использовали формулы Ашмарина И.П. и Воробьева А.А. (1962) (1).
Результаты и обсуждение Из гноя 210 больных, находящихся на стационарном лечении в отделениях -Республиканского онкологического диспансера было выделено 30 штаммов (14,6%) бактерии рода Proteus (5-P. vulgaris, 25-P. mirabilis) и 31 культур (15,1%) стафилококка (26-St. aureus, 5-St. epider-midis). При этом 17 культур (56,6%) бактерии рода Proteus (4-P. vulgaris, 13-P. mirabilis) и 16 (51,6%) штаммов стафилококка (14-St. aureus, 2-St. epidermidis) были выделены при ассоциированных протейно-стафилококковых инфекциях.
Продукция а гемолизина обуславливающая гемолитическую активность может быть использовано в качестве показателя потенциальной цитотоксичности бактерий.
Проведенные нами исследования на кровяном агаре по выявлению а-гемолизина показали, что 24 (80%) штаммов протея (21-P. vulgaris, 3-P. mirabilis) и 26 (85%) штаммов стафилококка (24-St. aureus, 2-St. epidermidis) выделенные от больных, находящихся на стационарном лечении в Республиканском онкологическом диспансере обладали данной активностью, среди которых 17 культур протеев (70,8%) и 16 (61,5%) стафилококков были выделены при ассоциированных протейно-стафилококковых инфекциях. А среди штаммов протеев и стафилококков выделенных от больных, находящихся на стационарном лечении в РКБ им. Г. Г. Ку-ватова 12(57,1%) и 15(62,5%) соответственно обладали а-гемолитической активностью, среди которых 5 штаммов бакте-
рий рода Proteus (41,6%) и 6(39,9%) культур Staphylococcus aureus были изолированы при ассоциированных инфекциях протейно-стафилококковой природы.
Из литературы известно (4) что основным субстратом действия бактериальных лецитиназ является лецитин, который входит в состав структурных компонентах, содержащихся во всех живых тканях.
Так из 30 штаммов бактерий рода Proteus 21(69,9%) (4-P. vulgaris, 17-P. mirabilis) и из 31 культур стафилококков 20(64,5%) (17-St. aureus, 3-St. epidermidis), выделенных от больных, находящихся на стационарном лечение в онкологическом диспансере, проявляли лецитиназную активность. При этом все штаммы протеев и стафилококков, изолированные при ассоциированной протейно-стафилококковой инфекции проявляли лецитиназную активность (р <0,05).
Одновременно мы проводили изучение лецитиназной активности штаммов протеев и стафилококков, изолированных от больных не страдающих онкологическими заболеваниями с инфекционными осложнениями. Из 21 штамма рода Proteus 11(52,3%) (2-P. vulgaris, 9-P. mirabilis) на желточном агаре из 24 штаммов стафилококка 12(49,9%) (10-St. aureus, и 2-St. epidermidis) проявляли лецитиназную активность. Причем, штаммы протеев и стафилококка выделенные при ассоциированной протейно-стафилококковой инфекции в 100% - случаях проявляли ферментативную активность.
Известно, что ДНК-азы являются ферментами, расщепляющими нуклеиновые кислоты, которые входят в состав как плазмидной, так и хромосомной ДНК.
Изучение ДНК-азной активности показало, что из 30 штаммов протеев выделенных от больных онкологического диспансера 19(63,3%) (3-P. vulgaris, 16-P. mirabilis) и из 31 культур стафилококков 21(67,7%) (19-St. aureus, и 2-St.
epidermidis) проявляли ДНК-азную активность. При этом все культуры протеев и стафилококка изолированные при ассоциированной протейно-стафилококковой инфекции давали положительную ДНК-азную активность. Несколько отличаю-
щиеся результаты были получены при определении ДНК-азной активности у культур протеев и стафилококков, изолированных от больных, находящихся на стационарном лечении РКБ им. Г.Г. Кувато-ва.
Так, среди 21 штамма бактерий рода Proteus ДНК-азной активностью обладали 10(47,6%) (2-P. vulgaris, 8-P. mirabilis) а из 24 штаммов бактерий рода Staphylococcus 11(45,8%) (10-St. aureus, 1-St. epidermidis) были выделены в виде ассоциации.
Микробиологи видят в микробных токсинах продукты жизнедеятельности бактериальных клеток, которые их разделяют условно на три группы.
В первую группу включают продукты, выделяемые в окружающую среду в процессе жизнедеятельности микробов и называют их бактериальными экзотоксинами; ко второй группе относятся токсические продукты прочно связанные со стромой бактериальной клетки и переходящей в культуральный фильтрат только после гибели и аутолиза бактериальной популяции и называют их эндотоксинами; к третьей группе относят токсические вещества, непрочно связанные со стромой микробной клетки и в определенный степени диффундирующие в среду культивирования и поэтому занимающие промежуточное положение между экзо- и эндотоксинами, часто называемая энтеротоксином. Известно, что способность бактерий вызывать инфекционный процесс зависит от наличия у возбудителя ряда факторов патогенности, но токсигенность при этом может быть одним из ведущих свойств играющих определяющую роль в симпто-мокомплексе заболевания (9).
Исходя из выше изложенного, мы проводили сравнительное изучение энте-ротоксигенности (ЛТ) штаммов бактерий рода Proteus и Staphylococcus, выделенные от больных, находящихся на стационарном лечении в отделениях Республиканского онкологического диспансера и в РКБ им. Г.Г. Куватова, страдающих гнойно-воспалительными процессами.
С целью выявления способности культур протея и стафилококка продуцировать термолабильного (ЛТ) энтероток-
сина использовали тест «отека лапки» мышей.
Результаты опытов показали, что способностью продуцировать ЛТ-энтеротоксины среди 30 штаммов протеев и 31 стафилококков, выделенных от онкологических больных обладали 9(29,9%) (2-P. vulgaris, 7-P. mirabilis) и 10(32,2%) (9-St. aureus, 1-St. epidermidis) культур соответственно. При этом среди ЛТ-энтеротоксинпродуцирующих культур 6 штаммов бактерий рода Proteus и 7 культур стафилококков были выделены при ассоциированных протейно-
стафилококковых инфекциях.
Данные по изучению ЛТ-энтеротоксигенности штаммов бактерий рода Proteus и Staphylococcus, изолированные от больных с инфекционными осложнениями, находящихся в РКБ им. Г.Г. Куватова, показали, что среди 21 культуры бактерий рода Proteus 5(23,8%) (1-P. vulgaris, 4-P. mirabilis) и из 24 штаммов Staphylococcus 5(20,8%) (4-St. aureus, 1-St. epidermidis) проявляли активность. При этом все ЛТ-энтеротоксин- продуцирующие штаммы бактерий рода Proteus и Staphylococcus, были изолированы при ассоциированных протейно-стафилококковых инфекциях.
Нами у 9 штаммов бактерий рода Proteus и 10 культур стафилококков, обладающих способностью продуцировать ЛТ-энтеротоксин, с помощью ПЦР было изучено наличие филогенетического сходства генетических структур, контролирующих продукцию ЛТ-энтеротоксина. Результаты исследований показали, наличие у 8 штаммов бактерий рода Proteus и 9 культур стафилококков филогенетическо-
го сходства генетических структур, контролирующих продукцию ЛТ - энтеротоксина.
В процессе изучения биологических свойств была установлена частая встречаемость высокой, а-гемолитической, ле-цитиназной, ДНК-азной, ЛТ-
энтеротоксигенной активностей среди штаммов протеев и стафилококков, выделенных при ассоциированных протейностафилококковых инфекциях.
Поэтому, усиление патогенного потенциала ассоциированного ферментными и токсигенными свойствами в частности протея и стафилококка должно учитываться при диагностике гнойно-
воспалительных процессов и оценке этиологической значимости этих бактерий в развитии ассоциированных осложнений у онкологических больных.
Выводы
1. Штаммы бактерий рода Proteus и куль-
туры Staphylococcus aureus, выделенные при инфекциях у больных, находящихся на стационарном лечении в Республиканском онкологическом диспансере, по сравнению с культурами изолированными от больных, находящихся в РКБ им. Г.Г. Куватова чаще проявляли, а-
гемолитическую, лецитиназную, ДНК-азную, ЛТ-энтеротоксигенную активностей, которые значительно ярче проявляются у культур изолированных при ассоциированных протейно-стафилококковых инфекциях.
2. Показано наличие филогенетического сходства генетических структур контролирующих у бактерий рода Proteus и Staphylococcus aureus, отвечающих за продукцию ЛТ - энтеротоксина.
ЛИТЕРАТУРА
1. Ашмарин И.П. Стастические методы в микробиологических исследованиях И.П Ашмарин, А. А ВоробьевЛ. Медицина 1962. 179
2. Бельский В.В. Структура популяций при ассоциации синегнойной палочки со стафилококками и эшерихиями. Журн. микробиология 1994, №.6. 37-38.
3. Белая О.В., Белая Ю.А. проблема смешанных инфекций. Сб. научных трудов М. 1986 . 45-52
4. Бондаренко В.М., Голубев А. Гемолизины энтеробактерий и их связь с вирулентностью возбудителя. Журн. Микробиология. 1988. 11. 109-112.
5. Бухарин О.В., Усвяцев Б.Я., Зыкова Л. С. и др. Антилизоцимный признак в диагностике смешанных инфекций. Сб. научных трудов М. 1986 43-46
6. Вортонян Ю.П., Северцева М.К., Введенская О.И., Станеславская Е.С. Отек лап белых мышей - тест для оценки активности энтеротоксинов. Бюллетень экспериментальной биологии и медицины - 1978, №2; 150-152
7. Воропаева С. Д. Условно-патогенные бактерии - возбудители госпитальных инфекций. Акушерство и гинекологи. 1983. 7; 71-73.
8. Габидуллин З.Г., Габидуллин Ю.З., Ахтариева А. А. и др. Характеристика свойств определяющих, персистенцию моно- и ассоциированных культур условно-патогенных энтеробактерий. Ж. микробиология 2006 №4; 62-64
9. Кузин М.И., Костюченок Б.М. Раны и раневая инфекция. Медицина. 1990. 183-213.
10. Минухин В.В., Кравцова В,И., Цыганенко А.Я. и др. Чувствительность к антибиотикам основных условно-патогенных аэрофилов. Антибиотики и химиотерапия. 1990. 35. 3; 36-38.
11. Нарциссов Т.В., Старицкий А.В., Василенко Н.И. Местное лечение гнойных ран. 1992. 1; 33-35.
12. Покровский В.Н. Энтеробактерии. 1985г.
13. Плечев В.В., Мурысева Е.Н., Тимербулатов В.М. и др. Профилактика гнойносептических осложнений в хирургии. Триада Х, 2003.320.
14. Симбирцев С.А., Бегишев О.Б., Конычев А.В. Социальные аспекты хирургических заболеваний. Хирургия 1993. 2; 55-57.
15. Стручков В.И., Гостищев В.А., Стручков Ю.В. Общая и местная гнойная инфекция Вестн. АМН СССР. 1983. 3-7.
16. Смолянская А.З. Смешанная инфекция в онкологической клинике. Смешенные инфекции. Сб. научных трудов М.1986г. 75-76
17. Суфияров Р.С. Лечение гнойно-воспалительных заболеваний мягких тканей протейно-стафилококковой природы. Авт. Канд. Дисс. Уфа 1998. 24
18. Чистович Ю.Н. Патогенез стафилококковых инфекций М. 1961 96-99
19. Jeffries C.D., Flolman D.G., Juse D.J. Rapid method for determining the activity of microorganisms on nuclear acidy J. of Bacteriology-1957-73-4; 590-591
20. Cherkasskaia R.S., Nesterova S.M., Efendiev A.I. Microbiology of suppurative wound in laser radiation. Khirurgiia 1994. 6; 6.
21. Douset C. The management of surgical wounds in a community setting. Br. J. Community Nurs. 2002. 7;. 33-38.
22. Fisher A., Brady B. Vacuum assisted wound closure therapy. Issues Emerg. Health Tech-nol. 2003. 44; 1-6.
23. Stephens P., Wall I.B., Wilson M.J. et al. Anaerobic cocci populatingthe deep tissues of chronic wounds impair cellular wound healing responses in vitro. Br. J. Dermatol. 2003. 148. 3; 456-466.
УДК 616.345-007.272
© М.В. Тимербулатов, Р.Я. Биганяков, М.А. Нуртдинов, Р.Т. Ибатуллин, 2008
М.В. Тимербулатов, Р.Я. Биганяков, М.А. Нуртдинов, Р.Т. Ибатуллин КАЧЕСТВО ЖИЗНИ ПРИ ХРОНИЧЕСКОЙ ТОЛСТОКИШЕЧНОЙ НЕПРОХОДИМОСТИ
ГОУ ВПО «Башкирский государственный медицинский университет Росздрава», кафедра факультетской хирургии с курсом колопроктологии, г. Уфа
В данной статье было отражено исследование показателей качества жизни пациентов с декомпенсирован-ным хроническим колостазом, у которых были выполнены лапароскопические резекции и резекции традиционным способом. При изучении, с помощью шкалы БТ-36, больных с хроническим колостазом было показано, что лапароскопические операции сопровождаются улучшением качества жизни в сравнении с традиционными операциями.
Ключевые слова: качество жизни, колостаз, лапароскопические операции.
