CC BY
131
ПАТОМОРФОЛОГИЯ
УДК: 619:616.98:578.833.314
Патоморфологические изменения у домашних свиней при остром и подостром течении африканской чумы свиней
Е.В. Рыжова1, С.А. Белянин2, Д.В. Колбасов2, В.М. Балышев2, В.В. Куриннов2, В.В. Пронин1, Г.В. Корнева1
1ФГБОУ ВПО «Ивановская государственная сельскохозяйственная академия имени академика ДК. Беляева».
2 ГНУ Всероссийский НИИ ветеринарной вирусологии и микробиологии Россельхозакадемии (Покров).
Ключевые слова: африканская чума свиней, домашние свиньи, патоморфологические изменения Сокращения: АЧС — африканская чума свиней, в/м — внутримышечно, ГАЕ — гемадсорбирующие единицы
Введение
Африканская чума свиней (Резиэ аЫсапа эииш) — высококонтагиозная, природно-очаговая вирусная болезнь домашних и диких свиней, вызываемая ДНК-содер-жащим вирусом семейства Asfarviridae, рода Asfavirus [1, 5...7].
Экспериментально АЧС была воспроизведена в 70-е годы прошлого столетия учеными Всероссийского института экспериментальной ветеринарии с использованием вирулентного изолята вируса АЧС, выделенного при вспышке болезни в Португалии. Я.Р. Коваленко с соавт. достаточно подробно описал клиническую картину, патолого-анатомические и патогистологические изменения при данном заболевании [5.7].
В настоящее время на территории Российской Федерации циркулируют высокопатогенные изоляты вируса АЧС, вызывая у восприимчивых животных преимущественно острую и подострую формы течения болезни
[1, 2, 7].
Клинические и патолого-анатомические признаки АЧС являются важной составляющей в диагностике инфекции, а для полного понимания патогенеза заболевания необходимы данные патогистологических исследований.
Цель исследования
Выявить основные патоморфологические изменения при остром и подостром течении АЧС у домашних свиней при экспериментальном заражении высокопатогенным полевым изолятом вируса АЧС Абхазия 02/07.
Материалы и методы
Подсвинки крупной белой породы в возрасте 2,5.3 мес (п=6) были получены из сектора подготовки подопытных животных ГНУ ВНИИВВиМ.
Для заражения использовали гемадсорбирующий вирус АЧС (изолят Абхазия 02/07), который был выделен при вспышке болезни в Абхазии в 2007 г. Подсвинков №1.4 заражали в/м в дозе 1000 ГАЕ50, животных №5, 6 поместили в бокс, где ранее содержали больных АЧС свиней.
Подсвинки №1 и №2 подвергнуты эвтаназии на 5-е и 7-е сутки после заражения. Подсвинки №3.6 пали на 8-е, 9-е, 11-е и 13-е сутки соответственно. В течение эксперимента ежедневно проводили клинический осмотр животных. Для гистологического исследования у павших подсвинков взяли пробы соматических (нижнечелюстных и предлопаточных), а также висцеральных (портальных, желудочных и почечных) лимфатических узлов, селезенки, легких, печени, почек.
Отобранный материал фиксировали в 10%-м растворе нейтрального формалина. Для проводки использовали гистологический процессор скоростной проводки Tissue-Tek®XpressTM Х50. Уплотняли в парафине в заливочном гистологическом центре Leika EG 1160. Разлагали парафиновые блоки на срезы с помощью ротационного микротома Leika RM 2125 RT (толщина среза 4.5 мкм). Срезы депарафинировали, окрашивали гематоксилином и эозином и заключали под покровное стекло на рабочей станции Leica ST5010 Autostainer XL/ CV5030 с использованием среды ВЮ Maent. Исследовали под микроскопом Leica DM1000 и Leica DMB, проводили фотодокументирование.
Результаты
Лимфатические узлы. У животных №1 и 2 в нижнечелюстных и предлопаточных лимфатических узлах макроскопически установлен серозный лимфаденит, гистологически отмечена гиперплазия лимфатических фолликулов. Последние четко очерчены, в некоторых хорошо выражены светлые центры размножения. Хорошо видны сосуды различного калибра с пролиферирующим эндотелием. В капсуле обнаружена диффузно-очаговая полиморфноклеточная инфильтрация, на отдельных участках отмечены грануляции и фиброз краевых синусов. В нижнечелюстных и предлопаточных лимфатических узлах животных, павших на 8-е и 9-е сутки (№3, 4), выявлено следующее: серозно-геморрагический лимфаденит, гистологическая структура сохранена, фолликулы небольшие, без центров размножения. Сосуды плохо различимы. Капсула местами очагово инфильтрирована круглоклеточными элементами. Фиброз краевых синусов. В очагах кровоизлияний отложения гемосидерина. У свиней, павших на 11-е и 13-е сутки (№5, 6), в нижнечелюстных и предлопаточных лимфатических узлах наблюдали геморрагический лимфаденит. При гистологическом исследовании отмечены: резкое полнокровие сосудов всех калибров, ядер-
Рис. 1. Желудочный лимфатический узел: а - кровоизлияния с отложением гемосидерина (1), редукция фолликулов (2). Окраска гематоксилином и эозином, об.х15, ок.х10; б - кариопикноз и кариорексис лимфоцитов. Окраска гематоксилином и эозином, об.х40, ок.х15
ная пыль в синусах, местами очаговые сливающиеся кровоизлияния с отложением гемосидерина.
В висцеральных лимфатических узлах изменения выражены более интенсивно, чем в соматических. При исследовании портальных, желудочных и почечных лимфоузлов в начале заболевания (животные №1, 2) обнаружен серозный лимфаденит, гистологически структура лимфоузлов сохранена, клеточный состав относительно мономорфный, преобладают лимфоциты, фолликулы с четкими границами, частью со светлыми центрами размножения. На отдельных участках заметны очаговая круглоклеточная инфильтрация капсулы, фиброз краевых синусов, в некоторых лимфатических узлах — очаговые кровоизлияния с отложением гемосидерина в этих местах. У животных №3, 4 в висцеральных лимфатических узлах серозно-геморрагический лимфаденит. При гистологическом исследовании выявлены очаговые сливающиеся кровоизлияния с отложением гемосидерина, фиброз краевых синусов, полнокровие сосудов, редукция фолликулов (рис. 1а). В лимфатических уз-
лах свиней № 5, 6 обнаружен геморрагический лимфаденит, гистологически отмечены резко выраженное полнокровие сосудов всех калибров, картина по-дострого неспецифического лимфаденита с преобладанием продуктивно-васкулярного компонента и минимальной реакцией фолликулов. Лимфатические фолликулы значительно уменьшены в размерах, центры размножения в них не определяются. Интенсивный кариопикноз и кариорексис лимфоцитов, ядерная пыль в синусах (рис. 1б).
Селезенка. Селезенка животного №1 макроскопически без видимых изменений, гистологически структура сохранена, однако наблюдается редукция фолликулов. Селезенка животного №2 незначительно увеличена, темно-вишневого цвета с поверхности и на разрезе. При гистологическом исследовании отмечены обширные сливающиеся кровоизлияния с отложением гемосидерина, редукция фолликулов и уменьшение их числа. У животных №3, 4 селезенка плотной консистенции, незначительно увеличена, темно-вишневого цвета с поверхности и на разрезе, гистологичес-
Рис. 2. Селезенка. Окраска гематоксилином и эозином, об.х40, ок.х15:
а - кровоизлияния с отложением гемосидерина (1), редукция фолликулов (2); б - кариопикноз и кариорексис лимфоцитов
РВЖ • СХЖ • № 1/2012
Патоморфологические изменения у домашних свиней при остром и подостром течении африканской чумы свиней
ки выявлены переполнение кровью синусов, переходящее местами в кровоизлияния, увеличение количества гемосидерина, более выраженная редукция фолликулов (рис. 2а). У животных №5, 6 селезенка почти черного цвета с поверхности и на разрезе, пульпа сочная. При гистологическом исследовании обнаружены инфильтрация пульпы эритроцитами, отложения гемосидерина, редукция фолликулов, уменьшение их числа, обеднение пульпы лимфоцитами из-за выраженного кариопикноза и кариорексиса лимфоцитов (рис. 2б).
Легкие. В легких у всех животных при патологоанатомическом исследовании наблюдали застойную гиперемию и отек. При гистологическом исследовании у животных №1, 2 отмечены единичные очаговые кровоизлияния, резкое полнокровие капилляров межальвеолярных перегородок, дистелектазы. У свиней №3, 4 — дистелектазы, чередующиеся с очагами серозно-фибринозной пневмонии, полнокровие сосудов, слущивание эпителия бронхов, скопление серозно-фибринозного экссудата в альвеолах. У свиней №5, 6 — ателектазы и дистелектазы, очаговые лимфоидные инфильтраты, выраженный отек интерстиции. Некроз эпителия бронхов, серозно-геморрагическая пневмония (рис. 3).
Печень. У всех исследованных животных печень дистрофична. У животных №1, 2 гистоструктура печени сохранена, отмечено полнокровие центральных вен. В междольковых септах лимфоцитарные инфильтраты, не проникающие в дольки. У животных №3, 4 межбалочные синусоиды переполнены кровью, лимфоидная инфильтрация стромы (рис. 4а). Гистоструктура печени свиней №5, 6 характеризуется резко выраженным застоем крови в центральных венах и капиллярах печеночных долей с дискомплексацией гепатоцитов (рис. 4б).
Почки. Гистоструктура почек свиней №1, 2 без видимых изменений, у ж:ивотных №3, 4 отмечена зернистая дистрофия канальцевого эпителия. В корковом слое почек свиней №5, 6 единичные мелкоочаговые
Рис. 3. Легкие: дистелектазы (1), ателектазы (2), некроз эпителия бронхов (3). Окраска гематоксилином и эозином, об.х15, ок.х10
кровоизлияния, зернистая дистрофия эпителия мочевых канальцев, отек интерстиции (рис. 5).
Обсуждение
Патолого-анатомические изменения при инфицировании свиней высокопатогенным полевым изолятом вируса АЧС (изолят Абхазия 02/07) обнаружены в соматических (нижнечелюстных и предлопаточных) и висцеральных (портальных, желудочных и почечных) лимфатических узлах, селезенке, легких, печени и почках.
В органах иммунной системы (лимфатические узлы, селезенка) изменения характеризуются вначале серозным, а затем серозно-геморрагическим или геморрагическим воспалением.
В легких наблюдается застойная гиперемия и отек; в печени и почках — дистрофия.
Патогистологические изменения носят динамический характер. Изменения в висцеральных лимфатических узлах проявляются интенсивнее, чем в соматических, характеризуются редукцией фолликулов, кариопикнозом и кариорексисом лимфоцитов, затем появляются обшир-
Рис. 4. Печень:
а - лимфоидная инфильтрация (1). Окраска гематоксилином и эозином, об.х15, ок.х10;
б - застой крови в центральной вене (1), дискомплексация гепатоцитов (2). Окраска гематоксилином и эозином, об.х40, ок.х15
ные геморрагии с образованием гемосидерина. Аналогичные изменения отмечены в работах других авторов при инфицировании свиней изолятами вируса АЧС различной патогенности [3.6].
На начальном этапе заболевания (5-й день после заражения) селезенка незначительно изменена, отмечается только редукция фолликулов, что при внешнем осмотре селезенки не выявляется. Это, по нашему мнению, необходимо учитывать при исследовании туш убитых свиней. Данных, касающихся исследования селезенки на ранних сроках заражения, у других авторов мы не встречали. В дальнейшем изменения в селезенке сходны с таковыми в лимфоузлах: редукция фолликулов, обеднение их лимфоцитами, обширные геморрагии с отложением гемосиде-рина, что согласуется с данными других ученых [3.5].
Гистологические изменения в легких вначале характеризуются наличием единичных точечных кровоизлияний, дистелектазами, затем появляются очаги серозно-фибринозной пневмонии, которая в дальнейшем переходит в серозно-геморрагическую. У животных, павших на 11.13-е сутки, в легких выраженный отек ин-терстиция, ателектазы и дистелектазы.
При исследовании печени установлено нарастающее полнокровие с застойными явлениями, в междольковых септах отмечены лимфоидные инфильтраты. В паренхиме печени свиней, павших на 11.13-е сутки, дискомп-лексация гепатоцитов. Гистоструктура почек в начале болезни не имеет видимых изменений, затем появляются единичные мелкоочаговые кровоизлияния в корковом веществе и зернистая дистрофия эпителия мочевыводящих канальцев.
Некоторые авторы отмечали, кроме этого, гиалино-капельную дистрофию мочевых канальцев с образованием гиалиновых цилиндров, некроз канальцев [3, 5, 6].
Рис. 5. Почка: кровоизлияния (1), зернистая дистрофия эпителия мочевых канальцев (2), отек интерстиции (3). Окраска гематоксилином и эозином, об.х15, ок.х10
Выводы
Патоморфологические изменения в лимфоузлах, внутренних органах при остром течении болезни имеют слабовыраженный характер.
С развитием патологического процесса нарастают дистрофические и геморрагические процессы, отмечены редукция фолликулов селезенки и лимфатических узлов и обеднение фолликулов лимфоцитами, кариорексис и кариопикноз лимфоцитов, кровоизлияния с накоплением гемосидерина, серозно-фибринозная или серозно-геморрагическая пневмония, зернистая дистрофия эпителия канальцев почек, застойная гиперемия и дискомплектация гепатоцитов печени.
Библиография
1. Балышев В.М., Куриннов В.В., Цыбанов С.Ж. и др. Биологические свойства вируса африканской чумы свиней, выделенного в Российской Федерации // Ветеринария, 2010; 7: 25—27.
2. Белянин С.А., Васильев А.П., Колбасов Д.В. и др. Патогенность вируса африканской чумы свиней, циркулирующего на территории РФ / Роль ветеринарной науки в реализации продовольственной доктрины РФ // Материалы международной научно-практической конференции. — Покров.: ГНУ ВНИИВВиМ., 2011.
3. Бурба Л.Г. Патоморфология экспериментальной африканской чумы свиней // Тез. докл. научно-произв. конф. «Болезни свиней». — Киев, 1967.
4. Коваленко Я.Р., Иванов Б.Г. и др. Экспериментальное заражение свиней вирусом африканской чумы // Сб. «Тр. Всесоюзн. ин-та экспериментальной ветеринарии», 1961; XXIV: 53—61.
5. Коваленко Я.Р., Сидоров М.А., Бурба Л.Г. Африканская чума свиней. — М.: Колос, 1972.
6. Макаров В.В. Африканская чума свиней. — М.: Российский университет дружбы народов, 2011.
Summary
E.V. Ryzhova, S.A. Beljanin, D.V. Kolbasov, V.M. Balyshev, V.V. Kurinnov, V.V. Pronin, G.V Korneva. Patho-morphological changes in domestic swines under acute and subacute african swine fever. The article presents data on the experimental reproduction of acute and subacutye forms of African Swine Fever (ASF) in domestic swine infected by highly virulent field ASFV (isolate Abkhazia 02/07). The pathomorphological changes have been found.
РВЖ • СХЖ • № 1/2012
