CC BY
27
УДК 616-001-08:615.241.3
С.С. Казанков, С.Г. Цыбиков, И.П. Зайчук, O.A. Найманова
отдельные аспекты динамики экспериментальной хронической раны при ее лечении препаратами, содержащими биологически активные вещества
НУЗ Дорожная клиническая больница на ст. Иркутск-Пассажирский (Иркутск)
Проведен сравнительный анализ биохимических, морфологических, планиметрических, микробиологических показателей заживления хронической раны при ее лечении препаратами содержащими биологически, активные вещества: «КУРИОЗИН», «АБИСИЛ-I», «АНТИРАН», а также «АНТИРАН» в сочетании с ультразвуковой кавитацией.
Ключевые слова: инфицированные раны, лечение
some aspects of DYNAMicS oF ExpERiMENTAL cHRoNic wouND AT iTS treatment BY MEDicATioNS coNTAiNiNG BioLoGicALLY AOTivE SuBSTANOES
S.S. Kazankov, S.G. Tsibikov, I.P. Zaychouk, O.A. Naymanova
Railroad Clinical Hospital at the Railroad Station «Irkutsk-Passazhirskiy» (Irkutsk)
The article describes comparative analysis of biochemical, morphologic, planimetric and microbiological parameters of chronic wound healing at its treatment by medications containing biologically active substances «Curiosin», «Abisil-І» and. also «Antiran» in combination, with ultrasound, cavitation.
Key words: infected wounds, treatment
введение
Проблема лечения инфицированных длительно не заживающих ран, является актуальной для хирургов многих стран. Ежегодные затраты на лечение данной патологии, к примеру в США, достигают 20 млрд. USD, а лечение каждого пациента обходится от 40 до 70 тыс. USD. при длительности лечение от 2-х до 4-х месяцев. Задачи лечебных мероприятий, как правило, решается с позиции коррекции фоновых заболеваний, определяющих хронизацию воспалительного процесса (нейродистрофия, ангиопатия, сахарный диабет и т.п.), что, безусловно патогенетически оправдано. Вместе с тем, учитывая, что фоновые заболевания приводят к ослаблению функциональной активности клеток, участвующих в воспалительном процессе, целесообразным и актуальным является поиск эффективных лекарственных средств наружного применения, оптимизирующих воспалительный процесс и его исход.
Цель настоящего исследования заключалась в сравнительной оценке терапевтического эффекта препаратов, содержащих биологически активные вещества, при их наружном применении в лечении хронической инфицированной экспериментальной раны.
материалы и методы
В эксперименте были использованы 180 белых крыс массой 170 — 200 г. Животные находились в стандартных условиях содержания в виварии на обычном рационе. Эксперименты проводили в соответствии с «Правилами проведения работ с использованием экспериментальных животных», утвержденных МЗ СССР (Приложение к
приказу МЗ СССР № 775 от12.08.1977 г.). Хроническую рану моделировали в соответствии с методическими рекомендациями Фарм. комитета СССР (№ 4 от 12.09.1989 г). Животным наносили стандартное повреждение путем в/к введения под лишенную волосяного покрова кожу в области боков 1 мл 1% раствора хлористого кальция. Через 4 дня под образовавшийся струп вводили микробную взвесь, содержащую по 2 x 108 кл/мл Ps. Aeruginosa и S. Aureus в равных соотношениях. Через 4 дня после первичного обсеменения проводили повторное по аналогичной схеме. Животные были разделены на пять групп, в каждой по шесть животных. Животным 1-й группы (контрольная) не проводили лечение, рана заживала спонтанно. У животных 2-й группы проводили лечение препаратом «АБИСИЛ-1» (20% раствор пихтового масла в рафинированном растительном), в 3-й группе — препаратом «Куриозин» (ассоциат гиа-луроновой кислоты и цинка), в 4-й группе — препаратом «Антиран» (комплексное соединение, включающее 10—15 % изоборнилацетата — природного стереоизомера борнилацетата, входящего в состав пихтового масла, 28 — 30 % поверхностноактивного вещества — блоксополимера, 3 — 4 % бензилового спирта, остальной объем — дистиллированная вода), в 5 группе препарат «Антиран» сочетали с ультразвуковой кавитацией (УЗК). На раневую поверхность наносили средство «Антиран» и воздействовали ультразвуком в течение 8 — 10 минут. Частота колебаний 26,5 ± 0,5 кГц, амплитуда 0,60 — 0,80 мм. Затем на рану повторно наносят средство «Антиран». Воздействие ультразвуком, предварительное и последующее нанесение на раневую поверхность препарата
«Антиран» осуществляли ежедневно в течение 4 — 6 суток. Материал для исследования брали на 4, 8, 14, 21, и 28 сутки после начала лечения. Животных выводили из эксперимента методом декапитации под эфирным наркозом. Изготавливали парафиновые срезы (7 — 9 мкм), окрашивали гематоксилин — эозином и по Ван Г изону, на срезах подсчитывали плотность лейкоцитарного инфильтрата и его клеточный состав. По качественным характеристикам оценивали ход воспалительного процесса: степень деструкции клеток и тканей в очаге воспаления, реакцию сосудов и активность ангиогенеза, воспалительный отек, ростовую активность эпидермиса, фиброархитектонику очага воспаления, структуру новообразованной соединительной ткани, в которой определяли наиболее характерные биохимические показатели: оксипролин, тирозин, нуклеиновые кислоты и малоновый диальдегид.
Концентрацию оксипролина в грануляционной ткани определяли по методу Н. Stegemann. Метод определение малонового диальдегида (МДА) был основан на спектрофотометрическом выявлении окрашенного комплекса, образовавшегося в результате реакции МДА с двумя молекулами тиобарбитуровой кислоты в кислой среде при t = 100 °С. Максимум поглощения образовавшегося комплекса находился в пределах 532 — 535 нм. В проводимых исследованиях применялся спектрофотометр — 26. Концентрацию нуклеиновых кислот (НК) определяли, так же спектофотометрически путем экстракции их из биологического материала горячей хлорной кислотой с последующим определением поглощения экстрактов в ультрафиолетовой области спектра 270 — 290 нм. Тирозин определяли по модифицированному методу Л.И. Слуцкого.
Сроки заживления хронической раны в конечном счете определяются скоростью течения отдельных фаз воспалительного процесса, имеющих свои характерные морфологические характеристики. Выполнение раневого дефекта грануляционной тканью, эпителизация, контракция и рубцевание раны являются наиболее демонстративными показателями скорости ее заживления и находят свое выражение в постепен-
ном уменьшении, а в конечном итоге ликвидации раневого дефекта.
Полученные данные проведенного исследования, отражающие динамику сроков заживления раны в различных условиях эксперимента, приведены в таблице 1. По каждой серии эксперимента приведены два показателя: медиана площади раневой поверхности и сокращение площади раны (в %) от ее исходного размера. Поскольку вариационные ряды имели ненормальное распределение, сравнение проводилось по медиане, а не по средней арифметической величине показателя.
При статистической обработке данных для каждой выборки проверяли гипотезу о нормальности распределения. Для этого использованы тесты Колмогорова-Смирнова, Шапиро-Вилка и Лиллиефорса. При количестве наблюдений в выборке менее 20 или в случае ненормального распределения, данные представляли в виде медианы с верхним и нижним квартилями (25-й и 75-й про-центили) — Ме (25; 75). При нормальном распределении в выборке данные представлены в средних величинах со средней квадратической ошибкой (M(s)). Определение значимости различий полученных данных (р) в сравниваемых выборках при ненормальном распределении проводили по критерию Крускала-Уолиса (k-w), для связанных выборок — по критерию Вилкоксона (W). Корреляционный анализ данных в выборках проводили с применением непараметрического коэффициента корреляции Спирмена (rs). Различия между показателями считали статистически значимыми при p < 0,05. Статистическая обработка результатов произведена с помощью пакета программ Statistica 6.0 for Windows.
РЕЗУЛЬТАТЫ И ОБСУЖДЕНИЕ
На основании проведенного экспериментального исследования установлено, что наиболее эффективным средством является препарат «Антиран». Применение этого препарата в сочетании с УЗК значительно улучшает результаты лечения, что обусловлено более быстрым очищением раны за счет механического удаления детрита и бактерицидного эффекта ультразвука. В результате изученных изменений биохимических показателей
Таблица 1
Динамика сокращения раневой поверхности инфицированной раны в разных условиях эксперимента
Спонтанное заживление Абисил Куриозин Антиран Антиран + УЗК
S, мм2 Yt, % S, мм2 Yt, % S, мм2 Yt, % S, мм2 Yt, % S, мм2 Yt, %
До лечения 866,5 0 866,2 0 867,5 0 884,5 0 910.0 0
4 сут. 852.0 1,4 685,5 20.0 783.0 8,5 828.0 4,6 895,5 1,3
8 сут. 753.0 14,4 627.0 31,1 633.0 24,8 544,5 39,6 471.0 50,6
14 сут. 769,5 9,9 417.0 48,7 438.0 49,1 439,5 48,9 282.0 70,4
21 сут. 729.0 16,4 238,5 72,8 324.0 60,1 243.0 72,7 85,5 90,5
28 сут. 727,5 19,7 235,5 73.0 180.0 78,9 139,5 85,9 37,5 96,1
достоверно установлено, что при лечении хронических ран препаратом «Антиран» в сочетании ультразвуковой кавитацией в ранние сроки уменьшается некробиотическая активность тканей, происходит увеличение белков коллагеновой и неколлагеновой природы, а также стимулируется репаративная активность тканей.
Из полученных данных следует, что все используемые в эксперименте препараты значительно ускоряли заживление раны. Данные морфологического исследования дают основание выделить два общих для всех препаратов эффекта — уменьшение количества и размеров микроабсцессов и стимуляция пролиферативной активности эпидермиса.
Сведения об авторах:
выводы
Таким образом, анализ полученных результатов дает основание считать, что наиболее эффективным средством для наружного лечения хронических инфицированных ран является препарат «Антиран», в котором содержится оптимальная концентрация терпенсодержащих соединений, обеспечивающая бактериостатическое и цитопро-текторное действие. Применение этого препарата в сочетании с УЗК значительно улучшает результаты лечения, что обусловлено более быстрым очищением раны от девитализированных тканей за счет их механического удаления и бактерицидного эффекта ультразвука.
Казанков Сергей Станиславович - врач-хирург отделения гнойной хирургии НУЗ «Дорожная клиническая больница» на ст. Иркутск - Пассажирский ОАО «РЖД». Тел. 8 (3952) 638-123.
Цыбиков Сергей Гармажапович - заместитель главного врача по хирургии НУЗ «Дорожная клиническая больница» на ст. Иркутск - Пассажирский ОАО «РЖД». Тел. 8 (3952) 638-101
