CC BY
37
ных лиц на предмет случайного совпадения как ребенок/ родитель, дал положительные результаты (определение заведомо неродственных лиц в качестве возможных прямых родственников).
В частности, при полном попарном сравнении всего массива данных нами были выявлены два случая обнаружения в качестве возможных родственников неродственных лиц. В обоих случаях успешно и достоверно полученными были данные для =60 % установленного генетического профиля, что тоже является достаточно высоким результатом. Для сравнения приведем пример исследования на предмет ложного определения заведомо неродственных лиц по панели 8 локусов: в результате указанного исследования среди проанализированного массива данных (несколько тысяч генотипов) нами были выявлены порядка 50 случаев случайного совпадения.
ВЫВОДЫ
Учитывая, что пока это лишь пилотное исследование, полученные данные позволяют поставить целый ряд дополнительных вопросов.
В целом результаты проведенной работы демонстрируют перспективность анализа однонуклеотидных последовательностей как дополнительного источника информативности в рамках проводимого исследования, либо в качестве альтернативного метода исследования.
В настоящий момент такого рода исследования нами продолжаются.
■ МОЛЕКУЛЯРНО-ГЕНЕТИЧЕСКАЯ ЭКСПЕРТИЗА ПРИ РАССЛЕДОВАНИИ ОБСТОЯТЕЛЬСТВ ГИБЕЛИ ЛЮДЕЙ, ЛЕТЕВШИХ НА АВИАЛАЙНЕРЕ AIRBUS 321 РЕЙСОМ EI-ETJ (ШАРМ-ЭЛЬ-ШЕЙХ - САНКТ-ПЕТЕРБУРГ) к.м.н. Е. Ю. Земскова, Т. В. Тимошенко, д.б.н., проф. П. Л. Иванов
• ФГБУ «Российский центр судебно-медицинской экспертизы» Министерства здравоохранения Российской Федерации (директор - д.м.н., проф. А. В. Ковалев). • Аннотация: Работа выполнена в рамках судебно-экспертного исследования, целью которого явилась молекулярно-генетическая идентификация останков 224 погибших пассажиров и членов экипажа российского авиалайнера Airbus 321 Metrojet (рейс EI-ETJ Шарм-эль-Шейх - Санкт-Петербург), потерпевшего крушение в результате теракта над территорией Египта в 2015 г., и установление местоположения лиц, находившихся в момент катастрофы на борту разбившегося воздушного судна. Общее количество объектов экспертизы составило 1049 (собранные на месте катастрофы образцы биологического материала от фрагментов тел погибших, смывы с приборных панелей кабины и вырезы тканей кресел, референтные биологические образцы от родственников погибших лиц). В беспрецедентно короткий срок (25 дней) установлены останки 217 погибших пассажиров и членов экипажа разбившегося воздушного судна. Не обнаружены фрагменты тел 7 женщин из списочного состава находившихся на борту лиц. Работа по их поиску продолжается. В настоящее время проводится дополнительная молекулярно-генетическая экспертиза еще 200 фрагментов тел, обнару-
женных при повторном осмотре места происшествия.
• Ключевые слова: авиакатастрофа, моле-кулярно-генетическая экспертиза, молекулярно-генетическая идентификация погибших, непрямая идентификация
ВВЕДЕНИЕ
31 октября 2015 г. самолет Airbus 321 c бортовым номером EI-ETJ, принадлежавший авиакомпании Metrojet («Когалым-Авиа»), следовавший по маршруту Шарм-эль-Шейх (Египет) - Санкт-Петербург (Россия), потерпел крушение на территории Египта, что повлекло смерть 217 пассажиров и 7 членов экипажа (впоследствии эта катастрофа признана терактом).
В рамках возбужденного уголовного дела по установлению обстоятельств гибели людей, летевших рейсом EI-ETJ, была назначена молекулярно-генетическая экспертиза. Проведение экспертизы поручено ФГБУ «Российский центр судебно-медицинской экспертизы» Минздрава РФ.
Вопросы, поставленные на разрешение экспертов, касались идентификации обнаруженных останков погибших, а также установления локализации членов экипажа и пассажиров в кабине и в салоне разбившегося воздушного судна в момент катастрофы.
МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ
• Выделение ДНК из мягких тканей, смывов и вырезов обшивки кресел проводили с применением сорбентных технологий с помощью применения роботизированных станций, выпускаемых Applied Biosystems (США), Promega Corporation (США) и QIAGEN GmbH (Германия).
• Выделение ДНК из костных фрагментов проводили на роботизированной станции AutoMate Express DNA Extraction System (Applied Biosystems, США) после предварительного измельчения костной ткани с помощью гомогенизатора TissueLyser II (QIAGEN, Германия), с использованием набора реагентов PrepFiler Express BTATM Forensic DNA Extraction Kit (Applied Biosystems, США).
• Выделение ДНК из образцов буккального эпителия проводили на роботизированной станции Maxwell® 16 Instrument AS2000 (Promega Corporation, США) с использованием набора реагентов DNA IQ™ Casework Sample Kit for Maxwell® 16 (Promega Corporation, США).
• Анализ матричной активности ДНК в полученных препаратах проводили с использованием систем количественной ПЦР-амплификации ДНК серии Quantifiler® DNA Quantification Kit (Applied Biosystems, США) и специализированного амплификатора ABI PRISM 7500 Sequence Detection System (Applied Biosystems, США).
• Выделение ДНК из образцов крови, а также ее количественную и качественную оценку (анализ матричной активности), как отдельную процедуру не проводили -поскольку для типирования полиморфных STR-локусов ДНК применяли специализированные наборы реагентов, предназначенные для прямой ПЦР-амплификации ДНК непосредственно в образцах биологического материала (это методика «direct PCR»: лизис ядросодержа-щих клеток в анализируемом биологическом материале и высвобождение хромосомной ДНК происходит прямо в реакционной смеси для ПЦР).
• Генотипирование полиморфных STR-локусов проводили с помощью полимеразной цепной реакции с использованием энзиматической амплификации следующих мультилокусных панелей: 17-локусной панели AmpFlSTR® NGMSElectTM PCR Amplification
Kit (Applied Biosystems, США), 24-локусной панели GlobalFilerTM PCR Amplification Kit (Applied Biosystems, США), 13-локусной панели Investigator HDplex PCR Kit (QIAGEN GmbH, Германия), 27-локусной панели Yfiler® Plus PCR Amplification Kit (Applied Biosystems, США), 17-локусной панели AmpFlSTR® Yfiler® PCR Amplification Kit (Applied Biosystems, США), 20-локусной панели COrDIS Plus (ООО «Гордиз», Россия).
РЕЗУЛЬТАТЫ И ВЫВОДЫ
В ходе производства следственных действий на месте трагедии были обнаружены и собраны образцы биологического материала от фрагментов тел погибших. В общей сложности количество поступивших фрагментов составило 722. Также были изъяты смывы с приборных панелей кабины и вырезы тканей кресел воздушного судна - всего 37 объектов. У родственников погибших были взяты биологические образцы для сравнительного анализа; количество этих референтных образцов - 273.
Таким образом, общее количество представленных на исследование объектов составило 1049.
Начальным этапом экспертного исследования явилась каталогизация всех объектов экспертизы. В ходе этой работы референтные образцы от родственников погибших были аналитически соотнесены со списком погибших. Их взаимное соответствие было формализовано по именам и по уровню родства. Это позволило провести аналитическую разработку возможных способов идентификации тел погибших.
На следующем этапе из всех фрагментов тел, признанных пригодными для молекулярно-генетического исследования (общим количеством 463; остальные 259 объектов были признаны непригодными для молекуляр-но-генетического идентификационного исследования по причине резко выраженных гнилостных изменений и термической деструкции - обугливание до состояния серого и белого каления), и всех референтных образцов (273) были получены препараты суммарной клеточной ДНК, в которой установлены половая принадлежность и генотипические характеристики от 5 до 31 STR-локусов аутосомной ДНК и 27 локусов ДНК Y-хромосомы.
Для этих двух массивов установленных генотипов (фрагментов тел и референтных образцов) с помощью специализированных программных средств был осуществлен алгоритм тождественного поиска. В результате по критерию тождественного совпадения генотипов все исследованные фрагменты от тел погибших были разделены на группы, которые представляют фрагментарные останки индивидуальных тел. Таким способом было установлено точное количество имеющихся останков индивидуальных тел - 217. Для референтных образцов процедура тождественного поиска позволила освободиться от дублирующих объектов.
Затем на основании полученных данных между двумя массивами объектов - 217 индивидуальными телами погибших и 235 референтными образцами - с помощью специализированных программных средств был выполнен общий перекрестный вероятностно-статистический сравнительный анализ с целью обнаружения ожидаемого взаимного соответствия между имеющимися фрагментарными останками и образцами, полученными от родственников конкретных погибших лиц.
Отмечаем, что эта работа потребовала значительных дополнительных усилий в части преодоления затруднений методического характера, которые были обусловлены высокой сложностью данной конкретной экспертной задачи. В частности, помимо типичных осложнений, сопровождающих экспертные действия при чрезвычай-
ных ситуациях с массовыми человеческими жертвами, проблемными оказались многоуровневая семейная дифференциация (в случаях наличия одного и того же референта сразу для нескольких погибших, состоящих с ним в одинаковом родстве (например, мать и погибшие дети, бабушка и несколько внуков) и верификация отдаленных уровней родства (например, племянник-тетя по отцу, или двоюродные братья/сестры). В этих случаях фатальное значение могут иметь недостаточный объем и качество полученных генетических данных, что обычно не редкость ввиду неизбежной деградации исходного биологического материала.
Тем не менее нами было установлено соответствие всех имеющихся 217 останков (отдельных фрагментов или групп из нескольких фрагментов) конкретным 217 пассажирам и членам экипажа, находившимся на борту разбившегося воздушного судна; все эти лица официально признаны погибшими, и их останки выданы родственникам для захоронения. Также установлена принадлежность биологических следов в 29 смывах из кабины пилотов и салона самолета конкретным 23 погибшим. (Эта информация легла в основу последующего криминалистического ситуалогического анализа обстоятельств, непосредственно предшествовавших катастрофе.)
Отмечаем, что все эти исследования были выполнены в объективно очень короткий срок - 25 дней (для сравнения: молекулярно-генетическая идентификация в Нидерландах сходного количества жертв крушения в июле 2014 г. малазийского Boeing 777 MH17 заняла порядка 4 месяцев).
В заключение сообщаем, что на сегодняшний день среди исследованных останков не удалось обнаружить фрагменты тел 7 женщин из числа лиц, находившихся на борту разбившегося воздушного судна. Формально их судьба остается неизвестной, поэтому работа по их поиску продолжается. В настоящее время назначена и нами проводится дополнительная молекулярно-генетическая экспертиза еще порядка 200 фрагментов тел, обнаруженных при повторном осмотре места происшествия (это мелкие костные фрагменты с мягкими тканями в состоянии мумифицирования и различной степени термической деструкции).
Результаты ожидаются в ближайшее время.
АВТОРЫ_
Бордюков Михаил Михайлович - к.м.н., врач -судебно-медицинский эксперт отдела молекуляр-но-генетических экспертиз (исследований) ФГБУ «Российский центр судебно-медицинской экспертизы» Министерства здравоохранения Российской Федерации. 125284, г. Москва, ул. Поликарпова, д. 12/13, ФГБУ «РЦСМЭ» Минздрава России. +7(495) 945-00-94 • bordykov-mm@mail.ru
Грязнова Елена Леонидовна - врач - судебно-медицинский эксперт гистологического отдела Государственного бюджетного учреждения здравоохранения Московской области «Бюро судебно-медицинской экспертизы». 111401, г. Москва, ул. 1-я Владимирская, д. 33, кор. 1, ГБУЗ МО «Бюро СМЭ». +7(495) 681-96-45 • gryaznova@sudmedmo.ru
Зайцева Ольга Александровна - государственный судебно-медицинский эксперт Государственного казенного учреждения здравоохранения Ленинградской области «Бюро судебно-медицинской экспертизы». 198095, г. Санкт-Петербург, ул. Шкапина, 36-38-40, литер «Б», ГКУЗ ЛО «Бюро СМЭ» • lucenko-olya@mail.ru Земскова Елена Юрьевна - к.м.н., заведующая отделением молекулярно-генетических экспертиз (ис-
следований) ФГБУ «Российский центр судебно-медицинской экспертизы» Министерства здравоохранения Российской Федерации. 125284, г. Москва, ул. Поликарпова, д. 12/13, +7(495) 945-00-94 • zemskova@rc-sme.ru Иванова Наталья Николаевна - фельдшер-лаборант молекулярно-генетической лаборатории су-дебно-биологического отдела Государственного бюджетного учреждения здравоохранения Московской области «Бюро судебно-медицинской экспертизы». 111401, г. Москва, ул. 1-я Владимирская, д. 33, кор. 1, ГБУЗ МО «Бюро СМЭ».
Иванов Павел Леонидович - д.б.н., проф., лауреат Государственной премии России, заместитель директора по высокотехнологичным исследованиям ФГБУ «Российский центр судебно-медицинской экспертизы» Министерства здравоохранения Российской Федерации. 125284, г. Москва, ул. Поликарпова, д. 12/13, ФГБУ «РЦСМЭ» Минздрава России. +7(495) 945-00-94 • апа@ rc-sme.ru
Исупов Сергей Владимирович - ведущий специалист по продукции для криминалистики и судебной медицины компании ООО «Альбиоген». 127006, г. Москва, ул. Долгоруковская, д. 27, стр. 1 • s.isupov@ albiogen.ru
Карасева Ирина Васильевна - государственный судебно-медицинский эксперт Государственного казенного учреждения здравоохранения Ленинградской области «Бюро судебно-медицинской экспертизы». 198095, г. Санкт-Петербург, ул. Шкапина, 36-38-40, литер «Б», ГКУЗ ЛО «Бюро СМЭ» • iren_73kar@mail.com Кузьмина Людмила Александровна - заведующая судебно-биологическим отделом Государственного бюджетного учреждения здравоохранения Московской области «Бюро судебно-медицинской экспертизы». 111401, г. Москва, ул. 1-я Владимирская, д. 33, кор. 1, ГБУЗ МО «Бюро СМЭ» • kuzmina@sudmedmo.ru Куйкина Марина Вячеславовна - врач - судебно-медицинский эксперт молекулярно-генетической лаборатории судебно-биологического отдела Государственного бюджетного учреждения здравоохранения Московской области «Бюро судебно-медицинской экспертизы». 111401, г. Москва, ул. 1-я Владимирская, д. 33, кор. 1, ГБУЗ МО «Бюро СМЭ» • mary372007@ya.ru Рындин Виталий Владимирович - заведующий молекулярно-генетической лабораторией судебно-био-логического отдела Государственного бюджетного учреждения здравоохранения Московской области «Бюро судебно-медицинской экспертизы». 111401, г. Москва, ул. 1-я Владимирская, д. 33, кор. 1, ГБУЗ МО «Бюро СМЭ» • ryndin@sudmedmo.ru
Смагина Татьяна Александровна - врач - судебно-медицинский эксперт молекулярно-генетической лаборатории судебно-биологического отдела Государственного бюджетного учреждения здравоохранения Московской области «Бюро судебно-медицинской экспертизы». 111401, г. Москва, ул. 1-я Владимирская, д. 33, кор. 1, ГБУЗ МО «Бюро СМЭ» • smagina@sudmedmo.ru Смоляницкая Антонина Ивановна - государственный судебно-медицинский эксперт Государственного казенного учреждения здравоохранения Ленинградской области «Бюро судебно-медицинской экспертизы». 198095, г. Санкт-Петербург, ул. Шкапина, 36-38-40, литер «Б», ГКУЗ ЛО «Бюро СМЭ» Смоляницкий Андрей Геннадьевич - к.б.н., заведующий молекулярно-генетическим отделением Государственного казенного учреждения здравоохранения Ленинградской области «Бюро судебно-медицинской экспертизы». 198095, г. Санкт-Петербург, ул. Шкапина, 36-38-40, литер «Б», ГКУЗ ЛО «Бюро СМЭ» • dolgov@ sudmedmo.ru
Тимошенко Татьяна Владимировна - врач - судебно-медицинский эксперт отдела молекулярно-ге-нетических экспертиз (исследований) ФГБУ «Российский центр судебно-медицинской экспертизы» Министерства здравоохранения Российской Федерации. 125284, г. Москва, ул. Поликарпова, д. 12/13, ФГБУ «РЦСМЭ» Минздрава России. +7(495) 945-00-94 • 1721. timoshenko@gmail.com
Фролова Ирина Александровна - заведующая межрайонным судебно-гистологическим отделом Государственного бюджетного учреждения здравоохранения Московской области «Бюро судебно-медицинской экспертизы», ассистент кафедры судебной медицины ФУВ ГБУЗ МО МОНИКИ им. М. Ф. Владимирского. 111401, г. Москва, ул. 1-я Владимирская, д. 33, кор. 1, ГБУЗ МО «Бюро СМЭ». +7(495) 681-96-45 • frolova@ sudmedmo.ru
Хромов-Борисов Никита Николаевич - к.б.н., научный редактор журнала «Травматология и ортопедия России» при Российском научно-исследовательском институте травматологии и ортопедии. 195427, Санкт-Петербург, ул. Акад. Байкова, 8 • Nikita. KhromovBorisov@gmail.com
Шилов Илья Александрович - д.м.н., проф., заведующий кафедрой токсикологии, экстремальной и водолазной медицины СЗГМУ им. И.И. Мечникова. 195067, г. Санкт-Петербург, Пискаревский пр., д. 47, пав. 26 • tox@szgmu.ru
