CC BY
20
УДК 619:616-084:616.2
Е.П. Сисягина, Г.Р. Реджепова Ye.P. Sisyagina, G.R. Redzhepova
МЕТОД ИММУНОПРОФИЛАКТИКИ СМЕШАННЫХ РЕСПИРАТОРНЫХ ИНФЕКЦИЙ ТЕЛЯТ
A METHOD OF IMMUNOPROPHYLAXIS OF MIXED RESPIRATORY INFECTIONS IN CALVES
Ключевые слова: телята, смешанные респираторные инфекции, иммунодефицит, «Иммо-ветон-Аэро», гипериммунная сыворотка животных-доноров.
Представлены данные по изучению влияния со-четанного применения комплексного средства «Иммоветон-Аэро» с гипериммунной сывороткой животных-доноров на иммунологические параметры телят в постпрофилакторный период выращивания. Опыты проводили на 2 группах клинически здоровых телят (опытная и контрольная). Телят опытной группы (102 гол.) обрабатывали аэрозолем комплексного средства «Иммоветон-Аэро» из расчёта 4,0 мл/м3 помещения, трёхкратно с интервалом 3 дня при экспозиции 40 мин. Животных контрольной группы (98 гол.) обрабатывали аэрозолем 3,5%-ного водного раствора настойки эхинацеи пурпурной из расчёта 4,0 мл/м3 помещения в том же режиме. Дополнительно телятам обеих групп вводили подкожно гипериммунную сыворотку животных-доноров в дозе 1,0 мл/кг живой массы трёхкратно с интервалом 10-12 дн. Исследованиями установлено, что сочетанное применение комплексного средства «Иммоветон-Аэро» с гипериммунной сывороткой животных-доноров способствует достоверному повышению исходно-сниженных иммунологических параметров у клинически здоровых телят, реализующееся повышением относительного содержания Т- и В-лимфоцитов на 49 и 58% соответственно, абсолютного содержания Т- и В-лим-фоцитов на 92 и 75%, функциональной активности нейтрофилов крови в спонтанном и индуцированном тестах на 37 и 45% соответственно, уровня иммуноглобулинов G и М на 31 и 56% соответственно, лизоцимной активности сыворотки крови на 72% в сравнении с фоновыми исследованиями. Сочетанное применение «Иммоветон-Аэро» с гипериммунной сывороткой животных-доноров обеспечивает повышение профилактической эффективности на 36,8%, среднесуточного прироста
живой массы на 37,2 и 100%-ную сохранность животных.
Keywords: calves, mixed viral-bacterial respiratory infections, immunodeficiency, Immoveton-Aero, hyperimmune serum of donor animals.
The paper presents some data on the effect of combined application of a complex drug Immoveton-Aero and a hyperimmune serum of donor animals on the immunological indices of calves in the post-prophylactic growing period. The trials were carried out on two groups of clinically healthy calves (trial and control). The calves of the trial group (n = 102) were treated with the spray of a complex drug Im-moveton-Aero at the rate of 4.0 mL per m3 of the room three times once every three days at 40 minute exposure. The calves of the control group (n = 98) were treated with the spray of 3.5% aqueous solution of Echinacea purpurea tincture at the rate of 4.0 mL per m3 of the room according to the same procedure. Additionally, the calves of both groups were subcutaneously injected with a hyperimmune serum of donor animals at a dose of 1.0 mL per kg of body weight three times once every 10-12 days. The study has found that combined application of a complex drug Immoveton-Aero and a hyperimmune serum of donor animals lead to a significant increase of initially reduced immunological indices in clinically healthy calves when compared with the background study (relative count of T- and B-lymphocytes by 49% and 58% respectively; absolute count of T- and B-lymphocytes by 92% and 75% respectively; functional activity of blood neutrophils in spontaneous and induced tests by 37% and 45% respectively; the level of IgG and IgM by 31% and 56% respectively; lysozyme activity by 72%). Combined application of a complex drug Immoveton-Aero and a hyperimmune serum of donor animals enhances the prophylactic efficacy by 36.8%, daily weight gain by 37.2% and provides 100% livability.
Сисягина Елена Павловна, д.в.н., гл. н.с., Научно-исследовательский ветеринарный институт Нечернозёмной зоны Российской Федерации (ФГБНУ НИВИ НЗ России), г. Нижний Новгород. Тел.: (831) 434-51-07. E-mail: nivinzrf@yandex.ru. Реджепова Гуля Реджеповна, к.в.н., вед. н.с., Научно-исследовательский ветеринарный институт Нечернозёмной зоны Российской Федерации (ФГБНУ НИВИ НЗ России), г. Нижний Новгород. Тел.: (831) 434-51-07. E-mail: nivinzrf@yandex.ru
Sisyagina Yelena Pavlovna, Dr. Vet. Sci., Chief Staff Scientist, Research Veterinary Institute of Non-Chernozem Zone of the Russian Federation, Nizhniy Novgorod. Ph.: (831) 434-51-07. E-mail: nivinzrf@yandex.ru.
Redzhepova Gulya Redzhepovna, Cand. Vet. Sci., Leading Staff Scientist, Research Veterinary Institute of Non-Chernozem Zone of the Russian Federation, Nizhniy Novgorod. Ph.: (831) 434-51-07. E-mail: nivinzrf@yandex.ru.
Введение
Смешанные респираторные инфекции телят являются серьезной проблемой животноводства. Чаще всего они протекают как микстинфекции с участием ассоциаций вирусов и бактериальных возбудителей. Актуальность данной патологии животных обусловлена прогрессивным ростом уровня заболеваемости, ассоциативным характером, повсеместной циркуляцией возбудителей, выраженным полиморфизмом клинических проявлений, развитием длительных тяжёлых форм течения инфекций [1, 2]. Смешанные респираторные инфекции регистрируются среди животных всех возрастных групп, но чаще болеют телята 30-45-дневного возраста в критический постпрофилакторный период выращивания. Воздействие неблагоприятных факторов окружающей среды, несбалансированный рацион и длительная персистенция вирусных возбудителей в организме обуславливают нарушения функционального состояния иммунной системы, проявляющиеся вторичными иммунодефицитами [3]. На этом фоне создаются условия для вирусоноси-тельства, значительно снижается эффективность традиционных лечебно-профилактических мероприятий. Всё вышеизложенное обуславливает необходимость изыскания и использования новых, более эффективных, средств, обеспечивающих высокий уровень резистентности организма телят. В связи этим исследования по разработке методов иммунопрофилактики смешанных респираторных инфекций у телят с использованием иммунотропных препаратов в комплексе со средствами специфического воздействия являются актуальными [4, 5].
Цель исследований — разработка метода иммунопрофилактики смешанных респираторных инфекций телят.
Материалы и методы
Экспериментальные исследования по разработке метода иммунопрофилактики смешанных респираторных инфекций телят проводились в научно-производственных опытах на клинически здоровых телятах 20-
30-дневного возраста в условиях сельхозпредприятия Нижегородской области, неблагополучного по смешанным респираторным инфекциям. В опытах использовались препараты «Иммоветон-Аэро», «Фи-тадез» и гипериммунная сыворотка животных-доноров.
Иммоветон-Аэро — комплексное имму-номодулирующее средство, содержащее 4,0 г ксимедона гидрохлорида в 100 мл 3,5%-ного раствора настойки препарата «Фитадез». Ксимедон гидрохлорид выпускается ОАО ГосНИИ «Кристалл» (г. Дзержинск Нижегородской области). Препарат обладает репаративными, иммуностимулирующими, десенсибилизирующими и антимикробными свойствами, не обладает токсичностью и раздражающим действием на кожу и слизистые оболочки, не оказывает отрицательного воздействия на репродуктивные функции животных. Фитадез — разработанный нами препарат, представляющий собой 70% спиртовую настойку из трёх видов растительного сырья. Содержит уникальный комплекс биологически активных веществ, включая флавоноиды, полисахариды, эфирные масла, витамины, микроэлементы. Фитадез обладает бактерицидными, антивирусными, противовоспалительными, иммуномодулирующими и антисептическими действиями, относится к нетоксичным препаратам, не обладает кумулятивными, эмбриотоксическими и аллергенными свойствами, совместим с химиотера-певтическими и биологическими средствами.
Гипериммунную сыворотку животных-доноров получали от специально иммунизированных взрослых животных, живой массой не менее 500 кг, свободных от заразных и кровепаразитарных заболеваний и готовили по методу Н.И. Горбань [6].
Изучение влияния сочетанного применения Иммоветон-Аэро с гипериммунной сывороткой животных-доноров на параметры иммунитета телят проводились на 200 гол. клинически здоровых животных 20-30-дневного возраста. Подобранные по принципу аналогов телята распределялись на две
группы (опытная — 102 гол. и контрольная — 98 гол.). Телята опытной группы обрабатывались аэрозолем комплексного средства «Иммоветон-Аэро» из расчёта 4,0 мл/м3 помещения, трёхкратно с интервалом 3 дня при экспозиции 40 мин. Животные контрольной группы обрабатывались аэрозолем 3,5%-ного раствора настойки эхинацеи пурпурной из расчёта 4,0 мл/м3 помещения в том же режиме (базовый способ). Аэрозольная обработка животных проводилась в специально оборудованной герметичной камере с помощью сверхзвуковой аэрозольной форсунки САФ производительностью не менее 200 мл/мин. при дисперсности генерируемого аэрозоля от 5 до 25 мкм, давлении 6-7 атм. в экспозиции 40 мин., при температуре воздуха 14оС и относительной влажности не ниже 70%. Дополнительно телятам обеих групп подкожно вводилась гипериммунная сыворотка животных-доноров в дозе 1,0 мл/кг живой массы трёхкратно с интервалом 10-12 дн.
Взятие крови у подопытных животных (по 10 гол. из каждой группы) для иммунологических исследований осуществлялось до применения препаратов (фоновое исследование) и спустя 7-10 дн. после завершения опытов. Влияние сочетанного применения препаратов на параметры иммуните-
та телят оценивалось по показателям клеточного и гуморального иммунитета, включающим относительное и абсолютное число Т- и В-лимфоцитов крови по методу Н.И. Блинова [7], функциональную активность нейтрофилов крови (НСТ-тест) — по методу М.Е. Виксмана и А.М. Маянского [8], уровень иммуноглобулинов отдельных изотипов (G и M) — по методу Manchini [9], лизоцимную активность сыворотки крови — по методу В.Г. Дорофейчу [10], а также по клиническим показателям, включающим число незаболевших и заболевших телят, форму переболевания, среднесуточный прирост живой массы и сохранность животных. Статистическую обработку результатов исследований осуществляли по Н.А. Плохинскому [11].
Результаты исследований
В результате проведенных исследований установлено, что сочетанное применение препарата «Иммоветон-Аэро» с гипериммунной сывороткой животных-доноров оказывает стимулирующее влияние на исходно-сниженные иммунологические показатели клинически здоровых телят в пост-профилакторный период выращивания (табл. 1).
Таблица 1
Влияние сочетанного применения Иммоветон-Аэро с гипериммунной сывороткой животных-доноров на параметры иммунитета телят
Показатели Группы животных
опытная контрольная
гипериммунная сыворотка животных-доноров подкожно в дозе 1 мл/кг живой массы трёхкратно с интервалом10-12 дн.
Иммоветон-Аэро, n=10 3,5%-ный раствор эхинацеи пурпурной, n=10
до применения препаратов после применения препаратов до применения препаратов после применения препаратов
Т-лимфоциты, % 22,8±1,0 34,0±1,2* 22,4±0,8 26,2±0,3*
Т-лимфоциты, 109/л 1,3±0,04 2,5±0,2** 1,3±0,08 1,7±0,06**
В-лимфоциты, % 6,2±0,4 9,8±0,5** 6,4±0,5 8,2±0,6
В-лимфоциты, 109/л 0,4±0,06 0,7±0,05** 0,4±0,01 0,5±0,02*
Функциональная активность нейтрофилов крови, % - спонтанный тест 7,0±0,8 9,6±0,6** 7,2±0,5 8,0±0,7
- индуцированный тест 18,1± 1,0 29,4±1,2* 18,9±1,0 25,2±0,7**
Иммуноглобулины, мг/мл - G 12,8±0,1 18,6±0,8* 12,9±0,2 16,8±0,3*
- М 0,9±0,01 1,4±0,02* 0,9±0,1 1,0±0,1
Лизоцимная активность сыворотки крови, % 2,2±0,2 3,8±0,3** 2,2±0,1 3,0±0,7
Примечание. Достоверность различий по сравнению с фоновыми исследованиями *р< 0,001; **р < 0,01.
Таблица 2
Эффективность иммунопрофилактики смешанных респираторных инфекций телят
Группы животных
опытная контрольная
Показатели подкожно гипериммунная сыворотка в дозе 1 мл/кг живой массы с интервалом10-12 дней трёхкратно
Иммоветон-Аэро 3,5% раствора настойки эхинацеи пурпурной
Количество животных, гол. 102 98
Заболело, гол., (%) 1 (1,0) 37 (37,8)
Форма переболевания, гол. - легкая 1 25
- тяжелая 0 12
Пало, гол., (%) 0 13 (13,3)
Профилактическая эффективность, % 99,0 62,2
Сохранность, гол., (%) 100 86,7
Среднесуточный прирост живой массы, г 928,0±21,8* 676,0±19,6
Примечание. Достоверность различий по сравнению с контролем *р< 0,001.
Из данных таблицы 1 следует, что применение комплексного средства «Иммове-тон-Аэро» в форме аэрозоля в сочетании с подкожным введением гипериммунной сыворотки животных-доноров способствовало оптимизации исходно-сниженных иммунологических параметров телят опытной группы, о чём свидетельствует динамика основных показателей. Так, относительное и абсолютное содержание Т-лимфоцитов крови в опытной группе телят достоверно увеличилось на 49 и 92%, относительное и абсолютное число В-лимфоцитов — на 58 и 75%, функциональная активность нейтро-филов крови в спонтанном и индуцированном тестах — на 37 и 62%, содержание иммуноглобулинов G и М — на 45 и 56%, лизоцимная активность сыворотки крови — на 72% в сравнении с фоновыми исследованиями. В контрольной группе изменения данных показателей имели слабо выраженный или недостоверный характер.
Результаты определения эффективности иммунопрофилактики смешанных респираторных инфекций телят путем применения аэрозоля комплексного средства «Иммове-тон-Аэро» в сочетании с подкожным введением гипериммунной сыворотки животных-доноров представлены в таблице 2.
Из таблицы 2 следует, что сочетанное использование препаратов в опытной группе обеспечивало снижение заболеваемости животных на 36,8%, повышение сохранности опытных телят — на 13,3% и среднесуточный прирост живой массы — на 37,2% в сравнении с контрольной группой. Таким образом, сочетанное применение аэрозоля комплексного иммуномодулирующего
средства «Иммоветон-Аэро» с подкожным
введением гипериммунной сыворотки животных-доноров может быть успешно использовано в качестве метода иммунопрофилактики смешанных респираторных инфекций телят в критический постпрофилак-торный период выращивания.
Заключение
Разработан метод иммунопрофилактики смешанных респираторных инфекций телят, включающий аэрозольное применение комплексного иммуномодулирующего
средства «Иммоветон-Аэро» из расчёта 4,0 мл/м3 помещения в экспозиции 40 мин., трёхкратно с интервалом 3 дня в сочетании с подкожным введением гипериммунной сыворотки животных-доноров в дозе 1,0 мл/кг живой массы трёхкратно с интервалом 10-12 дн., способствующий повышению исходно-сниженных показателей клеточного и гуморального иммунитета, обеспечивающий профилактическую эффективность на уровне 99%, сохранность -100% и среднесуточный прирост живой массы — более 900 г.
Библиографический список
1. Сисягин П.Н., Сисягина Е.П., Редже-пова Г.Р., Юлдашов Ю.Б., Убитина И.В. Иммунный статус у клинически здоровых и больных смешанными респираторными болезнями телят в зависимости от ассоциации возбудителей // Ветеринария с.-х. животных. — 2012. — № 9. — С. 54-59.
2. Масимов И.А. Смешанные респираторные инфекции КРС // Ветеринарный консультант. — 2003. — № 9-10. — С. 10-14.
3.Блохин А.А., Исаев В.В., Бурова О.А. Метод коррекции иммунодефицитных со-
стояний телят // Ветеринария и кормление. - 2016. - № 2. - С. 54-57.
4. Сисягин П.Н., Сисягина Е.П., Редже-пова Г.Р., Убитина И.В. Влияние «Иммове-тон-Аэро» на параметры иммунитета телят в критический период выращивания / / Аграрная наука Евро-Северо-Востока. — 2016. - № 1 (50). — С. 47-50.
5. Никулина Н.Б., Аксёнова В.М. Профилактика неспецифической бронхопневмонии телят // Вестник ветеринарии. — 2012. — № 4. — Т.63. — С. 83-85.
6. Горбань Н.И. Вирусные респираторные болезни животных. — Киев: Урожай, 1981. — 62 с.
7. Блинов Н.И. Методы выявления и идентификации Т- и В-лимфоцитов // Клиническая лабораторная диагностика в ветеринарии / под ред. И.П. Кондрахина. — М., 1985. — С. 215-222.
8. Виксман М.Е., МаянскийА.Н. Способ оценки функциональной активности нейтрофилов крови человека по реакции восстановления нитросинеготетразолия: метод. рекомендации. — Казань, 1979. — 13 с.
9. Mancini G., Carbonara A.O, Here-mans J.P. Immunochemical quantitation of antigens by single radial immunodiffusion // Immunochemistry. — 1965. — Vol. 2 (3). — P. 235-254.
10. Дорофейчук В.Г. Определение активности лизоцима нефелометрическим методом// Журн. лаб. дело. — 1969. — № 1. — С. 15-18.
11. Плохинский Н.А. Руководство по биометрии для зоотехников. — М.: Колос, 1969. — 256 с.
References
1. Sisyagin P.N., Sisyagina E.P., Redzhe-pova G.R., Yuldashov Yu.B., Ubitina I.V. Im-munnyy status u klinicheski zdorovykh i bol'nykh smeshannymi respiratornymi boleznyami telyat v zavisimosti ot assotsiatsii vozbuditeley // Veterinariya sel'skokho-
zyaystvennykh zhivotnykh. — 2012. — № 9. — S. 54-59.
2. Masimov I.A. Smeshannye respiratornye infektsii KRS // Veterinarnyy konsul'tant. — 2003. — № 9-10. — S. 10-14.
3. Blokhin A.A., Isaev V.V., Burova O.A. Metod korrektsii immunodefitsitnykh sos-toyaniy telyat // Veterinariya i kormlenie. — 2016. — № 2. — S. 54-57.
4. Sisyagin P.N., Sisyagina E.P., Redzhepova G.R., Ubitina I.V. Vliyanie «Im-moveton-Aero» na parametry immuniteta telyat v kriticheskiy period vyrashchivaniya // Agrarnaya nauka Evro-Severo-Vostoka. — 2016. — № 1 (50). — S. 47-50.
5. Nikulina N.B., Aksenova V.M. Profilakti-ka nespetsificheskoy bronkhopnevmonii telyat // Vestnik veterinarii. — 2012. — № 4. — T. 63. — S. 83-85.
6. Gorban' N.I. Virusnye respiratornye bolezni zhivotnykh. — Kiev: Urozhay, 1981. — 62 s.
7. Blinov N.I. Metody vyyavleniya i identif-ikatsii T- i V-limfotsitov // Klinicheskaya la-boratornaya diagnostika v veterinarii. Pod. red. Kondrakhina I.P. — M., 1985. — S. 215-222.
8. Viksman M.E., Mayanskiy A.N. Sposob otsenki funktsional'noy aktivnosti neytrofilov krovi cheloveka po reaktsii vosstanovleniya nitrosinegotetrazoliya: metodicheskie rek-omendatsii. — Kazan', 1979. — 13 s.
9. Mancini G., Carbonara A.O, Here-mans J.P. Immunochemical quantitation of antigens by single radial immunodiffusion // Immunochemistry. — 1965. — Vol. 2 (3). — P. 235-254.
10. Dorofeychuk V.G. Opredelenie ak-tivnosti lizotsima nefelometricheskim metodom// Zhurn. lab. delo. — 1969. — № 1. — S. 15-18.
11. Plokhinskiy N.A. Rukovodstvo po bio-metrii dlya zootekhnikov. — M.: Kolos, 1969. — 256 s.
+ + +
