CC BY
16
Эпидемиология, экология, специфическая диагностика, профилактика
т
УДК 616.988.25-002.954.2 (571.5)
КОЛИЧЕСТВЕННАЯ ОЦЕНКА ИНФИЦИРОВАННОСТИ ИКСОДОВЫХ КЛЕЩЕЙ РЕСПУБЛИКИ АЛТАЙ ВИРУСОМ КЛЕЩЕВОГО ЭНЦЕФАЛИТА
Л.Д. Щучинова1, Л.В. Щучинов1, Т.К. Клейн2 Управление Роспотребнадзора по Республике Алтай, Горно-Алтайск 2ФБУЗ "Центр гигиены и эпидемиологии в Республике Алтай", Горно-Алтайск 649002, Республика Алтай, г. Горно-Алтайск, проспект Коммунистический, 173. rpn_ra@mail.gorny.ru
Исследовано 2163 экземпляра голодных и 1080 экземпляров напитавшихся иксодовых клещей методом иммуноферментного анализа (ИФА). У 67,8 % положительных особей, собранных с растительности в Республике Алтай, содержание антигена вируса клещевого энцефалита (КЭ) было низким, у 16,5 % - умеренным, у 15,7 % - высоким. Среди зараженных напитавшихся переносчиков, снятых с людей, 67,3% экземпляров содержали антиген вируса КЭ в низкой, 14,4 % - в умеренной и 18,2 % - в высокой концентрации.
Ключевые слова: иксодовые клещи, зараженность, вирус клещевого энцефалита.
QUANTITATIVE ASSESSMENT OF TICK-BORNE ENCEPHALITIS VIRUS (TBEV) PREVALENCE IN IXODID TICKS IN THE ALTAI REPUBLIC L.D. Shchuchinova1, L.V. Shchuchinov1, Т.К. Klein2 1Federal service on customers' rights protection and human well-being surveillance in the Altai Republic, Gorno-Altaisk 2Federal Budget Institution of Public Health "Center of Hygiene and Epidemiology in the Altai Republic" of Federal service on customers' rights protection and human well-being surveillance, Gorno-Altaisk
2163 field-collected adult ticks and 1080 engorged ticks removed from people were tested for tick-borne encephalitis virus (TBEV) by enzyme linked immunosorbent assay (ELISA). 67,8 % of positive unfed ticks collected from vegetation had the low concentration of TBEV antigen, 16,5 % had moderate concentration, 15,7 % had high concentration. Among positive engorged ticks 67,3 % of individuals contained an TBEV antigen in low concentration, 14,4% - in the moderate concentration and 18,2% - in high concentration.
Keywords: ixodid ticks, prevalence, tick-borne encephalitis virus.
Введение. В настоящее время экспресс-индикация антигена вируса клещевого энцефалита (КЭ) в иксодовых клещах, присосавшихся к людям - наиболее распространенный способ определения риска заражения человека. Попытки установить взаимосвязь между количественным содержанием антигена вируса и заболеванием клещевым энцефалитом предпринимались несколькими исследователями [2-5]. Результаты были неоднозначными: в некоторых случаях прослеживалась корреляция между степенью ин-фицированности переносчиков и числом заболевших [2, 4], в некоторых - нет [5].
Цель исследования - количественная оценка уровня инфицированности голодных и напитавшихся иксодовых клещей Республики
Алтай вирусом клещевого энцефалита по результатам иммуноферментного анализа.
Материалы и методы: имаго иксодовых клещей были собраны с растительности с помощью флага в нестерильный влажный бинт в период высокой численности - с третьей декады апреля по первую декаду июня 2012-2014 года. Напитавшиеся иксодовые клещи доставлялись людьми, пострадавшими от присасывания переносчиков. Видовую идентификацию иксодид проводили с помощью светового бинокулярного микроскопа МБС-10 (ЛОМО, г. Санкт-Петербург).
Для обнаружения антигена вируса клещевого энцефалита применяли тест-системы «Век-торВКЭ-антиген» (ЗАО «Вектор-Бест», г. Новосибирск). Всего методом иммуноферментного
ISSN 2221-7711 Национальные приоритеты России. 2014. № 3 (13)
анализа было исследовано 2163 экземпляра голодных иксодид и 1080 экземпляров напитавшихся иксодовых клещей. Оценку концентрации антигена вируса КЭ проводили с учетом коэффициента инфицированности (КИ) = ОП исследуемой пробы / ОП крит., где ОП крит. = ОП ср.К- +0,2 (ОП ср.К - среднее значение оптической плотности в лунках с отрицательным контрольным образцом). За низкую концентрацию принимался коэффициент инфицированности 1,0-1,4, за умеренную - 1,5-1,9, за высокую - >2,0.
Анализ обращаемости населения по поводу присасывания клеща проводили по отчетным еженедельным формам, анализ заболеваемости
- по картам эпидемиологического обследования.
Результаты и обсуждение. Исследование иксодовых клещей, собранных с растительности, на присутствие антигена вируса клещевого энцефалита методом ИФА показало, что все фоновые виды, включая клещей рода Dermacentor, являются потенциальными переносчиками вируса КЭ, но доля зараженных иксодид у разных видов была различной: I. persulcatus - 2,6 % (23 положительных пробы из 897 исследованных),
H. concinna - 0,8 % (1 положительная проба из 132), D. ^ИтШ^ - 10,5 % (20 положительных проб из 189), D. silvarum - 16,7 % (57 положительных проб из 342), D.nuttalli - 26,5 % (160 положительных проб из 603 исследованных). В целом зараженность клещей рода Dermacentor составила 20,9 % (237 положительных экземпляра из 1134 исследованных) и была достоверно выше показателя вирусофорности основного переносчика
I.-регеи1са^ (р<0,001). Количественная оценка инфицированности иксодовых клещей показала, что у 67,8 % положительных особей концентрация антигена вируса КЭ была низкой, у 16,5 %
- умеренной, у 15,7 % - высокой (табл. 1).
Таблица 1
Уровень антигена вируса КЭ в голодных клещах, собранных с растительности
Виды Коэффициент инфицированности (КИ)
иксодид положительных иксодовых клещей
Низкий Уме- Высокий Сред- Макси-
(1,0-1,4) ренный (1,5-1,9) (> 2,0) ний мальный
I. persulcatus 11 4 8 4,5 11,5
H. concinna 1 3,0
D. silvarum 37 12 8 1,41 3,5
D. reticulatus 13 5 2 1,46 3,4
D. nuttalli 116 22 22 1,43 8,2
Всего 177 43 41
При этом среди положительных особей I. persulcatus зарегистрировано максимальное значение коэффициента инфицированности (11,5), а доля высокоинфицированных особей была выше, чем среди клещей других видов, поэтому средний коэффициент инфицированности
был выше, чем у других видов - 4,5. Среди клещей рода Dermacentor была обнаружена всего одна особь с коэффициентом выше 3,5 - самка D. nuttalli из Кош-Агачского района (КИ - 8,2).
Видовая идентификация напитавшихся иксодовых клещей перед исследованием не проводилась, поэтому для сравнения зараженности вирусом КЭ голодных и напитавшихся особей все клещи рода Dermacentor были объединены в одну группу. Анализ показал, что зараженность напитавшихся клещей I. persulcatus была 5,5 % (49 положительных особей из 896 исследованных), что достоверно выше зараженности голодных таежных клещей - 2,6 % (р<0,003). Такая же тенденция была характерна и для клещей рода Dermacentor: зараженность напитавшихся особей была 30,9 % (54 положительных экземпляра из 175 исследованных), что достоверно выше уровня зараженности голодных клещей - 20,9 % (р<0,01). Клещи H. mncinna редко нападают на человека - в нашем исследовании напитавшихся клещей этого вида было всего 9 экземпляров (1 положительный).
Более высокий уровень вирусофорности напитавшихся клещей I. persulcatus и I. ricinus по сравнению с голодными отмечали многие исследователи, объясняя этот факт более высокой активностью и агрессивностью зараженных клещей и активацией репродукции вируса во время питания переносчиков [1, 3]. Обе эти гипотезы подтвердились экспериментами [6]. В нашем исследовании показано, что это явление свойственно и клещам рода Dermacentor, доля которых среди переносчиков, снятых с людей, в Республике Алтай составила 16,2%. При этом зараженность напитавшихся клещей Dermacentor spp. была достоверно выше, чем напитавшихся I. persulcatus
- 30,9 % против 5,5 % (р<0,001).
Среди напитавшихся зараженных иксодид 67,3% особей содержали антиген вируса КЭ в низкой концентрации, 14,4 % - в умеренной и 18,2 %
- в высокой концентрации (табл. 2).
Таблица 2
Уровень антигена вируса КЭ в напитавшихся иксодовых клещах
Виды иксо- Коэффициент инфицированности (КИ)
дид положительных особей
низкий Уме- Высокий Сред- Макси-
(1,0-1,4) ренный (1,5-1,9) (> 2,0) ний маль-ный
I. persulcatus 33 8 8 2,1 11,4
H. concinna 1 - 2,2
Dermacentor 37 7 10 1,2 3,6
spp.
Всего 70 15 19
Расчеты показали, что доли высокоинфицированных особей I. persulcatus в двух группах - напитавшихся и голодных - статистических различий
Эпидемиология, экология, специфическая диагностика, профилактика
ffl
не имели. Голодные и напитавшиеся Dermacentor spp. также не имели статистических различий в удельном весе высокоинфицированных особей. Доли иксодид с низким содержанием антигена среди голодных и напитавшихся иксодид были также практически одинаковыми - 67,8 и 67,3 %.
В сезонах 2012-2014 годов частично проводилась идентификация напитавшихся клещей, снятых с людей, но не исследованных на наличие антигена вируса КЭ, от жителей Майминс-кого (50 экз.) и Онгудайского (31 экз.) районов. Выявлено, что преобладали клещи I. persulcatus (64 экз., среди которых были 2 самца, 2 нимфы и 60 самок). Остальные 17 экземпляров относились к роду Dermacentor: D. гейсиЩаи - 9 экземпляров (7 самок и 2 самца), D. silvarum - 4 экземпляра (самки), D. пиЫаШ - 4 экземпляра (все самки). Таким образом, в Республике Алтай не исключена возможность заражения клещевым энцефалитом жителей при присасывании дополнительных переносчиков вируса КЭ (О. геНсиШ^, D. silvarum, D. пиНаШ, Н. сопстпа).
За период с 2004 по 2013 год в республике было зарегистрировано 22 080 случаев обращений по поводу "укуса" клеща, показатель обращаемости составил 1051,5 на 100 тыс. населения. Среди обратившихся за медицинской помощью случаи заболевания редки: в 2004-2013 года переболели клещевым энцефалитом 469 человек, из которых лишь 6 человек сдавали присосавшегося клеща на анализ. Экспресс-исследование этих переносчиков показало, что в 4 экземплярах антиген вируса клещевого энцефалита был в низкой концентрации, а в 2 случаях результат анализа был
отрицательным (что наводит на мысль о недостаточной чувствительности используемых тест-систем). Все лица были не привитыми против клещевого энцефалита. Четырем пострадавшим был введен с профилактической целью иммуноглобулин (после получения положительного результата исследования клеща), в 2 случаях экстренная профилактика КЭ не проводилась. Пять человек переболели клещевым энцефалитом лихорадочной формы; 1 ребенок перенес очаговую форму клещевого энцефалита, несмотря на серопрофилактику, проведенную на вторые сутки после удаления клеща. Из 6 больных пятеро отмечали присасывание самки I. persulcatus, а один (сентябрьский) случай связан с присасыванием самки клеща рода ОегтасеМог. Упомянутый выше тяжелый случай очаговой формы КЭ у двухлетнего ребенка развился после недолгого (не больше 1 часа) присасывания самки I. persulcatus.
Выводы. Исследование показало, что клещи I. persulcatus не только более агрессивны по отношению к человеку, но и содержат более высокую концентрацию антигена вируса КЭ, что подтверждает их главную роль в эпидпроцессе. Клещи с низким содержанием вируса (в том числе и ниже порога обнаружения) способны вызвать заболевание человека КЭ. Дополнительными переносчиками вируса КЭ в Республике Алтай являются клещи других видов: О. геНсиШ^, О. silvarum, О. пиНаШ, Н. сопстпа, активность которых в природе продолжается до поздней осени, что требует организации профилактических мероприятий на протяжении всего сезона (с середины марта до конца октября).
БИБЛИОГРАФИЧЕСКИЙ СПИСОК
1. Алексеев А. Н. Система клещ возбудитель и ее эмерджентные свойства. - СПб., 1993. - 204 с.
2. Козлова И.В. и др. Современные подходы к экстренной специфической профилактике клещевого энцефалита / И.В. Козлова, В.И. Злобин, М.М.Верхозина, Т.В. Демина, Ю.П. Джиоев, Р.В. Адельшин // Вопросы вирусологии. - 2007. - № 6. - С. 25-30.
3. Мельникова О.В. Сравнительные данные о зараженности клещевым энцефалитом голодных и питавшихся таежных клещей (по результатам иммуноферментного анализа) / О.В. Мельникова, А. Д. Ботвинкин, Г.А. Данчинова // Мед. паразитол. - 1997. - № 1. - С. 44-49.
4. Пеньевская Н.А. Методологические подходы к оценке эффективности этиотропной противовирусной
иммунопрофилактики (на примере препаратов иммуноглобулина против клещевого энцефалита) // Клиническая микробиология и антимикробная химиотерапия. - 2008. - № 10 (1).- С. 70-84.
5. Чиканова Т.Ю., Шутова Н.А., Соляник Р.Г., Власова Н.М. Анализ заболеваемости клещевым энцефалитом и болезнью Лайма на основании данных пункта серопрофилактики медицинского диагностического центра «НПО «Вирион» //Сибирский медицинский журнал (Томск). - 2011. - № 26 (2). - С. 112-114.
6. Belova OA, Burenkova LA, Karganova GG. Different tick-borne encephalitis virus (TBEV) prevalences in unfed versus partially engorged ixodid ticks - Evidence of virus replication and changes in tick behavior //Ticks and Tickborne Diseases. - 2012. - № 3. - P. 240-246.
Щучинова Лилия джигангеровна - канд. мед. наук, главный специалист-эксперт Управления Роспотребнадзора по Республике Алтай.
Щучинов Леонид Васильевич - канд. мед. наук, главный государственный санитарный врач в Республике Алтай, руководитель Управления Роспотребнадзора по Республике Алтай.
Клейн татьяна Константиновна - заведующая серологической лабораторией ФБУЗ «Центр гигиены и эпидемиологии в Республике Алтай».
© Л.Д. Щучинова, Л.В. Щучинов, Т.К. Клейн, 2014 Статья поступила в редакцию 18 сентября 2014 г.
