CC BY
36
УДК 591.111.05:636.93
10.18286/1816-4501-2016-3-34-37
ИЗМЕНЕНИЕ АКТИВНОСТИ ФЕРМЕНТОВ КРОВИ ПЕСЦА И ЛИСИЦЫ ПРИ ВКЛЮЧЕНИИ В РАЦИОН РАЗНЫХ ДОЗ ЛИГНОГУМАТА
Пронина Наталия Вячеславовна1, аспирант Сухих Олеся Николаевна1, аспирант
Беспятых Олег Юрьевич2, кандидат биологических наук, доцент кафедры «Медико-биологические дисциплины»
*ФГБНУ «Всероссийский научно-исследовательский институт охотничьего хозяйства и звероводства им. проф. Б.М. Житкова»
610000, г. Киров, ул. Преображенская, 79; Тел. 8 (8332) 642770, е-тоИ: bio.vniioz@mail.ru
2ФГБОУ ВО «Вятский государственный университет» 610000, г. Киров, ул. Московская, 36, Тел. +79226626820, е-тоИ: Ь_oleg@mail.ru
Ключевые слова: ферменты, кровь, песец, лисицы, гуминовые кислоты.
Изучено влияние нового гуминового препарата лигногумат в разных дозах на активность ферментов крови песца и лисицы. Выявлено, что разные дозы препарата оказывают разнонаправленное влияние на активность ферментов крови, что обеспечивает адаптацию песца и лисицы к наступлению зимы. Большее влияние лигногумат (причем в минимальной дозе) оказывает на уровень ферментов крови лисицы, чем песца.
Введение
Важной особенностью организма является его способность к адаптации к различным факторам окружающей среды, что отражает биохимический профиль крови [1, 2], поэтому его критерии лежат в основе системы мониторинга состояния здоровья пушных зверей [3]. В первую очередь на изменение условий внешней среды реагирует ферментная система организма [4], когда явные клинические признаки нарушений еще отсутствуют. Поэтому, анализируя изменения ферментного спектра крови, можно оценить влияние препаратов на организм зверей. При этом необходимо учитывать, что изменениям активности ферментов, как и других функций, у пушных присуща сезонность [1].
Разработанный в последнее время лигногумат содержит не менее 58% органических веществ (от сухого вещества), 60% высокомолекулярных гуминовых кислот (от органических веществ), не более 40% фуль-вовых и низкомолекулярных кислот (от органических веществ). Ранее в исследованиях показано положительное влияние препарата на продуктивность пушных зверей [5,
6], но нет работ по сравнительно-видовому изучению влияния разных доз лигногумата на ферментный спектр крови пушных зверей семейства псовые - песца и лисицы. Поэтому цель работы: изучить изменение ферментного спектра крови песца и лисицы под влиянием разных доз лигногумата.
Объекты и методы исследований
Исследования проводили на молодняке песцов (А1орех lagopus, L., 1758) и лисиц (Vulpes vulpеs L., 1758) ООО «Зверохозяйство «Вятка» (Кировская обл.) Из каждого вида зверей сформировали 4 группы по принципу условных аналогов (в каждой группе п=15). Всех зверей кормили по общехозяйственным рационам в соответствии с возрастом [7]. Животным 1-й опытной группы дополнительно в рацион вводили 20%-й раствор лигногумата КД-Б из расчета 0,1 мл/ кг, 2-й опытной группы - 0,2 мл/кг, 3-й опытной группы - 0,3 мл/кг массы тела. Препарат вводили в рацион в первые 10 дней каждого
г "
месяца, делая через 5 дней скармливания 2-дневные перерывы. Звери контрольной группы препарат не получали.
В конце опыта у 7-месячных зверей (ноябрь - период убоя зверей для получе-
1!
га еа »1
р и ш ■ !
00 и
ния шкурки) брали кровь, в которой определяли аспартатаминотрансферазу (АСТ), аланинаминотрансферазу (АЛТ), щелочную фосфатазу (ЩФ), а-амилазу и липазу на полуавтоматическом биохимическом анализаторе «Вю^ет SA» (США) с использованием наборов реактивов фирмы «High Technology» (США). Результаты исследований статистически обработаны с использованием программы Biostat.
Результаты исследований
Активность ферментов крови изменяется разнонаправленно под влиянием разных доз лигногумата (табл.1). Уровень АСТ у песцов опытных групп колебался в некоторых пределах от уровня в контрольной группе, тем не менее, в 1-й опытной группе он был выше, чем в других. Активность АЛТ у песцов 1, 2 и 3-й опытных групп была выше, в чем контрольной, на 56,6 (p<0,05), 18,2 и 9,6 %, соответственно. Коэффициент Ритиса у песцов меньше 1. При этом в сравнении с песцами контрольной группы в опытных группах он еще меньше, особенно в 1-й опытной (p<0,05). Уровень ЩФ также был выше в 1-й опытной группе на 16,3 %, а в других опытных несколько ниже, по сравнению с контрольной. Активность а-амилазы изменилась подобно изменениям АСТ, ее значение в 1-й опытной группе было больше, чем
в остальных, в частности, больше на 30 % по
V « п
сравнению с контрольной группой. В отличие от других показателей уровень липазы в 1-й опытной группе был ниже, чем в других группах, в частности, при сравнении с контрольной группой - на 15,5 %. Во 2-й группе, наоборот, активность липазы была выше на 50 % (р<0,05) в сравнении с контрольной.
У лисицы наблюдали несколько иные изменения активности ферментов в крови. Уровни АСТ в опытных группах были несколько меньше, чем в контроле, при этом более низкий уровень отмечен в 1-й опытной группе. Активность АЛТ в 1-й опытной группе была одинаковой, а в 2 и 3-й опытных группах - несколько меньше по сравнению с контрольной. Значение коэффициента Ритиса меньше 1, но между группами почти не различается, за исключением опять же 1-й опытной группы, в которой он несколько ниже по сравнению с контрольной. Уровень ЩФ был выше в 1-й опытной группе на 33 % (р<0,05), во 2-й
и /■— и V и
опытной группе был равный и в 3-й опытной - ниже на 29 % (р<0,001), чем в контрольной. Активность а-амилазы была выше в 1 и 3-й опытных группах на 3 %, во 2-й опытной группе - на 9,6 % (р<0,01). Уровни липазы в крови лисицы в контрольной группе выше, чем в 1, 2 и 3-й опытных группах, соответственно на 43 (р<0,001), 3,5 и 30 % (р<0,01).
Таблица 1
Ферментный спектр крови песцов и лисиц
Группа зверей Фермент
АСТ, E/l АЛТ, E/l АСТ/АЛТ ЩФ, E/l а-амилаза, E/l липаза, E/l
Песец
контр. 45,2±3,0 53,2±4,1 0,85±0,07 70,7±8,9 625,9±33,9 116,5±12,2
1 опыт. 50,9±4,0 83,3±11,1 * 0,61±0,07 * 82,2±7,9 814,1±90,7 98,5±11,1
2 опыт. 41,8±4,2 62,9±3,7 0,66±0,05 60,4±5,9 613,1±10,5 173,5±16,2 *
3 опыт. 45,7±3,4 58,3±2,6 0,78±0,04 65,4±6,6 634,9±23,0 106,4±13,6
Лисица
контр. 45,5±2,5 53,1±4,4 0,86±0,06 66,5±2,3 790,4±15,8 ## 217,1±7,8 ###
1 опыт. 39,6±4,1 53,2±3,4 # 0,74±0,08 88,5±7,8 * 814,6±29,7 124,0±11,2***
2 опыт. 42,0±3,0 47,9±1,7 ## 0,88±0,04# 66,2±8,6 866,1±10,4 ** ### 209,0±20,8
3 опыт. 41,7±2,3 47,1±2,1 # 0,89±0,04 47,5±2,9*** # 813,8±22,0 ### 150,9±13,5 ** #
Примечание:
*, **, *** - внутривидовые различия между контрольной и опытными группами достоверны, соответственно р<0,05; р<0,01; р<0,001;
#, ##, ### - межвидовые различия внутри группы по определенному показателю, соответственно р<0,05; р<0,01; р<0,001.
и
SS S S К
S«
Р U ш eS ;«1 М >1
00
При межвидовом сравнении значений ферментов крови выявлено, что в контрольной группе у лисицы активности а-амилазы и липазы больше соответственно на 20,8 (p<0,01) и 46 % (p<0,001), чем у песцов. По 1-й опытной группе отмечен достоверно меньший уровень АЛТ на 56,6 % (p<0,05) у лисицы по сравнению с песцом. Во 2-й опытной группе также у лисицы достоверно меньше активность АЛТ на 31 % (p<0,01), но больше активность а-амилазы на 41 % (p<0,001). Наибольшее количество межвидовых различий в значениях ферментов зафиксировано при применении лигно-гумата в наибольшей дозе. Так, в крови лисиц 3-й опытной группы в сравнении с песцами ниже активность АЛТ на 19 % (p<0,05), ЩФ - на 27 % (p<0,05) и выше активность а-амилазы на 28 % (p<0,001) и липазы - на 41,8 % (p<0,05).
Известно, что у пушных зверей повышенные в 6-7-месячном возрасте (осень) уровни трансаминаз способствуют активизации промежуточного обмена, в результате чего в период подготовки зверей к зиме происходит увеличение массы тела, в том числе за счет жировых накоплений [1, 8, 9, 10]. При наличии избыточной массы тела и ожирении активность и АСТ, и АЛТ повышается, но в большей мере АЛТ, при этом соотношение АСТ/АЛТ всегда составляет меньше 1
[11]. Это является печеночным проявлением метаболического синдрома, и предвестником признаков жировой дистрофии печени
[12]. Однако наличие жировой дистрофии у зверей к концу осени (ноябрь) не считается критичным в звероводстве, т.к. у животных к этому времени формируется зимний волосяной покров, после чего их убивают для получения шкурки. Включение лигногумата в рацион песцов способствовало дальнейшему увеличению массы и размеров животных в ноябре (до момента убоя), особенно у зверей, получавших препарат из расчета 0,1 мл/кг массы тела (p<0,05). У лисиц, получавших лигногумат, наоборот, наблюдали некоторое уменьшение уровня трансаминаз, что свидетельствует о завершении прироста массы и размеров тела.
Повышенный уровень ЩФ, участвую-
1!
£ & ES SS »1
Si
р Ü ш Sä Hi H ■ i
са s!
щей в формировании скелета в онтогенезе, способствует активному формированию костяка у зверей к 6-7-месячному возрасту [1, 8, 13]. У песцов препарат в минимальной дозе способствовал продолжению формирования костяка, что естественно при увеличении массы тела; в больших дозах лигногумат способствовал некоторому уменьшению уровня ЩФ, что может говорить о завершении формирования костной системы зверей. У лисицы отмечена такая же закономерность.
Изменения уровней а-амилазы и липазы связаны с адаптацией (перестройкой) растущего организма к изменяющимся условиям окружающей среды (осень), в том числе, формированием зимнего волосяного покрова [1, 8, 13]. Препарат в дозе 0,1 мл/кг массы тела повысил активность а-амилазы при одновременном уменьшении активности липазы, что, вероятно, свидетельствует об увеличении роли углеводного метаболизма, чем липидного, в адаптационных процессах у песца. В это время у песца еще продолжается отложение энергии в организме в жировых депо и завершается формирование зимнего волосяного покрова. В дозе 0,2 мл/кг массы тела препарат способствовал активизации липидного обмена (p<0,05). У лисицы лигногумат в дозе 0,2 мл/ кг массы тела существенно активизировал углеводный обмен (p<0,01) без изменения липидного обмена; в других дозах препарат замедлил липидный обмен (p<0,001 и p<0,01) при некотором усилении углеводного обмена. К этому времени (ноябрь) у лисицы завершается прирост массы тела и отложение жира, но продолжается формирование зимнего волосяного покрова, энергетические затраты на который, вероятно, и обеспечиваются за счет углеводного обмена.
Выводы
1. Ферментный спектр крови песца и лисицы изменяется под влиянием лигногу-мата, при этом изменения зависят от дозы лигногумата в рационе. Наибольшее влияние препарат оказывает в наименьшей дозе - 0,1 мл/кг массы тела.
2. Ферменты крови лисицы более под-
вержены влиянию лигногумата по сравнению с песцом. Межвидовые различия по ферментам отмечены в основном по АЛТ, а-амилазе и липазе; а из доз препарата - по наибольшей дозе - 0,3 мл/кг массы тела.
Библиографический список
1. Берестов, В.А. Клиническая биохимия пушных зверей / В.А. Берестов. -Петрозаводск, 2005. -168 с.
2. Хиггинс, К. Расшифровка клинических лабораторных анализов/ К Хиггинс. -М., 2008.- 376 с.
3. Тютюнник, Н.Н. Биохимическое тестирование как способ оценки физиологического состояния пушных зверей, разводимых в промышленных комплексах / Н.Н. Тютюнник, Л.К. Кожевникова // Сельскохозяйственная биология. -1996. -№ 2.- С. 39-49.
4. Кожевникова, Л.К. Принципы диагностической энзимологии и использование их в звероводстве / Л.К. Кожевникова // Физиологическое состояние пушных зверей и пути его регуляции: сборник трудов.-Петро-заводск, 1982.- С. 27-43.
5. Стимуляция репродуктивной функции самок и самцов пушных зверей / О.Ю.Беспятых Н.В. Пронина, О.Н. Сухих, А.Е. Кокорина // Труды Карельского научного центра Российской академии наук. -2015. -№ 11.- С. 56-61.
6. Повышение качества шкурок молодняка пушных зверей / О.Н. Сухих, Н.В.Пронина, А.Е. Кокорина, О.Ю. Беспятых //
Пермский аграрный вестник. -2G15. -№ 4.- С. 78-84.
7. Балакирев, HA Hормы кормления и нормативы затрат кормов для пушных зверей и кроликов: справочное пособие / HA Балакирев, В.Ф. Кладовщиков, Т.М.Демина. - М.,2007.- 186 с.
8. Балакирев, HA Звероводство / HA Балакирев, Г.А. Кузнецов.- М.: КолосС, 2006.343 с.
9. Звероводство / Е.Д. Ильина, А.Д. Соболев, Т.М. Чекалова, H.H. Шумилова.- СПб., 2GG4. -3G4 с.
1G. Санжиева, С.Е. Морфологические и биохимические показатели крови серебристо-черных лисиц / С.Е. Санжиева, H.B. Ман-татова, В.Д. Раднатаров // Аграрный вестник Урала. -2G1G. -№ 4.- С. 96-97.
11. Молчанов, Д. Коэффициент Де Ритиса: современное значение в диагностике заболеваний печени / Д.Молчанов // Здоровая Украина. Гастроэнтерология. Гепатоло-гия. Колопроктология. -2G14. -№ 3. -С.43.
12. Sookoian, S. The genetic epidemioIo-gy of nonaIcohoIic fatty Iiver disease: toward a personaIized medicine / S.Sookoian, C.J. PiroIa // CIin. Liver Dis.- 2G12. - VoI. 16 (3).- Р. 467-85.
13. Санжиева, С.Е. Использование биохимических методов в изучении физиологического состояния пушных зверей в сравнительном аспекте / С.Е. Санжиева, Ц.Ж. Батоев, И.А. Котура // Вестник Бурятского государственного университета. -2011.- № 4.- С. 183-187.
