CC BY
52
КЛИНИЧЕСКИЕ ИССЛЕДОВАНИЯ
CLINICAL INVESTIGATIONS
© Коллектив авторов, 1994 УДК 618.19-006.6-097-053.84
М. А. Френкель, Т. Е. Сокирка, Н. Б. Лебедева,
Н. Н. Тупицын, А. Ю. Барышников, Е. Н. Шолохова
ФЕНОТИП ЛИМФОИДНЫХ КЛЕТОК ПРИ В-ПРОЛИМФОЦИТАРНОЙ ЛИМФОСАРКОМЕ В СТАДИИ ЛЕЙКЕМИЗАЦИИ И В-ХРОНИЧЕСКОМ ЛИМФОЛЕЙКОЗЕ
НИИ клинической онкологии,
НИИ диагностики и терапии опухолей
Установление принадлежности лимфоидных элементов к Т- или В-субпопуляциям, а также степени их диф-ференцировки является существенным моментом в диагностике лимфопролиферативных заболеваний (ЛПЗ), так как, с одной стороны, объясняет многообразие клинических форм болезни и определяет тактику лечения больного, а с другой — позволяет прогнозировать течение процесса.
Существующие в настоящее время морфоцитохимические методы не дают возможности выявить подтипы клеток в пределах морфологически однородной популяции. Иммунологическое исследование лимфоидных элементов с помощью моноклональных антител (МКА) значительно улучшает диагностику ЛПЗ [3, 8, 10]. С помощью фенотипирования определяется моноклональный характер опухолевой популяции, что играет решающую роль в установлении злокачественности процесса [11].
Согласно данным литературы, в рамках отдельных нозологических единиц имеется фенотипическая гетерогенность клеток. Степень экспрессии отдельных поверхностных маркеров также коррелирует с нозологической формой и ее подвариантами [9].
Вместе с тем, богатство рецепторного аппарата лимфоидных клеток и появление новых MICA делают актуальными дальнейшие исследования по расширению используемой панели. Особый интерес представляет применение отечественных МКА, полученных в последние годы.
Цель данной работы — изучение фенотипической характеристики лимфоидных клеток крови и костного мозга для установления уровня дифференцировки опухолевых элементов при различных В-ЛПЗ: пролимфоци-тарной лимфосаркоме (ПЛСА) в стадии лейкемизации и хроническом лимфолейкозе (ХЛЛ).
Материалы и методы. Был исследован фенотип лимфоидных элементов костного мозга и периферической крови 40 больных В-ПЛСА в стадии лейкемизации и 7 больных B-XJIJ1 в возрасте от 24 до 78 лет. Диагноз устанавливали на основании гистологических (биопсия лимфатических узлов, трепанобиопсия костного мозга) и цитологических (пунктат костного мозга, исследование периферической крови) данных. Обследовали как первичных больных (26 человек), так и пациентов, получавших ранее специфическое лечение (14).
Морфологическое исследование препаратов крови и костного мозга наряду с рутинным изучением состава форменных элементов включало также определение лимфоцитограммы. При этом подсчитывали в процентах соотношение в опухолевой популяции лимфоидных элементов разной степени зрелости: лимфобластов, пролимфоцитов и лимфоцитов. На основании этих данных среди больных ПЛСА были
M. A. Frenkel, T. E. Sokirka, N. B. Lebedeva,
N. N. Tupitsyn, A. Yu. Baryshnikov, E. N. Sholokhova
LYMPHOID CELL PHENOTYPE IN B-PROLYMPHOCYTIC LYMPHATIC SARCOMA IN LEUKEMIZATION STAGE AND IN B-CHRONIC LYMPHOCYTIC LEUKEMIA
Research Institute of Clinical Oncology,
Research Institute of Experimental Diagnostics and Therapy of Tumors
Determination of lymphoid elements’ belonging to T-or B-subpopulations and differentiation degree is a significant component of diagnosis of lymphoproliferative disorders (LPD), because, on the one hand, it accounts for the variety of disease clinical forms and determines treatment strategy, and, on the other hand, it allows prognosis of disease course.
The present morphocytochemical techniques cannot identify cell subtypes in morphologically homogeneous populations. While immunologic identification of lymphoids with monoclonal antibodies (MoAB) improves considerably diagnosis of LPD [3, 8, 10]. Phenotyping allows determination of monoclonal character of tumor populations, which is of great value for establishing disease malignancy [11].
As reported in the literature cellular phenotypic heterogeneity can be observed within individual nosological units. Degree of expression of individual surface markers also correlates with nosological forms and their subvariants [9].
Besides, the great variety of lymphoid cell receptors and development of new MoABs necessitate further investigations aimed to enlarge the panel currently in use. Of much interest are MoABs developed in this country over the recent years.
The purpose of this investigation was to study phenotypic characteristics of blood and bone marrow lymphoid cells and to determine degree of tumor element differentiation in various B-LPDs, including prolymphocytic lymphatic sarcoma (PLSA) in leukemization stage and chronic lymphatic leukemia (CLL).
Materials and Methods. We studied phenotype of lymphoid elements from bone marrow and peripheral blood of 40 patients with B-PLSA in leukemization stage and 7 patients with B-CLL of age ranging from 24 to 78 years. Diagnosis was made by histologic (lymph node biopsy, bone marrow trepanobiopsy) and cytologic (bone marrow puncture, peripheral blood analysis) tests. The analysis was performed both in primary patients (26) and in those with a history of previous specific treatment (14).
Morphologic analysis of blood and bone marrow specimens consisted both of routine study of formed elements and lymphocytogram determination. Percentages of lymphoid elements of different maturity degree, such as lymphoblasts, prolymphocytes and lymphocytes, were calculated in tumor populations. Basing on these data the PLSA patients were stratified into two groups: with predominance of lymphoblasts and prolymphocytes in the bone marrow (more than 60%) and with lymphocytic bone marrow composition.
Панель МКА к дифференцировочным АГ лимфоидных клеток Panel of MoABs to lymphoid cell differentiation AGs
MKA АГ Специфичность
ICO-115 CD34 Предшественники гемопоэза Hemopoietic progenitors
ICO-124 CD10 Лимфобласты и гранулоциты Lymphoblasts and granulocytes
ICO-1 — HLA-Dr-ЛГ HLA-Dr-AG
ICO-91 CD22 Ранние и все В-лимфоциты Early and all B-lymphocytes
HD37 CD19 В-лимфоциты B-lymphocytes
ИПО-Ю — »
ИПО-3 — А Г В-бластов B-blast AGs
ICO-166 CD45RA Все В- и 35% Т-клеток All В- and 35% of T-cells
ICO-20 CD38 Лимфоидные предшественники, плазматические, активированные Т-лимфоциты Lymphoid progenitors, plasmic activated T-lymphocytes
ICO-105 CD25 Активированные T- и В-клетки (рецептор IL-2) Activated Т- and В-cells (IL-2 receptor)
ICO-92 CD71 Пролиферирующие В-клетки (рецептор трансферрина) Proliferative В-cells (transferrin receptor)
ICO-30 — ц -Цепь IgM IgM ц-chain
ICO-106 — Легкая А.-цепь Ig Ig light X-chain
ICO-107 — Легкая к-цепь Ig Ig light K-chain
ICO-97 — IgG
ICO-10 Thyl Ранние тимоциты Early thymocytes
ICO-31 CD8 Т-супрессоры T-suppressors
ICO-86 CD4 Т-хелперы T-helpers
ICO-90 CD3 Т-лимфоциты T-lymphocytes
ICO-80 CD5 T- и субпопуляция В-лимфоцитов T-lymphocytes and B-lymphocyte subpopulation
ICO-87 CD7 Т-лимфоциты T-lymphocytes
MoAB AG Specificity
выделены две группы: с преобладанием в костном мозге лимфобластов и пролимфоцитов (более 60%) и с лимфоцитарным составом костного мозга.
Фенотип клеток на мазках костного мозга и периферической крови исследовали фосфотазо-антифосфотазным методом с использованием панели из 21 МКА к дифференцировочным антигенам (АГ) (табл. 1). Были применены отечественные МКА серии ГСО, полученные А. Ю. Барышниковым и соавт. (НИИ клинической онкологии ОНЦ РАМН) [1], и серии ИПО, полученные С. П. Сидоренко и соавт. (Институт проблем онкологии АН Украины) [6].
Cell phenotypes were studied on bone marrow and peripheral blood smears by phosphatase-antiphosphatase technique using a panel of 21 MoABs to differentiation antigens (AG) (table 1). We used domestic MoABs of the ICO series developed by A. Yu.Baryshnikov and colleagues (Research Institute of Clinical Oncology RAMS) and of the IPO series developed by S.P.Sidorenko and colleagues (Institute of Oncological Problems Ukranian AS) [6].
The panel consisted of MoABs specific for hemopoietic early progenitors, pan-B-AGs, activation B-Iymphocyte AGs and T-cell AGs.
Detection of 20% or more of antigen-containing cells in a lymphoid population was considered a positive result.
Together with immunoenzymometric assay we used the traditional immunofluorescence technique. There were no significant differences in the results obtained by these two methods.
The results were precessed statistically according to Student’s, Fisher’s and ^-squared tests.
Results and Discussion. Immunologic cgaracteristics of leukemic cells from bone marrow and peripheral blood of the 40 patients with B-PLSA in leukemization stage and of the 7 patients with B-CLL are presented in table 2.
In cases of PLSA leukemization AG CD34 of stem hemopoietic cells was detected in about one third of the patients on 14—19% of cells on the average. The rate and mean content of AG-positive cells was about the same as detected with MoABs ICO-20 (CD38) and ICO-124 (CD 10).
B-cell differentiation AGs (HLA-Dr, CD22, CD 19 and IPO-10) were expressed by cells of most of the PLSA patients. Percentage of AG-positive elements was 40—42 on the average.
Frequency of other AGs expressed by B-lymphoid cells (CD45RA, CD71, CD25 and AG IPO-3) was varying. For example, AGs CD45RA and CD71 were detected in most cases, the percentage of AG-positive elements reaching 20-31 on the average. While the rest of activation AGs (CD25 and AG IPO-3) showed low frequency.
Expression of Ig heavy chains was as follows: Ig |a-chain was detected in 6 of 20 cases, 2 positive cases also presented IgG. Of 14 patients examined 8 had an Ig light chain (k or X), the rest of the cases were negative.
Common T-cell AGs (CD5 and CD7) were detected in most B-PLSA patients, percentage of positive cells reaching 33-37 on the average. In rare cases there was weak expression of AGs of thymocytes and mature T-helpers or suppressors.
Basing on morphology of lymphoid cells from bone marrow and peripheral blood the patients with PLSA in leukemization stage were stratified into two groups. Patients of group 1 (25) had leukemic population mainly consisting of prolymphocytes, group 2 patients (15) presented predominance of mature lymphocytes in the bone marrow.
Comparison of phenotypes in PLSA patients of these groups is presented in table 3.
As is seen in the table the number of cells expressing pan-B-AG (HLA-Dr, CD 19, IPO-10) in group 1 was significantly greater than in group 2. Though frequencies of positive cases were next to similar. At the same time patients of group 2 showed a greater frequency of |j.-chain detection. T-AGs (CD7) were also expressed at higher frequency in group 2. Analysis of expression of other AGs failed to find any significant differences in immunologic characteristics of lymphoid elements in the two groups.
Thus, in patients with B-PLSA morphologically in-homogeneous leukemic cells show different phenotypic features. B-PLSA characterized mainly by prolymphocytes expresses pan-B-AGs more actively. While lymphocytic B-PLSA shows more frequent expression of heavy fi-chain and higher content of T-AG CD7.
Фенотип лимфоидных клеток костного мозга и периферической крови у больных В-ПЛСА и В-ХЛЛ Phenotype of lymphoid cells from bone marrow and peripheral blood in B-PLSA and B-CLL patients
В-ПЛСА В-ХЛЛ
MKA АГ число положительных случаев 0/ /0 реагирующих клеток колебание реагирующих клеток число положительных случаев % реагирующих клеток колебание реагирующих клеток
ICO-115 CD34 3/10 15,1 0—42 1/4 15,0 2—43
ICO-124 CD10 5/19 14,6 0—87 1/4 21,7 0—70
ICO-20 CD38 7/23 19,3 0—56 4/7 17,2 2—38
ICO-1 HLA-Dr 31/37 42,1 1—90 5/7 34,8 13—67
ICO-91 CD22 23/31 40,8 1—90 4/6 43 5—88
HD37 CD19 7/11 41,7 4—90 н/д / n.d. н/д / n.d. н/д / n.d.
ИПО-Ю / IPO-IO — 17/25 37,4 3—98 1/5 24,4 6—82
ICO-166 CD45RA 15/26 31,3* 3—90 2/5 12,2* 5—21
ICO-92 CD71 2/4 19,7 2—36 2/3 31,3 7—52
ИПО-3 / IPO-3 — 6/23** 16,7 2—90 4/6** 30,5 3—78
ICO-105 CD25 2/10 10,5 0—55 1/4 14,7 1—27
ICO-30 ц-Цепь / |i-Chain 6/20 17,6 0—51 2/6 16,3 4—33
ICO-97 IgG 6/11** 18,7* 0—36 5/5** 57,4* 31—83
ICO-10 Thyl 3/10 17,5 6—51 2/6 28,1 7—65
ICO-31 CD8 2/6 17,6 3—48 — — —
ICO-86 CD4 1/6 12,5 1—36 0/3 6,3 3—12
ICO-90 CD3 7/23 14,5 2—35 1/7 9,7 0—29
ICQ-80 CD5 17/26 33,6 0—92 6/7 46,6 19—74
ICO-87 CD7 25/35 37,9 3—84 6/7 44,1 19—95
MoAB AG No. of positive cases %of reactive cells reactive cell range No. of positive cases %of reactive cells reactive cell range
B-PLSA B-CLL
Примечание. Здесь и в табл. 3, 4 в числителе — количество положительных случаев, в знаменателе — общее количество. * <0,001;
** р < 0,05; н/д — нет данных.
Note. Here and in tables 3, 4 numerator shows the number of positive cases, denominator shows total number of cases.
*, p<0.001 ** p <0.05 n.d., no data.
Набор включал М КА, специфичные для ранних предшественников гемопоэза, пан-В-АГ, активационные АГ В-лимфоцитов и АГ Т-кле-точного ряда.
Положительным результатом считали наличие 20% и более антигенсодержащих клеток в лимфоидной популяции.
Одновременно с иммуноферментным фенотипированием клеток использовали традиционный иммунофлюоресцентный метод. Сопоставление полученных данных не выявило достоверных различий.
Полученные результаты статистически обрабатывали методами Стъюдента, Фишера и %2.
Результаты и их обсуждение. Иммунологические показатели лейкемических клеток костного мозга и периферической крови у 40 больных В-ПЛСА в стадии лей-кемизации и у 7 больных В-ХЛЛ представлены в табл. 2.
При лейкемизации ПЛСА АГ стволовых гемопоэти-ческих клеток СБ34 выявлялись примерно у трети больных в среднем на 14—19% клеток. Примерно такие же частота и среднее содержание АГ-положительных клеток установлены при использовании МКА 1СО-20 (СБ38) и 1СО-124 (СОЮ).
Immunologic phenotype of lymphoid cells from bone marrow and blood in CLL was studied in 7 patients (see table 2).
Stem cell AG CD34 and AG CD 10 were detected in 1 of 4 patients tested. AG CD38 was detected in 4 of 7 cases.
Pan-B-AGs (HLA-Dr, CD22) were expressed in most cases, percentage of reactive cells being 34—43 on the average. Pan-B-AG IPO-10 was found in 1 of 5 patients examined. Activation AGs CD71 and IPO-3 were detected in most cases. Weak expression of AG CD25 was detected in 1 case. AG CD45RA was not found.
Ig heavy p,-chain was detected in 2 of 6 patients studied, IgG was found in all 5 patients studied. Percentage of positive cells was 57.4 on the average. Simultaneous expression of heavy y- and |a.-chains characterizes a certain stage in differentiation of B-cells which they undergo in lymph nodes. Monoclonal expression of at least one Ig light chain was detected in all 6 cases.
Дифференцировочные АГ клеток В-ряда (НЬА-Ог, CD22, СЬ19 и ИПО-10) обнаруживались на клетках большинства больных ПЛСА. Число АГ-положительных элементов составило в среднем 40—42%.
Другие АГ, выявляемые на В-лимфоидных клетках (СБ4ЖА, СЪ1\, СБ25 и АГ ИПО-3), были экспрессированы с различной частотой. Так, АГ СВ45ЯА и СБ71 обнаруживались на клетках в большинстве случаев, число АГ-положительных элементов составило в среднем 20—31%. Показатели остальных активационных АГ (С025 и АГ ИПО-3) были низкими.
Экспрессия тяжелых цепей ^ распределилась следующим образом: ц-цепь ^ была обнаружена у 6 из 20 больных, в 2 положительных случаях выявлялся также ^С. Из 14 обследованных больных у 8 было констатировано наличие одной из легких цепей ^ (к или X), у остальных реакция была отрицательной.
Общие Т-клеточные АГ (СГ)5 и СБ7) у больных В-ПЛСА выявлялись в большинстве наблюдений, число положительных клеток составило в среднем 33—37%. В редких случаях выявлялась слабая экспрессия АГ тимоцитов и зрелых Т-хелперов и супрессоров.
На основании морфологических характеристик лимфоидных клеток костного мозга и крови больные ПЛСА в стадии лейкемизации были разделены на две группы.
1-ю группу составили 25 человек, лейкемическая популяция которых была представлена преимущественно пролимфоцитами, 2-ю — 15 пациентов, у которых в костном мозге определялись в основном зрелые лимфоциты.
Был проведен сравнительный анализ особенностей фенотипа у больных ПЛСА обеих групп. Сопоставление полученных данных представлено в табл. 3.
Как видно из табл. 3, у больных 1-й группы количество клеток, экспрессирующих пан-В-АГ (НЬА-Ог, Си 19, ИПО-10), было достоверно выше, чем у больных
2-й группы. Частота положительных случаев существенно не различалась. В то же время у пациентов 2-й группы чаще выявлялась (1-цепь. Т-АГ (СБ7) экспрессировались чаще также на клетках больных 2-й группы. Результаты исследований остальных АГ не выявили достоверных различий в иммунологической характеристике лимфоидных элементов больных обеих групп.
Таким образом, при В-ПЛСА морфологически неоднородные лейкемические клетки характеризуются различиями фенотипических особенностей. В-ПЛСА, представленная преимущественно пролимфоцитами, активнее экспрессирует пан-В-АГ. Лимфоцитарная В-ПЛСА отличается более частой экспрессией тяжелой ц-цепи и высоким содержанием Т-АГ СЮ7.
Иммунологический фенотип лимфоидных клеток костного мозга и крови при ХЛЛ был исследован у 7 больных (см. табл. 2).
Стволово-клеточные АГ СБ34, а также АГ СБЮ были выявлены у 1 больного из 4 обследованных. АГ С038 определялся в 4 из 7 случаев.
Пан-В-АГ (НЬА-Ог, СБ22) экспрессировались в большинстве наблюдений, количество реагирующих клеток составило в среднем 34—43%. Наличие пан-В-АГ ИПО-10 было констатировано у 1 из 5 обследованных больных. Активационные АГ С071 и ИПО-3 определялись в большинстве исследований. Слабая экспрессия АГ СБ25 обнаруживалась в 1 случае. АГ С045ЯА отсутствовал на клетках. Тяжелая ц-цепь ^ определялась у 2 из 6 обследованных больных, 1§0 был выявлен у всех 5 обследованных. Количество положительных клеток составило в среднем 57,4%. Одновременная экспрессия тя-
Сравнение фенотипа лейкемических клеток больных В-ПЛСА 1-й и 2-й групп
Comparison of leukemic cell phenotypes in B-PLSA patients of groups 1 and 2
!-я группа 2-я группа
MKA АГ число положи- тельных случаев % реаги- рующих клеток число положи- тельных случаев % реагирую- щих клеток
ICO-1 HLA-Dr 19/21 52,7* 12/16 30,9*
HD37 CD19 5/5 63,6* 2/6 23,5*
ИПО-Ю IPO-10 — 10/13 47,9* 2/6 26,1*
ICO-30 ц-Цепь ц-Chain 1/9* 12,3* 5/11* 21,9*
ICO-87 CD7 13/21 31,0* 12/14 48,3*
MoAB AG No. of positive cases % of reactive cells No. of positive cases % of reactive cells
Group 1 Group 2
* /><0,05.
T-lymphocyte AGs (CD5 and CD7) in the B-CLL patients were detected in an overwhelming majority of the cases on 44—46% of cells on the average.
It should be noted that morphologic methods cannot distinguish neoplastic and normal cell elements within the lymphocytic component in B-PLSA and B-CII. In these cases diagnosis of subvariants is based on elevation of B-cells with confirmed monoclonality and T-cell content variation within normal limits.
Thus, phenotype of leukemic cells in B-CLL is characterized by expression of AGs HLA-Dr, CD5, the presence of the heavy |i-chain, IgG and a light chain.
Phenotype of leukemic elements in CLL was different from that of PLSA. Expression of AG CD45RA was significantly weaker, while IPO-3 frequency and IgG content were higher in CLL than in PLSA.
B-PLSA in leukemization stage is characterized by 2 cell types with different morphoimmunologic features, i.e. prolymphocytes and morphologically mature lymphocytes. Comparison of phenotype of the latter (B-PLSA with lymphocyte preponderance) and immunologic characteristics of cells in B-CLL revealed certain phenotypic differences, though the cells were similar morphologically (table 4).
As is seen detection of AG CD45RA in B-PLSA with lymphocytic composition of tumor population was significantly more frequent, while expression of AGs CD22, CD5 and content of IgG were significantly decreased as compared with B-CLL.
So, our study of tumor cell phenotypes in different variants of LPD has showed that prolymphocytes in PLSA are characterized by higher expression of pan-B-AG (CD19, HLA-Dr and IPO-IO), and of restricted common
желых у- и (i-цепей указывает на определенный этап дифференцировки В-клеток, который они проходят в лимфатическом узле. Во всех 6 исследованиях была установлена моноклональная экспрессия одной из легких цепей Ig.
АГ Т-лимфоцитов (CD5 и CD7) у больных B-XJIJI выявлялись в подавляющем большинстве случаев, в среднем на 44—46% клеток.
Следует отметить, что лимфоцитарный компонент при В-ПЛСА и В-ХЛЛ не дифференцируется морфологическими методами на неопластические и нормальные клеточные элементы. В этих случаях основой диагностики подвари-анта является возрастание абсолютного содержания В-кле-ток с подтверждением их моноклональности, в то время как колебания уровня Т-клеток наблюдаются в количестве, не превышающем их содержание в норме.
Таким образом, фенотип лейкемических клеток больных В-ХЛЛ характеризуется экспрессией следующих АГ : HLA-Dr, CD5, а также наличием тяжелой ц-цепи, IgG и одной из легких цепей.
Фенотип лейкемических элементов при ХЛЛ отличался от такового при ПЛСА. Так, экспрессия АГ CD45RA была достоверно более слабой, а ИПО-3 и наличие IgG были существенно выше при ХЛЛ, чем при ПЛСА.
Однако В-ПЛСА в стадии лейкемизации представлена 2 типами клеток с различной морфоиммунологической характеристикой: пролимфоцитами и морфологически зрелыми лимфоцитами. Сравнение фенотипа последних (В-ПЛСА с преобладанием лимфоцитов) и иммунологических показателей клеток при В-ХЛЛ позволило выявить определенные фенотипические различия, хотя морфологически они были сходны (табл. 4).
Как видно, при В-ПЛСА с лимфоцитарным составом опухолевой популяции уровень АГ CD45RA был достоверно выше, а АГ CD22, CD5, а также содержание IgG —достоверно ниже, чем при В-ХЛЛ.
Таким образом, изучение фенотипа опухолевых клеток при различных вариантах ЛПЗ показало, что пролимфоциты при ПЛСА характеризуются наиболее высокой экспрессией пан-В-АГ (CD 19, HLA-Dr и ИПО-Ю), а также рестриктированного общелейкоцитарного АГ CD45RA. В лейкемических лимфоцитах при ПЛСА экспрессия этих АГ снижается, в клетках появляется тяжелая (l-цепь, легкие цепи Ig. В то же время при ХЛЛ в лимфоцитах определяется увеличение экспрессии IgG и АГ CD5 по сравнению с опухолевыми клетками ПЛСА.
Наши исследования подтверждают многочисленные данные литературы о том, что опухолевые клетки при различных ЛПЗ характеризуются специфическими иммунологическими отличиями. На основании особенностей фенотипа выделяются иммунологические субварианты как ПЛСА [5], так и ХЛЛ [7]. Е. Н. Злобина и соавт. [2] указывают на 6 этапов дифференцировки лейкемических лимфоцитов и соответственно 6 субвариантов ХЛЛ.
Полученные данные также свидетельствуют об иммунологической гетерогенности опухолевых клеток больных ЛПЗ. В связи с этим представляет интерес дальнейшее изучение клинико-иммунологических особенностей течения ХЛЛ у больных в зависимости от наличия или отсутствия экспрессии на лимфоцитах АГ ранних костномозговых предшественников и активационных АГ. Представляется вероятным установление прогностического значения показателей реакции МКА с АГ CD34, CD 10 или CD38.
Сравнение фенотипа лейкемических клеток больных В-ПЛСА и В-ХЛЛ
Comparison of leukemic cell phenotypes in patients with B-PLSA and B-CLL
В-ПЛСА В-ХЛЛ
MKA АГ число положи- тельных случаев % реаги- рующих клеток число положи- тельных случаев % реаги- рующих клеток
1CO-91 CD22 10/12* 33,2* 4/6* 43,0*
ICO-66 CD45RA 7/13* 28,6* 2/5* 12,2*
IgG — 4/6 22,5* 5/5 57,4*
ICO-80 CD5 9/13* 28,7* 6/7* 46,6*
MoAB AG No. of positive cases % of reactive cells No. of positive cases % of reactive cells
B-PLSA B-CLL
* /><0,05.
leukocytic AG CD45RA. While leukemic lymphocytes in PLSA show decreased expression of these AGs, the presence of heavy |i-cheins, Ig light chains. In CLL lymphocyte express IgG and AG CD5 more intensively as compared to PLSA cells.
Our findings are in agreement with numerous reports about specific immunologic features of tumor cells characteristic of different LPD. Diagnosis of PLSA [5] or CLL [7] may be made basing on these phenotypic peculiarities. E. N. Zlobina et al. [2] distinguish 6 phases of leukemic lymphocyte differentiation and, consequently, 6 CLL subvariants.
Our results also give evidence of immunologic heterogeneity of tumor cells in LPD. It seems interesting therefore to study clinical and immunologic characteristics of CLL course depending upon expression of AGs of bone marrow early progenitors and activation AGs. MoAB reactivity with AGs CD34, CD 10 or CD38 may prove to be of prognostic value.
On the other hand, AG CD22 first appearing in cytoplasm and then on membranes of lymphocytes is expressed in about 70% of all cases. AG CD22 is known to be coexpressed with AG CD21 [5]. In our investigation AG CD22 was studied in parallel with AG CD 19 detectable in every phase of B-cell maturation except plasmocyte one. It is showed [4] that two variants of CLL and PLSA, i.e. CD22+ and CD2~, can be identified by immunological phenotyping. We suport the opinion that further profound study of these AGs will allow evaluation of prognostic significance of tumor lymphocyte phenotyping both in PLSA and CLL.
Results of our study may help to distinguish MoABs necessary for differential diagnosis of mature cell PLSA in leukamization phase and CLL. We recommend to use MoABs to AG CD45RA, CD22, CD5, IgG and IgM, that allow more accurate phenotyping of tumor lymphocytes.
С другой стороны, изучение экспрессии АГ CD22, появляющегося сначала в цитоплазме, а затем на мембране лимфоцитов, позволило установить, что этот АГ выявляется приблизительно в 70% всех случаев. Известно, что АГ CD22 коэкспрессируется с АГ CD21 [5]. В нашей работе изучение АГ CD22 проводилось параллельно с АГ CD 19, обнаруживаемым на всех стадиях созревания В-клеток, исключая плазмоциты. Показано [4], что по иммунологической характеристике можно выделить два варианта XJ1J1 и ПЛСА: CD22+ и CD22". Можно согласиться с исследователями, что дальнейшее углубленное изучение этих АГ даст возможность установить прогностическую значимость показателей фенотипа опухолевых лимфоцитов как при ПЛСА, так и при ХЛЛ.
Результаты проведенного исследования позволяют определить необходимый набор МКА для дифференциальной диагностики зрелоклеточной ПЛСА в стадии лей-кемизации и ХЛЛ. При этом могут быть использованы МКА к АГ CD45RA, CD22, CD5, IgG и IgM, позволяющие более точно охарактеризовать фенотип опухолевых лимфоцитов.
© Коллектив авторов, 1994 УДК 616-006-052-08
О. А. Мамедова, Г. А. Мелконян, В. Л. Кассиль,
В. Н. Христофоров
ПЕРВЫЙ ОПЫТ ПРИМЕНЕНИЯ СОЧЕТАННОГО МАГНИТНО-ИНФРАКРАСНО-ЛАЗЕРНОГО ВОЗДЕЙСТВИЯ В ЛЕЧЕНИИ ОНКОЛОГИЧЕСКИХ БОЛЬНЫХ
НИИ клинической онкологии,
ОКБ Московского энергетического института
В последние годы в литературе появилось много сообщений об успешном применении лазерного облучения в комплексной терапии ряда острых и хронических заболеваний: язвенной болезни желудка и двенадцатиперстной кишки [3, 4], пневмонии [3, 5, 8, 10], заболеваний опорно-двигательного аппарата [2, 4, 8], предопухолевых состояний и опухолей полости рта [2], ишемической болезни сердца [1, 6, 7, 9].
Имеются сведения об использовании низкоэнергетического излучения гелий-неонового лазера с целью обезболивания и повышения иммунных процессов в послеоперационном периоде у онкологических больных.
Г осударственным производственно-конструктор-
ским предприятием гуманитарных информационных технологий (ПКП ГИТ) совместно с сотрудниками ММСИ им. Н. А. Семашко на базе больницы № 50 разработан и выпускается магнитно-инфракрасный лазерный терапевтический аппарат «Милта», осуществляющий воздействие на организм одновременно тремя биофизическими факторами: постоянным магнитным полем (магнитная индукция 35±10 мТ), инфракрасным непрерывным монохроматическим излучением (длина волны 0,85— 0,89 мкм) и когерентным лазерным импульсным излучением (длина волны 0,83 мкм, импульсная мощность 4 Вт, частота следования импульсов 5, 1 кГц, 50, 10 Гц).
Целью настоящего исследования было изучение эффективности применения магнитно-инфракрасно-лазерного излучения для лечения сопутствующих заболеваний и осложнений различных методов противоопухолевой терапии у больных со злокачественными новообразованиями.
ЛИТЕРА ТУРА/REFERENCES
1. Барышников А. Ю. И Гематол. и трансфузиол. — 1990. — № 8. — С. 4—7.
2. Злобина E. H., Барышников А. Ю., Морозова В. Т. и др. // Экс-пер. онкол. — 1987. — Т. 9, № 2. — С. 21—24.
3. Кнапп В., Риебер П., Деркен Б. и др. // Гематол. и трансфузиол. — 1990, — № 4, —С. 10—16.
4. Мерсон А. Г., Бромье Ж., Гипш H. М. и др. // Экспер. онкол. — 1988.— Т. 10, № I. —С. 40—43.
5. Никулыиин С. В., Яворковский Л. Л., Яворковский Л. И. // Там же.— 1991,—Т. 13, № 2.—С. 36—41.
6. Сидоренко С. П., Ветрова Е. П., Юрченко О. В. и др. // Гематол. и трансфузиол. — 1990. — № 4. — С. 19—23.
7. Cafara A., Napolitano М., Zoli V. // Blut. — 1987. — Vol. 54,
N 1— P. 43—49.
8. Foon K. A., Todd R. F. II Blood. — 1986. — N 68. — P. 1—15.
9. Gale R. P., Foon K. A. // Seminars hematol. — 1987. — Vol. 24,
N 4. — P. 209—229.
10. Salter D. M., Krajewski A. S., Canningham S. II J. Path. — 1988. — Vol. 134, N 3. — P. 209—222.
11. Sobal R. E., Oilman R. O., Collins H. II Cancer (Philad.) — 1985. — Vol. 56, N 8. — P. 2005—2010.
Поступила 21.09.92 / Submitted 21.09.92
O A. Mamedova, G. A. Melkonyan, V. L. Kassil, V. N. Khristoforov
THE FIRST EXPERIENCE IN ASSOCIATED MAGNETIC, INFRARED AND LASER TREATMENT OF CANCER PATIENTS
Research Institute of Clinical Oncology,
Design Bureau of Moscow Energy Institute
There is a vast literature on successful application of laser radiation in complex therapy for acute and chronic diseases such as gastric and duodenal ulcers [3, 4], pneumonia [3, 5, 8, 10], musculoskeletal lesions [2, 4, 8], preneoplastic conditions and tumors of the oral cavity [2], heart ischemia [1, 6, 7, 9].
There are reports of application of helium neon laser low power radiation for relief of pain and stimulation of immune protection in postoperative cancer patients.
The State Design and Production Enterprise for Humanitarian Information Technologies (DEP HIT) together with N.A.Semashko Medical Stomatological Institute and Hospital No.50 have developed and manufactured a Milta therapeutical apparatus providing treatment by means of three biophysical factors, such as permanent magnetic field (magnetic induction 35±10 mT), continuous infrared monochromatic radiation (wavelength 0.85—0.89 mcm) and coherent laser pulse radiation (wavelength 0.83 mcm, pulse power 4 W, pulse frequency 5, 1 kHz, 50, 10 Hz).
The purpose of this investigation was to study efficacy of associated magnetic, infrared and laser irradiation as applied for treatment of concomitant diseases and complications occurring as a result of various modalities of anticancer therapy.
Materials and Methods. The study was performed in 22 patients with cancers of various sites. There were 14 cancers of the larynx, tongue and oral cavity, 2 lung cancers, 2 breast cancers. The rest of the cases were cancer of Fathers papilla (1), rectal cancer (1), foot bone and skin metastases of melanoma (1), dorsal subcutaneous metastasis of liposar-
