CC BY
10
Summary
PECULIARITIES OF EXPRESSION OF NITRIC OXIDE SYNTHASE ISOFORMS IN LEFT VENTRICULAR MYOCARDIUM OF RATS IN ARTERIAL HYPERTENSION OF VARIOUS GENESES Fedotova M.I., Kovalev M.M., Zhulinsky V.A., Kadzharyan E.V.
Key words: isoforms, nitric oxide synthase, myocardial remodeling, left ventricle, heart, arterial hypertension, rats, SHR, Wistar lines.
Cardiovascular diseases (CVD) are known as the leading cause of death worldwide. The prevalence of myocardial pathology is especially widespread. Nitric oxide and nitric oxide synthase performs cardioprotective and cardiodepressive roles in CVD. The purpose of this study was to reveal the features of the expression and balance of NOS isoforms in the myocardium of the left ventricle under various experimental models of arterial hypertension (essential and endocrine-salt).
УДК 616.24-006.61:616-07:616-097
Филенко Б.М., Ройко Н.В., Проскурня С.А., Совгиря С.М., Винник Н.1. ЗНАЧЕННЯ ПРОАПОПТОТИЧНИХ ТА АНТИАПОПТОТИЧНИХ 1МУНОГ1СТОХ1М1ЧНИХ МАРКЕР1В ПРИ ВИСОКОДИФЕРЕНЦ1ЙОВАНОМУ ПЛОСКОКЛ1ТИННОМУ РАКУ ЛЕГЕНЬ
ВДНЗ Украши «Украшська медична стоматолопчна акаде1^я», м. Полтава
Незважаючи на досягнення в сучаснй онкоморфологп, в'дкриття рол!' багатьох бiологiчних маркерiв в онкогенез¡, роль бтюв, як в'дносяться до одного смейства, вивчена недостатньо. До таких онкогене в'дносяться блки р53 та Вс1-2. Тому, метою нашого досл'дження було вивчення особливостей експреси онкоб'тк'в р53 та Вс1-2 при високодиферен^йованому плоскоклтинному раку легень. Об'ектом дослдження були леге^, уражен високодиферен^йованим плоскоклтинним раком. Досл-дження проводилось на матерiалi. взятому в'д 58 хворих. lмуногiстохiмiчнi досл'дження проводили з використанням моноклональних антит'т онкопроте(ну р53 (клон DO-7, «DakoCytomation»), Вс1-2 (клон 124, «DakoCytomation»). Встановлено паралелiзм експреси онкоб'тк'т р53 та Вс1-2 в ракових комплексах високодиферен^йованого раку легень з ороговiнням, що характеризуеться поступовим УУ зни-женням в'д зони ¡'нвазУУ до зони диференцювання. Порушення апоптозу призводить до наростання клтинно'У маси пухлини. Результати св'дчать, що змни Вс1-2 можуть в 'д'гравати певну роль в про-цесах диференцювання плоскоштинного раку легень з ороговнням. Блок р53 не може бути об'ективним критерiем для iдентифiкацiУракових комплексв з р1'зними типами ракових перлин. Ключов1 слова: р53, Вс1-2, високодиференцмований плоскокл1тинний рак легень, морфогенез, порушення апоптозу. Робота е фрагментом науково-дослiдноi' роботи «Визначення закономiрностей морфогенезу органiв, тканин та судинно-нервових утворень органiзму в нормi, експериментi та пiд дiею зовнш^х чинниюв. Морфоекспериментальне обгрунтування дп нових шовних матерiалiв при використаннi (х в клiнiчнiй практик», № державное реестрацп 0113и0010024.
Актуальшсть
Рак легень тримае першi позицп в структурi захворюваност та смертност вщ злоякюних новоутво-рень, тому залишаеться актуальною медико-со^альною проблемою сучасностк За рiзними джерела-ми, 40-50% злоякюних епiтелiальних пухлин леген складае плоскокл^инний гютогенетичний його ва-рiант [1]. Вщповщно до сучасноТ класифкаци [17], розрiзняють дектька варiантiв плоскокл^инного раку: ороговiваючий плоскокттинний рак, неороговiваючий плоскокттинний рак, базалоТдна плоскокл^ тинна карцинома, прешвазивне ураження (плоскокл^инний рак на мюц^. В основу даноТ класифкацп покладен останн досягнення в галузi генетики та терапп раку легень. Проте, найбтьш суттеве зна-чення придтяеться новим даним iмуногiстохiмiчних дослщжень та штеграци молекулярного тестуван-ня.
Незважаючи на досягнення в сучаснш онкоморфологп, вщкриття ролi багатьох бюлопчних маркерiв в онкогенезi [8], роль бтюв, як вщносяться до одного амейства, вивчена недостатньо. До таких онко-гешв вщносяться бтки р53 та Вс1-2.
Як вщомо, одшею з головних функцш р53 е зупинка кл^инного циклу пюля пошкодження геному в точц G1/S, що дозволяе кл^иы вщновити цтюнють пошкодженоТ ДНК. Р53 шдукуе репарацiю ДНК до ТТ реплкацп та подiлу клiтини, активуючи регуляторы гени р14, mdm2. Якщо вщновити цтюнють пошкодженоТ ДНК не вдаеться, то р53 запускае в кл^иш мехашзм апоптозу [5]. Втрата функцп р53 знижуе стабiльнiсть гешв та характеризуеться порушенням процесiв апоптозу, що може призвести до появи додаткових мутацш ^ як наслщок, до неопластичноТ трансформацiТ клiтин. Це вщбуваеться в резуль-татi мутацп гена р53 - утворення мутантного аналога - mt р53 [2].
Мута^я гену р53 часто спостер^аеться в пухлинах легенi, що може бути спричинене впливом полн ци^чних ароматичних вуглеводiв i нiтрозамiнiв, знайдених у тютюновому димi [16]. В первинних пухлинах леген делецп та змiни в транскрипцiТ гену р53 можуть спiвпадати або сприяти розвитку злоякю-ного фенотипу [10].
Мутантний ген р53, пперекспреая якого виявляеться за допомогою анти-р53 антитт, е paHHiM маркером процеав малГгшзаци i пухлинно' прогресГ'.
Анaлiз р53 як фактора прогнозу в онкопатологп включае дослiдження гена ТР53 на предмет мута-цiй або безпосередньо самого бтка в тканин пухлини. Мутaцiя гена ТР53 запобГгае зв'язуванню бiлкa р53 з mdm2 та призводить до стабтГзацп бтка р53 з можливiстю його ГмунопстохГмГчно' вГзуалГзацГ', що спостеpiгaеться у 70% мутацш гену ТР53 [13].
За даними лГтератури, позитивна експpесiя р53 спостеpiгaеться у 22-79% випaдкiв недрГбноклГтин-ного раку легень [9]. До того ж вщзначаеться взаемозв'язок з пстогенезом пухлини, що вище при плос-коклiтинному вapiaнтi раку у поpiвняннi з аденокарциномою [12].
В наш час прогностичне значення позитивно' експресп бтка р53 не однозначне. Деякими авторами вщзначаеться взаемозв'язок мутацп та делецп гену ТР53 i позитивно' експресГ' бiлкa р53 з низьким по-казником виживання хворих та несприятливим прогнозом [9;12]. В той час як iншi цей зв'язок запере-чують, вiдзнaчaючи pозмip пухлини i ступiнь '' диференцГацГ' як неспpиятливi пpогностичнi характеристики. Доведено, що при наявност некpозiв у пухлинi вiдзнaчaеться низький piвень експресп р53 [14,19].
До антиапоптотичних pегулятоpiв клiтинного циклу вiдноситься бток Bcl-2 (B cell lympho-ma/leukemia-2) - член сiмействa гомологiв Bcl-2, гени яких локaлiзовaнi на 18 хромосомк Члени даного амейства дiють через гомодимеpнi чи гетеродимерн aсоцiaцГ' так, що спpийнятливiсть клГтин до по-тенцiйного апоптотичного стимулу може бути визначена ступенем проапоптотичних та антиапоптотичних впливГв представниш цГеТ групи 6ГлкГв, що знаходяться в клГтинГ в даний час. Bcl-2 i 6лизькГ йому бтки мають двГ рГзнГ ФункцГТ: вони не ттьки гальмують апоптоз, але i пеpехiд клГтини в клГтинний цикл. Отже, основне призначення Bcl-2 полягае у пролонгуванн життя клГтини при зупинцГ його в G0, G1 фазах клГтинного циклу.
Проте, в даний час немае едино' думки стосовно експресп бтка Bcl-2 i зв'язку з молекулярно-бюлопчними i клГнГко-морфологГчними характеристиками новоутворень людини рГзноТ локалГзацГТ. За-лишаеться неясною участь бГлка Bcl-2 в онкогенезГ [6]. За даними лГтератури, експресГя бГлка Bcl-2 в ештелГ' бронха виявляеться лише в шарГ базальних клГтин та складае 10%, що, ймовГрно, перешко-джае гибелГ недиференцГйованих стовбурових клГтин бронхГального еттелш [15].
ЗгГдно лГтературних даних, позитивна експресГя онкомаркера Bcl-2 спостерГгаеться у 5-46% випад-кГв плоскоклГтинного раку легень [15]. Також виявлено кореляцшний зв'язок мГж експресГею Bcl-2 i прогнозом, проте, цГ дан суперечливГ та потребують бГльш детального вивчення [18]. КореляцГ' мГж експресГею Bcl-2 та ступенем диференцшвання плоскоклГтинного раку легень не виявлено.
Таким чином, дослщження проаптотичного маркеру р53 та антиапоптотичного маркеру Bcl-2 в пс-тогенезГ пухлин е актуальним та потребуе всебГчного дослщження.
Мета дослщження
Вивчення особливостей експресГ' онкобГлкГв р53 та Bcl-2 при високодиференцшованому плоскоклн тинному раку легень.
Матерiали та методи дослiдження
Об'ектом дослщження були легеш, ураженГ високодиференцшованим плоскоклГтинним раком (ВПРЛ), який визначався вщповщно до класифГкацГТ ВООЗ (2004) [17]. Дослщження проводилось на матерГалГ, взятому вщ 58 хворих на базГ Полтавського обласного патологоанатомГчного бюро.
Отриманий матерГал спочатку фГксували в забуференому 10% розчин нейтрального формалшу з подальшою парафГновою проводкою за стандартними методиками. З парафшових блокГв робили зрГзи товщиною 4-5 мкм, якГ забарвлювались гематоксилГном та еозином. ПлоскоклГтинний рак з ороговш-ням щентифкували за наявнГстю «ракових перлин» - концентричних структур з епГтелГальних клГтин в глибинГ ракових комплешв.
При проведеннГ ГмуногГстохГмГчного дослГдження парафшовГ зрГзи вГдГбраних блокГв наносили на спецГальнГ адгезивнГ предметнГ скельця SuperFrost Plus. ПГсля депарафГнГзацГТ та регщратацп зрГзГв проводили температурне демаскування антигешв. ДалГ проводили ГнкубацГю зрГзГв з первинними анти-тГлами у вологих камерах при температурГ 23-25°С впродовж 30 хвилин. В якост первинних викорис-товували моноклональнГ антитГла онкопротеТну р53 (клон DO-7, «DakoCytomation»), Bcl-2 (клон 124, «DakoCytomation»). 1дентифГкацГя реакцГ' проводилась завдяки нанесенню хромогену DAB з проявом у виглядГ коричневого забарвлення специфГчних структур. Для щентифкацп тканинних структур зрГзи додатково забарвлювали гематоксилГном Майера впродовж 1-3 хвилин.
ЕкспресГя онкопротеТну р53 визначалась на пщставГ специфГчного бурого Гнтрануклеарного забарвлення. Вщповщно до штенсивносп останнього визначали негативний (-), низький (+), помГрний (++) та високий (+++) стушнь експресп.
Визначення ступеня експресГ' молекулярно-бюлопчного маркеру Bcl-2 проводилось за наявнГстю цитоплазматичноТ реакцГ' клГтинних елементГв, що проявлялась забарвленням бурого кольору рГзноТ ГнтенсивностГ: негативний (-), низький (+), помГрний (++) та високий (+++).
Вивчення забарвлених npenapaTiB проводилось на цифровому св^ловому MiKpocKoni фiрми «Olympus BX-41» з використанням oб'eктивiв *10, х20, *40, хю0, а Тх фотозйомка - на цифрову фотокамеру фipми «Olympus C 4040».
Дocлiдження проведено з дотриманням основних бюетичних положень Конвенцп Ради Свропи про права людини та бioмедицину (вiд 04.04.1997 р.), ГельанськоТ деклаpацiT Всесв^ньоТ медичноТ асоць ацiT про етичнi принципи проведення наукових медичних дослщжень за участю людини (1964-2008 рр.), а також наказу МОЗ УкраТни № 690 вщ 23.09.2009 р.
Результати дослщження та Ух обговорення
У пoпеpеднiх гicтoлoгiчних та гicтoхiмiчних дослщженнях виcoкoдифеpенцiйoванoгo плоскокттин-ного раку легень було визначено три зони в ракових комплексах: зона швазп, зона пpoлiфеpацiT та зона диферен^ювання. Зона диферен^ювання представлена раковими перлинами, як становлять собою утворення з концентрично зiбpаних рогових кл^ин з piзними тинктopiальними властивостями: ль пiд-пoзитивнi, ШИК-пoзитивнi та тioнiн-пoзитивних [11]. Тому, визначення експресп iмунoгicтoхiмiчних маpкеpiв проводили з урахуванням piзних титв ракових перлин у кoжнiй зон пухлинних кoмплекciв.
Пpoапoптoгеннi та антиапоптогенн процеси тicнo пoв'язанi з пpoлiфеpативнoю активнicтю пухлинних клiтин, як виявлялись за допомогою маpкеpiв р53 та Bcl2. При пpoведеннi iмунoгicтoхiмiчнoгo до-cлiдження з використанням даних маpкеpiв вiдмiчаeтьcя певний паpалелiзм в Тх екcпpеciT. Так, онкобь лок р53 мае сильну екcпpеciю в зон iнвазiT, пoмipну - в зон пpoлiфеpацiT та слабку - в зон диферен-цiювання ракових комплекав (табл.1), незалежно вiд гicтoхiмiчнoгo типу «перлин».
Таблиця 1.
Шуног'ютох'шчна характеристика апоптотичних та антиапоптотичних MapKepie при високодиферен^йованому плоскоклтинному раку легень
Тип «перлини» Зони пухлинних комплекав Р 53 Bcl 2
Лтщ-позитивна 1нвазп +++ +++
Прол1ферацп ++ +
Диференцювання + -
ШИК-позитивна 1нвазп +++ ++
Прол1ферацп ++ +
Диференц1ювання + ±
Тюнш-позитивна 1нвазп +++ ++
Прол1ферацп ++ +
Диференц1ювання + -
Рис. 1. Експре^я маркеру р53 в пухлинних комплексах високодиферен^йованого раку легень. 1муног'ютох'шчний метод забарвлення. Об. 40х, ок. 10х.
1. Зона iнвазiï. 2. Зона пролiферацiï. 3. Зона диференцювання. 4. Строма пухлини.
Рис. 2. Експре^я маркеру Bcl-2 в пухлинних комплексах високодиферен^йованого плоскоклтинного раку легень з ШИК-позитивними перлинами. lмуногiстохiмiчний метод забарвлення. Об. 40х, ок. 10х.
1. Зона iнвазiï. 2. Зона пролiферацiï. 3. Зона диференцювання. 4 Строма пухлини.
Це, очевидно, пов'язано з piBHeM пролiферативноï активност кттин та пошкодженням генетичного матерiалу пщ час ïx подту, що максимально проявляеться в зон швазп з поступовим зниженням до зони ракових перлин [8].
Пперекспреая гену р53 е маркером пухлинно!' прогресп та процеав мал^ызацп, що пщтверджуеть-ся поступовим зменшення даного бтка з наростанням ступеня диференцювання штин (рис.1).
Як пщтвердження даного положення, експреая антиапоптотичного мiтоxондрiального бтка Bcl-2
теж характеризуемся поступовим зменшенням вщ зони швазп до зони диференцшвання, з майже по-вною вщсутнютю вiзуалiзацiТ в останнiй (табл. 1). Проте, спостер^аеться нерiвномiрнiсть його показни-KiB в ракових комплексах з рiзними типами «перлин», що проявляеться пперекспреаею в зонi швазп лтщ-позитивних ракових комплексiв, в той час, як в аналопчних дiлянках з ШИК- та тюнш-позитивними перлинами в^^чаеться помiрна його експресiя (рис.2).
Даний бток перешкоджае процесам апоптозу в атипових клiтинах, пiдвищуючи штинне виживан-
ня.
Отже, за результатами власних iмуногiстохiмiчних дослiджень, в комплексах плоскокл^инного раку легень з ороговшням спостерiгаеться неоднорiдна експресiя проапоптотичного маркеру р53. Пперекс-пресiя даного бтка в зонi швазп вказуе на пошкодження генетичного матерiалу внаслiдок патолопчних мiтозiв та накопичення його мутантноТ форми. Це призводить до зупинки процесу апоптозу. Дане по-ложення пщтверджуеться дослiдженням експресiТ антиапоптотичного маркеру Bcl-2. Вiдомо, що ппе-рекспреая онкобiлка Bcl-2 запобiгае вiдкриттю мiтохондрiальних каналiв за участю Вах та вивтьнен-ню цитохрому с, який бере участь у апоптозi шляхом активацп каспаз. Для гена Вах необхщна присут-нiсть функцiонально активного р53. Оскiльки при плоскоклiтинному раку легень з ороговшням накопи-чуеться мутантна форма р53, активнiсть Вах знижена, не формуються його гомодимери та не запуска-еться апоптоз. [6]. Очевидно, це свщчить про зв'язок мiтохондрiального бiлка Bcl-2 з процесами про-лiферацiТ та диференцшвання. G данi, що Bcl-2 i спорiдненi з ним бiлки володшть двома рiзними фун-кцiями: вони не ттьки гальмують апоптоз, а й входження кл^ини в кл^инний цикл. Отже, наростання клiтинноТ маси може вщбуватися не лише за рахунок пролiферативноТ активностi, а також i за рахунок порушення процесу загибелi клiтин [3;4;6].
Висновки
Встановлено паралелiзм експресiТ онкобiлкiв р53 та Bcl-2 в ракових комплексах високодиференцн йованого раку легень з ороговшням, що характеризуеться поступовим ТТ зниженням вщ зони iнвазiТ до зони диференцшвання. Порушення апоптозу призводить до наростання штинноТ маси пухлини. Ре-зультати свiдчать, що змiни Bcl-2 можуть вiдiгравати певну роль в процесах диференцшвання плоско-клiтинного раку легень з ороговшням, шляхом зупинки подту. Бток р53 не може бути об'ективним критерiем для щентифкацп ракових комплексiв з рiзними типами ракових перлин.
Перспективи поданих дослщжень
Перспективним е вивчення експресiТ бтюв сiмейства р53 та обфунтування Тх значення в морфоге-незi плоскокл^инного раку легень.
Лiтература
1. Акопов А. Современные подходы к классификации рака легкого / А. Акопов // Врач. - 2011. - № 12. - С. 7-12.
2. Бабиченко И.И. Новые методы иммуногистохимической диагностики опухолевого роста: Учеб. пособие. / И.И. Бабиченко - М.: РУДН, 2008. - 109 с.
3. Заридзе Д.Г. Канцерогенез / Д.Г. Заридзе. - М.: Медицина, 2004. - 576 с.
4. Комаревцева И.А. Промотор апоптоза ген р53 и антиапоптозный ген Bcl-2 в пролиферирующих клетках / И.А. Комаревцева, Э.Н. Попов, Е.В. Комаревцева, А.В. Заика // УкраТнський журнал кшшчноТ та лабораторноТ медицини. - 2009. - Том 4, №2. - С. 162-167.
5. Лисачев П.Д. Мdm2-зависимая регуляция экспрессии р53 при долговременной потенциации / П.Д. Лисачев, В.О. Пустыльняк, М.Б. Штарк // Бюлл. эксп. биол. и мед. - 2014. - № 9. - С. 317-319.
6. Фтьченков О.О. Апоптоз i рак: вщ теорп до практики / О.О. Фтьченков, Р.С. Стойка. - Терношль: ТДМУ, 2006. - 524 с.
7. Филенко Б.М. Оцшка експресп марке|^в пролiферацiТ Ю67 та цикпш D1 при плоскокштинному раку легень з ороговшням / Б.М. Филенко, Н.В. Ройко, С.А. Проскурня // Вюник УкраТнськоТ медичноТ стоматолопчноТ академп «Актуальш проблеми сучасноТ медицини». - 2016. - Т.16, Вип. 2(54). - С. 250-254.
8. Филенко Б.Н. Иммуногистохимическая характеристика пролиферативной активности и апоптоза плоскоклеточного рака легких (обзор литературы) / Б.Н. Филенко, Н.В. Ройко, А.П. Степанчук [и др.] // Wiadomosci Lekarskie. - 2016. - Tom LXIX, nr 2 (cz II). - P.289-294.
9. Ahn H.K. Clinical significance of Ki-67 and p53 expression in curatively resected non-small cell lung cancer / H.K. Ahn, M. Jung, S.Y. Ha, [et al.] // Tumour Biol. - 2014. - Vol. 35(6). - P. 5735-5740.
10. Capelozzi V. L. Role of immunohistochemistry in the diagnosis of lung cancer / V. L. Capelozzi // J. bras. pneumol. - 2009. - Vol.35, №4. - Р. 375382.
11. Fylenko B. Histochemical polymorphism of keratin pearls in squamous cell carcinoma of the lung / B. Fylenko, Y. Gasyuk // Canadian Scientific Journal. - 2014. - № 2. - С. 18-24.
12. Grossi F. Prognostic significance of K-ras, p53, bcl-2, PCNA, CD34 in radically resected non-small cell lung cancers / F. Grossi, M. Loprevite, M. Chiaramondia [et al.] // Eur. J. Cancer. - 2003. - Vol. 39 (9). - P. 1242-1250.
13. Midgley C.A. P53 protein stability in tumor cells is not determined by mutation but is dependent on Mdm2 binding / C.A. Midgley, D.P. Lane // Oncogene. - 1997. - Vol. 15 (10). - P. 1442-1448.
14. Mohamed S. Prognostic implications of cell cycle-related proteins in primary resectable pathologic N2 non-small cell lung cancer / S. Mohamed, K. Yasufuku, K. Hiroshima [et al.] // Cancer. - 2007. - Vol. 109(12). - P. 2506-2514.
15. Porebska I. Apoptotic markers p53, Bcl-2 and Bax in primary lung cancer / I. Porebska, E. Wyrodek, M. Kosacka [et al.] // In Vivo. - 2005. - Vol. 92, № 7. - P. 1253-1260.
16. Toyooka S. The TP53 gene, tobacco exposure, and lung cancer / S. Toyooka, T. Tsuda, A.F. Gazdar // Human mutation. - 2003. - Vol. 21. - P. 229239.
17. Travis W. D. The 2015 World Health Organization Classification of Lung Tumors Impact of Genetic, Clinical and Radiologic Advances Since the 2004 Classification / W. D. Travis, E. Brambilla, A. G. Nicholson, // Journal of Thoracic Oncology. - 2015. - Vol.10, №9. - P. 1243-1260.
18. Ulukus E.C. Surviving expression in non-small-cell lung carcinomas: correlation with apoptosis and other apoptosis-related proteins, clinicopathologic prognostic factors and prognosis / E.C. Ulukus, H.A. Kargi, B. Sis [et al.] // Appl. Immunohistochem. Mol. Morphol. - 2007. - Vol. 15(1). - P. 31-37.
19. Uramoto H. Expression of the p53 Family in Lung Cancer / H. Uramoto, K. Sugio, T. Oyama [et al.] // Anticancer research. - 2006. - Vol. 26 (3A). -P. 1785-1790.
Реферат
ЗНАЧЕНИЕ ПРОАПОПТОТИЧЕСКИХ И АНТИАПОПТОТИЧЕСКИХ ИММУНОГИСТОХИМИЧЕСКИХ МАРКЕРОВ ПРИ ВЫСОКОДИФФЕРЕНЦИРОВАННОМ ПЛОСКОКЛЕТОЧНОМ РАКЕ ЛЕГКИХ Филенко Б.Н., Ройко Н.В., Проскурня С.А., Совгыря С.Н., Винник Н.И.
Ключевые слова: p53, Bcl-2, высокодифференцированный рак легких, морфогенез, нарушение апоптоза.
Несмотря на достижения в современной онкоморфологии, открытие роли многих биологических маркеров в онкогенезе, роль белков, которые относятся к одному семейству, изучена недостаточно. К таким онкогенам относятся белки р53 и Bcl-2. Поэтому, целью нашего исследования было изучение особенностей экспрессии онкобелков р53 и Bcl-2 при высокодифференцированном плоскоклеточном раке легких. Объектом исследования были легкие, пораженные высокодифференцированным плоскоклеточным раком. Исследование проводилось на материале. взятом от 58 больных. Иммуногисто-химические исследования проводили с использованием моноклональных антител онкопротеинов р53 (клон DO-7, «DakoCytomation»), Bcl-2 (клон 124, «DakoCytomation»). Установлено параллелизм экспрессии онкобелков р53 и Bcl-2 в раковых комплексах высокодифференцированного рака легких с ороговением, характеризующимся постепенным ее снижением от зоны инвазии в зону дифференци-ровки. Нарушение апоптоза приводит к нарастанию клеточной массы опухоли. Результаты свидетельствуют, что изменения Bcl-2 могут играть определенную роль в процессах дифференцировки плоскоклеточного рака легких с ороговением. Белок р53 не может быть объективным критерием для идентификации раковых комплексов с различными типами раковых жемчужин.
Summary
ROLE OF PROAPOPTOTIC AND ANTIAPOPTOTIC IMMUNOHISTOCHEMICAL MARKERS IN WELL-DIFFERENTIATED SQUAMOUS CELL LUNG CANCER
Fylenko B.M., Royko N.V., Proskurnya S.A., Sovgyrya S.M, Vynnyk N.I.
Keywords: p53, Bcl-2, well-differentiated lung cancer, morphogenesis, apoptosis disorder.
Notwithstanding the achievements of the contemporary oncomorphology and the involvement of multiple biological markers in the oncogenesis, the role of proteins that belong to the same family has not been sufficiently studied to date. Such oncogenes include the p53 and Bcl-2 proteins. Consequently, the purpose of our study was to analyze the features of the p53 and Bcl-2 oncoproteins expression in well-differentiated squamous cell lung cancer. The lungs, affected by the well-differentiated squamous cell cancer, have been studied. The study was based on the material taken from 58 patients. Immunohistochemical studies were conducted using the monoclonal antibodies of the p53 (DO-7 clone, "DakoCytomation") and Bcl-2 (clone 124, "DakoCytomation") oncoproteins. The parallelism of the p53 and Bcl-2 oncoproteins expression has been found in the cancer complexes of the well-differentiated squamous cell lung cancer with keratinization, characterized by its gradual decrease from the invasion zone to the differentiation zone. Apoptosis disorder leads to a growth of the tumour cellular mass. The findings show that the Bcl-2 alterations can be somehow involved in the processes of differentiation of squamous cell lung cancer with keratinization. The p53 protein can not be used an objective criterion for the identification of cancer complexes with different types of epithelial pearls.
УДК: 611.62.018+612.467].08:612.65:599.323.4 Хитрик А.И.
МОРФОФУНКЦИОНАЛЬНЫЕ ОСОБЕННОСТИ МОЧЕВОГО ПУЗЫРЯ КРЫС В ПОСТНАТАЛЬНОМ ОНТОГЕНЕЗЕ
Запорожский государственный медицинский университет
Среди патологии мочевыделительной системы большой процент приходится на патологию мочевого пузыря (15-65%). Однако, в этой области морфологические знания недостаточны для понимания механизмов патологических процессов. Целью данного исследования было изучить морфологические особенности мочевого пузыря в постнатальном онтогенезе в норме. Материалом для исследований были мочевые пузыри крыс от первых до сорок пятых суток постнатального онтогенеза. Исследование морфологических особенностей мочевого пузыря крыс в постнаталь-ном онтогенезе в норме и анализ данных исследований позволили сделать вывод о присутствии в структурах слизистой мочевого пузыря уже на ранних этапах постнатального онтогенеза клеток иммуноморфологического комплекса. Это, с нашей точки зрения, делает перспективными дальнейшие морфологические исследования в этом направлении с использованием антигенной стимуляции.
Ключевые слова: мочевой пузырь, лимфоциты, постнатальный онтогенез
Робота виконана в рамках плану наукових дослiджень Запорiзького державного медичного унiверситету i е фрагментом комплексноТ науковоТ роботи кафедри г'ютологп, цитологи та ембрiологii' «Морфофункцiональнi особливостi слизових обо-лонок внутрiшнiх органiв людини i тварин в нормi та псля введення антигена», № держ. реестрацп 0103и00939
