CC BY
46
ракитин Анатолий Васильевич - канд. мед. наук, преподаватель кафедры эпидемиологии Омской государственной медицинской академии,
обухова татьяна Михайловна - д-р мед. наук, профессор кафедры эпидемиологии Омской государственной медицинской академии,
Стасенко Владимир Леонидович - д-р мед. наук, заведующий кафедрой эпидемиологии Омской государственной медицинской академии,
Вайтович Марина анатольевна - канд. мед. наук, заведующая отделом эпиднадзора Управления Роспотребнадзора по Омской области,
Седова татьяна александровна - главный специалист-эксперт отдела эпиднадзора Управления Роспотребнадзора по Омской области.
© Коллектив авторов, 2014 Статья поступила в редакцию 16 октября 2014 г.
УДК 616.314.17-008.1:616.98:578.828.6-07
ЗНАЧЕНИЕ СПЕЦИФИЧЕСКОЙ АНАЭРОБНОЙ ФЛОРЫ В РАЗВИТИИ ЗАБОЛЕВАНИЙ ПАРОДОНТА У ВИЧ-ИНФИЦИРОВАННЫХ ПАЦИЕНТОВ И МОЛЕКУЛЯРНЫЕ МЕТОДЫ ДИАГНОСТИКИ
Царёв В.Н., Ягодина Е.В., Трефилова Ю.А., Ипполитов Е.В.
Московский государственный медико-стоматологический университет 127473, г. Москва, ул. Делегатская, д. 20, стр. 1; [email protected]
Авторами изучена частота колонизации дёсен вирулентными анаэробными бактериями у носителей вируса иммунодефицита человека и влияние воспалительного процесса в пародонте на информативность и точность новых экспресс-тестов для выявления маркерной ДНК пародонтопатогенных бактерий и антител к ВИЧ в десневой жидкости.
Ключевые слова: анаэробная флора, маркерная ДНК, ПЦР, гингивит, пародонтит, ВИЧ-инфицированные пациенты, ИФА
THE ROLE OF SPECIFIC ANAEROBIC MICROLORA IN DEVELOPMENT OF PERIODONTAL DISEASES IN HIV-INFECTED PATIENTS AND MOLECULAR DIAGNOSTIC METHODS
Tsarev V.N., Jagodina E.V., Trefilov Y.A., Ippolytov E.V.
Moscow State University of Medicine and Dentistry
We studied the frequency of gums colonization with virulent anaerobic bacteria in HIV-infected people and the effect of the inflammatory process in the periodontium on the information content and accuracy of the new rapid tests for the detection of marker DNA of bacteria, which are pathogenic for periodontium, and antibodies to HIV in gingival fluid.
Keywords: anaerobic flora, a DNA-marker, PCR, gingivitis, periodontitis, HIV-infected patients, ELISA
В настоящее время по данным НИИ наркологии число лиц, страдающих наркоманией в России, составляет более 2 млн. человек (если брать только тех, кто обращается за медицинской помощью, причем число таковых соотносится с истинным числом больных наркоманией как 1:7). Установлена прямая сильная корреляционная связь между численностью наркоманов и лицами, входящими
в группы заболевания ВИЧ-инфекцией и парентеральными гепатитами В и С [5].
Инфицированиемолодыхлюдейвирусамивы-шеуказанных инфекций приводит не только к количественному росту показателя заболеваемости ВИЧ-инфекцией, но и имеет важное медико-социальное значение, т.к. ВИЧ-инфицированные длительно остаются бессимптомными источниками
инфекции и погибают от СПИДа в детородном и трудоспособном возрасте [6]. Этими клинико-эпидемиологическими особенностями ВИЧ-инфекции объясняется ее исключительная социальная значимость, т.к. под угрозой находится демографическая ситуация в России.
В связи с этим, врачи-стоматологи должны уметь распознавать связанные с ВИЧ стоматологические заболевания и обеспечивать направление пациентов к соответствующим специалистам [13, 14]. Чаще всего дифференциальная диагностика подобной патологии может быть проведена на основании визуального осмотра и клинических особенностей течения заболевания. Развитие патологии напрямую связано с уменьшением количества CD4 + клеток и увеличением вирусной нагрузки и является независимым индикатором прогрес-сирования ВИЧ-инфекции. У лиц с неизвестным статусом по ВИЧ подобные проявления в полости рта могут служить признаком возможного наличия ВИЧ-инфекции, хотя сами по себе они не являются диагностическим критерием [6, 8, 14].
Связанная с ВИЧ патология полости рта присутствует у 30-80 % ВИЧ-инфицированных лиц [3, 4]. У ВИЧ-положительных пациентов, не подвергающихся лечению, наличие определенных проявлений такого рода в полости рта может служить признаком прогрессирования заболевания. Также отмечается, что у пациентов с ВИЧ-инфекцией, принимающих антиретровирусные препараты, наличие тех или иных патологических проявлений в полости рта может означать повышение уровня вирусной нагрузки [1, 9, 13].
Последовательность осмотра пациента врачом-стоматологом для обнаружения клинических симптомов ВИЧ-инфекции имеет большое значение, так как патологические изменения на слизистой оболочке полости рта возникают наиболее рано, и их выявление играет решающую роль в своевременной постановке диагноза [4, 5, 10].
В нашей стране изучение СПИДа проводится с 1985 года, плановое обследование населения на антитела к ВИЧ начато с 1987 года [5, 6]. Актуальным является вопрос о влиянии хронического воспалительного процесса в пародонте на информативность и точность новых экспресс-тестов выявления антител к ВИЧ в десневой жидкости, что и определило цель нашей работы [1, 14].
Цель исследования - изучить частоту колонизации дёсен вирулентными анаэробными бактериями у носителей вируса иммунодефицита человека и влияние воспалительного процесса в пародонте на информативность и точность новых экспресс-тестов для выявления маркерной ДНК пародонтопатогенных бактерий и антител к ВИЧ в десневой жидкости.
Материалы и методы исследования. Обследованию было подвергнуто 102 пациента Клинической инфекционной больницы № 2 г. Москвы с верифицированным диагнозом «ВИЧ-инфекция», в том числе на основе серологической диагностики методом ИФА, и являвшихся серопози-тивными по результатам обнаружения анти-ВИЧ антител в сыворотке крови. Группа сравнения была представлена 30 пациентами лечебно-профилактического центра МГМСУ им. А.И. Евдокимова с различной соматической и стоматологической патологией, в сыворотке которых не были обнаружены антитела к антигенам ВИЧ-1 и ВИЧ-2, давших согласие на обследование с целью обнаружения в их сыворотке анти-ВИЧ антител и являвшихся, соответственно, серонега-тивными по результатам ИФА.
Для выявления маркерной ДНК пародонтопатогенных видов в десневой жидкости или экссудате пародонтальных карманов пациентов использовали тест-систему «МультиДент-5» производства ООО «ГенЛаб» (Россия) для проведения мультиплексной ПЦР с праймерами пяти основных пародонтопатогенных видов анаэробных бактерий -Aggregatibacter actinomycetemcomitans, Tannerella forsythia, Prevotella intermedia, Porphyromonas gingivalis, Treponema denticola [7].
Для проведения исследований антител к ВИЧ в ротовой жидкости пациентов использовали тест-набор фирмы «Calypte® HIV-1/2 OMT Aware™ Oral», представляющий собой единый комплект для выделения антител к вирусу ВИЧ-1 и ВИЧ-2 производства фирмы Calypte Biomedical Corporation на 50 тестов, содержащий инструкцию, 50 индивидуальных тестов (каждый в пластиковой упаковке в составе: (1) пакетик из фольги с тестовой полоской и десикантом внутри, (2) тестовая пробирка с 1 мл буфера образца слюны, (3) прокладка для проведения забора слюны, две одноразовые подставки для тестовых пробирок, две карточки тестовой процедуры).
Для проведения анализа согласно инструкции прокладку забора слюны зажимали между верхними и нижними деснами, а затем помещали в пробирку с буфером образца и тщательно встряхивали. После этого прокладку удаляли, а в пробирку с пробой десневой жидкости помещали вертикально тестовую полоску. Тест проводили до появления красной линии в зоне контроля полоски (положительным считается тест, если ниже зоны контроля в тест-зоне образуется красная полоса).
Обработку результатов проводили методом вариационной статистики (компьютерная программа Biostat 8,0) с вычислением критерия Стьюдента Т и вероятности различий p. За достоверную разницу принимали различия p<0,05.
Результаты исследования и их обсуждение. Из находившихся на обследовании и лечении ВИЧ-инфицированных пациентов (основная группа 1 - всего 62 человека в возрасте от 24 до 46 лет) у 40 пациентов (64,5 %) мы наблюдали следующие клинические формы поражения па-родонта: катаральный гингивит (подгруппа 1а), язвенно-некротический гингивит (подгруппа 1б), язвенно-некротический пародонтит (подгруппа 1в), в то время как у 20 пациентов (подгруппа 1г) таковые отсутствовали (32,3 %). Из материала, представленного в таблице 1, очевидно, что доминирующей формой патологических проявлений во рту являлись проявления в виде катарального гингивита или линейной эритемы дёсен (у 25,8 % пациентов со стоматологическими проявлениями). Более выраженные проявления с нарушением прикрепления десны, в том числе, деструктивные язвенно-некротические процессы в пародонте встречались существенно реже (у 15 % пациентов со стоматологическими проявлениями).
В контрольной группе (группе 2) без ВИЧ-инфекции у 40 человек в возрасте от 18 до 39 лет с интактным пародонтом и относительной небольшой частотой сопутствующей патологии (не более 15 % пациентов), признаков катарального гингивита (глубина пародонтального кармана < 3 мм), клинических и рентгенологических признаков потери зубодесневого соединения (средний возраст 24 года) не было выявлено. Аналогичная картина наблюдалась также и у 20 ВИЧ-инфицированных пациентов без признаков патологии пародонта (подгруппа 1 г).
Таблица 1
Клиническая характеристика основных поражений десен и пародонта
№ п/гр Диагноз Кол- во человек % Клинические проявления в полости рта
1а ВИЧ-гингивит (линейная эритема дёсен) 25 25,8 Эритематозная непрерывная полоса, идущая вдоль границы с зубами. Десна ярко-красная, отёчная. Кровоточивость маргинальной части десны на фоне анемичной прикреплённой части. Чаще наблюдали в области фронтальной группы зубов.
1б Язвенно-некротический ВИЧ-гингивит 8 8,7 Прогрессирующее разрушение мягких тканей десны без распространения на костные структуры челюстей. Некроз межзубных сосочков. Глубокие рыхлые пародонтальные карманы с обильным гнойным отделяемым.
1в Язвенно-некротический ВИЧ-пародонтит 7 7,6 Сильная боль, кровоточивость дёсен, изъязвление десневых сосочков, быстрая утрата мягких тканей пародонта и костных структур, секвестрация. Потеря зубов.
В таблице 2 представлены данные о распределении обследованных пациентов по стадии
ВИЧ - инфицирования согласно классификации В.И. Покровского [6]. Установлено, что 17 (27,4 %) из 62 ВИЧ - инфицированных пациентов находились во IIA стадии острой инфекции, 16 (25,8 %) человек в IIB стадии персистирующей генерализованной лимфаденопатии и 29 (46,8 %) человек - в IIIA стадии вторичных заболеваний.
При этом половина ВИЧ - инфицированных пациентов без признаков патологии пародонта) находилась во IIA стадии, 6 (30,0 %) человек -во IIB стадии и 4 (20,0 %) - в IIIA стадии.
Иная картина отмечена при патологии пародонта. По 5 (22,7 %) человек с ХГП (подгруппа 1а имели IIA и IIB стадии ВИЧ - инфекции, а 12 (54,6 %) человек - IIIA стадию (подгруппа 1б). Большинство пациентов подгрупп 1б и 1в - 13 (65,0 %) - имели IIIA стадию, 5 (25,0 %) - ПВ стадию и только 2 (10,0 %) человека - IIA стадию.
Таблица 2
Распределение пациентов по стадии инфицирования ВИЧ
Группа Стадии ВИЧ - инфицирования (n, %) Всего
IIA IIB IIIA
1а 10 (50,0) 6 (30,0) 4 (20,0) 20
1б 5 (22,7) 5 (22,7) 12 (54,6) 22
1в 2 (10,0) 5 (25,0) 13 (65,0) 20
Всего: 17 (27,4) 16 (25,8) 29 (46,8) 62
При проведении молекулярно-биологичес-ких и иммунологических исследований у пациентов из рассмотренных групп: ВИЧ-инфицированных с клиническими проявлениями в полости рта (40 человек), без указанных клинических проявлений в полости рта (62 чел.) и практически здоровых пациентов, составивших контрольную группу (40 чел.), мы стремились решить две задачи:
1. Сопоставить данные о наличии представителей пародонтопатогенных видов анаэробных бактерий - Aggregatibacter actinomycetemcomitans, Tannerella forsythia, Prevotella intermedia, Porphyromonas gingivalis, Treponema denticola с помощью мультиплексной ПЦР материала содержимого пародонтального кармана;
2. Сопоставить данные о наличии антител к ВИЧ в десневой жидкости с помощью имму-ноферментного экспресс-теста Calypte® HIV-1/2 при наличии проялений поражения пародонта и без такового.
У 25 ВИЧ-инфицированных пациентов был диагностирован катаральный гингивит (КГ). Анализ результатов индексной оценки клинических показателей у пациентов с КГ показал, что все они статистически достоверно отличались от показателей здоровых людей, p<0,05.
Относительная частота выявления всех исследованных нами видов пародонтопатогенных бактерий с помощью ПЦР у больных КГ и людей
контрольной группы также статистически достоверно отличались (p<0,05).
Так, у 2-х обследуемых с интактным паро-донтом (5 %) с помощью системы для ПЦР-диа-гностики «МультиДент» выявляли генетические маркеры (ДНК) A. actinomycetemcomitans (А.а.), у 1-го (2,5 %) - P. intermedia (P.i.), у 3-х (7,5%) -T. denticola (T.d.). Маркеры бактерий T. forsythia (T.f.) и P. gingivalis (P.g.) не выявили ни у одного обследуемого. У остальных 19 пациентов контрольной группы генетических маркеров данных патогенов соответственно не было выявлено (рис. 1).
Рис. 1. Частота выявления ДНК пародонтопатогенных видов анаэробных бактерий в области зубодесневой борозды (пародонтального кармана) у ВИЧ-инфицированных пациентов с хроническим катаральным гингивитом и людей с интактным пародонтом (%)
При обследовании пациентов с признаками КГ частота выявления генетических маркеров пародонтопатогенных бактерий была достоверно выше. Так, у 3-х пациентов (18,75 %) выявляли A. actinomycetemcomitans, у 10-и (62,5 %) - P. gingivalis, у 2-х (12,5 %) - P. intermedia пациентов, у 1-го (6,25 %) - Т. forsythia, у 1-го (6,25 %) пациентов - T. denticola.
Наиболее часто (примерно у 1/3 пациентов) выявляли маркерную ДНК одного вида и двух видов (примерно у 1/4 пациентов). Только у одного пациента выявили маркерную ДНК трёх видов. Однако у 5-и пациентов из 25 с признаками КГ, то есть в 20 % случаев не было выявлено ни одного из исследуемых видов микробов (рис. 2).
По-видимому, клиническую картину поражения дёсен в этом случае можно связать с активизацией условно-патогенных бактерий, например, альфа-зеленящих стрептококков вероятность такого процесса указывают данные разных исследователей [11, 12].
%
Рис. 2. Частота сочетанного выявления ДНК разных видов парадонтопатогенных анаэробных бактерий у ВИЧ-инфицированных пациентов с хроническим катаральным гингивитом (%)
Сопоставляя наши данные с результатами ПЦР-диагностики хронического пародонтита (ХГП), полученными с применением системы «МультиДент» и аналогичного оборудования в исследованиях В.Н. Царева и соавт. [7], следует отметить существенную разницу между показателями при ХГ и ХГП. Так, частота выявления генетических маркеров пародонтопатогенных бактерий при КГ и ХГП была примерно одинаковой только для одного вида - P. gingivalis (62,5 и 60 % соответственно), который, к тому же, не выявляется у здоровых людей и, большинством авторов признается как безусловный инфекционный агент, вызывающий воспаление тканей па-родонта. Второй вид - A. actinomycetemcomitans, выявлен у 18,75 % больных КГ и у 35,9 % - ХГП. В норме частота выявления маркеров данного вида составила 5 % по нашим данным и 6 % по данным В.Н. Царева с соавт. [7]. По-видимому, данный вид также можно рассматривать как пусковой инфекционный агент в развитии воспалительного процесса десен, что предлагают некоторые зарубежные исследователи [10, 14].
Соответственно частота выявления одного вида инфекционного возбудителя при КГ оказалась существенно выше, чем при ХГП (37,5 % против 10,3 %). Напротив, три и более видов в ассоциации выявлялись чаще при ХГП, чем при ХКГ. Что касается представителей других видов, то их роль в развитии гингивита нам представляется весьма проблематичной, так как частота выявления маркеров этих видов составляла от 6,25 % (T. forsythia, T. denticola) до 12,5 % (P.intermedia). А «здоровое носительство» этих видов у пациентов с интакт-ным пародонтом составляло от 2,5 до 7,5%.
В тоже время при ХГП в группе ВИЧ-инфицированных пациентов частота выявления маркерной ДНК этих пародонтопатогенных видов была крайне высокой - 71,7 %, 74,5 и 56 % соответственно (рис. 3).
/
4?
\
40х
виды бактерий
пациенты с язвенно-некротич. Формами контрольная группа
Рис. 3. Частота выявления ДНК пародонтопатогенных видов анаэробных бактерий в области зубодесневой борозды (пародонтального кармана) у ВИЧ-инфицированных пациентов с язвенно-некротическими формами (гингивита, пародонтита) и людей с интактным пародонтом (%)
При этом наиболее часто встречались ассоциации - у 8-и пациентов из 15 (53,3 %), в том числе: T. forsythia, P. gingivalis с другими видами - у 3-х пациентов (20 %), реже одна P. gingivalis с другими видами - у 2-х человек (13,3%). Маркеры четырех и пяти видов пародонтопатогенных, грамотрицательных анаэробных бактерий одновременно выявлены в двух (13,3 %) и одном случае (6,7 %) соответственно. У 40 % выявлены генетические маркеры только одного вида.
Следовательно, можно предположить, что перечисленные виды и их ассоциации играют важную роль именно при развитии язвенно-некротического гингивита и пародонтита, как более глубокого и генерализованного поражения тканей пародонта.
видов
Рис. 4. Частота сочетанного выявления ДНК разных видов парадонтопатогенных анаэробных бактерий у ВИЧ-инфицированных пациентов с язвенно-некротическими формами гингивита, пародонтита (%)
Таким образом, у ВИЧ-инфицированных пациентов с КГ и ХГП отмечали высокий уровень обсемененности пародонта анаэробными паро-донтопатогенными бактериями. Число выделяемых видов из пяти основных пародонтопатоге-нов увеличивалось по мере нарастания тяжести иммунодефицита и выраженности клинической картины деструкции тканей пародонта. Если при КГ отмечалась высокая частота обнаружения моноинфекции, то при язвенно-некротическом па-родонтите, как правило, выявляли 3-4 вида.
Во всех случаях у пациентов с частичной аде-нтией ИФА-тесты на ВИЧ с десневой жидкостью дали позитивные результаты. В группе сравнения ни в одном из анализируемых серонегатив-ных по анти-ВИЧ IgG-антителам случаев тест не дал положительного результата. В связи с этим можно отметить, что пол и возраст, а также сопутствующая стоматологическая и соматическая патология на результаты тестирования влияния не оказывали.
Хотя в ротовой полости присутствует более 400 видов микроорганизмов, в настоящее время доказана роль только небольшого числа бактерий в качестве этиологических факторов заболеваний пародонта. Развитие генерализованного пародонтита связывают прежде всего с грамотрицатель-ными анаэробными бактериями Actinobacillus actinomycetemcomitans, Porphyromonas gingivalis, Prevotella intermedia, Bacteroides forsythus и Treponema denticola [9, 10].
В связи с этим основной целью терапии паро-донтита является уничтожение его возбудителей и устранение отрицательных последствий их воздействия на окружающие ткани [2, 8].
Полученные нами данные позволяют рекомендовать тест-системы для ПЦР-диагности-ки грамотрицательных анаэробных бактерий и иммуноферментного выявления антител к ВИЧ тест-набором Calypte® HIV-1/2 для ранней диагностики ВИЧ, особенно, для обследования пациентов молодого возраста при реализации профилактических программ.
Принимая во внимание, что выявить все источники возбудителя не всегда представляется возможным, в основу мероприятий по защите медицинских работников от ВИЧ и вирусов гепатита положен следующий универсальный принцип: всех пациентов следует рассматривать как потенциально инфицированных.
В связи с этим, необходимо обязательное выполнение всеобщих (универсальных) мер предосторожности, в рамках которых кровь и биологические жидкости всех пациентов следует рассматривать как потенциально инфицированные и при работе с ними всегда предпринимать
соответствующие меры защиты, а не полагаться на собственную проницательность в отношении принадлежности того или иного пациента к группе, имеющей фактор «высокого риска» инфицирования, например, ВИЧ и/или вирусами парентеральных гепатитов [1, 3, 4, 12, 14].
Удобной, доступной и экономически выгодной для широкого круга специалистов-стоматологов является, в частности, тест-система Calypte® HIV-1/2, позволяющая в течение 10-15 минут прямо в кресле провести ориентировочный скрининг на наличие антител к ВИЧ у пациента.
Выводы
1. В соскобе десневой борозды у ВИЧ-инфицированных с признаками гингивита доминируют анаэробные бактерии P. gingivalis (62,5 %) и A. actinomycetemcomitans (18,75 %). Относительная частота встречаемости других пародонтопа-тогенных видов у больных гингивитом существенно ниже и составляет для P. intermedia - 12,5 %,
T. forsythia и T. denticola - 6,25 %. В ассоциациях пародонтопатогенных бактерий, выделенных при язвенно-некротических формах гингивита и пародонтита у ВИЧ-инфицированных доминируют ассоциации 3-4 видов пародонтопатогенов, чаще всего P. gingivalis, T. forsythia и других видов (P. intermedia и T. denticola).
2. На результаты экспресс-тестирования де-сневой жидкости с помощью ИФА на наличие анти-ВИЧ IgG-антител не оказывают влияния сопутствующая стоматологическая (инфекционный пародонтит, катаральный гингивит) и соматическая патология.
3. Полученные данные позволяют рекомендовать тест-систему «Мультидент» для ПЦР-диагностики и набор реагентов Calypte® HIV-1/2 для иммуноферментного анализа с целью выявления антител к ВИЧ в десневой жидкости с помощью тест-системы для обследования пациентов групп риска.
БИБЛИОГРАФИЧЕСКИЙ СПИСОК
1. Елисеева М.Ю., Царев В.Н., Масихи К.Н., Оси-дак Л.В., Баринский И.Ф., Царева Т.В., Мынбаев О.А. Эффективность вспомогательной иммунотерапии у пациентов с иммунодефицитом и часто болеющих детей: систематический обзор и метаанализ применения инозина пранобекса // Русский медицинский журнал. -2010. - Т. 18. - № 5. - С. 313-320.
2. Кузьмина Э.М., Янушевич О.О. Стоматологическая заболеваемость населения России - М., 2009. -Т.2. - 236 с.
3. Осеева А.О. Механизмы формирования и особенности течения хронического генерализованного паро-донтита у больных ВИЧ-инфекцией: Дис. ...канд. мед. наук. - Саратов, 2014. - 133 с.
4. Соболева Л.А., Шульдяков А.А., Булкина Н.В. Микробный профиль пародонтальных карманов на фоне ВИЧ-инфекции у больных пародонтитом //Современные наукоемкие технологии. - 2012. -№ 8. - С. 37.
5. Позднякова М.Е., Брюно В.В., Чекинева Т.В. К вопросу изменения наркоситуации в России // Конфликты в социальной сфере: сб. материалов VIII Всерос. науч.-практ. конф.; М-во образ. и науки России, Казан. нац. исслед. технолог. ун-т. - Казань : Изд-во КНИИ-ТУ, 2014. - С. 23-30.
6. Покровский В.В., Ермак Т.Н., Беляева В.В., Юрин О.Г. ВИЧ-инфекция: клиника, диагностика и лечение / Под общ. ред. В. В. Покровского. - М.: ГЭО-ТАР МЕДИЦИНА, 2000. - 496 с.
7. Царев В.Н., Николаева Е.Н., Плахтий Л.А. Перспективы применения молекулярно-генетических методов исследований в диагностике пародонтита // Российский стоматологический журнал. - 2002. - № 5. - С. 6-9.
8. Янушевич О.О., Дмитриева Л.А., Грудянов А.И. Пародонтит. XXI век, 2012 - 366 с.
9. Ashimoto A., Chen C., Bakker I., Slots J. Polimerase chain reaction detection of 8 putative periodontal pathogens in subgingival plaque of gingivitis and advanced periodontitis lesions. // Oral microbiol Immunol. - 1996, V. 11. - P. 266-273.
10. Ezzo P.J., Culter C.W. Microorganisms as risk indicators for periodontal disease. Periodontol 2000. -2003. - V.32. - P. 24-35.
11. Le, H., Theilade, E., Jensen, S.B. Experimental gingivitis in man. Journal of Periodontology. - 1965. -V. 36. - P. 177-187.
12. Grande S.R., Imbronito A.V., Okuda O.S., Lotufo R.F.M., Magalhaes M.H.G., Nunes F.D. Herpes viruses in periodontal compromised sites: comparison between HIVpositive and -negative patients // J. Clin. Periodontol. -2008. - Vol. 35. - P. 838 - 845.
13. Mombelli A, Meier C. On the symmetry of periodontal disease. // J Clin Periodontol. - 2001. - 28. -P. 741-745.
14. Scannapieco F.A. Микробиоценоз полости рта // Микробиология и иммунология для стоматологов; пер. с англ. // под ред. Р.Дж. Ламант; под ред. В.К. Леонтьева. - М.: Практическая медицина, 2010. - С. 77-103.
Царев Виктор Николаевич - д-р мед. наук, профессор, заведующий кафедрой микробиологии Московского государственного медико-стоматологического университета,
Ипполитов Евгений Валерьевич - канд. мед. наук, доцент кафедры микробиологии Московского государственного медико-стоматологического университета
© В.Н. Царев, Е.В. Ипполитов, 2014 Статья поступила в редакцию 7 октября 2014 г.
