CC BY
21
метриальных мезенхимных стволовых клеток человека (эМСК), полученных из культуры клеток, выделенных от здорового донора. В четвертой группе (n = 30) эМСК вводили внутриматочно. Пятая группа (n = 10) служила контрольной: в данной группе животным внутриматочно вводили по 0,2 мл PBS в каждый маточный рог. Через 3 эстральных цикла производилось спаривание с одновозраст-ными самцами с последующим наблюдением за наступлением и течением беременности. Вывод из эксперимента осуществлялся через 3 месяца от момента спаривания. Результат оценивался по частоте наступления беременности и числу плодов.
Результаты исследования
При оценке фертильности в группе животных, которым вводился PBS, отмечено, что беременность не наступала в 100 % случаев, что соответствовало требованиям, применявшимся при разработке модели. В группе животных, которым клетки вводились внутривенно, было отмечено восстановление фертильности у 25 % особей, получавших инфузию эМСК и 33 % особей, получавших ККМ. Число плодов составляло в среднем 2,8 ± 1,7 в обеих данных группах. При местном введении суспензии клеток в полость матки, как в группе животных, получавших ККМ, так и в группе, где производилось введение эМСК, наблюдалось восстановление
фертильности у 50 % животных. Число плодов в группе животных, получавших эМСК составило 2,9 ± 1,3, а в группе животных, получавших ККМ, — 2,6 ± 1,5. Таким образом, отмечалась более высокая частота наступления беременности у крыс при местном введении клеточного продукта на основе стволовых клеток как эндометриального, так и костномозгового происхождения по сравнению с таковым при внутривенной инфузии (50 % по сравнению с 25 % в группе, получавшей эМСК (р > 0,05), и 50 % по сравнению с 33 % в группе, получавшей ККМ (р > 0,05)). По частоте наступления беременности у крыс результаты от введения эМСК сопоставимы с аналогичными, полученными при введении ККМ (р > 0,05), что также исключает влияние на результат возможной реакции организма крысы на ксенотрансплантацию.
Выводы
Из полученных данных следует, что эМСК могут оказывать влияние на восстановление структуры и функции эндометрия, сравнимое с таковым, достигающимся при введении клеток костномозгового происхождения. Малая инвазивность при получении эМСК и доказанная безопасность их применения делают эМСК перспективным направлением для использования в широкой клинической практике, в том числе при нарушениях репродуктивной функции, в частности при синдроме Ашермана.
значение соматотропного гормона в лечении бесплодия у женщин со «слабым» ответом яичников на стимуляцию в программах экстракорпорального оплодотворения
© К.В. Объедкова
Санкт-Петербургский государственный университет, медицинский факультет, кафедра акушерства, гинекологии и репродуктологии, Санкт-Петербург, Россия
Актуальность проблемы
До настоящего времени «слабый» ответ яичников на стимуляцию в программах экстракорпорального оплодотворения (ЭКО) остается нерешенной проблемой. Это зачастую приводит пары с бесплодием к отказу от дальнейшего лечения или определяет их выбор в пользу применения донорских ооцитов. Гипотеза о том, что соматотропный гормон (СТГ) стимулирует яичниковый стероидогенез, рост и развитие
фолликулов, а также повышает ответ яичников на стимуляцию гонадотропинами, была выдвинута более 20 лет назад. Несмотря на многочисленные исследования, проведенные с тех пор, вопрос использования СТГ остается спорным.
Цель исследования
Определить значение СТГ в лечении бесплодия у женщин со «слабым» ответом яичников на стимуляцию в программах ЭКО.
Материалы и методы исследования
Проанализированы результаты 50 циклов ЭКО/ИКСИ у женщин со «слабым» ответом яичников на стимуляцию. Прогностический анализ «слабого» ответа яичников на стимуляцию производился на основании болонских критериев (Ferraretti A.P. ESHRE, 2011). В основную группу вошли 25 женщин, которым проводилась контролируемая стимуляция суперовуляции рекомбинантными и/или мочевыми гонадотропинами в программе ЭКО в сочетании с рекомбинантным СТГ и применением антагонистов гонадотропин-рили-зинг-гормона. СТГ использовали ежедневно в вечерние часы с первого дня стимуляции суперовуляции в дозе 4 МЕ подкожно до дня введения триггера овуляции. Была сформирована группа сравнения пациентов (n = 25), стимуляция суперовуляции у которых проводилась по аналогичной схеме без использования СТГ. Всем пациентам, включенным в исследование, посредствам иммунофер-ментного анализа проводили измерение концентрации СТГ, инсулиноподобного фактора роста I (IGF-I) и белка — 3, связывающего инсулиноподобный фактор роста I (IGFBP-3), в сыворотке крови на 2-3-й день спонтанного менструального цикла (МЦ) и в день трансвагинальной пункции фолликулов (ТВП); также производился анализ фолликулярной жидкости (ФЖ) (hGH, IGF-I, IGFBP-3 ELISA, Mediagnost, Германия).
Статистическая обработка данных осуществлялась с использованием непараметрических методов, отношения шансов (OR) его 95 % доверительного интервала (95 % CI); корреляционный анализ проводился при помощи критериев Спирмена (R), Кендалла и гамма.
Результаты исследования
При анализе показателей исходного гормонального статуса пациенток установлено, что концентрация в сыворотке крови фолли-кулостимулирующего гормона на 2-3-й день спонтанного МЦ в основной группе (11,57 (8,38; 15,03) МЕ/л) была достоверно выше по сравнению с группой сравнения (6,9 (6,2; 8,57) МЕ/л) (U = 81, р = 0,001), тогда как концентрация антимюллерова гормона в основной группе (0,5 (0,3; 0,79) нг/мл) была достоверно ниже по сравнению с группой сравнения
(0,73 (0,5; 0,87) нг/мл) (и = 137,5, р = 0,0005). Концентрация СТГ, ГСБ-1 и ГСБВР-3 на 2-3-й день МЦ достоверно не различалась в исследуемых группах.
При анализе показателей стимуляции яичников у пациенток основной группы выявлено достоверное увеличение концентрации СТГ в сыворотке крови в день ТВП (3,74 (2,73; 5,99) нг/мл) по сравнению с 2-3-м днем МЦ (1,83 (1,15; 2,42) нг/мл) (W = 21; р = 0,015), а также достоверное снижение активности ГСБВР-3 в ФЖ (2994,64 (2313,27; 3409,73) нг/мл) и сыворотке крови в день ТВП (2398,03 (2064,07; 2857,61) нг/мл) по сравнению с 2-3-м днем МЦ (4080,08 (3221,38; 4719,53) нг/мл) (Ш = 10, р = 0,003; Ш = 24, р = 0,023 соответственно). Эффективная доза гонадотропинов была достоверно ниже в основной группе (750 (533,3; 1312,5) МЕ) по сравнению с группой сравнения (1375 (862,5; 2962,5) МЕ) (и = 160, р = 0,008), кроме того, длительность стимуляции у пациентов основной группы (8 (7; 10) дней) была достоверно меньше по сравнению с группой сравнения (9 (8; 10) дней) (и = 208, р = 0,043). Количество полученных ооцитов было достоверно выше в основной группе (3 (2; 6)) по сравнению с группой сравнения (2 (1; 3)) (и = 197,5, р = 0,025).
При анализе показателей эффективности эмбриологического этапа программы ЭКО установлено, что количество ооцитов на стадии мейоза II (М11), двупронуклеарных (2р) зигот и морфологически качественных эмбрионов в день переноса в основной группе было достоверно выше по сравнению с группой сравнения (и = 15, р = 0,007; и = 156, р = 0,018; и = 17, р = 0,016 соответственно). В основной группе выявлена прямая корреляционная связь между концентрацией ГСБ-1 в ФЖ и количеством морфологически качественных эмбрионов в день переноса (гамма 0,5, р = 0,048). Кроме того, в основной группе обнаружена прямая корреляционная связь между динамикой изменения концентрации ГСБВР-3 в сыворотке крови на 2-3-й день МЦ и в ФЖ и количеством полученных ооцитов, 2р зигот, морфологически качественных эмбрионов в день переноса (гамма 0,53, р = 0,007; Я = 0,66, р = 0,005; гамма 0,72, р = 0,004 соответственно). В результате проведения программы ЭКО беременность наступила только у пациентов основной группы. Частота насту-
пления беременности на перенос составила 24 %. Вероятность наступления беременности среди пациенток основной группы была достоверно выше, чем среди пациенток группы сравнения (ОЯ = 9,1; 95 % С1 1,034-80,093).
Выводы
Использование СТГ у женщин групп риска по «слабому» ответу на стимуляцию овуляции в циклах ЭКО приводит к увеличению кон-
центрации IGF-I и снижению концентрации IGFBP-3 как в сыворотке крови, так и в ФЖ, тем самым повышая чувствительность яичников в ответ на экзогенное влияние гонадотро-пинов. Применение СТГ в протоколах ЭКО приводит к увеличению количества ооцитов MII, доли 2p зигот, увеличению числа морфологически качественных эмбрионов и, следовательно, повышает перспективы наступления беременности.
роль нарушений лиПидного обмена в патогенезе макросомии плода при наличии сахарного диабета у матери
© К.М. Олькова1, Е.Н. Алексеенкова2, Р.В. Капустин1
1 ФГБНУ «НИИ акушерства, гинекологии и репродуктологии им. Д.О. Отта», Санкт-Петербург;
2 Санкт-Петербургский государственный университет, кафедра акушерства, гинекологии и репродуктологии, Санкт-Петербург
Актуальность проблемы
В настоящее время отмечается неуклонный рост заболеваемости сахарным диабетом (СД) в мировой популяции. Закономерно возрастает число женщин репродуктивного возраста с данной патологией. Известно, что гипергликемия при наличии СД у матери обусловливает развитие макросомии плода и формирование у него симптомокомплекса диабетической фетопатии. Однако имеются сведения о том, что нарушения липидного обмена (ЛО), протекающие тождественно с процессами гипергликемии, могут играть не менее значимую роль в патогенезе развития данных осложнений.
Цель исследования
Уточнить роль нарушений липидного обмена в патогенезе макросомии плода при наличии сахарного диабета у матери.
Материалы и методы исследования
Проведено проспективное, когортное исследование, выделено 4 группы: I группа — беременные с сахарным диабетом 1-й типа (n = 18); II группа — беременные с сахарным диабетом 2-й типа (из них 4 — на инсули-нотерапии) (n = 8); III группа — беременные с гестационным сахарным диабетом (ГСД) (из них 4 — на инсулинотерапии) (n = 21); и IV группа (контрольная) — беременные без нарушений углеводного обмена (n = 4).
Показатели липидного обмена определяли ферментативным методом с помощью биохимического анализатора Konelab 60/60i (Thermo Fisher Scientific, Финляндия). При этом оценивали содержание в крови общего холестерина (ХС), триглицеридов (ТГ), липопротеидов высокой плотности (ЛПВП). Содержание липопротеидов низкой плотности (ЛПНП) и липопротеидов очень низкой плотности (ЛПОНП) определяли по формуле:
ЛПНП, ммоль/л = ХС - ЛПВП - || (ТГ/2,2);
ЛПОНП, ммоль/л = ТГ/2,2.
Статистическую обработку данных проводили с использованием программного обеспечения SPSS V.23 (SPSS: An 1MB Company, США). Различия средних оценивали методом многофакторного дисперсионного анализа (ANOVA) с оценкой 95 % доверительного интервала распределения значений (95 %ДИ). Корреляционный анализ проводили с использованием метода Спирмена (r). Уровень значимости p принимали при 0,05 и менее.
Результаты исследования
Показатели плазменного содержания триглицеридов у беременных исследуемых групп составили: в I группе — 5,32 ммоль/л (95 % ДИ 4,68-6,05), во II группе — 7,1 ммоль/л (95 % ДИ 6,42-7,31), в III группе — 4,68 ммоль/л (95 % ДИ 4,12-4,98), в контрольной группе — 4,12 ммоль/л (95 % ДИ
