CC BY
6УДК 619:616.98:587 Генджиев А. Я., Абакин С. С.
ЗНАЧЕНИЕ КОМПЛЕКСНОЙ ДИАГНОСТИКИ ПРИ ОЗДОРОВЛЕНИИ ХОЗЯЙСТВ КАЛМЫКИИ ОТ ЛЕЙКОЗА КРУПНОГО РОГАТОГО СКОТА
Ключевые слова: лейкоз крупного рогатого скота, вирус лейкоза (BLV), РИД, ИФА, ПЦР, антитела (АТ), генотипирование, эпизоотия, инфекция, гематология, клетки крови, клещи.
Резюме: Исходя из поставленных перед АПК задач по реализации национального проекта, сформировалась необходимость изучения ряда эпизоотологических вопросов по лейкозу крупного рогатого скота в хозяйствах Республики Калмыкия с последующей разработкой и внедрением на данной территории комплексного плана мероприятий по профилактике и ликвидации лейкоза крупного рогатого скота. Особенно актуальным стал поиск высокочувствительных методов для ранней диагностики по выявлению вируса лейкоза крупного рогатого скота не только в крови взрослых животных, но и в крови телят до 6-ти месячного возраста, а также в сборном молоке коров, что позволит ускорить сроки оздоровления хозяйств от лейкоза. Основными методами диагностики лейкоза крупного рогатого скота являются реакция иммунодиффузии в геле агара (РИД) и иммуноферментный анализ (ИФА). Однако они не применимы для молодняка до 6-ти месячного возраста в связи с чем, эта группа животных остается вне плановых исследований. Единственно возможной диагностикой для телят раннего возраста является молекуляр-но-генетический метод полимеразной цепной реакции (ПЦР), поскольку позволяет обнаружить наличие ДНК провируса вируса лейкоза уже у новорожденных телят, что крайне важно для ранней изоляции зараженных животных. Несмотря на отсутствие клинических и гематологических признаков болезни, обнаружение в стаде инфицированных вирусом лейкоза животных должно послужить сигналом для проведения противолейкозных мероприятий. Внедрение противолей-козной программы в условиях сложной обстановки, сложившейся в регионе на фоне длительной предыстории этой патологии среди скота в общественном и индивидуальном секторах содержания животных, требует использования всех имеющихся ресурсов, в том числе административных и ветеринарной службы, при постоянном научном сопровождении.
Введение
BLV является экзогенным ретро-вирусом, и принадлежит к роду Дель-таретровирусы в пределах подсемейства Orthoretrovirinae. Он структурно и функционально связан с человеческим Т-лимфотропным вирусом 1 и 2 (HTLV-1 и ИТЬУ-2), основными клетками-мишенями для BLV являются В-лимфоциты [1].
Прижизненная диагностика является основой противоэпизоотических мероприятий при лейкозе крупного рогатого скота. Специфичность, чувствительность, легкость технического выполнения и низкая стоимость, определяют ее эффективность [2]. Реакция иммунодиффузии с гли-копротеидным антигеном в геле агара является достаточно специфичной и достоверность её результатов не вызывает сомнений. Но с момента постановки реакции до учёта её результатов проходит много времени - 48 часов. Иногда, при повторных исследованиях наблюдается выпадение РИД, что объясняется временным снижением титров антител или технической погрешностью, что крайне редко. Досто-
верность исследований по РИД возрастает при повторных или динамических исследованиях животных, что вполне может гарантировать эффективность противолей-козных мероприятий [3, 4].
В настоящее время заслуживает особого внимания иммуноферментный анализ (ИФА), как ещё один серологический метод прижизненной диагностики лейкоза. Благодаря высокому уровню чувствительности и специфичности, он принимает наступательный характер и широко используется в ветеринарной практике многих стран мира при реализации программы ликвидации лейкоза крупного рогатого скота. Это сравнительно более удобный метод, отличающийся не только специфичностью, но и гибкостью работы (анализ может быть проведен вручную и автоматически). С помощью ИФА раньше и больше выявляют инфицированных животных, так как он регистрирует более низкие величины титров антител [5, 6]. Однако при проведении оздоровительных мероприятий от лейкоза крупного рогатого скота в выборе метода серологических ди-
агностических исследований следует учитывать эпизоотическую напряженность по лейкозу в данном хозяйстве [7, 8]. Метод по-лимеразной цепной реакции (ПЦР) позволяет выявлять провирусную ДНК независимо от возраста и состояния животного. Его использование позволяет разделить животных на здоровых и больных в более ранние сроки, т. е. более эффективно. Важная область применения ПЦР — исследование импортируемого скота, находящегося в карантине, для предотвращения завоза вируса лейкоза из-за рубежа [9, 10].
Цель наших исследований - изучить эффективность диагностических методов контроля лейкоза крупного рогатого скота при оздоровительных мероприятиях в хозяйствах Республики Калмыкия.
Материалы и методы исследований
Вирусоносительство ВЛКРС у коров определялось реакциями иммунодиффу-зии (РИД), ИФА и ПЦР. Серологические исследования проводили при помощи набора реагентов для проведения РИД в агаровом геле производства ФГУП «Курская биофабрика - фирма «Биок»; постановку ИФА - тест-системой производства НПО «Нарвак». Учитывали реакцию на иммуно-ферментном анализаторе АИФР-01 Уни-план с последующим вычислением коэффициента. Динамику титра специфических антител к вирусу лейкоза определяли при помощи последовательных разведений сыворотки крови физиологическим раствором с последующей постановкой РИД и ИФА. Для выделения ДНК использовали наборы реагентов Diatom™ DNA Prep 100 (ООО «Лаборатория Изоген»). Для постановки ПЦР использовали набор реагентов GenPakRDNAPCRtestBLV для обнаружения ДНК возбудителя лейкоза крупного рогатого скота (ООО «Лаборатория Изоген») [5]. На базе молекулярно-гене-тической лаборатории Центра коллективного пользования ФГБОУ ВПО «Калм-ГУ» были проведены детекции провирус-ной ДНК лейкоза КРС. При исследовании клещей выделение ДНК из тканей проводили с использованием набора «Ампли Прайм ДНК-сорб-В». Для амплификации участка ДНК провируса ЛКРС использовали тест-систему ПЦР - комплект реагентов вариант FRT - 50 F (изготовитель ФБУН ЦНИИ эпидемиологии Роспотреб-надзора). ПЦР-амплификацию и детекцию продуктов амплификации проводили с использованием приборов «Real-time», «Rotor-Gene» 6000 («CorbettResearch», Австра-
лия). При анализе результатов амплификации специфического участка ДНК про-вируса лейкоза КРС (Bovineleukosisvirus) использовали программу JOE/YellowRo-tor-Gene 6000 версии 1.7 (build 67) [11]. Для сравнения эффективности двух методов серологической диагностики нами проведено параллельное тестирование животных в РИД и ИФА. Результаты исследований показали, что иммуноферментный анализ позволяет выделять дополнительно до 10-12 % инфицированных ВЛ животных, что является существенным при искоренении вирусной инфекции.
Результаты и обсуждение
Анализ результатов серологических (РИД) исследований с учетом возраста и пола крупного рогатого скота показал определенную особенность. Так, из общей численности 151593 исследованных в РИД животных положительно реагировали 2227 голов, в том числе удельный вес инфицированности коров составил 98,3 %, телок и нетелей 1,1 %, быков и бычков 0,4 %. При этом удельный вес инфицированных коров и нетелей в возрасте 2-4 года составил 28,1 %, а коров 4-6 лет - 70,2 %, что на 42,10 % больше, чем у нетелей и коров. Таким образом, возрастная закономерность проявления лейкоза характеризуется тем, что коровы до 4-х лет являются животными повышенной группы риска, а у телят до 2-х лет при условии пренаталь-ного или постнатального заражения отмечается иммунологическая толерантность. В случае, если телята не инфицированы, то они проявляют устойчивость к заражению. Результаты серологических исследований даны с учетом пола и возраста в разрезе районов (табл.1.).
Гематологическому исследованию подвергаются животные с двух лет и старше, положительно реагирующие в диагностической тест-системе РИД, ИФА и ПЦР. Следует отметить снижение гематологических исследований с 28829 (что составляло 66,17 % охвата исследованиями) в 1988 году до 1850 исследований (при 22,11 % охвата) в 1993 году в связи с увеличением серологических исследований. Гематологический метод, как значимый остается большей частью в индивидуальном секторе, где инфицированность превышала 30 %. Резкое снижение уровня гематологических исследований до 176 голов в год было отмечено в 1996 году. Значение охвата поголовья гематологическими исследованиями и показатель заболеваемости при
Таблица 1. Результаты серологических исследований крупного рогатого _скота различных половозрастных групп на лейкоз _
Наименование района Всего исследовано Положительно реагирующие в РИД В том числе Сдано на убой
Всего, гол. % Телки 0,7-2 года Коровы и нетели Быки и бычки Всего
2-4 лет 4-6 лет
Городовиковский 4151 1132 27,3 10 350 770 2 59
Ики-Бурульский 13940 51 0,3 - 13 38 - 51
Лаганский 5393 373 6,9 3 97 273 - 373
Кетченеровский 24995 47 0,1 - 7 40 - 47
Малодербетовский 16629 114 0,6 - 36 78 - 114
Октябрьский 8402 7 0,08 - 7 - 7
Приютненский 17241 51 0,2 - 9 42 - 51
Сарпинский 8355 57 0,6 - 6 28 3 57
Целинный 11897 201 1,7 - 63 138 - 171
Черноземельский 7522 - - - - - -
Юстинский 11320 87 0,7 - 30 57 - 87
Яшалтинский 7157 67 0,9 12 10 39 6 67
Яшкульский 13816 17 0,1 - 17 - 17
Элиста 775 23 2,9 - 5 18 - 23
ИТОГО: 151593 2227 2,3 25 626 1565 11 1015
этом снизились до 8,2 % до 0,1 % соответственно. Темп прироста заболеваемости на период с 1991 по 1996 гг. составил 93,0 %. Однако с 1997 года наметилась тенденция к повышению гематологических исследований до 799 голов, но одновременно повышается и количество больных животных от 45 до 109 голов. Объем гематологических исследований к 1999 году вырос на 922 единицы. Всего за этот год было выявлено 232 больные коровы, заболеваемость составила 0,58 %. В среднем за весь период исследований значения показателей инфи-цированности и превалентности популяции составляют 7,5 % и 3,5 %. Однако, если учесть, что показатели значений прева-лентности усредняются в целом по республике за счет численности поголовья свободных от инфекции, то значения процента инфицированных от исследованных будут более информативными.
Гематологический метод выявления больных лейкозом животных, в проблеме ликвидации заболевания, оказался для всех районов республики неэффективным. После удаления больных животных из стада через короткие промежутки времени вновь появлялись животные с изменениями крови, характерными для лейкоза. Также лейкоз крупного рогатого скота был широко распространен среди скота сель-
скохозяйственных организаций и хозяйств населения республики. Все это послужило поводом для поиска новых путей оздоровительных мероприятий во всех категориях хозяйствования, связанных со спецификой разведения мясного скотоводства.
Рекомендованные нами оздоровительные мероприятия по лейкозу КРС в республике имеют особенность в связи с технологией разведения животных, когда теленок находится с матерью (подсосный период) на протяжении 7-9 месяцев на пастбище. При такой технологии содержания животных, эпизоотический процесс лейкоза крупного рогатого скота закономерно поддерживается за счет передачи возбудителя больными и инфицированными коровами своему приплоду, т. е. обеспечивается эстафетная передача возбудителя инфекции. Это значит, что возбудитель этой болезни передаётся, преимущественно, вертикальным путём, что объясняет причины стабильного неблагополучия по лейкозу крупного рогатого скота в животноводческих хозяйствах республики. Следует отметить также, что, если неблагополучной по этому заболеванию является племенная ферма, то степень распространения инфекции значительно увеличивается в связи с реализацией племенных животных.
Нами была проведена ПЦР-
диагностика образцов крови животных в хозяйствах Городовиковского района с целью выяснения эффективности диагностических мероприятий и улучшения эпизоотической обстановки района. Предварительно сыворотку крови исследовали в реакции иммунодиффузии, затем провели молекулярный метод (ПЦР-анализ) исследования. Результаты исследований пред-
Молекулярным методом исследования провируса лейкоза крупного рогатого скота выделено присутствие провируса ДНК у 79-ти животных (ПЦР+), что составило 76,6 % встречаемости. У 24-х животных по результатам ПЦР диагностики ДНК провирус не детектируется, что составило 23,3 % от исследованных животных. Сравнительный анализ результатов серологических и молекулярно-биологических исследований показывает, что в КФХ Дем-кин П. В. ПЦР исследованием обнаружено на 2 головы больше животных с про-вирусом ДНК, чем серопозитивных в реакции иммунодиффузии. В п. Шин-Бядл, южный инд. сектор, молекулярный анализ дополнительно выявил одно животное носителя ДНК провируса. В инд. секторе с. Дружное, также обнаружено на 2 носителя ДНК провируса больше, чем животных выявленных по носительству антител. Однако в БАК КГУ гурт Алиева А. М. ПЦР-исследованием выявлено на одно инфицированное животное меньше, чем при серологической диагностике.
Анализ данных по носительству про-вируса ДНК показывает, что процент инфицированных на основании ПЦР-исследований не соответствует проценту РИД-позитивных животных. В 75-ти случаях выявлено совпадение результатов РИД и ПЦР! При этом, ПЦР метод выявил на 4 случая больше носителей ДНК провируса, чем серологическое исследование. Из 6-ти случаев несовпадения серологических и молекулярных методов исследования один РИД-положительный случай ПЦР диагностикой не подтвердился, а в 5-ти случаях
ставлены в табл. 2.
По результатам серологических исследований в реакции иммунодиффузии выявлены антитела к вирусу лейкоза крупного рогатого скота в 75 случаях, что составило 72,8 % встречаемости от числа исследованных. Серонегативными оставались 28 голов или 27,1 % встречаемости от числа исследованных.
выявления ПЦР-положительного случая РИД не выявила антитела к вирусу. ПЦР-исследование выявило на 4 случая больше носителей провируса ДНК. Следовательно, если проводить разделение телочек методом ПЦР на носителей провируса и здоровых в первые 2-3 недели жизни животного, можно оздоравливать хозяйства значительно быстрее. Молекулярный метод позволяет провести раннюю диагностику инфицированности, как взрослых животных, так и молодняка и определить их в категорию откормочных животных. Следовательно, своевременное выявление инфицированных животных с использованием молекулярно-генетической диагностики (ПЦР) позволяет обеспечить оздоровление поголовья животных от данной нозологии.
По результатам проведенного филогенетического анализа на основе гена ро/провируса лейкоза КРС выявлена идентичность изоля-тов 10/5bKALMIKIYA, 10/2dKALMIKI-YA с изолятом 09/5164 ROSTOV (JQ400141) из Ростовской области, а изолята 10/8k KALMIKIYA c изолятом 10/13 KALUGA (JQ400146) из Калужской области (Лиман-ский А. П., 2001). Высокая степень сходства для анализируемых штаммов c международными изолятами в среднем составляет от 97-100 % в зависимости от референс-ной последовательности. Максимальное совпадение выявлено с изолятом M16017_ USA: в случае штаммов 10/8kKALMIKIYA и 10/15sh KALMIKIYA обнаруживается 100 % сходство; для остальных изолятов 10/2d KALMIKIYA, 10/5b KALMIKIYA, 10/2kKALMIKIYA такое совпадение со-
Таблица 2. ^ Результаты серологических и молекулярных исследований
Количество исслед-х, n Наименование хозяйства РИД + РИД ПЦР + ПЦР
35 КФХ Демкин П.В. 31 4 33 2
32 п. Шин-Бядл (южный) инд. сектор 26 6 27 5
21 с. Дружное, инд. сектор 12 9 14 7
15 БАК КГУ гурт Алиева А.М. 6 9 5 10
Итого: 75 28 79 24
ставляет 98-99 % Для обнаружения про-вирусной ДНК лейкоза крупного рогатого скота (ВЦ^провирус) нами были проведены исследования клещей, как естественных резервуаров инфекционных возбудителей, с применением ПЦР с гибриди-зационно-флюоресцентной детекцией. Исследованию подвергались клещи вида Ну-alommascupense (сбор в январе, феврале) и Нуа1оттатаМтаШт (сбор в апреле, мае). Также нами проведены исследования методом ПЦР реального времени на лейкоз крупного рогатого скота 187 проб крови животных, с которых сняли клещей. ПЦР-анализ крови коров на наличие ВЛКРС показал, что имеется связь между частотой встречаемости провируса BLV и количеством коров, положительно реагирующих на вирус. Самая большая частота встречаемости провируса BLV в клещах обнаружена в п. Дружба Городовиковского района, где наблюдается наибольшая инфици-рованность КРС вирусом ВЛКРС в Республике. Таким образом, результаты полученных нами исследований показали, что при инфестации животных клещами существует возможность трансмиссивного пути передачи ВЛКРС. Поэтому в систему противолейкозных мероприятий нами был включен комплекс мер по дезакаризации животных и помещений.
Был разработан план противолейкоз-ных мероприятий на ближайшие 5 лет, где были определены следующие основные подходы:
• Проведение серологических (РИД) исследований коров и нетелей 2 раза в год - весной перед случной кампанией и осенью после осеменения.
• Проведение серологических (РИД) исследований быков и бычков 2 раза в год - до осеменительной и после осе-менительной кампании.
• Исследование молодняка 1 раз в год -весной перед выгоном на пастбища.
• Научно обосновать регламент использования ПЦР в хозяйствах с разной эпизоотической ситуацией по ВЛКРС-инфекции.
• Изучить генотипическое разнообразие, молекулярно-генетическую структуру возбудителя лейкоза крупного рогатого скота, циркулирующего в популяции животных Республики Калмыкия.
• На основании филогенетического анализа определить подвидовую принадлежность изолятов ВЛКРС.
• Вывод без передержки из стада всех
инфицированных животных.
• Продажа, сдача на убой, выгон, размещение на пастбищах и все другие перемещения и перегруппировки животных, реализация животноводческой продукции только с разрешения ветеринарных специалистов.
• Карантинировать в течение 30-ти дней вновь поступающих животных для проведения серологических и других исследований и обработок.
• Ветеринарным специалистам и зоотехникам следить за своевременным мечением животных с соблюдением всех правил асептики и антисептики.
• Включить обязательные мероприятия по обработке животных против клещей и кровососущих насекомых. Главной составляющей оздоровительных мероприятий является получение потомства свободного от вируса лейкоза крупного рогатого скота путем использования репродуктивного потенциала ин-тактных, неинфицированных животных. Решением проблемы может стать только ранняя диагностика лейкоза у молодняка крупного рогатого скота, которая позволит проводить своевременную выбраковку и тем самым ликвидировать затраты на выращивание инфицированного низкопродуктивного теленка или же хотя бы изолировать его от общего стада в целях исключения заражения здоровых животных. Таким образом, предложенная нами методика позволила в первую очередь оздоровить все племенные хозяйства республики. В настоящее время статус благополучия племенных хозяйств подтверждается ежегодными однократными исследованиями (табл. 3).
Индекс неблагополучия, определяющий широту распространения инфекции на территории республики, при отрицательном темпе прироста (-90,2 %) с 2000 по 2014 гг. снижен в 10,2 раза. При этом, если на протяжении 9-ти лет с 2000 по 2008 годы средний показатель индекса неблагополучия был в пределах 0,42, то с 2009 года по 2014 год отмечается снижение данного показателя с 0,33 до 0,04. Средний коэффициент напряженности, учитывающий уровень зараженности ВЛКРС на территории республики, в начале периода исследований был в пределах 0,19 (2001 г.) и к концу периода (2014 г.) удерживается на нулевых значениях. При этом, если с 2005 по 2009 гг. регистрировался спад показателя напряженности эпизоотического процесса с 0,033 до 0,002 соответственно, то в 2010
Таблица 3. Результаты эффективности проводимых мер борьбы с
лейкозом к рупного рогатого скота
Годы Индекс неблагополучия Коэффициент очаговости Коэфициент напряженности Сдано на убой
2000 0,41 1,11 0,014 2291
2001 0,46 3,88 0,199 4057
2002 0,52 3,55 0,110 3338
2003 0,54 3,97 0,121 3009
2004 0,44 2,55 0,034 2926
2005 0,36 2,63 0,033 3149
2006 0,37 1,04 0,003 2476
2007 0,33 2,16 0,006 2302
2008 0,41 0,53 0,000 2227
2009 0,33 1,28 0,002 2910
2010 0,17 11,4 0,035 2403
2011 0,20 4,74 0,004 2438
2012 0,14 9,15 0,006 2833
2013 0,09 4,33 0,000 1799
2014 0,04 1,31 0,000 1100
среднее 0,32 3,58 0,04 2 617
значение
темп -90,2 18,1 -99,85 -51,9
прироста
году вновь отмечается повышение этих же значений до уровня 0,035 с последующим снижением показателя напряженности до нулевых значений. Объясняется такая ситуация увеличением охвата поголовья диагностическими исследованиями в республике к 2010 году и усилением противо-лейкозных мероприятий к концу периода исследований. Также отмечается снижение показателей коэффициента очаговости с 3,8 в 2001 году до 1,3 в 2014 году, при этом темп прироста показателей снизился, но еще остается в пределах положительных значений (18,1). Однако аналогично показателям коэффициента напряженности в 2010 году здесь также отмечается повышение коэффициента очаговости до уровня значений 11,4 с последующим понижением данных значений, что также связано с по-
вышением диагностических исследований, выявляемостью и ликвидацией инфицированных и больных животных. Применение ПЦР в комплексе противолейкозных мероприятий обеспечивает более раннее и полное выявление зараженных животных и сокращает сроки оздоровления стада.
Выводы
В результате проведенной нами работы, достигнуто стойкое снижение показателей неблагополучия стад при отрицательном темпе прироста коэффициента напряженности (- 99,8). В 2013 и 2014 году отмечаются нулевые значения коэффициента напряженности, что подтверждает установление благополучия в хозяйствах Республики Калмыкия по лейкозной инфекции.
Библиографический список:
1. Сюрин В. Н. Лейкоз крупного рогатого скота / В. Н. Сюрин, А. Я. Самуйленко, Б. В. Соловьёв, Н. В. Фомина // Книга: «Вирусные болезни животных». - М.: ВНИТИБП. - 1998. - С. 383-406.
2. Бурба Л. Г Диагностика лейкозов сельскохозяйственных животных: монография / Л. Г Бурба // - М.: Колос, 1983. - С. 31-103.
3. Гулюкин М. И. Обзор эпизоотической ситуации по лейкозу в РФ / М. И. Гулюкин // Доклад на координационном совещании ВИЭВ. - Москва, 2015. - 17 с.
4. Павленко С. Изучение возможности выявления носительства ВЛКРС у телят 6-месячного возраста / С. Павленко, А. Говдин, А. Миролюбова // Международный сельскохозяйственный журнал. - № 4. - 2002. - С. 53-58.
5. Абакин С. С. Новые подходы в диагностике и оздоровлении стад от вирусов лейкоза и иммунодефицита крупного рогатого скота / С. С. Абакин, С. В. Криворучко // Ветеринарная патология. - 2013. - № 1 (43). - С. 63.
6. Егоров А. М. Теория и практика иммунофер-
ментного анализа / А. М. Егоров и др. // - М.: Высшая школа, 1991. - 78 с.
7. Абакин С. С. О защите племенного поголовья крупного рогатого скота от инфекционных болезней в хозяйствах Ставропольского края / С. С. Абакин, Т. Л.Красовская // Сборник научных трудов Всероссийского научно-исследовательского института овцеводства и козоводства. -2014. Т. 2. - № 7. - С. 335-340.
8. Абакин С. С. Лейкоз крупного рогатого скота и овец на Ставрополье: монография / С. С. Аба-кин. - Ставрополь, 2014. - 312 с.
9. Пономаренко Д. Г. Лейкоз в структуре основных инфекционных патологий крупного рогатого скота Российской Федерации, современ-
ная эпизоотическая ситуация по лейкозу КРС в Ставропольском крае / Д. Г. Пономаренко, С. С. Абакин, Е. А. Борщев // 72-я научно-практическая конференция СтГАУ Сборник научных трудов. - Ставрополь. - 2008. - С. 109-111.
10. Противоэпизоотические мероприятия при лейкозе крупного рогатого скота в фермерских и личных подсобных хозяйствах граждан: рекомендации / сост. М. И. 1улюкин [и др.] - Москва, 2007. - 14 с.
11. Гулюкин М. И. Генотипирование изоляторов ВЛКРС, распространенных на территории Республики Калмыкия / М. И. Гулюкин, Л. А. Иванова, О. Б. Генджиева, Н. Г. Козырева // Ветеринария Кубани. - 2012. - № 4. - С. 4-7.
References:
1. Syurin V N. Lejkoz krupnogo rogatogo skota [Cattle leukemia] / VN. Syurin, A. YA. Samujlenko, B. V Solov>yov, N. V Fomina // Kniga: «Virusnye bolezni zhivotnyh». - M.: VNITIBP - 1998. - S. 383-406.
2. Burba L. G. Diagnostika lejkozov sel>skohozyajstvennyh zhivotnyh [Diagnosis of farm animal leukemias]: monografiya / L. G. Burba // - M.: Kolos, 1983. - S. 31-103.
3. Gulyukin M. I. Obzor ehpizooticheskoj situacii po lejkozu v RF [Overview of the epizootic situation on leukemia in the Russian Federation] / M. I. Gulyukin // Doklad na koordinacionnom soveshchanii VIEHV - Moskva, 2015. - 17 s.
4. Pavlenko S. Izuchenie vozmozhnosti vyyavleniya nositel>stva VLKRS u telyat 6-mesyachnogo vozrasta [Studying the possibility of identifying VLKRS carriage in calves of 6 months of age] / S. Pavlenko, A. Govdin, A. Mirolyubova // Mezhdunarodnyj sel>skohozyajstvennyj zhurnal. - № 4. - 2002. - S. 53-58.
5. Abakin S. S. Novye podhody v diagnostike i ozdorovlenii stad ot virusov lejkoza i immunodeficita krupnogo rogatogo skota [New approaches in the diagnosis and rehabilitation of herds from viruses of leukemia and immunodeficiency of cattle] / S. S. Abakin, S. V. Krivoruchko // Veterinarnaya patologiya. - 2013. - № 1 (43). - S. 63.
6. EgorovA. M.Teoriya i praktika immunofermentnogo analiza [Theory and practice of enzyme immunoassay] / A. M. Egorov i dr. // - M.: Vysshaya shkola, 1991. - 78 s.
7. Abakin S. S. O zashchite plemennogo pogolov>ya krupnogo rogatogo skota ot infekcionnyh boleznej v hozyajstvah Stavropol>skogo kraya [On the protection of breeding livestock of cattle from
infectious diseases in the farms of the Stavropol Territory] / S. S. Abakin, T. L.Krasovskaya // Sbornik nauchnyh trudov Vserossijskogo nauchno-issledovatel>skogo instituta ovcevodstva i kozovodstva. - 2014. T. 2. - № 7. - S. 335-340.
8. Abakin S. S. Lejkoz krupnogo rogatogo skota i ovec na Stavropol>e [Leukemia in cattle and sheep in the Stavropol region]: monografiya / S. S. Abakin. -Stavropol>, 2014. - 312 s.
9. Ponomarenko D. G. Lejkoz v strukture osnovnyh infekcionnyh patologij krupnogo rogatogo skota Rossijskoj Federacii, sovremennaya ehpizooticheskaya situaciya po lejkozu KRS v Stavropol>skom krae [Leukemia in the structure of the main infectious pathologies of cattle in the Russian Federation, the current epizootic situation of cattle leukemia in the Stavropol Territory] / D. G. Ponomarenko, S. S. Abakin, E. A. Borshchev // 72-ya nauchno-prakticheskaya konferenciya StGAU. Sbornik nauchnyh trudov. - Stavropol>. - 2008. - S. 109-111.
10. Protivoehpizooticheskie meropriyatiya pri lejkoze krupnogo rogatogo skota v fermerskih i lichnyh podsobnyh hozyajstvah grazhdan [Anti-epizootic measures for cattle leukemia in farms and private farms of citizens]: rekomendacii / sost. M. I. Gulyukin [i dr.] - Moskva, 2007. - 14 s.
11. Gulyukin M. I. Genotipirovanie izolyatorov VLKRS, rasprostranennyh na territorii Respubliki Kalmykiya [Genotyping of insulators VLKRS, common on the territory of the Republic of Kalmykia] / M. I. Gulyukin, L. A. Ivanova, O. B. Gendzhieva, N. G. Kozyreva // Veterinariya Kubani. - 2012. - № 4. - S. 4-7.
Gendzhiev A. Ya., Abakin S. S.
THE IMPORTANCE OF COMPLEX DIAGNOSTICS FOR THE TREATMENT OF THE REPUBLIC OF KALMYKIA FROM BOVINE LEUCOSIS
Key Words: cattle leucosis, bovis leucosis virus (BLV), RID, ELISA, PCR, antibodies, genotyping, epizootia, infection, hematology, blood cells, ticks.
Abstract: To implement a national project to increase cattle production, it is necessary to work out the issue of bovine leucosis in the Republic of Kalmykia. It is also necessary to develop and introduce in the republic an action plan for the prevention and elimination of bovine leucosis. The search for methods of early diagnosis of bovine leucosis virus, not only in the blood of adult animals, but also in the blood of calves up to 6 months of age, as well as in milk is especially relevant. This will speed up the recovery of farms from leucosis. The main methods of diagnosis of bovine leucosis are the immunodiffusion reaction and enzyme immunoassay. However, they do not apply to calves up to 6 months of age. The only possible diagnosis for calves of an early age is the molecular genetic method of the polymerase chain reaction (PCR), which allows DNA detection of leucosis provirus already in newborn calves, which is extremely important for the early isolation of infected animals. Despite the absence of clinical and hematological
signs of the disease, the detection of leucosis infected animals in the herd should serve as a signal for anti-leucosis measures. The implementation of the anti-leucosis program requires the use of all available resources, including administrative and veterinary services, with constant scientific support.
Сведения об авторах:
Генджиев Александр Ялмтаевич, директор центра коллективного пользования «БИО-ВЕТ» федерального государственного бюджетного образовательного учреждения высшего образования ФГБОУ ВО «Калмыцкий государственный университет им. Б. Б. Го-родовикова»; д. 11, ул. Пушкина г. Элиста, Республика Калмыкия, Российская Федерация, 358000; тел.: +7(961) 542 24 68; e-mail: biovet08@bk.ru
Абакин Сергей Стефанович, канд. вет. наук, доцент, ведущий научный сотрудник лаборатории инфекционных, незаразных и паразитарных болезней Всероссийского научно-исследовательского института овцеводства и козоводства - филиала федерального государственного бюджетного научного учреждения ФГБНУ «Северо-Кавказский федеральный научный аграрный центр»; : д. 15, пер. Зоотехнический, г. Ставрополь, Россия, 355017; тел.: +7(962) 448 43 35, e-mail: abakins@yandex.ru
Author affiliation:
Gendzhiev Alexander Yalmtayevich, director of the center of collective use «BIOVET» of the Federal state budgetary educational institution of higher education (FSBEI HE) «Kalmyk State University named after B. B. Gorodovikov"; house 11, Pushkin str., Elista city, Republic of Kalmykia, Russian Federation, 358000; phone: +7 (961) 542 24 68; e-mail: biovet08@bk.ru
Abakin Sergey Stefanovich, Ph. D. in Veterinary Medicine, Associate Professor, Leading Researcher of the Laboratory of Infectious, Non-communicable and Parasitic Diseases of the All-Russian Research Institute for Sheep and Goat Breeding - a branch of the federal state budgetary scientific institution (FSBSI) «North Caucasus Federal Scientific Agrarian Center»; house 15, Zootechnical lane, Stavropol city, Russia, 355017; phone: +7 (962) 448 43 35; e-mail: abakins@yandex.ru
УДК 619:616.98:579.842(470.61) ГРНТИ 68.41.35
Торопыно А. В., Шевченко А. А., Шевченко Л. В., Черных О. Ю., Зеркалев Д. Ю., Каратунов В. А.
КЛИНИЧЕСКИЕ ПРИЗНАКИ И ПАТОМОРФОЛОГИЧЕСКИЕ ИЗМЕНЕНИЯ ПРИ ЭШЕРИХИОЗЕ ТЕЛЯТ
Ключевые слова: эшерихиоз, телята, клинические признаки, патологоанатомические изменения, острое, сверхострое течение, диарея, колостральные антитела, биохимический анализ.
Резюме: Наблюдали различные формы проявления и течения эшерихиоза у телят: энтеритную форму болезни острое течение, характеризующуюся отсутствием бактериемии, сверхострое течение при отсутствии выраженной клинико-патоморфологической картины. Из клинических признаков отмечали депрессию, взъерошенность шерсти, наличие кашицеобразного кала. В крови отмечается гипопротеинемия. При недостатке микроэлементов у телят происходит изменение данного вида обмена: в крови снижается уровень белка, увеличивается содержание гамма-глобулинов при одновременном снижении альбуминов, повышается щелочная фосфатаза. Повышение активности аспартатаминотрансферазы (АСТ) и аланинаминотрансферазы (АЛТ) в сыворотке крови наблюдается при заболеваниях, связанных с разрушением клеток, заболева-
