CC BY
23
БИОТЕРАПИЯ
ментальным животным использовался 16-й пассаж штамма медленнорастущей опухоли печени, полученного в ГУРОНЦим. H.H. БлохинаРАМН. Вакцинацию проводили дважды, с 12-ным интервалом, внутрибрюшин-но в дозе 0,1 мл и 0,3 мл/мышь. Перевивку проводили через 7 дней после последней вакцинации, когда полностью сформирован иммунитет. Контролем служили не-вакцинированные мыши с перевитыми опухолями. Эффект вакцинации оценивали по срокам появления первых опухолевых узелков, торможению роста опухолевого узла и изменению продолжительности жизни.
Первые узелки на месте перевивки у вакцинированных мышей появились несколько позже (процент увеличения времени - 5 %), однако различия между опытной и контрольной группой статистически не зна-
чимы. Средний объём опухолевого узла у вакцинированных мышей был меньше, чем у невакцинирован-ных. Достоверные различия по объёму опухолей отмечались в 8 из 11 измерений эксперимента. Недостоверные различия наблюдались в последние сроки измерения, когда в живых оставались единичные животные. У вакцинированных мышей наблюдалось некоторое снижение средней продолжительности жизни (8 %), однако эти различия по сравнению с невакцинирован-ными животными статистически не значимы.
Анализ полученных данных показал, что введение вакцины «Стрептоевак-1» оказывает тормозящее действие на объём опухолевых узлов перевивной опухоли печени мыши, не оказывая влияния на время появления первых узелков и продолжительность жизни.
ЗНАЧЕНИЕ ИММУНОГИСТОХИМИИ
ДЛЯ ОЦЕНКИ СТЕПЕНИ ЗЛОКАЧЕСТВЕННОЙ
ТРАНСФОРМАЦИИ ВОРСИНЧАТЫХ ОПУХОЛЕЙ
A.B. Игуменов, И.Г. Гататуллин, С.В. Петров Казанская государственная медицинская академия Казанский государственный медицинский университет Городская клиническая больница №1, Тольятти
Цель исследования. Выявить значение тканевых биомаркеров р53, Кі-67, РЭА для оценки степени злокачественной трансформации ворсинчатых опухолей.
Материалы и методы. Исследованы иммуногистохимически 43 препарата ворсинчатых аденом толстой кишки. В исследование включалась экспрессия раково-эмбрионального антигена с помощью МКАТ клона 12-140-10 (фирма ІМоуосазІта, Великобритания) к белку СО 66е или раково-эмбриональному антигену (РЭА), онкобелка гена р53 с помощью МКАТ клона ЕЮ7 (фирма Коуосаэ^а) к мутантному белку гена - супрессора р53 и маркера пролиферации Кі-67 с помощью МКАТ клона МІВ-1 (фирма ОакоСу1:ота1;іоп,Дания) к ядерному белку Кі-67. Системами визуализации служили наборы ЬБАВ2 (БАКО) и Novostain (ІЧоуоСазІха). В качестве негативного контроля срезы инкубировали с нормальной сывороткой животного,от которого были получены первые антитела, а также с РВБ. Позитивным контролем служила нормальная ткань слизистой оболочки кишки, а также ткань аденокарцином различных локализаций (молочной железы, желудка, легкого).
Результаты. Антитела к РЭА в ворсинчатых полипах окрашивали только апикальную часть эпите-
лия ворсинок. В ворсинчатых полипах средний индекс Кл-67 (количество позитивно окрашенных клеток) составил 5,5±0,38 %. При диспластических изменениях в эпителии интенсивность пролиферации усиливалась, и индекс пролиферации составлял 12,1 ±0,45 %. Экспрессия мутантного белка гена р53 была негативной в 8 и позитивной в 35 наблюдениях ворсинчатых полипов. Кл-67-позитивные ядра опухолевых клеток обнаружены во всех клетках неопластических желёз, независимо от степени дифференцировки. Средний индекс Ю-67 в опухоли составил 62,5±2,78 %. Раково-эмбриональный антиген в 80 % наблюдений выявлялся в клетках ярко, умеренно - в 20 %. В подавляющем числе наблюдений колоректального рака - в 80 % - выявлена яркая экспрессия мутантного белка гена р53. Реакция носила характер равномерного окрашивания всех ядер клеток опухоли и не зависела от степени дифференцировки опухоли.
Выводы. Мутация гена р53 свидетельствует о переходе ворсинчатой аденомы толстой кишки в рак; экспрессия РЭА прямо пропорциональна степени дифференцировки колоректального ворсинчатого новообразования; при диспластических изменениях в эпителии ворсинчатых аденом нарастает интенсивность пролиферации (индекс Кл-67).
РОССИЙСКИЙ БИОТБРАПЕВТИЧЕСКИЙ ЖУРНАЛ
№2/томЗ/2004
