CC BY
47
© Щербакова Ю. В., Смоляшнов Б. В.
УДК 577.17:591.16:612.62
Щербакова Ю. В., Смолян'шов Б. В.
ЗМ1НА Р1ВНЯ СТЕРО1ДНИХ ГОРМОН1В ЗАЛЕЖНО
В1Д ФАЗИ ЕСТРАЛЬНОГО ЦИКЛУ У К1ШОК
Р1ЗНИХ В1КОВИХ ГРУП I ПОР1Д
Одеський державний аграрний ушверситет (м. Одеса)
Дана робота е фрагментом науково-досл1дних роб1т кафедри ф1зюлоги, б1ох1мИ та м1кроб1ологИ ветеринарного факультету Одеського державного аграрного уыверситету - «Взаемозв'язок репро-дуктивно! та 1мунно1 системи в орган1зм1 тварин та удосконалення метод1в 1мунокорекцИ» (№ державно! реестрацИ 0115 и 002661; супровщний лист № 01-19/01-334 вщ 12.03.2015 р.).
Вступ. На сьогодн досконально вивчен1 особли-вост1 прот1кання статевих цикл1в у багатьох тварин
[2.5]. Досл1джено морфолог1чн1 зм1ни в репродук-тивних органах самок, а так само р1вень статевих гормоыв в р1зн1 фази циклу. Що ж стосуеться осо-бливостей статево! цикл1чност1 домашн1х тварин, то в даний час це питання вивчено недостатньо. У зв'язку з1 значним збтьшенням популяци домаш-н1х тварин, все б1льше проявляеться штерес до ви-вчення ф1з1олог1чних особливостей статевих цикгмв у к1шок I собак. Особливо цкавим е вивчення стате-вого циклу у кшок, так як цей вид домашых тварин найменш вивчений в даний час [2,4].
Середнм в1к статевого дозр1вання у домашньо! к1шки вар1юе. У норм1 самка може досягти статево! зр1лост1 не ран1ше, н1ж в 4 м1сяц1 I не п1зн1ше, н1ж через 18 мюяц1в, але в б1льшост1 випадк1в першм ознаки статево! активност1 проявляються в 6-9 мюя-ц1в. Естральний цикл у юшок мае сезонний характер (хоча бувають винятки) I багато в чому схожий з циклом таких ссавц1в, як кролики, норки I тхори, особливо в тому, що стосуеться шдукци овуляцп. До-сягнення статево! зр1лост1 залежить вщ пори року I, як правило, вщбуваеться в той час, коли тривалють св1тлового дня збтьшуеться [1,5].
За в1дсутност1 ваптност еструс у к1шок поновлю-еться кожн1 2-3 тижн1 навесн1, вл1тку I восени. При утриманн1 в прим1щенн1 з1 штучним осв1тленням, особливо якщо св1тло горить I вноч1, пер1одичн1сть циклу може проявлятися незалежно вщ пори року, в таких випадках т1чка у к1шок спостер1гаеться I взим-ку [1]. Перюд еструса характеризуеться максималь-ним р1внем естроген1в, що виробляються фолкула-ми. При вщсутност в'язки т1чка поновлюеться кожн1 10-14 дн1в протягом всього репродуктивного сезону. Однак, у деяких тварин цикли розвитку фолкугмв слщують один за 1ншим без пром1жюв [4]. У цьому випадку концентрац1я естрогену не знижуеться, I юшка може демонструвати постмний еструс. Початок анеструса зб1гаеться з1 скороченням св1тлового дня або штучного осв1тлення до 4-6 годин на добу
[3.6]. Таким чином, за останнм час створено базу
даних, що стосуються взаемозв'язку повед1нкових I ендокринних зм1н, що в1дбуваються в орган1зм1 к1шок протягом фол1кулярно! I люте!ново! фази п1сля стерильно! або фертильно! в'язки, п1д час ваптност та в п1сляпологовому пер1од1. Однак в знаннях про репродуктивну ф1зюлопю та ендокринолог1ю все ще юнують питання, як1 потребують подальших досл1-джень.
Метою нашого досл1дження було вивчити взаемозв'язок р1вня стеро!дних гормоыв в кров1 к1шок I морфометричних показниюв внутр1шн1х репродуктивних орган1в самок залежно вщ фази естрального циклу I породних особливостей.
Об'ект I методи дослщження. Досл1дження проведен! на 25 породистих (абисинська, с1амська, египетський мау) I 30 безпородних кл1н1чно здо-рових к1шок у вщ1 в1д 3 до 12 мюяц1в. Тварини були розбит1 на дв1 в1ков1 групи 3-6 м1сяц1в I 7-12 мюяц1в. К1шкам проводили оварюпстеректомю у вщповщ-ност1 з ус1ма вимогами до даного х1рург1чного втру-чання. К1шкам натщесерце в1дбирали венозну кров, центрифугировали I сироватку заморожували. Мор-фометричн показники гонад визначали протягом години пюля отримання внутр1шн1х статевих орган1в самок. В яечниках пщраховували к1льк1сть фол1кул1в р1зного д1аметру I жовтих т1л, I залежно вщ цього судили про фазу статевого циклу. Зразки сироватки кров1 одночасно розморожували I визначали кон-центрац1ю естрад1олу, прогестерону I кортизолу за допомогою 1ФА тест систем ф1рми РЯС (США) вщ-пов1дно до 1нструкц1!. Р1вень гормоыв вим1рювали на м1кропланшетному 1муноферментному анал1затор1 1_аЫ1пе - 022 (Австр1я). Отриман дан1 оброблялися за допомогою стандартних статистичних функц1й Ехе1 програми МюговоАОАссе.
Проведення експерименту зд1йснювалось 1з дотриманням принцип1в б1оетики, що викладен1 у Хельсинсьюй декларац1! Всесв1тньо! медично! асоц1-ац1! про гуманне ставлення до тварин, а також згщно до Закону Укра!ни «Про захист тварин вщ жорстоко-го поводження» вщ 15.12 2009 р. № 1759-^ та «За-гальних етичних принцип1в експеримент1в на твари-нах» (Ки!в, 2001).
Результати досл1дження та 'Гх обговорення. В1домо, що к1льк1сть фол1кул1в визначаеться фазою статевого циклу (табл. 1). У безпородних юшок з першо! групи у в1ц1 3-6 мюяц1в к1льк1сть др1бних фо-л1кул1в d<1 мм було на 19-33% менше н1ж у породистих кшок в фол1кулярну фазу статевого циклу. В ц1-лому, як у породистих так I безпородних кшок у вщ1
Таблиця 1.
Ктькють i розмiри фолiкулiв в яечниках кiшок в рiзному функцiональному станi
Групи тварин Фаза статевого циклу К!льк!сть фолкул!в d<1 мм Ктькють фол!кул!в d=1-2 мм Ктьюсть фолкул!в d>3 мм
правий л!вий правий л!вий правий л!вий
3-6 мю. безпородш фолкулярна 12,30+1,40 11,90+0,87 3,10+1,43 3,15+1,12 1,53+0,32 2,09+0,74
люте!нова 11,90+1,51 9,71+2,17 1,57+0,59 2,10+1,24
3-6 мю. породист! фол!кулярна 16,41+1,1*3 14,22+1,0*9 3,13+1,30 3,10+1,24 3,42+0,65* 3,21+0,58*
люте!нова 10,97+1,16 9,64+1,98 1,60+0,66 2,13+1,11
7-12 мю. безпородн1 фолкулярна 4,95+1,70 4,53+1,49 3,68+0,98 3,06+0,63 3,27+0,89 3,32+0,71
люте!нова 6,45+1,54 5,60+1,47 2,40+0,95 2,25+0,66 1,54+0,73 1,52+0,44
7-12 м1с. породист! фол!кулярна 5,05+1,14 4,98+1,02 5,23+0,87* 5,40+0,56* 4,48+1,12* 4,91+1,08*
люте!нова 6,83+1,49 6,07+1,81 4,47+0,83* 4,62+0,61* 2,87+0,98 2,90+0,86
Примiтка. * — для р<0,05.
3-6 мюя^в дрiбнi фолiкули е домiнуючими в загаль-нiй кiлькостi фолiкулiв. У лютешову фазу ця кiлькiсть суттево не вiдрiзнялася. Так само не спостеркалося вiдмiнностей в кiлькостi фолкутв середнього дiа-метра мiж породистими i безпородними кiшками у вМ 3-6 мiсяцiв. Кiлькiсть великих фолкутв d>3 мм у породистих кшок було значно вище нiж у безпо-родних. Так, в фол^лярну фазу у породистих кiшок великих фолiкулiв було в 1,53-2,23 рази бтьше. Цей факт, швидше за все пов'язаний з тим, що в групу породистих тварин увмшли в основному представ-ники схщно! групи, для яких характерне бтыш ранне статеве дозрiвання. Мiж породистими i безпородними кiшками в вц 7-12 мiсяцiв також спостеркають-ся вiдмiнностi в чиселыностi фолiкулiв. Так, кiлыкiсты дрiбних фолiкулiв не залежиты вiд породних особли-востей i фази статевого циклу. У той же час i в фо-лiкулярну i в лютешову фазу спостеркаеться значне збiлышення юлькост фолiкулiв середнього дiаметра у породистих кшок. У фолiкулярну фазу у породистих кшок 1х в 1,42-1,76 рази бтыше ыж у безпород-них, а в лютешову в 1,86-2,05 рази.
Ктькють фолкутв великого дiаметра d>3 мм у породистих кшок на 37-47% бтьше ыж у безпород-них в фолкулярну фазу. Швидше за все, цей факт пов'язаний з утриманням породистих кшок виключ-но в квартирних умовах i як наслщок вiдсутнiстю впливу на статевий цикл довжини св^лового дня i температури.
У зв'язку з виявленими законо-мiрностями у вiдмiнностi морфо-метричних показниюв внутрiшнiх репродуктивних органiв самок ста-новить iнтерес дослiдження концен-трацiI стеро1дних гормонiв в кровi кiшок залежно вiд фази статевого циклу (табл. 2). Концентра^я естрадюлу у кiшок у вц 3-6 мiсяцiв не вiдрiзнялася мiж породистими i безпородними кiшками i перебу-вала в фiзiологiчних межах норми. Так само не спостеркаеться досто-вiрних вiдмiнностей в концентраци естрадiолу мiж фазами статевого циклу. У той же час у кшок з друго! вiковоI групи 7-12 мюя^в у фол^-
лярну фазу концентра^я естрадiолу стрiмко зрос-тае.
Це свiдчиты про те, що юшки досягли статево! зр^ лостi i у всiх представниюв цiеI групи спостерiгаетыся чiтка диференща^я на статевi фази. У породистих кшок з групи 7-12 мюя^в концентра^я естрадiолу на 64% вище ыж у безпородних в фол^лярну фазу. Це явище пов'язане з тим, що у породистих кшок з раным статевим дозрiванням еструс проткае бiлыш виражено i активно. Так само таке збтьшення в концентраци естрадюлу корелюе i з тим фактом, що у породистих кшок спостерiгалася бiлыша ктькють фолiкулiв великого дiаметру. Цiкавим е той факт, що у породистих кшок в лютешову фазу рiвены естрад^ олу ютотно не знизився в порiвняннi з фолiкулярною фазою. У той час як у безпородних кшок вш знизився в 3,67 рази. Така вщмшнють пов'язана з тим, що у деяких кшок хвилi фолiкулярного росту слщують буквально одна за одною, таю тварини постмно де-монструють поведiнковий еструс. Даний феномен е характерною особливютю деяких порiд (таких, як Ыамська, абiссiнсыка). За рiвнем прогестерону не спостерiгалося iстотних вщмшностей мiж кiшками рiзних порiд в груп 3-6 мiсяцiв. У кшок у вМ 7-12 мiсяцiв вже яскраво виражена змша в концентраци прогестерону в залежност вiд фази циклу. Так, у безпородних кшок концентра^я прогестерону зросла в 4,22 рази в лютешову фазу у порiвняннi з фол^ляр-
Таблиця 2.
Концентращя гормонiв в кровi кiшок в рiзнi фази статевого циклу
Групи тварин Фаза статевого циклу Естрад!ол, пг/мл Прогестерон, нг/мл Кортизол, нмоль/л
3-6 мю. фолкулярна 20,42+2,16 0,22+0,09 65,14+2,47
безпородш люте!нова 19,12+1,98 0,98+0,10 56,17+1,19
7-12 мю. фол!кулярна 68,14+3,23 4,64+1,18 101,75+2,98
безпородш люте!нова 18,56+1,57 19,60+1,23* 112,53+2,15
3-6 мю. фолкулярна 21,16+2,12 0,38+0,06 55,15+2,13
породист! люте!нова 18,75+2,46 0,72+0,13 47,13+1,11
7-12 мю. фол!кулярна 112,41+3,67* 5,16+0,93* 98,34+0,79
породист! люте!нова 75,10+3,12* 6,67+1,71* 100,43+1,15
Примiтка. * — для р<0,05.
ною. Це свщчить про те, що у кшок сформувалися повноцшы жовтi тiла, якi пiдтримують piBeHb прогестерону на досить високому рiвнi. Так само, мабуть, це свщчить про результати у в'язанн даних кшок. У породистих кшок, рiвень прогестерону в лютешову фазу ютотно не збiльшився в порiвняннi з фол^-лярною, в той час як рiвень естрадiолу залишився як i ранiше високий. Це свщчить про те, що жовт тта функцiонально не активнi i не виробляють прогестерон, внаслщок чого вiдразу ж настае нова фол^-лярна фаза. За рiвнем кортизолу не виявленi змiни мiж породистими i безпородними кiшками. Концен-трацiя кортизолу залишаеться в межах фiзiологiчних норм, вiдзначаеться тенденцiя до збтьшення його концентрацп в мiру дорослiшання кiшок.
Висновки
1. У породистих кшок в фолiкулярну фазу кть-кiсть великих фолiкулiв d>3 мм i фолiкулiв серед-нього дiаметра d=1-2 мм бiльше, ыж у безпородних
кiшок, данi вщмшност характернi для кiшок у вц 7-12 мiсяцiв. Не встановленi суттевi морфометричнi вiдмiнностi для кiшок у вМ 3-6 мiсяцiв.
2. Концентра^я статевих гормонiв не завжди в^ дображае фазу статевого циклу, у породистих кшок у вiцi 7-12 мюя^в рiвень естрадiолу залишаеться високим як у фолкулярну, так i в лютешову фазу, а у безпородних кшок у вц 7-12 мюя^в рiвень прогестерону в лютешову фазу вище в 2,93 рази, ыж у породистих.
3. Не вщзначаеться кореляцiя мiж концентрацiею кортизолу в кровi кiшок рiзного вку i фазою статевого циклу, а так само породною приналежнютю.
Перспективи подальших дослiджень. Нада-лi плануеться вивчення впливу гормонiв гiпофiзу, а саме ФСГ, на дозрiвання антральних фолiкулiв пiд час проеструсу. Також актуальним е вивчення за-лежностi концентраци ФСГ та естрадюлу пiд час проеструсу та еструсу.
Лiтература
1. Banks D.H. Luteinizing hormone release in the cat it response to coitus on consecutive days of estrus / D.H. Banks, G.Y Stabenfeld // Biology of Reproduction. - 1999. — № 26. - Р. 603-611.
2. Burke T.J. Feline reproduction / T.J. Burke // Veterinary Clinics of North America. - 2006. — № 6. — Р. 317-321.
3. Concannon P. Reflex L. H. release in estrous cats following single and multiple copulations / P. Concannon, B. Hodson, D. Lein // Biology of Reproduction. — 2001. - № 23. - Р 111-117.
4. Goodrowe K.L. Reproductive biology of the domestic cat with special reference to endocrinology, sperm function and in-vitro fertilization / K.L. Goodrowe, J.G. Howard, P.M. Schmidt, D.E. Wildt // Journal of Reproduction and Fertility Supplement. - 1993. - № 39. - Р. 73-90.
5. Hurni H. Daylength and breeding in the domestic cat / H. Hurni // Laboratory Animals. — 1997. — № 15. - Р. 229-233.
6. Olson P.N. Reproductive endocrinology and physiology of the bitch and queen / P.N. Olson, P.W. Husted, T.A. Allen, T.M. Nett // Veterinary Clinics of North America: Small Animal Practice. - 1996. - № 14. - Р. 927-946.
УДК 577.17:591.16:612.62
ЗМ1НА Р1ВНЯ СТЕРОЩНИХ ГОРМОН1В ЗАЛЕЖНО В1Д ФАЗИ ЕСТРАЛЬНОГО ЦИКЛУ У К1ШОК Р1З-НИХ В1КОВИХ ГРУП I ПОР1Д
Щербакова Ю. В., Смоляншов Б. В.
Резюме. У статп розглянут морфометричн особливост внутршых репродуктивних оргаыв кшок у вщ 3-6 мюя^в i 7-12 мюя^в залежно вщ фази статевого циклу. Встановлено, що у безпородних кшок у вщ 3-6 мюя^в ктькють дрiбних фолiкулiв d<1 мм на 19-33% менше, ыж у породистих кшок в фол^лярну фазу статевого циклу. У породистих кшок в 1,23-2,56 рази бтьше фолiкулiв d>2 мм ыж у безпородних. Дослщжено взаемозв'язок морфометричних показниюв i рiвня стерощних гормоыв в сироватц кровг Вщзначено, що у породистих кшок у вщ 7-12 мюя^в рiвень естрадюлу в фол^лярну фазу на 64,9% вище ыж у безпородних. Концентра^я прогестерону в лютешову фазу статевого циклу у безпородних кшок у вц 7-12 мюя^в в 2,93 рази вище ыж у породистих. Концентра^я кортизолу залишаеться стабтьною в рiзнi фази статевого циклу.
Ключовi слова: домашн кшки, морфометричн показники, естрадюл, прогестерон, кортизол, фаза статевого циклу.
УДК 577.17:591.16:612.62
ИЗМЕНЕНИЕ УРОВНЯ СТЕРОИДНЫХ ГОРМОНОВ В ЗАВИСИМОСТИ ОТ ФАЗЫ ЭСТРАЛЬНОГО ЦИКЛА У КОШЕК РАЗНЫХ ВОЗРАСТНЫХ ГРУПП И ПОРОД Щербакова Ю. В., Смолянинов Б. В.
Резюме. В статье рассмотрены морфометрические особенности внутренних репродуктивных органов кошек в возрасте 3-6 месяцев и 7-12 месяцев в зависимости от фазы полового цикла. Установлено, что у беспородных кошек в возрасте 3-6 месяцев количество мелких фолликулов d<1 мм на 19-33% меньше, чем у породистых кошек в фолликулярной фазе полового цикла. У породистых кошек в 1,23-2,56 раза больше фолликулов d>2 мм чем у беспородных. Исследована взаимосвязь морфометрических показателей и уровня стероидных гормонов в сыворотке крови. Отмечено, что у породистых кошек в возрасте 7-12 месяцев уровень эстрадиола в фолликулярной фазе на 64,9% выше чем у беспородных. Концентрация прогестерона в лютеиновую фазу полового цикла у беспородных кошек в возрасте 7-12 месяцев в 2,93 раза выше чем у породистых. Концентрация кортизола остается стабильной в различные фазы полового цикла.
Ключевые слова: домашние кошки, морфометрические показатели, эстрадиол, прогестерон, корти-зол, фаза полового цикла.
UDC 577.17:591.16:612.62
CHANGES IN THE LEVELS OF STEROID HORMONES IN RELATION TO THE PHASE OF THE ESTROUS CYCLE IN DOMESTIC CATS DIFFERENT AGE GROUPS AND BREEDS
Shcherbakova I. V., Smolaninov B. V.
Abstract. Currently, thoroughly studied the flow characteristics of sexual cycle in many animals. Due to the significant increase in population in recent years more and more pets manifested interest in the study of the physiological characteristics of the sexual cycle in cats and dogs. Of particular interest is the study of the sexual cycle in cats as pets this kind least currently studied. Thus, recently created a database relating to the linkage of behavioral, endocrine and ovarian changes that occur in the body of cats during the follicular and luteal phase after sterile or fertile mating, during pregnancy and the postpartum period. However, knowledge of reproductive physiology and endocrinology there are still gaps and contradictions that require further research.
Materials and methods. Investigations were carried out on 25 thoroughbred (Abyssinian, Siamese, Egyptian Mau) and 30 clinically healthy mongrel cats between the ages of 3 to 12 months. Animals were divided into two age groups, 3-6 months and 7-12 months. The ovaries were counted the number of follicles with different diameters and corpora lutea, and depending on it judged the sexual phase of the cycle. Serum samples were thawed one time, and the concentration of estradiol, progesterone, and cortisol using DRG test systems company (USA) according to the instructions. The data were processed using standard statistical functions Exel Microsoft Oficce program.
Results and discussion. In mongrel cats of the first group at the age of 3-6 months, the number of small follicles d<1 mm was at 19-33% less than in pedigreed cats in the follicular phase of the sexual cycle. The number of large follicles d>3 mm pedigreed cats was significantly higher than that of inbred. Thus, in the follicular phase pedigreed cats large follicles was 1,53-2,23 times Between purebred and pedigree cats aged 7-12 months are also observed differences in the number of follicles. In the follicular phase in their pedigree cats 1,42-1,76 times than in inbred, but in the luteal 1,86-2,05 times.
The number of follicles of large diameter d>3 mm pedigreed cats on 37-47% more than the mongrel in the follicular phase.
Estradiol concentration in cats aged 3-6 months did not differ between purebred and pedigree cats and was in the physiological limits of the norm. It is also not observed significant differences in estradiol concentration between phases of the sexual cycle.
In cats pedigreed group of 7-12 months estradiol concentration is 64% higher than in inbred follicular phase. As this increase in estradiol concentration correlates with the fact that the observed pedigreed cats greater number of follicles larger diameter. While in mongrel cats, he declined to 3.67 times. The level of progesterone was observed significant differences between cats of different breeds in a group of 3-6 months. In cats aged 7-12 months have pronounced change in progesterone concentration versus cycle phase. Thus, in outbred cats progesterone concentration increased 4.22 fold in the luteal phase compared with the follicular. This suggests that the cats were formed yellow full body that support levels of progesterone at a sufficiently high level. As appears, it indicates the effective data mating cats. At pedigreed cats, progesterone levels during the luteal phase is not significantly increased as compared with follicular, while the estradiol level was still high. The level of cortisol is not marked changes between purebred and pedigree cats. Cortisol concentrations remain within the physiological norms, there is a tendency to an increase in its concentration as cats get older.
Conclusions
1. The number of large follicles and follicular d>3 mm average diameter d=1-2 mm pedigreed cats in the follicular phase is larger than that of purebred cats. These differences are typical for cats aged 7-12 months. Significant morphometric differences for cats aged 3-6 months have not been established.
2. The concentration of sex hormones do not always display a sexual cycle phase, pedigreed cats aged 7-12 months estradiol levels remain high in the follicular and luteal phase in, and in outbred cats aged 7-12 months progesterone level in the luteal phase 2.93 times higher than that of the pedigree.
3. The correlation between cortisol concentration in the blood of cats of all ages and the phase of the sexual cycle, as well as rock accessory do not observed.
Keywords: domestic cats, morphometric parameters, estradiol, progesterone, cortisol, the phase of the estrous cycle.
Рецензент — д. вет. н. Брошков М. М.
Стаття надшшла 09.10.2016 року
