CC BY
33
БИОХИМИЯ
ЗАВИСИМОСТЬ ПОЛИМОРФИЗМА ГЕНОВ СВЕРТЫВАНИЯ КРОВИ ОТ ГРУППОВОЙ И РЕЗУСНОЙ ПРИНАДЛЕЖНОСТЕЙ КРОВИ У ЖЕНЩИН
Понамарева Полина Олеговна
студент магистерской программы 06.04.01 Биология, ФГБОУ ВО Кубанский государственный университет, 350040, Россия, Краснодар, ул. Ставропольская 149
Хаблюк Виктор Викторович
канд. биол. наук, доцент, ФГБОУ ВО Кубанский государственный университет,
350040, Россия, Краснодар, ул. Ставропольская, 149
Золотавина Мария Леонидовна
канд. биол. наук, доцент, ФГБОУ ВО Кубанский государственный университет,
350040, Россия, Краснодар, ул. Ставропольская, 149
Милилян Наталья Станиславовна
врач КЛД, ГБУЗ Детская краевая клиническая больница, 350007, Россия, Краснодар, ул. Площадь Победы, 1 E-mail: poli.volkova@mail.ru
DEPENDENCE OF BLOOD COAGULATION GENE POLYMORPHISM OF GROUP AND RH BLOOD ACCESSORIES AMONG WOMEN
Polina Ponamareva
student of the Master's program Biology 04.06.01, Kuban State University, 350040, Russia, Krasnodar, Stavropolskaya St., 149
Viktor Hablyk
candidate of biological Sciences, associate Professor, Kuban State University, 350040, Russia, Krasnodar, Stavropolskaya St., 149
Maria Zolotavina
candidate of biological Sciences, associate Professor, Kuban State University, 350040, Russia, Krasnodar, Stavropolskaya St., 149
Natalya Mililian
doctor KLD, Children's Regional Clinical Hospital, 350007, Russia, Krasnodar, Square Pobedi St., 1
АННОТАЦИЯ
В работе представлены результаты исследования полиморфизма генов FII, FV, FVII, FGB, SERPINE1, ITGB3 и результаты определения групповой и резусной принадлежностей крови пациенток, находившихся на учете в женской консультации Краевого перинатального центра г. Краснодара. Выявлена общность исследуемых полиморфизмов с генетическим фактором - группой крови.
ABSTRACT
Relations between polymorphisms of genes FII, FV, FV, FGB, SERPINE1, ITGB3 and group-rhesus supplies blood of patients, who was registered in the antenatal clinic of the Children's Regional Clinical Hospital of Krasnodar has been researched. Study revealed common polymorphisms to genetic factors - blood group.
Ключевые слова: группы крови, система антигенов, полиморфизм. Keywords: group blood, system antigens, polymorphism.
Библиографическое описание: Зависимость полиморфизма генов свертывания крови от групповой и резусной принадлежностей крови у женщин // Universum: Химия и биология: электрон. научн. журн. Понамарева П.О. [и др.]. 2017. № 1(31). URL: http://7universum.com/ru/nature/archive/item/4123
Введение. Появление и проявление патологических аллелей генов может возникнуть при изменение внешних или внутренних воздействий (особенности питания, беременность, инфекции, прием лекарств, образ жизни тяжелый физический труд, стресс и т.д.) на организм. Причем, многие аллельные гены могут не проявлять патологическую активность долгое время. Предпосылками для формирования патологических процессов, по мнению Ф.Н. Гильмияровой и др. [1] является принадлежность к определенным группам крови системы антигенов AB0. Группы крови АВ0 у человека определяются тремя альтернативными вариантами гена гликозилтрансферазы (А, В, 0), расположенного на 9-й хромосоме, наследуясь с учетом множественного принципа: действие различных вариантов одного гена проявляется в равной степени, независимо друг от друга. На основании нуклеотидной последовательности полиморфизма, который детектируется на данной хромосоме, к настоящему моменту описано большое число аллелей гена АВ0. Но только те полиморфные замены, которые приводят к смене аминокислоты, являются критичными в определении активности и субстратной специфичности гликозилтрансферазы и, таким образом, ответственными за различный АВ0-фено-тип [2].
Целью исследования стало определение зависимости полиморфизма генов свертывающей системы крови от генов групповой и резусной принадлежностей крови у беременных женщин.
Материал и методы исследования. С целью изучения влияния генетических факторов на полиморфизмы генов свертывания крови было проведено
Количество пол
исследование крови 100 женщин с диагнозом привычная невынашиваемость беременности (ПНБ). Исследования проводились с определением групп крови системы антигенов АВ0, Rh-фактора, и определением наличия полиморфизма генов свертывающей системы крови. Определение группы крови у реципиентов проводилось, стандартными изогемаглю-тинирующими сыворотками двух серий каждой группы или моноклональными антителами. Анализ полиморфизма генов проводился методом ПЦР с ориентацией на 3 варианта результатов: 1) гомозигота по аллели 1 (нормальная гомозигота); 2) гетеро-зигота; 3) гомозигота по аллели 2 (патологическая или мутантная гомозигота).
При анализе 100 историй болезни пациенток обнаружено, что кровь пациенток с 0ap(I) Rh+ групповой и резусной принадлежностью составляла 18%, с Áp(II) Rh+ - 39%, с Ba(III)Rh+ - 25%, для ABo(IV)Rh+-лишь 4%. Однако количество пациенток не обладающих резус-фактором у 0ap(I)Rh- и Ap(II)Rh-принад-лежностью составила по 5%, с Ba(III)Rh-- 4%. Кровь пациенток, содержащая антигены AB0(IV)Rh- не была получена в результате исследования.
Для изучения связи полиморфизмов (гетерозиготный, гомозиготный патологический или нормального варианта полиморфизма аллельных генов) генов свертывания крови и генов групповой и резусной принадлежностей были выбраны следующие гены свертывающей системы крови: ген FV, ген FII, ген FVII, гены FGB, PAI-1, ITGB-3. Результаты представлены в таблице 1.
Таблица 1.
i, случаев
Полиморфизм Гены факторов свертывания крови Всего
FV FII FVII FGB PAI-1 ITGB-3
Гетерозигота 6 1 0 30 53 40 130
Гом. патологическая 0 0 1 5 30 1 37
Гом. нормальная 94 99 99 65 17 59 433
Общее количество случаев, когда гены не имели патологических изменений (гомозигота нормальная), составляли 433 из 600 рассмотренных случаев. Гены
имеющие гетерозиготные полиморфизмы были отмечены в 130 случаях, гомозиготные патологические полиморфизмы - в 37 случаях. Все полученные данные были обобщены в таблицу 2.
Таблица 2.
Полиморфизмы генов свертывания крови и групповой и резусной принадлежностей
Полиморфизм 1 группа 2 группа 3 группа 4 группа
Rh+ Rh- Rh+ Rh- Rh+ Rh- Rh+
Гет Г.П Г.Н Гет Г.П Г.Н Гет Г.П Г.Н Гет Г.П Г.Н Гет Г.П Г.Н Гет Г.П Г.Н Гет Г.П Г.Н
F5 G1691A - - 18 1 - 4 1 - 38 - - 5 3 - 22 - - 4 1 - 3
F2 G20210A - - 18 - - 5 1 - 38 - - 5 - - 25 - - 4 - - 4
FGB G455A 5 1 12 1 - 4 9 2 28 - - 5 10 1 14 2 1 1 3 - 1
PAI-1 -675 5G/4G 8 8 2 1 2 2 18 11 10 4 1 - 16 6 3 3 1 - 3 1 -
F7 G103T - - 18 - - 5 - - 39 - - 5 - 1 24 - - 4 - - 4
ITGB-3 T1565C 9 - 9 2 - 3 16 1 22 4 - 1 3 - 22 4 - - 2 - 2
Количество проб 18 5 39 5 25 4 4
«-» - Знак минус означает отсутствие данной формы полиморфизма, Гет. - Гетерозигот, Г.П. - Гомозигота патологическая (мутантная), Г.Н. - Гомозигота нормальная
Полиморфизмы (гетеро-, гомо- патологий) гена РА1-1, встречались в 83 пробах крови пациенток, 29 из них имели Ар(П)КЬ+ группу крови; полиморфизм гена FV встречался только в гетерозиготной форме (шесть из 100 проб); в генах FП и FVII полиморфизмы обнаружены лишь в единичных случаях: для FП была отмечена только гетерозиготная форма, для БУЛ - патологическая гомозигота. Для оценки влияния генов свертывания крови на формирование ПНБ проводился подсчет частот встречаемости аллелей по формуле 1.
Р(А)= (2^1+^2)/2И, (1)
где Р - частота встречаемости аллели; А - аллель;^1 -число патологических гомозигот по исследуемому аллелю;М2 - число гетерозигот;п - объем выборки.
Полученные данные были внесены в таблицу 3.
Наиболее часто встречаются в гетерозиготной и патологической гомозиготной форме гены FGB, РА1-1, 1ТОБ-3. Следует заметить, что полиморфизмы аллелей FGB закономерны и являются клинически значимыми для определения патологических процессов
при ПНБ у женщин с первой группой крови - 0ар (I) и Rh- принадлежностью, второй группой крови -Ар (II) ЯИ+ и Rh- принадлежностью, с третьей группой крови - Ба (Ш)КИ+ и Rh- принадлежностью; полиморфизмы генотипа 1ТвБ-3 также закономерны и являются клинически значимыми у женщин с первой группой крови - 0ар (I) второй группой крови -Ар (II) с третьей группой крови - Ба (Ш)КИ+.
Таблица 3.
Частота встречаемости полиморфизма генов
Ген F5 F2 FGB PAI-1 F7 ITGB-3
Частота встречаемости 0,03 0,005 0,2 0,565 0,01 0,21
Для расчета критерия х2 были взяты часто встречаемые полиморфизмы генов свертывания крови (таблица 4).
Таблица 4.
Расчет критерия х2 для антигенов системы АВ0 и антигенов системы Резус (5% значимость=5,99)
Генотипы Аллели Групповая и резусная принадлежности
0 (I) ар A(II) в B (III) а АВ (IV) 0
+ ИИ ИИ + ИИ ИИ + ИИ ИИ + ИИ ИИ
БвВ вв вА АА 66,5 8,2 45,97 15 14,52 0 1,5 0
РАН 5в/5в 5в/4в 4в/4в 4,22 1,8 0,28 2,2 2,68 1,5 1,5 0
ТТОВ-3 Т/Т Т/С С/С 9 3,8 23,87 2,2 53,16 0 1,5 0
Расчет критерия х2 для 0ар(!) ЯИ+ групповой и ре-зусной принадлежностей генов FGB, РА1-1, ГТвВ-3 указывает на то, что при 5% уровне значимости нуль гипотеза опровергается только для генотипов FGB, ЕТвВ-З, для 0ав(1) Як~ - для генотипов РА1-1 и ГТОВ-3 нуль гипотеза принимается, т.е. расхождения случайны.
У пациенток с Ар(П)КЬ+ группой крови для генотипов FGB, ITGB-3 нуль гипотеза опровергается, при Ар(Н) Кк~ - расхождения случайны у генотипов РАГ-1 и ITGB-3.
Критерия х2для Вр(Ш) групповой и резусной принадлежностей показал, что нуль гипотеза принимается только для генотипа РАГ-1. В случае с антигенами эритроцитов Бр(Ш) Кк'щль гипотеза принимается, расхождения случайны.
Расхождения между эмпирическими и теоретическими частотами для АБ^У) ЯИ+ принадлежностей (четвертая положительная группа) являются случайными. Для антигенов эритроцитов, относящихся к АБ0(1У) ^"расчет критерия х2 отсутствовал.
Таким образом, в результате проведенного исследования, нами было отмечено, что эритроциты, содержащие антигены Ар (II) ЯИ+ группы крови имели наибольшее количество патологических полиморфизмов генов свертывания крови (30 случаев из 37);наибольшая частота встречаемости полиморфизма характерна для генов свертывания крови FGB (0,2), РАМ (0,565), РТвВ-З (0,21), наименьшая частота встречаемости, следовательно, возникновение полиморфизма генов свертывания крови, характерна для генов FV (0,03), FII (0,005), FVII (0,01); наиболее значимыми в диагностике возникновения патологических процессов во время течения процесса беременности женщин являются полиморфизмы гена FGB и ITGB-3.
Антигены системы АВ0 и антигены системы Резус могут оказывать влияние на возникновение патологических процессов системы свертывания крови, что может быть использовано в акушерской практике.
Список литературы:
1 Группы крови: Биологическая вариабельность метаболизма в норме и патологии / Гильмиярова Ф.Н. [и др.]. Вятский медицинский вестник — №4. — 2007. — С. 45 — 48.
2 Тарлыков П.В., Кожамкулов У.А., Раманкулов Е.М. Генетические основы формирования групп крови человека. Биотехнология. Теория и практика. — 2014. — №2. — С. 4 — 10.
