CC BY
24
https://russjcardiol.elpub.ru doi:10.15829/1560-4071-2020-3881
ISSN 1560-4071 (print) ISSN 2618-7620 (online)
Закономерности формирования кальций-фосфатных бионов у пациентов с каротидным и коронарным атеросклерозом
Кутихин А. Г., Шишкова Д. К., Хрячкова О. Н., Фролов А. В., Шабаев А. Р., Загородников Н. И., Маркова В. Е., Богданов Л. А., Осяев Н. Ю., Индукаева Е. В., Груздева О. В.
Цель. Изучить механизмы формирования кальций-фосфатных бионов (КФБ), являющихся одним из триггеров дисфункции эндотелия, в крови пациентов с коронарным (КоА) и каротидным атеросклерозом (КаА) в сравнении со здоровыми донорами крови.
Материал и методы. В исследование было включено 264 субъекта: 88 пациентов с гемодинамически значимым (потребовавшим проведения ка-ротидной эндартерэктомии вследствие ишемического инсульта (n=44) или хронической ишемии головного мозга (n=44)) КаА, 88 пациентов с гемоди-намически значимым (ставшим причиной стабильной ишемической болезни сердца или инфаркта миокарда (ИМ)) КоА и 88 участников эпидемиологического исследования PURE (Prospective Urban Rural Epidemiology Study), не имеющих гемодинамически значимого КаА по данным ультразвукового исследования и симптоматического КоА. У включенных в исследование пациентов определялись параметры системного минерального гомеостаза: уровень общего и ионизированного кальция, фосфора, а также концентрации общего белка и ингибиторов внескелетной кальцификации альбумина и фетуина-А в сыворотке крови. Помимо этого, посредством перенасыщения (+2 ммоль/л) сыворотки крови пациентов солями кальция (CaCl2) и фосфора (Na2HPO4) с последующей инкубацией при 37° С в течение 24 ч определялась ее склонность к формированию КФБ в сравнении с контрольной сывороткой.
Результаты. Выявлено, что пациенты с КаА (как нестабильным, т.е. вызвавшим ишемический инсульт, так и стабильным) и ИМ характеризуются повышенной склонностью сыворотки крови к формированию КФБ, а также сниженной концентрацией общего белка и альбумина в сочетании с повышенным уровнем ионизированного кальция. Корреляционный анализ позволил выявить, что формирование КФБ в сыворотке крови ассоциировано со снижением общего белка и альбумина. Таким образом, при истощении белкового депо в крови повышается уровень свободных ионов кальция, нейтрализуемых далее путем формирования КФБ, являющихся вторичным депо ионов кальция.
Заключение. Формирование КФБ в сыворотке крови обусловлено вызванным снижением концентрации общего белка и альбумина, повышением уровня ионизированного кальция и ассоциировано с развитием атеросклероза в различных сосудистых бассейнах, включая прогрессирование КоА от стабильной ишемической болезни сердца до ИМ.
Ключевые слова: атеросклероз, дисфункция эндотелия, минеральный гомеостаз, фосфат кальция, кальций-фосфатные бионы.
Отношения и деятельность. Работа (дизайн, проведение экспериментов, анализ и интерпретация данных) выполнена в рамках поискового научного исследования (ПНИ) № 2020_419_29 "Определение склонности сыворотки крови пациентов с коронарным и мультифокальным атеросклерозом к формированию эндогенных кальций-фосфатных наночастиц, триггера дисфункции эндотелия и атеросклероза", выполняемого НИИ КПССЗ.
ФГБНУ Научно-исследовательский институт комплексных проблем сердечнососудистых заболеваний, Кемерово,Россия.
Кутихин А. Г. — к.м.н., зав. лабораторией фундаментальных аспектов атеросклероза отдела экспериментальной медицины, ORCID: 0000-0001-86794857, Шишкова Д. К.* — м.н.с. лаборатории фундаментальных аспектов атеросклероза отдела экспериментальной медицины, ORCID: 0000-00021518-3888, Хрячкова О. Н. — м.н.с. лаборатории фундаментальных аспектов атеросклероза отдела экспериментальной медицины, ORCID: 0000-00026620-5960, Фролов А. В. — к.м.н., с.н.с. лаборатории рентгенэндоваскуляр-ной и реконструктивной хирургии сердца и сосудов отдела хирургии сердца и сосудов, ORCID: 0000-0003-2366-6545, Шабаев А. Р. — м.н.с. лаборатории фундаментальных аспектов атеросклероза отдела экспериментальной медицины, ORCID: 0000-0002-9734-8462, Загородников Н. И. — аспирант, ORCID: 0000-0003-3539-0291, Маркова В. Е. — лаборант-исследователь лаборатории фундаментальных аспектов атеросклероза отдела экспериментальной медицины, ORCID: 0000-0002-6652-5745, Богданов Л. А. — м.н.с. лаборатории фундаментальных аспектов атеросклероза отдела экспериментальной и клинической кардиологии, ORCID: 0000-0003-4124-2316, Осяев Н. Ю. — лаборант-исследователь лаборатории фундаментальных аспектов атеросклероза отдела экспериментальной и клинической кардиологии, ORCID: нет, Индукаева Е. В. — к.м.н., с.н.с. лаборатории эпидемиологии сердечно-сосудистых заболеваний отдела оптимизации медицинской помощи при сердечно-сосудистых заболеваниях, ORCID: 0000-0002-6911-6568, Груздева О. В. — д.м.н., зав. лабораторией исследований гомеостаза отдела экспериментальной медицины, ORCID: 0000-0002-7780-829X.
*Автор, ответственный за переписку (Corresponding author): [email protected]
АГ — артериальная гипертензия, ИБС — ишемическая болезнь сердца, ИИ — ишемический инсульт, ИМ — инфаркт миокарда, КаА — каротидный атеросклероз, КоА — коронарный атеросклероз, КФБ — кальций-фосфатные бионы, ОШ — отношение шансов, ХИГМ — хроническая ишемия головного мозга, ХПН — хроническая почечная недостаточность, FDR — false discovery rate.
Рукопись получена 05.05.2020 Рецензия получена 20.05.2020 Принята к публикации 06.06.2020
Для цитирования: Кутихин А. Г., Шишкова Д. К., Хрячкова О. Н., Фролов А. В., Шабаев А. Р., Загородников Н. И., Маркова В. Е., Богданов Л. А., Осяев Н. Ю., Индукаева Е. В., Груздева О. В. Закономерности формирования кальций-фосфатных бионов у пациентов с каротидным и коронарным атеросклерозом. Российский кардиологический журнал. 2020;25(12):3881. doi:10.15829/1560-4071-2020-3881
Formation of calcium phosphate bions in patients with carotid and coronary atherosclerosis
Kutikhin A. G., Shishkova D. K., Khryachkova O. N., Frolov A. V., Shabaev A. R., Zagorodnikov N. I., Markova V. E., Bogdanov L. A., Osyaev N. Yu., Indukaeva E. V., Gruzdeva O. V.
Aim. To study the formation of calcium phosphate bions (CPB), a trigger of endothelial dysfunction in the patients with coronary and carotid atherosclerosis as compared to healthy blood donors.
Material and methods. The study included 264 individuals: 88 patients with cerebrovascular disease who underwent carotid endarterectomy due to ischemic stroke (n=44) or chronic cerebral ischemia (n=44)); 88 patients with coronary artery disease (44 patients with stable angina requiring coronary artery bypass graft surgery and 44 patients with myocardial infarction); 88 healthy volunteers enrolled into Prospective Urban Rural Epidemiology (PURE) study who did not have symptomatic coronary or hemodynamically relevant carotid atherosclerosis as measured by ultrasound. We further measured serum parameters defining mineral homeostasis: total and ionized calcium, phosphate, total protein, albumin, and fetuin-A. We also determined serum calcification propensity by means of supersaturation (+2 mmol/L) with CaCl2 and Na2HPO4 followed by incubation at 37° C for 24 hours. Results. Patients with carotid atherosclerosis (either with ischemic stroke or chronic cerebral ischemia) or myocardial infarction were characterized by an increased calcification propensity in combination with reduced total protein and albumin and elevated ionized calcium. Correlation analysis revealed that serum calcification was associated with a decrease in serum total protein and albumin. Therefore, depletion of serum protein mineral depot leads to the elevation of ionized calcium which is further aggregated into calcium phosphate bions, a secondary mineral depot. Conclusion. Formation of CPB in the serum is induced by an elevation of ionized calcium caused by a reduction of total protein and albumin and is associated with increased risk and progression of atherosclerosis.
Key words: atherosclerosis, endothelial dysfunction, mineral homeostasis, calcium phosphate, calcium phosphate bions.
Перенасыщение крови ионами кальция (Са2+) и фосфора (Р043-) ассоциировано с повышенным риском сердечно-сосудистых событий [1-3], однако патофизиологические основы данной клинико-эпи-демиологической связи остаются неясными. В ответ на превышение физиологических уровней кальция и фосфора в результате действия минерального шаперона фетуина-А происходит агрегация избыточных минеральных ионов в кальций-фосфатные бионы (КФБ) [4, 5], которые, защищая организм от внескелетной, в т.ч. сосудистой кальцификации, далее необратимо интернализуются эндотелиальными клетками [6], вызывая пермеабилизацию их лизосо-мальной мембраны [7] и приводя к неспецифическому провоспалительному ответу и клеточной гибели [6]. В сочетании данные процессы приводят к формированию патологического микроокружения, потенцирующего развитие дисфункции эндотелия [6] и воспаления адвентиции [8]; данные последствия, в свою очередь, вносят существенный вклад в формирование неоинтимы.
Хотя корреляция между повышенным уровнем КФБ в сыворотке крови и повышенным риском сердечно-сосудистых событий и сердечно-сосудистой смерти, ожидаемая при выраженном участии данных частиц в патогенезе дисфункции эндотелия и сосудис-
Relationships and Activities. The work (design, experiments, analysis and interpretation of data) was carried out as part of an exploratory research № 2020_419_29 "Determination of the propensity of blood serum of patients with coronary and multifocal atherosclerosis to form endogenous calcium-phosphate nanoparticles, a trigger of endothelial dysfunction and atherosclerosis", performed by the Research Institute for Complex Issues of Cardiovascular Diseases.
Research Institute for Complex Issues of Cardiovascular Diseases, Kemerovo, Russia.
Kutikhin A. G. ORCID: 0000-0001-8679-4857, Shishkova D. K.* ORCID: 00000002-1518-3888, Khryachkova O. N. ORCID: 0000-0002-6620-5960, Frolov A. V. ORCID: 0000-0003-2366-6545, Shabaev A. R. ORCID: 0000-0002-9734-8462, Zagorodnikov N. I. ORCID: 0000-0003-3539-0291, Markova V. E. ORCID: 00000002-6652-5745, Bogdanov L. A. ORCID: 0000-0003-4124-2316, Osyaev N.Yu. ORCID: none, Indukaeva E. V. ORCID: 0000-0002-6911-6568, Gruzdeva O. V. ORCID: 0000-0002-7780-829X.
'Corresponding author: [email protected]
Received: 05.05.2020 Revision Received: 20.05.2020 Accepted: 06.06.2020
For citation: Kutikhin A. G., Shishkova D. K., Khryachkova O. N., Frolov A. V., Shabaev A. R., Zagorodnikov N. I., Markova V. E., Bogdanov L. A., Osyaev N.Yu., Indukaeva E. V., Gruzdeva O. V. Formation of calcium phosphate bions in patients with carotid and coronary atherosclerosis. Russian Journal of Cardiology. 2020;25(12):3881. (In Russ.) doi:10.15829/1560-4071-2020-3881
того воспаления, впервые была выявлена у пациентов с хронической болезнью почек [9, 10], последние исследования указывают на ее присутствие и у пациентов с артериальной гипертензией (АГ) и ишеми-ческой болезнью сердца (ИБС) и без почечной дисфункции [11], предполагая общий и единый патофизиологический механизм.
Целью текущей работы было изучение связи формирования КФБ в сыворотке крови с атеросклерозом различных сосудистых бассейнов и различной степени прогрессирования, а также расшифровка обусловливающих данный эффект патогенетических механизмов у указанных когорт пациентов.
Материал и методы
В исследование было включено 264 субъекта: 1) 88 пациентов, поступивших в нейрохирургическое отделение ГБУЗ КО "КОККД им. акад. Л. С. Барбараша" с гемодинамически значимым (потребовавшим проведения каротидной эндартерэктомии вследствие ишемического инсульта (ИИ) (п=44) или хронической ишемии головного мозга (ХИГМ) (п=44)) каро-тидным атеросклерозом (КаА); 2) 44 пациента, поступивших в кардиохирургическое отделение НИИ КПССЗ с потребовавшей коронарного шунтирования стабильной ИБС, а также 44 пациента, поступивших
в кардиологическое отделение ГБУЗ КО "КОККД им. акад. Л. С. Барбараша" с инфарктом миокарда (ИМ); 3) 88 участников эпидемиологического исследования PURE (Prospective Urban Rural Epidemiology Study), обследованных на базе НИИ КПССЗ и не имеющих гемодинамически значимого (стеноз >50% просвета сосуда) КаА по данным ультразвуковой допплерографии и симптоматического коронарного атеросклероза (КоА) в анамнезе. Исследование было выполнено в соответствии со стандартами надлежащей клинической практики (Good Clinical Practice) и принципами Хельсинкской декларации. Протокол исследования был одобрен локальным этическим комитетом НИИ КПССЗ (дата заседания 10.09.2018, протокол № 100920180-ЛФАА). До включения в исследование от всех пациентов было получено письменное информированное согласие.
Таким образом, критериями включения в исследование были 1) проведенная пациенту каротидная эндартерэктомия вследствие ХИГМ или ИИ, либо проведенное пациенту коронарное шунтирование по поводу стабильной ИБС, либо госпитализация по поводу ИМ, либо участие в эпидемиологическом исследовании PURE с заполнением соответствующих анкет и отсутствием КаА и КоА по вышеперечисленным критериям; 2) добровольное информированное согласие пациента на участие в исследовании. Критерием исключения было неполное прохождение запланированных исследований независимо от причины (с обязательной заменой участника исследования). Гендерно-возрастные характеристики, коморбидные патологии и лекарственный анамнез включенных в исследование субъектов приведены в таблице 1.
У включенных в исследование пациентов при помощи автоматизированного биохимического анализатора Konelab 60i (Thermo Scientific) определялись параметры, определяющие системный минеральный гомеостаз: уровень общего и ионизированного кальция, фосфора, а также концентрации общего белка и альбумина. Концентрация фетуина-А в сыворотке крови определялась посредством иммуноферментно-го анализа (RD191037100, BioVendor) согласно протоколу производителя на спектрофотометре Multiskan Sky (Thermo Scientific). Для определения склонности сыворотки крови к формированию КФБ в 96-луноч-ные плоскодонные культуральные планшеты (92696, Techno Plastic Products) раскапывали по 100 мкл сыворотки пациента на лунку с последующим выделением контрольной лунки (+4 мкл предварительно отфильтрованной через поры диаметром 220 нм стерильной бидистиллированной воды) и экспериментальной лунки с предварительно отфильтрованными через поры диаметром 220 нм растворами солей кальция и фосфора (+2 мкл 0,1 М CaCl2 и +2 мкл 0,1 М Na2HPO4). Далее планшеты инкубировали
в течение 24 ч (MCO-18AIC, Sanyo) при температуре тела человека (37° C), поддержании атмосферы 95% воздуха: 5% CO2 для поддержания pH и высокой влажности для предотвращения высыхания содержимого лунок. После этого во всех лунках измеряли оптическую плотность на длине волны 650 нм на спектрофотометре Multiskan Sky (Thermo Scientific) и вычитали фоновый шум путем вычитания значений контрольной сыворотки из значений экспериментальной.
Сравнения между двумя группами проводили по критерию хи-квадрат Пирсона с поправкой Йейтса на непрерывность при анализе качественных признаков и по критерию Манна-Уитни при анализе количественных признаков. Сравнения между тремя группами проводили при помощи критерия Краскела-Уоллиса, при этом поправка на множественные сравнения выполнялась посредством двух-этапного расчета средней доли ложных отклонений гипотез по Беньямини, Кригеру и Йекутиели (false discovery rate, FDR). В этом случае анализировались значения q (значения p, скорректированные с учетом FDR). Корреляционный анализ также выполняли в программе GraphPad Prism 8 (GraphPad Software) с использованием коэффициента корреляции Спирмена. Кроме того, проводили анализ отношения шансов (ОШ) наличия гемодинамически значимого КаА или КоА, а также их нестабильных форм (ИИ и ИМ, соответственно) в зависимости от их вхождения в различные процентили уровней параметров минерального гомеостаза в онлайн-калькулято-ре MedCalc (MedCalc Software, https://www.medcalc. org/calc/odds_ratio.php). Значения p или q (в случае применения критерия Краскела-Уоллиса с FDR-поправкой) <0,05 (вероятность отвергнуть верную нулевую гипотезу в менее чем 5%) признавались статистически значимыми.
Результаты
Повышение склонности сыворотки крови к формированию бионов наблюдалось как у пациентов с КаА независимо от его клинической манифестации (стабильная ХИГМ и нестабильный ИИ), так и у пациентов с нестабильным КоА (ИМ) (рис. 1). В то же время данное увеличение имело лишь характер статистически незначимой тенденции у пациентов со стабильной ИБС (рис. 1).
С целью изучения механизмов, обусловливающих данный эффект, были измерены уровни основных параметров минерального гомеостаза — общего и ионизированного кальция, фосфора, общего белка, альбумина и фетуина-А. Несмотря на снижение уровня общего кальция у пациентов с КаА и КоА, у данных групп отмечалось статистически значимое повышение уровня свободного (ионизированного) кальция, а также выраженные снижение концен-
Таблица 1
Гендерно-возрастные характеристики, коморбидные патологии и лекарственный анамнез включенных в исследование субъектов
Группа пациентов/изучаемый сопутствующий фактор Пациенты сХИГМ Пациенты с ИИ Р Пациенты со стабильной ИБС Пациенты с ИМ Р Пациенты с КаА Пациенты с КоА Р Пациенты с ССЗ Здоровые доноры крови Р
Гендерно-возрастные характеристики
Мужской пол 26/44 (59,09%) 31/44(70,46%) 0,37 35/44 (79,55%) 30/44(68,19%) 0,33 57/88 (64,77%) 65/88 (73,86%) 0,25 122/176(69,3%) 51/88(58,0%) 0,09
Возраст 67,0(61,0-73,7) 64,50 (59,25-70,0) 0,07 64,0(58,0-69,0) 63,0 (56,7-71,7) 0,95 66,0(61,0-72,0) 64,0(58,0-69,0) 0,09 65,0(60,0-71,0) 63,0 (57,2-67,0) 0,01
Сопутствующие заболевания или патологические состояния
Артериальная гипертензия 41 /43 (95,3%) 39/41 (95,1%) 0,64 38/42 (90,5%) 26/31 (83,9%) 0,62 80/84 (95,2%) 64/73 (87,7%) 0,15 144/157 (91,7%) 31/88(35,2%) 0,01
Хроническая сердечная недостаточность 36/43 (83,7%) 37/41 (90,2%) 0,57 41/42(97,6%) 12/31 (38,7%) 0,01 73/84 (86,9%) 53/73 (72,6%) 0,04 126/157(80,2%) 3/88 (3,4%) 0,01
Хроническая обструктивная болезнь легких или бронхиальная астма 3/43 (70%) 7/41 (171%) 0,27 0/42 (0,0%) 4/31 (12,9%) 0,06 10/84(11,9%) 4/73 (5,5%) 0,26 14/157(8,9%) 11/88(12,5%) 0,50
Курение 2/43 (4,6%) 6/41 (14,6%) 0,24 18/42 (42,9%) 20/31 (64,5%) 0,11 8/84 (9,5%) 38/73 (52,0%) 0,01 46/157(29,3%) 22/88 (25,0%) 0,57
Хроническая болезнь почек 4/43 (9,3%) 4/41 (9,8%) 0,76 9/42(21,4%) 3/31 (9,7%) 0,31 8/84 (9,5%) 12/73(16,4%) 0,29 20/157(12,7%) 6/88 (6,8%) 0,22
Сахарный диабет 10/43(23,2%) 13/41 (31,7%) 0,53 12/42(28,6%) 6/31 (19,4%) 0,53 23/84(274%) 18/73 (24,7%) 0,84 41/157(26,1%) 3/88 (3,4%) 0,01
Избыточная масса тела 25/43(58,1%) 20/41 (48,8%) 0,52 18/42 (42,9%) 3/31 (9,7%) 0,01 45/84(53,6%) 21/73(28,8%) 0,01 66/157 (42,0%) 30/88(34,1%) 0,28
Ожирение 5/43(11,6%) 9/41 (22,0%) 0,33 16/42(38,1%) 14/31 (45,2%) 0,71 14/84(16,7%) 30/73 (41,0%) 0,01 44/157(28,0%) 40/88 (45,4%) 0,01
Количественные показатели
Индекс массы тела, кг/м2 27,6 (24,2-32,0) 26,3(24,6-32,8) 0,88 28,71 (25,9-31,8) 27,0 (23,0-33,0) 0,29 26,9(24,5-32,1) 28,5(24,4-32,3) 0,81 27,8(24,5-32,2) 28,8(25,3-32,4) 0,25
Скорость клубочковой фильтрации, мл/мин/1,73 м2 73,0(60,0-82,0) 770(66,0-91,5) 0,13 87,0 (70,7-96,5) 84,0 (65,0-96,0) 0,67 74,0 (63,2-87,7) 86,0 (66,5-96,0) 0,01 78,0 (65,0-92,0) 90,0 (770-98,0) 0,01
Фракция выброса левого желудочка, % 64,0 (60,5-65,5) 65,0 (64,0-670) 0,10 62,0 (48,0-65,0) 52,0(45,0-61,0) 0,01 64,0 (62,0-65,7) 55,0 (46,0-63,0) 0,01 62,0(52,5-65,0) - -
Число пораженных коронарных артерий поданным коронарной ангиографии 3,0(2,0-3,0) 2,0(1,0-3,0) 0,01 2,0(2,0-3,0)
Процент стеноза брахиоцефальных артерий 75,0(70,0-83,5) 86,0(75,5-95,0) 0,01 - - - 80,0 (70,0-90,0) - - - - -
Лекарственный анамнез до поступления в стационар (клиника НИИ КПССЗ или ГБУЗ КО "КОККД им. акад. Л. С. Барбараша"
Антиагреганты 25/43(58,1%) 15/41 (36,6%) 0,08 33/42 (78,6%) 16/31 (51,6%) 0,03 40/84 (476%) 49/73 (67,1%) 0,02 89/157(56,7%) 15/88(170%) 0,01
Бета-адреноблокаторы 16/43(372%) 13/41 (31,7%) 0,76 28/42 (66,7%) 14/31 (45,2%) 0,11 29/84 (34,5%) 42/73 (57,5%) 0,01 71/157(45,2%) 7/88 (8,0%) 0,01
Ингибиторы АПФ 7/43(16,3%) 3/41 (7,3%) 0,35 17/42(40,5%) 11/31 (35,5%) 0,85 10/84(11,9%) 28/73 (38,4%) 0,01 38/157(24,2%) 13/88(14,8%) 0,11
Статины 29/43 (674%) 14/41 (34,1%) 0,01 35/42 (83,3%) 18/31 (58,1%) 0,03 43/84(51,2%) 53/73 (72,6%) 0,01 96/157(61,1%) 4/88 (4,5%) 0,01
Нитраты 0/43 (0,0%) 0/41 (0,0%) 0,91 2/42 (4,8%) 0/31 (0,0%) 0,61 0/84 (0,0%) 2/73 (2,7%) 0,41 2/157(1,3%) 0/88 (0,0%) 0,75
Блокаторы рецепторов к ангиотензину II 16/43(372%) 5/41 (12,2%) 0,02 16/42(38,1%) 8/31 (25,8%) 0,39 21/84(25,0%) 24/73 (32,9%) 0,36 45/157(28,7%) 10/88(11,4%) 0,01
Антагонисты альдостерона 2/43 (4,7%) 1/41 (2,4%) 0,96 3/42 (7,1%) 1/31 (3,2%) 0,83 3/84(3,6%) 4/73 (5,5%) 0,85 7/157(4,5%) 0/88 (0,0%) 0,11
Блокаторы кальциевых каналов 14/43(32,5%) 5/41 (12,2%) 0,05 19/42(45,2%) 9/31 (29,0%) 0,24 19/84(22,6%) 28/73 (38,4%) 0,05 47/157 (29,9%) 7/88 (8,0%) 0,01
Диуретики 0/43 (0,0%) 1/41 (2,4%) 0,97 7/42(16,7%) 4/31 (12,9%) 0,91 1/84(1,2%) 11/73(15,1%) 0,01 12/157 (7,6%) 6/88 (6,8%) 0,99
Антикоагулянты 5/43(11,6%) 1/41 (2,4%) 0,23 3/42 (7,1%) 1/31 (3,2%) 0,83 6/84 (7,1%) 4/73 (5,5%) 0,92 10/157 (6,4%) 1/88(1,1%) 0,12
Сокращения: ИБС — ишемическая болезнь сердца, ИИ — ишемический инсульт, ИМ — инфаркт миокарда, КаА — каротидный атеросклероз, КоА— коронарный атеросклероз, ХИГМ — хроническая ишемия головного мозга, ССЗ — сердечно-сосудистые заболевания.
Склонность сыворотки крови к формиванию КФБ (перенасыщение сыворотки 2 ммоль/л CaCl2 и Na2HPO4) 0,003
на во но
ьн т
со оф
п
о
0,25
0,20
0,15
0,10
0,05
0,00
-0,05
0,0006
0,17
Здоровые Хроническая Ишемический доноры ишемия инсульт крови головного мозга
Склонность сыворотки крови к формиванию КФБ
(перенасыщение сыворотки 2 ммоль/л CaCl2 и Na2HPO4) 0,003 2 2 4
0,32
0,003
Здоровые Стабильная Инфаркт доноры ишемическая миокарда крови болезнь сердца
Рис. 1. Сравнительный анализ склонности сыворотки крови здоровых доноров крови, пациентов со стабильными (ХИГМ) и нестабильными (ИИ) каротидны-ми атеросклеротическими бляшками и пациентов со стабильными (стабильная ИБС) и нестабильными (ИМ) коронарными атеросклеротическими бляшками к формированию КФБ при ее перенасыщении солевыми растворами кальция (СаС12) и фосфора (№2НР04) в концентрации 2 ммоль/л. Каждая точка на графике соответствует измерению от одного пациента, линия внутри "коробки" обозначает медиану, границы "коробок" обозначают межквартильное расстояние, границы "усов" — минимальное и максимальное значения. Критерий Краскела-Уоллиса с РЭЯ-поправкой на множественные сравнения. Значения Р приведены над графиками.
Сокращение: КФБ — кальций-фосфатные бионы.
трации общего белка и альбумина, ответственного за связывание значительной доли свободных ионов кальция в крови (рис. 2).
В то же время не было выявлено статистически значимых различий в уровне сывороточного фосфора и ключевого ингибитора внескелетной минерализации фетуина-А, ответственного за стабилизацию комплексов фосфата кальция на субнаноразмерном уровне и за формирование КФБ, являющихся следующей линией предотвращения эктопической каль-цификации в организме человека (рис. 3).
Стоит отметить, что полученные различия, хотя статистически и были значимыми (рис. 1, 2), не вполне отчетливо визуализировались на графиках, поскольку статистическая значимость, очевидно, была достигнута не столько за счет величины эффекта, сколько за счет существенного объема выборки. Поэтому был проведен анализ ОШ наличия КаА и КоА, отраженного вышеуказанными клиническими проявлениями, у исследуемых субъектов в зависимости от их вхождения в различные процен-тили уровней параметров минерального гомеостаза. Независимо от выбираемого процентиля пациенты с КоА (табл. 2) и КаА (табл. 3) характеризовались повышенной склонностью сыворотки крови к формированию бионов, при этом данный параметр и при таком виде анализа был ассоциирован с нестабильным КоА (табл. 4), но не КаА (табл. 5). Аналогичные результаты были получены относительно парамет-
ров, регулирующих формирование КФБ в сыворотке крови — уровню ионизированного кальция и концентрациям общего белка и альбумина (табл. 2-5).
Для математического подтверждения предлагаемой патофизиологической концепции был выполнен ранговый корреляционный анализ, который также продемонстрировал выраженную прямую корреляционную связь уровня общего кальция с концентрациями общего белка (г=0,680) и альбумина (г=0,706), ожидаемую сильную прямую корреляционную связь концентраций общего белка и альбумина (г=0,869), а также убедительную обратную корреляционную связь склонности сыворотки крови к формированию КФБ с концентрацией общего белка (г=-0,451) и альбумина (г=-0,508) (табл. 6).
Обсуждение
Клиническая значимость феномена образования КФБ в крови обусловлена повышенной склонностью сыворотки крови пациентов с терминальной хронической почечной недостаточностью (ХПН) и больных АГ к формированию КФБ в сравнении с сывороткой условно здоровых доноров крови [11]. Кроме того, повышенная склонность сыворотки крови к формированию КФБ ассоциирована с неблагоприятным прогнозом у пациентов с ХПН 3 и 4 стадий [12], а также у больных терминальной ХПН [9], включая перенесших трансплантацию почки [13]. При этом пациенты с увеличенной склонностью
Общий кальций в сыворотке крови 0,0001
Ионизированный кальций в сыворотке крови 0,0001
4п
0,0001
0,0135
2-
й
ий 1
1,5
0,0001
0,0044
& 1,0-ь
аль
ка
0,5
в
о р
и
Здоровые Пациенты Пациенты
доноры с каротидным с коронарным крови атеросклерозом атеросклерозом
Общий белок в сыворотке крови 0,0001
о Ио
0,0
Здоровые Пациенты Пациенты
доноры с каротидным с коронарным крови атеросклерозом атеросклерозом
Альбумин в сыворотке крови 0,0001
100
80-
0,0001
0,0001
60-
щ
б О
40
20
60
40
20
0,0001
0,0003
Здоровые Пациенты Пациенты
доноры с каротидным с коронарным крови атеросклерозом атеросклерозом
Здоровые Пациенты Пациенты
доноры с каротидным с коронарным крови атеросклерозом атеросклерозом
Рис. 2. Сравнительный анализ уровня сывороточного общего и ионизированного кальция, общей белковой фракции, а также связывающего ионы кальция альбумина у здоровых доноров крови, пациентов со стабильными (ХИГМ) и нестабильными (ИИ) каротидными атеросклеротическими бляшками и пациентов со стабильными (стабильная ИБС) и нестабильными (ИМ) коронарными атеросклеротическими бляшками. Каждая точка на графике соответствует измерению от одного пациента, линия внутри "коробки" обозначает медиану, границы "коробок" обозначают межквартильное расстояние, границы "усов" — минимальное и максимальное значения. Критерий Краскела-Уоллиса с РЭЯ-поправкой на множественные сравнения. Значения Р приведены над графиками.
Фосфор в сыворотке крови 0,98
Фетуин-А в сыворотке крови 0,91
3 п
2-
0,65
0,65
р
о ф
с о Ф
1
0,8
0,6
А,
К 0,4
0,71
0,71
т
е Фе
0,2
0,0
Здоровые доноры крови
Пациенты с каротидным атеросклерозом
Пациенты с коронарным атеросклерозом
Здоровые доноры крови
Пациенты с каротидным атеросклерозом
Пациенты с коронарным атеросклерозом
Рис. 3. Сравнительный анализ уровня фосфора и ингибитора внескелетной кальцификации фетуина-А у здоровых доноров крови, пациентов со стабильными (ХИГМ) и нестабильными (ИИ) каротидными атеросклеротическими бляшками и пациентов со стабильными (стабильная ИБС) и нестабильными (ИМ) коронарными атеросклеротическими бляшками. Каждая точка на графике соответствует измерению от одного пациента, линия внутри "коробки" обозначает медиану, границы "коробок" обозначают межквартильное расстояние, границы "усов" — минимальное и максимальное значения. Критерий Краскела-Уоллиса с РЭЯ-поправкой на множественные сравнения. Значения Р приведены над графиками.
ол 3
0
0
0
0
Таблица 2
Анализ ОШ наличия гемодинамически значимого (потребовавшего коронарного шунтирования или ставшего причиной ИМ)
КоА у участников исследования в зависимости от их вхождения в различные процентили уровней параметров минерального гомеостаза
Процентиль ОШ 95% ДИ Р
Склонность сыворотки к формированию бионов
Половина (п=88) (верхние 50%: нижние 50% значений) 1,90 1,04-3,46 0,0356
Терциль (п=59) (верхние 33%: нижние 33% значений) 2,43 113-5,23 0,0237
Квартиль (п=44) (верхние 25%: нижние 25% значений) 3,75 1,42-9,88 0,0075
Квинтиль (п=38) (верхние 20%: нижние 20% значений) 3,88 1,31-11,47 0,0142
Уровень ионизированного кальция в сыворотке крови
Половина (п=88) (верхние 50%: нижние 50% значений) 13,19 6,43-27,04 0,0001
Терциль (п=59) (верхние 33%: нижние 33% значений) 11,49 4,85-27,24 0,0001
Квартиль (п=44) (верхние 25%: нижние 25% значений) 18,60 5,98-5782 0,0001
Квинтиль (п=38) (верхние 20%: нижние 20% значений) 16,35 4,76-5614 0,0001
Уровень общего белка в сыворотке крови
Половина (п=88) (верхние 50%: нижние 50% значений) 0,076 0,04-0,16 0,0001
Терциль (п=59) (верхние 33%: нижние 33% значений) 0,013 0,004-0,045 0,0001
Квартиль (п=44) (верхние 25%: нижние 25% значений) 0,005 0,001-0,028 0,0001
Квинтиль (п=38) (верхние 20%: нижние 20% значений) 0,007 0,001-0,038 0,0001
Уровень альбумина в сыворотке крови
Половина (п=88) (верхние 50%: нижние 50% значений) 0,086 0,04-017 0,0001
Терциль (п=59) (верхние 33%: нижние 33% значений) 0,028 0,01-0,08 0,0001
Квартиль (п=44) (верхние 25%: нижние 25% значений) 0,020 0,006-0,072 0,0001
Квинтиль (п=38) (верхние 20%: нижние 20% значений) 0,018 0,004-0,072 0,0001
Сокращения: ДИ — доверительный интервал, ОШ — отношение шансов.
Таблица 3
Анализ ОШ наличия гемодинамически значимого (потребовавшего проведения каротидной эндартерэктомии вследствие ИИ или ХИГМ) КаА у исследуемых субъектов в зависимости от их вхождения в различные процентили уровней параметров минерального гомеостаза
Процентиль ОШ 95% ДИ Р
Склонность сыворотки к формированию бионов
Половина (п=88) (верхние 50%: нижние 50% значений) 510 2,69-9,69 0,0001
Терциль (п=59) (верхние 33%: нижние 33% значений) 8,74 3,79-2014 0,0001
Квартиль (п=44) (верхние 25%: нижние 25% значений) 8,00 3,09-20,72 0,0001
Квинтиль (п=38) (верхние 20%: нижние 20% значений) 6,98 2,53-19,24 0,0002
Уровень ионизированного кальция в сыворотке крови
Половина (п=88) (верхние 50%: нижние 50% значений) 3,74 2,00-6,97 0,0001
Терциль (п=59) (верхние 33%: нижние 33% значений) 8,74 3,79-2014 0,0001
Квартиль (п=44) (верхние 25%: нижние 25% значений) 10,06 3,51-28,84 0,0001
Квинтиль (п=38) (верхние 20%: нижние 20% значений) 50,87 6,30-310,54 0,0002
Уровень общего белка в сыворотке крови
Половина (п=88) (верхние 50%: нижние 50% значений) 0,01 0,004-0,028 0,0001
Терциль (п=59) (верхние 33%: нижние 33% значений) 0,001 0,0001-0,009 0,0001
Квартиль (п=44) (верхние 25%: нижние 25% значений) 0,001 0,0001-0,013 0,0001
Квинтиль (п=38) (верхние 20%: нижние 20% значений) 0,001 0,0001-0,012 0,0001
Уровень альбумина в сыворотке крови
Половина (п=88) (верхние 50%: нижние 50% значений) 0,016 0,006-0,04 0,0001
Терциль (п=59) (верхние 33%: нижние 33% значений) 0,003 0,0004-0,015 0,0001
Квартиль (п=44) (верхние 25%: нижние 25% значений) 0,002 0,0002-0,017 0,0001
Квинтиль (п=38) (верхние 20%: нижние 20% значений) 0,0023 0,0002-0,023 0,0001
Сокращения: ДИ — доверительный интервал, ОШ — отношение шансов.
Сокращения: ДИ — доверительный интервал, ОШ — отношение шансов.
Таблица 5
Анализ ОШ наличия нестабильного (ставшего причиной ИИ) КаА у исследуемых субъектов в зависимости от их вхождения в различные процентили уровней параметров минерального гомеостаза
Таблица 4
Анализ ОШ наличия нестабильного (ставшего причиной ИМ) КоА у исследуемых субъектов в зависимости от их вхождения в различные процентили уровней параметров минерального гомеостаза
Процентиль ОШ 95% ДИ Р
Склонность сыворотки к формированию бионов
Половина (п=44) (верхние 50%: нижние 50% значений) 3,73 1,55-9,02 0,0034
Терциль (п=29) (верхние 33%: нижние 33% значений) 4,72 1,48-15,03 0,0087
Квартиль (п=22) (верхние 25%: нижние 25% значений) 9,15 2,07-40,39 0,0035
Квинтиль (п=18) (верхние 20%: нижние 20% значений) 12,57 219-72,23 0,0046
Уровень ионизированного кальция в сыворотке крови
Половина (п=44) (верхние 50%: нижние 50% значений) 1512 5,37-42,61 0,0001
Терциль (п=29) (верхние 33%: нижние 33% значений) 27,24 6,28-118,09 0,0001
Квартиль (п=22) (верхние 25%: нижние 25% значений) 13,57 2,99-61,58 0,0007
Квинтиль (п=18) (верхние 20%: нижние 20% значений) 10,00 2,06-48,56 0,0043
Уровень общего белка в сыворотке крови
Половина (п=44) (верхние 50%: нижние 50% значений) 0,58 0,25-1,34 0,20
Терциль (п=29) (верхние 33%: нижние 33% значений) 0,76 0,27-213 0,60
Квартиль (п=22) (верхние 25%: нижние 25% значений) 1,00 0,31-3,26 1,00
Квинтиль (п=18) (верхние 20%: нижние 20% значений) 1,25 0,34-4,64 0,74
Уровень альбумина в сыворотке крови
Половина (п=44) (верхние 50%: нижние 50% значений) 0,69 0,30-1,61 0,39
Терциль (п=29) (верхние 33%: нижние 33% значений) 0,57 0,20-1,62 0,29
Квартиль (п=22) (верхние 25%: нижние 25% значений) 0,69 0,21-2,27 0,55
Квинтиль (п=18) (верхние 20%: нижние 20% значений) 0,51 013-1,92 0,32
Процентиль ОШ 95% ДИ Р
Склонность сыворотки к формированию бионов
Половина (п=44) (верхние 50%: нижние 50% значений) 0,48 0,20-112 0,09
Терциль (п=29) (верхние 33%: нижние 33% значений) 0,43 015-1,24 012
Квартиль (п=22) (верхние 25%: нижние 25% значений) 0,69 0,21-2,28 0,54
Квинтиль (п=18) (верхние 20%: нижние 20% значений) 0,64 0,17-2,39 0,50
Уровень ионизированного кальция в сыворотке крови
Половина (п=44) (верхние 50%: нижние 50% значений) 2,09 0,89-4,88 0,09
Терциль (п=29) (верхние 33%: нижние 33% значений) 1,52 0,54-4,28 0,43
Квартиль (п=22) (верхние 25%: нижние 25% значений) 1,75 0,52-5,84 0,36
Квинтиль (п=18) (верхние 20%: нижние 20% значений) 1,27 0,33-4,97 0,73
Уровень общего белка в сыворотке крови
Половина (п=44) (верхние 50%: нижние 50% значений) 1,44 0,62-3,33 0,39
Терциль (п=29) (верхние 33%: нижние 33% значений) 1,52 0,54-4,28 0,43
Квартиль (п=22) (верхние 25%: нижние 25% значений) 1,20 0,37-3,92 0,76
Квинтиль (п=18) (верхние 20%: нижние 20% значений) 0,80 0,21-3,00 0,73
Уровень альбумина в сыворотке крови
Половина (п=44) (верхние 50%: нижние 50% значений) 0,70 0,30-1,61 0,39
Терциль (п=29) (верхние 33%: нижние 33% значений) 0,52 019-1,43 0,20
Квартиль (п=22) (верхние 25%: нижние 25% значений) 0,69 0,21-2,28 0,54
Квинтиль (п=18) (верхние 20%: нижние 20% значений) 0,40 011-1,55 0,19
Сокращения: ДИ — доверительный интервал, ОШ — отношение шансов.
сыворотки крови к формированию КФБ характеризуются повышенным риском смерти как от всех, так и отдельно от сердечно-сосудистых причин [13], а также повышенным риском развития ИМ и заболеваний периферических артерий [9]. Последние ис-
следования также демонстрируют, что повышенная склонность сыворотки к формированию КФБ ассоциирована с более выраженным коронарным каль-цинозом и более высоким риском прогрессирования этого патологического процесса у пациентов с ХПН
Таблица 6
Корреляционный анализ параметров минерального гомеостаза по Спирмену у всех пациентов (п=264, ранговая корреляция). Значимые корреляции (-0,4< г >0,4) выделены
Общий кальций Ионизированный кальций Общий белок Альбумин Фосфор Фетуин-А Склонность сыворотки крови к формированию КФБ
Общий кальций -0,011 0,680 0,706 0,245 0,086 -0,328
Ионизированный кальций -0,011 -0,150 -0,140 0112 -0,066 0118
Общий белок 0,680 | -0,150 0,869 0140 0134 -0,451
Альбумин 0,706 | -0140 0,869 0,233 0111 -0,508
Фосфор 0,245 0112 0140 0,233 0132 -0,015
Фетуин-А 0,086 -0,066 0134 0111 0132 -0,020
Склонность сыворотки крови к формированию КФБ -0,328 0118 -0,451 -0,508 -0,015 -0,020
Сокращение: КФБ — кальций-фосфатные бионы.
на различных стадиях, исключая начальную и терминальную [10]. Это косвенно подтверждается данными о том, что высокое содержание КФБ в системном кровотоке может служить суррогатным маркером КоА, коррелируя как с объемом бляшки в целом, так и с объемом ее липидного компонента, а также превалируя у пациентов с острым коронарным синдромом в сравнении с субъектами со стабильной стенокардией [14].
Полученные результаты позволяют выдвинуть гипотезу о том, что причиной увеличенной склонности крови пациентов с КаА и ИМ к формированию КФБ является снижение (до "низкого нормального" уровня) сывороточной концентрации общего белка и альбумина, роль которых в поддержании минерального гомеостаза заключается в связывании свободных ионов кальция. Истощение этой "первой линии" защиты организма от внескелетной каль-цификации приводит к также детектированному в нашем исследовании повышению уровня ионизированного кальция в сыворотке крови (до "высоких нормальных" значений), что запускает процесс формирования КФБ, являющихся "второй линией" защиты — скевенджерами, агрегирующими избыточный кальций в виде наноразмерных частиц фосфата кальция, поглощаемых как макрофагами печени, так и эндотелиальными клетками в процессе циркуляции в системном кровотоке. Интернализация КФБ эндотелиальными клетками вызывает нарушение их функционирования; кроме того, по vasa vasorum КФБ также попадают в адвентицию, способствуя развитию локального воспаления. Таким образом, связующим патофизиологическим звеном связи повышенной склонности сыворотки крови к формированию КФБ и атеросклероза могут являться дисфункция эндотелия и сосудистое воспаление, рассматриваемые в числе ведущих триггеров данного патологического процесса.
В последних исследованиях удалось успешно обнаружить КФБ в сыворотке крови пациентов с терминальной ХПН и преддиализной ее стадией при помощи проточной цитометрии с использованием специфичных к фосфату кальция и клеточным мембранам флюоресцентных маркеров [15]. В ближайшей перспективе это позволит сопоставить полученные в представленной работе результаты по повышенной склонности сыворотки крови пациентов с атеросклерозом к формированию КФБ с прямой детекцией этих частиц в сыворотке крови.
Ограничением проведенного исследования, безусловно, следует считать некоторую гетерогенность сравниваемых групп в отношении коморбидных патологий и лекарственного анамнеза. Тем не менее факторы, в отношении которых были выявлены статистически значимые различия между пациентами с атеросклерозом и условно здоровыми донорами крови (повышенная у больных с атеросклерозом частота АГ, хронической сердечной недостаточности, сахарного диабета, приема антиагрегантов, бе-та-адреноблокаторов, статинов, блокаторов рецепторов к ангиотензину II, блокаторов кальциевых каналов), либо напрямую определяют развитие атеросклероза (АГ, сахарный диабет), либо неразрывно ассоциированы с ним (хроническая сердечная недостаточность, прием всех вышеуказанных классов препаратов). Ни один из участников исследования не принимал препараты кальция или фосфора, что позволило гарантировать отсутствие подобной систематической ошибки в отношении оценки активности формирования КФБ на изученной выборке пациентов.
Сравнивая между собой изучаемые категории пациентов с атеросклерозом, стоит отметить, что пациенты с ХИГМ характеризовались более частым приемом статинов и блокаторов рецепторов к ангио-тензину II, а также менее выраженным стенозом бра-
хиоцефальных артерий в сравнении с перенесшими ИИ больными. Данные различия, на взгляд авторов, также логичны и либо связаны с протективным эффектом данных классов препаратов, либо с тем, что ИИ является следствием прогрессирования атеро-склеротического, в т.ч. стенотического, процесса в экстракраниальных артериях. Более высокая степень гетерогенности наблюдалась между пациентами со стабильной ИБС и ИМ: у больных со стабильной формой ИБС наблюдалась большая частота хронической сердечной недостаточности и многососудистого поражения коронарного русла в сочетании с более сохранной фракцией выброса левого желудочка; их фармакологический анамнез был отмечен более частым приемом антиагрегантов и статинов до госпитализации в стационар.
Важным аспектом данного исследования, который также, возможно, стоит отнести к его ограничениям, является неоднозначность сопоставимости групп в отношении почечной коморбидности. Частота ХПН между группами статистически значимо не различалась, однако при этом скорость клу-бочковой фильтрации у пациентов с КаА была ниже, чем у условно здоровых доноров и пациентов с КоА. Тем не менее сниженная скорость клубочковой фильтрации, в свою очередь, может служить причиной "низкого нормального" уровня общего белка и альбумина и, соответственно, "высокого нормального" уровня ионизированного кальция; иными словами, именно снижение функции почек и может обусловливать выявленные нарушения минерального гомеостаза. В то же время различное снижение
Литература/References
1. Lind L, Skarfors E, Berglund L, et al. Serum calcium: a new, independent, prospective risk factor for myocardial infarction in middle-aged men followed for 18 years. J Clin Epidemiol. 1997;50(8):967-73. doi:10.1016/S0895-4356(97)00104-2.
2. Foley RN, Collins AJ, Ishani A, Kalra PA. Calcium-phosphate levels and cardiovascular disease in community-dwelling adults: the Atherosclerosis Risk in Communities (ARIC) Study. Am Heart J. 2008;156(3):556-63. doi:101l016/j.ahj.2008.05.016.
3. Larsson TE, Olauson H, Hagstrom E, et al. Conjoint effects of serum calcium and phosphate on risk of total, cardiovascular, and noncardiovascular mortality in the community. Arterioscler Thromb Vasc Biol. 2010;30(2):333-9. doi:10.1161/ATVBAHA.109.196675.
4. Heiss A, Eckert T, Aretz A, et al. Hierarchical role of fetuin-A and acidic serum proteins in the formation and stabilization of calcium phosphate particles. J Biol Chem. 2008;283(21):14815-25. doi:101074/jbc.M709938200.
5. Heiss A, Pipich V, Jahnen-Dechent W, Schwahn D. Fetuin-A is a mineral carrier protein: small angle neutron scattering provides new insight on Fetuin-A controlled calcification inhibition. Biophys J. 2010;99(12):3986-95. doi:10/l016/j.bpj.20101l0.030.
6. Kutikhin AG, Velikanova EA, Mukhamadiyarov RA, et al. Apoptosis-mediated endothelial toxicity but not direct calcification or functional changes in anti-calcification proteins defines pathogenic effects of calcium phosphate bions. Sci Rep. 2016;6:27255. doi:101038/srep27255.
7 Shishkova DK, Velikanova EA, Mukhamadiyarov RA, et al. Study of the mechanism specific endoteliotsitov calcium-phosphate BIONA. Siberian scientific medical journal. 2019;4(39):12-21. (In Russ.) Шишкова Д. К., Великанова Е.А., Мухамадияров Р.А. и др. Изучение механизма специфичной эндотелиотоксичности кальций-фосфатных бионов. Сибирский научный медицинский журнал. 2019;4(39):12-21. doi:1015372/SSMJ20190402. 8. Shishkova DK, Velikanova EA, Krivkina EO, et al. Toxic effect of calcium-phosphate biones on the adventitia of the rat abdominal aorta. Atherosclerosis and dyslipidemia.
почечной функции у пациентов с КаА и КоА при выявленных нарушениях минерального гомеостаза в обеих указанных когортах не позволяет сделать однозначного вывода о подобной причинно-следственной связи.
Заключение
Снижение концентрации общего белка и альбумина в крови до "низкого нормального" уровня приводит к истощению белкового депо ионов кальция, что приводит к повышению уровня свободного кальция в крови до "высокого нормального". Это, в свою очередь, вызывает формирование КФБ, являющихся второй линией депо ионов кальция и ассоциированных с развитием КаА и КоА, а также с прогрессиро-ванием КоА от стабильной ИБС до ИМ. Прямая детекция КФБ в крови пациентов с сердечно-сосудистыми заболеваниями при помощи флюоресцентно меченного бисфосфоната в обозримом будущем позволит доказать важность нарушений минерального гомеостаза в патогенезе дисфункции эндотелия, сосудистого воспаления и развитии атеросклероза.
Отношения и деятельность. Работа (дизайн, проведение экспериментов, анализ и интерпретация данных) выполнена в рамках поискового научного исследования (ПНИ) № 2020_419_29 "Определение склонности сыворотки крови пациентов с коронарным и мультифокальным атеросклерозом к формированию эндогенных кальций-фосфатных наночас-тиц, триггера дисфункции эндотелия и атеросклероза", выполняемого НИИ КПССЗ.
2018;(3):37-43. (In Russ.) Шишкова Д. К., Великанова Е. А., Кривкина Е. О. и др. Токсическое действие кальций-фосфатных бионов на адвентицию брюшной аорты крыс. Атеросклероз и дислипидемии. 2018;(3):37-43.
9. Pasch A, Block GA, Bachtler M, et al. Blood Calcification Propensity, Cardiovascular Events, and Survival in Patients Receiving Hemodialysis in the EVOLVE Trial. Clin J Am Soc Nephrol. 2017;12(2):315-22. doi:10.2215/CJN.04720416.
10. Bundy JD, Cai X, Scialla JJ, et al; CRIC Study Investigators. Serum Calcification Propensity and Coronary Artery Calcification Among Patients With CKD: The CRIC (Chronic Renal Insufficiency Cohort) Study. Am J Kidney Dis. 2019;73(6):806-14. doi:10.1053/j. ajkd.2019.01.024.
11. Pruijm M, Lu Y, Megdiche F, et al. Serum calcification propensity is associated with renal tissue oxygenation and resistive index in patients with arterial hypertension or chronic kidney disease. J Hypertens. 2017;35(10):2044-52. doi:101097/HJH.0000000000001406.
12. Smith ER, Ford ML, Tomlinson LA, et al. Serum calcification propensity predicts all-cause mortality in predialysis CKD. J Am Soc Nephrol. 2014;25(2):339-48. doi:101681/ ASN.2013060635.
13. Bostom A, Pasch A, Madsen T, et al. Serum Calcification Propensity and Fetuin-A: Biomarkers of Cardiovascular Disease in Kidney Transplant Recipients. Am J Nephrol. 2018;48(1):21-31. doi:101159/000491025.
14. Nakazato J, Hoshide S, Wake M, et al. Association of calciprotein particles measured by a new method with coronary artery plaque in patients with coronary artery disease: A cross-sectional study. J Cardiol. 2019;74(5):428-35. doi:101016/j.jjcc.2019.04.008.
15. Smith ER, Hewitson TD, Cai MMX, et al. A novel fluorescent probe-based flow cytometric assay for mineral-containing nanoparticles in serum. Sci Rep. 2017;7(1):5686. doi:101038/s41598-017-05474-y.
