Взаимосвязь уровней пепсиногенов в сыворотке крови с патогистологическими параметрами аденом и аденокарцином желудка Текст научной статьи по специальности «Фундаментальная медицина»

гематология

гематология

© КОЛЛЕКТИВ АВТОРОВ, 2013

УДК 616.33-006.5+616.33-006.66]-074

А. В. Соснина1, Н. Н. Сорокина2, А. И. Аутеншлюс1, Д. В. морозов1, Н. Б. Исакова3, А. В. Ванхальский3, С. А. Фурсов3

взаимосвязь уровней пепсиногенов в сыворотке крови с патогистологическими параметрами аденом и аденокарцином желудка

1НИИ молекулярной биологии и биофизики СО РАмН, Новосибирск; 2ЗАО «Вектор-Бест», Новосибирская область; 3Новосибирский областной онкологический диспансер

У больных с аденомами желудка снижены уровни пепсиногена (ПГ) I в сыворотке крови, а также соотношение ПГ-1/ПГ-11. При аденомах и аденокарциномах желудка уровень ПГ-1/ПГ-11 и соотношение ПГ-1/ПГ-11 находились в обратной корреляционной связи с показателями пролиферативной активности эпителиоцитов аденом и опухолевых клеток соответственно. Пороговые уровни ПГ-1/ПГ-11 могут служить критериями выраженности пролиферативной активности эпителиоцитов аденом и клеток аденокарцином желудка.

Ключевые слова: пепсиногены, аденомы, аденокарциномы желудка, пролиферация

A.V. Sosnina, N.N. Sorokina, A.I. Autenshlyus, D.V. Morozov, N.B. Isakova, A.V. Vankhalkiy, S.A. Fursov THE RELATIONSHIP BETWEEN CONCENTRATIONS OF PEPSINOGENS IN BLOOD SERUM AND PATHOHYSTOLOGIC PARAMETERS OF ADENOMAS AND ADENOCARCINOMAS OF STOMACH The article demonstrates that in patients with adenomas of .stomach the concentration ofpepsinogen I in blood .serum and the rate between pepsinogen I and pepsinogen II is decreased. In case of adenomas and adenocarcinomas of stomach the concentration of pepsinogen I and the rate between pepsinogen I and pepsinogen II are in inverse correlation relationship with indicators of proliferative activity of epithelial cells and tumor cells correspondingly. The threshold level ща the rate between pepsinogen I and pepsinogen II can be used as criteria of intensity of proliferative activity of epithelial cells of adenomas and cells of adenocarci-nomas of stomach.

Key words: pepsinogen, adenoma, adenocarcinoma, stomach, proliferation

Введение. Аденомы появляются на фоне хронического гастрита с различной степенью атрофии слизистой оболочки желудка, представляющей собой дисрегенераторный процесс, связанный с нарушением деления камбиальных клеток и их последующей дифференцировки, что позволило рассматривать хронический атрофический гастрит, аденомы и рак желудка как последовательные стадии нарушения клеточного обновления эпителиоцитов [1-3, 9]. Информативными маркерами атрофических изменений в теле желудка могут служить уровни ПГ-1 в сыворотке крови и величина отношения уровня ПГ-1 к уровню ПГ-11 [5, 11]. ПГ-1 продуцируется главными клетками фундальных желез желудка и слизистыми клетками шеек желез, а ПГ-11 - еще и клетками кардиальных, пилорических и дуоденальных бруннеровых желез. С уменьшением массы фундальных желез снижается концентрация ПГ-1 в сыворотке крови, тогда как уровень ПГ-11 остается постоянным [7, 8]. Следовательно, при атрофии слизистой желудка происходит снижение содержания ПГ-1 в сыворотке крови и соотношения ПГ-1/ПГ-11 [4]. Если рассматривать аденомы в качестве промежуточной стадии между атрофическим гастритом и раком желудка, то представляется интересным

Для корреспонденции:

Соснина Анастасия Викторовна, канд. мед. наук, вед. науч. сотр. Адрес: 630105, Новосибирск, ул. Линейная, 43/29 Телефон: 8(383)226-39-20 E-mail: [email protected]

изучение характера взаимосвязи уровней пепсиногенов в сыворотке крови с патогистологическими параметрами аденом и аденокарцином желудка, чему и посвящено настоящее исследование.

Материалы и методы. Материалом исследования служила сыворотка крови 43 человек - 15 больных с аденомами желудка, 14 больных с аденокарциномами желудка и 14 условно здоровых без злокачественных новообразований в анамнезе и обострения хронических инфекционно-воспалительных заболеваний. Диагноз аденом и адено-карцином выставлялся на основании заключения патологоанатома, во всех случаях аденомы выявлялись на фоне атрофического гастрита и сочетались с дисплазией эпителия желудка. В исследовании анализировали образцы сыворотки крови, взятой до оперативного вмешательства, только тех больных, у которых диагноз был подтвержден после операции. Содержание ПГ-1 и ПГ-11 в сыворотке крови определяли методом иммуноферментного анализа с использованием наборов реагентов «Пепсиноген 1-ИФА-БЕСТ» и «Пепсиноген 2-ИФА-БЕСТ» производства ЗАО «Вектор-Бест» и выражали в микрограммах на 1 л. У больных с аденомами высчитывали показатель пролиферативной активности - процент Ю-67-позитивных клеток на 1000 эпителиоцитов аденом, а у больных с аде-нокарциномами желудка - на 1000 опухолевых клеток [6]. Патогистологическую картину аденом и аденокарцином характеризовали по нижеперечисленным параметрам в баллах, которые возрастали от меньшей до большей выраженности признака: при аденомах учитывали степень выраженности инфильтрации лимфоцитами, макрофагами

клиническая лабораторная диагностика, № 2, 2013

Таблица 1

Уровни пепсиногенов в сыворотке крови и величины ПГ-1/ПГ-11 у больных и здоровых

Группа обследованных Уровень ПГ-1, мкг/л (норма 30-130) Уровень ПГ-11, мкг/л (норма 4-22) ПГ-1/ПГ-11 (норма 3-20)

Ме (2 -й; 7-й процентиль)

Больные с аденома- 28,0** 16,3 1,9*

ми желудка(п = 15) (21,0; 75,9) (12,7; 19,1) (1,6; 3,7)

Больные с аденокар- 57,8 11,2 4,7

циномами желудка (14,6; 97,7) (9,1; 17,5) (1,3; 9,8)

(п = 14)

Условно здоровые 96,9 18,5 6,3

(п = 14) (85,4; 120,3) (13,4; 22,0) (3,8; 8,8)

Примечание. * - р < 0,05; ** - р < 0,01 по сравнению с условно здоровыми.

Таблица 2

Корреляционные связи между уровнями пепсиногенов в сыворотке крови, величинами ПГ-1/ПГ-11 и процентом К-67-позитивных клеток у больных с аденомами желудка

Показатель Процент Ю-67-позитивных эпителиоцитов аденом

Уровень ПГ-1

г -0,671

Р 0,006

Уровень ПГ-11

г -0,550

Р 0,034

ПГ-1/ПГ-11

г -0,590

Р 0,021

Примечание. Здесь и в табл. 3 приведены только статистически значимые корреляционные связи.

и гранулоцитами, количество клеток с митозами и патологическими митозами в поле зрения, степень выраженности дисплазии эпителия; при аденокарциномах определяли количество опухолевых клеток в сосудах, степень выраженности инфильтрации опухоли лимфоцитами, макрофагами и гранулоцитами, количество опухолевых клеток с митозами и патологическими митозами в поле зрения, степень васкуляризации опухоли, глубину инвазии, количество пораженных метастазами регионарных лимфоузлов, наличие отдаленных метастазов, вариант гистологической дифференцировки опухоли, который устанавливался на основании процентного содержания высоко-, умеренно- и низкодифференцированных клеток.

Статистическую обработку данных выполняли с использованием методов непараметрического анализа. Сравнение изучаемых показателей проводили с помощью критериев Крускалла-Уоллиса, Данна и двустороннего критерия Фишера. Результаты исследования и количество наблюдений (п) представлены в таблицах. Нормативные значения показателей указаны, согласно инструкциям к используемым наборам реагентов. Данные выражены в виде медиан (Ме) и процентилей (2-го и 7-го). Различия между группами считались статистически значимыми при р < 0,05. Для выявления взаимосвязи переменных проводили расчет коэффициента ранговой корреляции по Спир-мену (г). Для статистической обработки данных применяли программу Statistica 6.0.

Результаты и обсуждение. Исследование показало, что у больных с аденомами содержание ПГ-1 в сыворотке крови и величина отношения ПГ-1/ПГ-11 было более низким по сравнению с соответствующими показателями здоровых (табл. 1), что указывало на атрофические изменения в слизистой оболочке желудка, на фоне которых развиваются аденомы. При этом содержание ПГ-1 и ПГ-11 в сыворотке крови, а также величина их соотношения находились в обратной корреляционной связи с процентом Ю-67-позитивных эпителиоцитов (табл. 2).

При аденокарциномах желудка содержание ПГ-1 и ПГ-11 в сыворотке крови и соотношение ПГ-1/ПГ-11 не отличались от показателей здоровых, так как наряду с больными с нормальным или сниженным содержанием пепсиногенов встречались пациенты и с высоким уровнем, что согласуется с данными других исследователей [10]. Содержание ПГ-1 находилось в обратной корреляционной связи с количеством митозов в поле зрения (табл. 3), а содержание ПГ-11 - в прямой корреляционной связи с относительным содержанием в опухоли низкодифференцированных клеток и в обратной - с содержанием высокодифференцированных, что подтверждалось прямой корреляционной связью между уровнем ПГ-11 и вариантом гистологический дифференцировки опухоли, баллы которого возрастали от высоко- до низкодифферен-цированной аденокарциномы. Что касается величины ПГ-1/ ПГ-11, то она находилась в обратной корреляционной связи с количеством клеток опухоли с митозами и с количеством опухолевых клеток в сосудах. В отличие от аденом не получено статистически значимых корреляционных связей между концентрацией пепсиногенов в сыворотке крови, их соотношением и процентом Ю-67-позитивных клеток опухоли.

Таким образом, представленные данные свидетельствуют о том, что уровни пепсиногенов в сыворотке крови и их соотношение являются маркерами дисрегенераторных измене-

Таблица 3

Корреляционные связи между уровнями пепсиногенов в сыворотке крови, величинами ПГ-1/ПГ-11 и патогистологическими параметрами опухолей у больных с аденокарциномами желудка

Показатель Уровень пепсино-гена I Уровень пепсино-гена II ПГ-1/ПГ-11

Количество опухолевых клеток

в сосудах

г -0,597

р 0,024

Количество клеток опухоли с

митозами

г -0,588 -0,706

р 0,027 0,005

Содержание в опухоли низкодифференцированных клеток

г 0,643

р 0,013

Содержание в опухоли высоко-дифференцированных клеток

г -0,581

р 0,029

Вариант гистологической диффе-

ренцировки опухоли

г 0,642

р 0,013

иммунология

ний в эпителии слизистой оболочки желудка, поэтому возникает необходимость интерпретации их величин внутри групп больных с аденомами и аденокарциномами желудка.

Вернемся к данным табл. 1. Сравнивая величины ПГ-1/ ПГ-11 между группой больных с аденомами и группой здоровых, необходимо подчеркнуть, что 75-й процентиль этого показателя у больных с аденомами был ниже процентиля у здоровых. Если взять величину ПГ-1/ПГ-11, равную 3,7 (75-й процентиль в группе больных с аденомами) в качестве порогового уровня, то у этих больных при величине показателя, не превышающей 3,7 (12 человек), относительное содержание Ki-67-позитивных эпителиоцитов аденом превышало 10% в 75% случаев (9 человек). При величине ПГ-1/ПГ-11 свыше 3,7 во всех случаях (3 человека) относительное содержание Ki-67-позитивных эпителиоцитов было менее 10% (р < 0,04 по двустороннему критерию Фишера).

У больных с аденокарциномами желудка наиболее высокое значение коэффициента корреляции (см. табл. 3) было получено между величиной ПГ-1/ПГ-11 и количеством опухолевых клеток с митозами, что также свидетельствует о взаимосвязи уровня пепсиногенов с пролиферативной активностью опухолевых клеток. При величине этого отношения, не превышающей 4 (6 человек), в 67% случаев (4 человека) количество опухолевых клеток с митозами в поле зрения составило 6 клеток и более, а при величине 4 и более в 100% случаев (8 человек) количество опухолевых клеток с митозами не превышало 5 клеток в поле зрения (р < 0,02 по двустороннему критерию Фишера).

Таким образом, определенные нами пороговые уровни величин ПГ-1/ПГ-11 могут явиться критериями, свидетель-

ствующими о выраженности пролиферативной активности эпителиоцитов аденом и клеток аденокарцином желудка.

ЛИТЕРАТУРА

1. Куренков Е. Л. // Рос. журн гастроэнтерол., гепатол. и колопрок-тол. - 2000. - № 2. - С. 18-25.

2. Наумова Л. А., Пальцев А. И., Беляева Я. Ю. // Тер. арх. - 2009. -№ 2. - С. 17-23.

3. Осадчук A. M., Осадчук М. А., Кветной И. М. // Клин. мед. -2008. - № 5. - С. 33-38.

4. Пиманов С. И., Макаренко Е. В. // Тер. арх. - 2008. - № 2. - С. 15-21.

5. Успенская М. Н., Калиновский В. П., Ткаченко Е. И. // Вопр. он-кол. - 2007. - Т. 53, № 3. - С. 304-310.

6. Evans С., Morrison I., Heriot A. G. et al. // Br. J. Cancer. - 2006. -Vol. 94, № 10. - P. 1412-1419.

7. Kim N, Jung H. C. // Gut Liver. - 2010. - Vol. 4, № 3. - P. 307319.

8. Mukoubayashi C., YanaokaK., OhataH. et al. // Intern. Med. - 2007. - Vol. 46, № 6. - P. 261-266.

9. Park do Y., Lauwers G. Y. // Arch. Pathol. Lab. Med. - 2008. - Vol. 132, № 4. - P. 633-640.

10. So J. B., Yeoh K. G., Moochala S. // Gastric Cancer. - 2002. - Vol. 5. - P. 228-232.

11. SongH. J., JangS. J., YunS. C. et al. // Gut Liver. - 2010 - Vol. 4, № 4. - P. 475-480.

Поступила 05.04.12

иммунология

© КОЛЛЕКТИВ АВТОРОВ, 2013 УДК 616.36-002-022-092:612.014.467

К. А. Сысоев1, А. Б. Чухловин1, А. А. Тотолян2

диагностическая роль определения хемокинов и их рецепторов при хроническом гепатите с

1Санкт-Петербургский государственный медицинский университет им. акад. И. П. Павлова; 2Санкт-Петербургский НИИ эпидемиологии и микробиологии им. Пастера

Хронический гепатит С (ХГС) характеризуется нарастанием воспалительных нарушений и прогрессированием фиброза печени. Соответствующие иммунологические механизмы повреждения печени остаются малоизученными. Настоящий обзор посвящен анализу литературных и собственных данных о роли хемокинов в патогенезе ХГС. Хемокины представляют собой небольшие катионные белки, способствующие транзиту и оседанию мигрирующих клеток (главным образом лейкоцитов) в тканях и органах. Так, показана существенная роль хемокинов в тканевом гомеостазе, при воспалении, заживлении ран и клеточной пролиферации. Отдельные виды хемокинов продуцируются различными типами клеток и воздействуют на клетки-мишени через их специфические рецепторы. Хемокины и хемокиновые рецепторы СС- и СХС-семейств по данным разных исследователей вовлечены в процессы фиброзирования и провоспалительную активацию гепатобилиарной системы при ХГС. Обращает на себя внимание разнообразие продуцентов и мишеней хемокинов в печени: гепатоциты, звездчатые клетки, эндотелиальные клетки, макрофаги (клетки Купфера), дендритные клетки, лимфоциты и моноциты. Рассмотрен патогенез ХГС с точки зрения участия хемокинов и хемокиновых рецепторов на различных этапах клеточного транзита. Охарактеризованы наиболее важные клеточные популяции - участники патологических изменений при ХГС. Снижение экспрессии генов CCR1, CCR2, CCR3 и CCR5 в лейкоцитах крови заслуживает дополнительных исследований с целью выявления их диагностической ценности в качестве маркера нарушений иммунной системы у пациентов с ХГС.

Ключевые слова: хемокины, хемокиновые рецепторы, хронический гепатит С