Научная статья на тему 'Взаимосвязь первичной и вторичной контракции с гистоструктурой кожно-фасциального лоскута'

Взаимосвязь первичной и вторичной контракции с гистоструктурой кожно-фасциального лоскута Текст научной статьи по специальности «Клиническая медицина»

CC BY
132
16
i Надоели баннеры? Вы всегда можете отключить рекламу.
Ключевые слова
КРЫСЫ / МОДЕЛИ ЗАБОЛЕВАНИЙ / КОЖА / КОНТРАКЦИЯ / ТКАНЕВОЕ ПРИЖИВЛЕНИЕ / ГИСТОМОРФОМЕТРИЯ / RATS / DISEASES MODELS / SKIN / CONTRACTION / TISSUE ENGRAFTMENT / HISTOMORPHOMETRY

Аннотация научной статьи по клинической медицине, автор научной работы — Щудло Н. А., Варсегова Т. Н., Щудло М. М., Сбродова Л. И., Ступина Т. А.

Цель. Провести сопоставительный анализ гистоморфометрических характеристик кожи васкуляризованного кожно-фасциального лоскута при разной степени его первичной и вторичной контракции. Материал и методы. Эксперименты проведены на 28 крысах линии Вистар. У животных cформирован кожно-фасциальный лоскут по шаблону площадью 18 см2 на основе поверхностной надчревной артерии, которая была клипирована; через 1,5 часа лоскут реперфузирован и репонирован. Животные эвтаназированы через 12 дней после операции. Использованные в исследовании методы анализ лейкоцитарной формулы крови, компьютерная планиметрия цифровых изображений лоскутов, гистоморфометрия, иммуногистохимия. Результаты. После реплантации лоскута у четырех крыс его площадь увеличилась на 6-30% по сравнению с шаблоном, у 24 уменьшилась на 9-34%. В конце опыта крысы распределены на 4 группы: 1 увеличение площади лоскута (+5-19%), 2 уменьшение первичной контракции (до -1-14%), 3 значительная первичная (-22-34%) и вторичная (-20-25%) контракция, 4 выраженная вторичная контракция (-30-59%). Дефекты эпидермиса, связанные с замедленным раневым заживлением и частичным некрозом, в группах 1-3 не превышали 3%, а в группе 4 варьировали от 8 до 41% от площади лоскута. Наибольшая выраженность гипоплазии эпидермиса отмечена в группе 1 (47% промеров толщины), гиперплазии в группе 4 (67%). По сравнению с нормальной кожей в группах 1-4 прогрессивно снижались численные плотности придатков кожи и объемная плотность адипоцитов дермы, увеличивалась выраженность постнекротических изменений дермы и гиподермы. Заключение. Полученные результаты обосновывают необходимость мониторинга первичной и вторичной контракции васкуляризованных кожно-фасциальных лоскутов с целью разработки индивидуально ориентированных протоколов терапии, модулирующей пролиферативную активность эпидермиса и реваскуляризацию сосудистых сплетений кожи. Научная новизна статьи Изучены гистоморфометрические характеристики эпидермиса и васкуляризации слоев кожи хирургических лоскутов с осевым кровоснабжением в зависимости от направленности и величины изменения их площади в момент реплантации и в послеоперационном периоде. Установлено, что удлинение и расширение лоскута вызывает атрофию сосочков дермы и эпидермиса, а значительная контракция в послеоперационном периоде увеличивает вероятность замедления раневого заживления, эпидермолизиса, фиброза дермы и гиподермы. Мониторинг изменений площади лоскутов позволяет определить показания к терапии, модулирующей пролиферативную активность эпидермиса и реваскуляризацию сосудистых сплетений кожи.

i Надоели баннеры? Вы всегда можете отключить рекламу.

Похожие темы научных работ по клинической медицине , автор научной работы — Щудло Н. А., Варсегова Т. Н., Щудло М. М., Сбродова Л. И., Ступина Т. А.

iНе можете найти то, что вам нужно? Попробуйте сервис подбора литературы.
i Надоели баннеры? Вы всегда можете отключить рекламу.

INTERRELATION BETWEEN PRIMARY AND SECONDARY CONTRACTION WITH HISTOLOGICAL STRUCTURE OF FASCIOCUTANEOUS FLAP

Objective. To conduct histomorphometric assessment of the skin in fasciocutaneous flap with regard to its primary and secondary contraction degree. Methods. The experiments were carried out on 28 rats of the Wistar line. In animals a fasciocutaneous flap was formed according to a template with the area of 18 cm2 on the basis of a superficial epigastric artery that was clipped; after 1.5 hours the flap was reperfused and re-donated. The animals were euthanized 12 days after the operation. The methods used in the study were the analysis of the leukocyte blood formula, computerized planimetry of the digital images of flaps, histomorphometry, immunohistochemistry. Results. Right after the flap reposition in four rats, its area increased by 6-30% compared to the template and decreased by 9-34% in 24 rats. At the end of the experiment, rats were divided into 4 groups: 1 an increase in the flap area (+ 5-19%), 2 a decrease in primary contraction (up to -1-14%), 3 significant primary (-22-34%) and secondary -20-25%) contraction, 4 expressed secondary contraction (-30-59%). Defects of the epidermis associated with delayed wound healing and partial necrosis in groups 1-3 did not exceed 3%, and in group 4 varied from 8 to 41% of the area of the flap. The highest degree of epidermal hypoplasia was registered in group 1 (47% of thickness measurements), hyperplasia in group 4 (67%). In comparison with a normal skin, the numerical densities of the skin appendages and the volume density of the adipocytes of the dermis progressively decreased in groups 1-4, the severity of postnecrotic changes in the dermis and hypodermis increased. Conclusions. The obtained results substantiate the necessity for monitoring of the primary and secondary contraction of the vascularized fasciocutaneous flaps to elaborate individually oriented therapy protocols in order to modulate the proliferative activity of epidermis and revascularization of the vascular plexus of the skin. What this paper adds Histomorphometric characteristics of the epidermis and vascularization of skin layers of surgical flaps with the axial blood supply have been studied depending on the direction and size of changes in their area at the time of replantation and in the postoperative period. It has been established that lengthening and widening of the flap causes atrophy of the papillae of the dermis and epidermis, and significant contraction in the postoperative period increases the probability of retardation of wound healing, epidermolysis, fibrosis of the dermis and hypodermis. Monitoring changes in the area of flaps allow determining the indications for the therapy modulating proliferative activity of the epidermis and revascularization of the vascular plexuses of the skin.

Текст научной работы на тему «Взаимосвязь первичной и вторичной контракции с гистоструктурой кожно-фасциального лоскута»

doi: 10.18484/2305-0047.2018.3.284

Н.А. ЩУДЛО, Т.Н. ВАРСЕГОВА, М.М. ЩУДЛО Л.И. СБРОДОВА, Т.А. СТУПИНА

взаимосвязь первичной и вторичной контракции с гистоструктурой кожно-фасциального лоскута

Российский научный центр «Восстановительная травматология и ортопедия» им. акад. Г.А. Илизарова, г. Курган, Российская Федерация

Цель. Провести сопоставительный анализ гистоморфометрических характеристик кожи васкуляри-зованного кожно-фасциального лоскута при разной степени его первичной и вторичной контракции.

Материал и методы. Эксперименты проведены на 28 крысах линии Вистар. У животных сформирован кожно-фасциальный лоскут по шаблону площадью 18 см2 на основе поверхностной надчревной артерии, которая была клипирована; через 1,5 часа лоскут реперфузирован и репонирован. Животные эвтаназированы через 12 дней после операции. Использованные в исследовании методы — анализ лейкоцитарной формулы крови, компьютерная планиметрия цифровых изображений лоскутов, гистоморфометрия, иммуногистохимия.

Результаты. После реплантации лоскута у четырех крыс его площадь увеличилась на 6-30% по сравнению с шаблоном, у 24 — уменьшилась на 9-34%. В конце опыта крысы распределены на 4 группы: 1 — увеличение площади лоскута (+5-19%), 2 — уменьшение первичной контракции (до -1-14%), 3 — значительная первичная (-22-34%) и вторичная (-20-25%) контракция, 4 — выраженная вторичная контракция (-30-59%). Дефекты эпидермиса, связанные с замедленным раневым заживлением и частичным некрозом, в группах 1-3 не превышали 3%, а в группе 4 варьировали от 8 до 41% от площади лоскута. Наибольшая выраженность гипоплазии эпидермиса отмечена в группе 1 (47% промеров толщины), гиперплазии — в группе 4 (67%). По сравнению с нормальной кожей в группах 1-4 прогрессивно снижались численные плотности придатков кожи и объемная плотность адипоцитов дермы, увеличивалась выраженность постнекротических изменений дермы и гиподермы.

Заключение. Полученные результаты обосновывают необходимость мониторинга первичной и вторичной контракции васкуляризованных кожно-фасциальных лоскутов с целью разработки индивидуально ориентированных протоколов терапии, модулирующей пролиферативную активность эпидермиса и рева-скуляризацию сосудистых сплетений кожи.

Ключевые слова: крысы, модели заболеваний, кожа, контракция, тканевое приживление, гистоморфо-метрия

Objective. To conduct histomorphometric assessment of the skin in fasciocutaneous flap with regard to its primary and secondary contraction degree.

Methods. The experiments were carried out on 28 rats of the Wistar line. In animals a fasciocutaneous flap was formed according to a template with the area of 18 cm2 on the basis of a superficial epigastric artery that was clipped; after 1.5 hours the flap was reperfused and re-donated. The animals were euthanized 12 days after the operation. The methods used in the study were the analysis of the leukocyte blood formula, computerized planimetry of the digital images of flaps, histomorphometry, immunohistochemistry.

Results. Right after the flap reposition in four rats, its area increased by 6-30% compared to the template and decreased by 9-34% in 24 rats. At the end of the experiment, rats were divided into 4 groups: 1 — an increase in the flap area (+ 5-19%), 2 — a decrease in primary contraction (up to -1-14%), 3 — significant primary (-22-34%) and secondary -20-25%) contraction, 4 — expressed secondary contraction (-30-59%). Defects of the epidermis associated with delayed wound healing and partial necrosis in groups 1-3 did not exceed 3%, and in group 4 varied from 8 to 41% of the area of the flap. The highest degree of epidermal hypoplasia was registered in group 1 (47% of thickness measurements), hyperplasia in group 4 (67%). In comparison with a normal skin, the numerical densities of the skin appendages and the volume density of the adipocytes of the dermis progressively decreased in groups 1-4, the severity of postnecrotic changes in the dermis and hypodermis increased.

Conclusions. The obtained results substantiate the necessity for monitoring of the primary and secondary contraction of the vascularized fasciocutaneous flaps to elaborate individually oriented therapy protocols in order to modulate the proliferative activity of epidermis and revascularization of the vascular plexus of the skin.

Keywords: rats, diseases models, skin, contraction, tissue engraftment, histomorphometry

Novosti Khirurgii. 2018 May-Jun; Vol 26 (3): 284-292

Interrelation Between Primary and Secondary Contraction with Histological Structure of Fasciocutaneous Flap N.A. Shchdlo, T.N. Varsegova, M.M. Shchdlo, L.I. Sbrodova, T.A. Stupina

Научная новизна статьи

Изучены гистоморфометрические характеристики эпидермиса и васкуляризации слоев кожи хирургических

®

ГлняМлГк

лоскутов с осевым кровоснабжением в зависимости от направленности и величины изменения их площади в момент реплантации и в послеоперационном периоде. Установлено, что удлинение и расширение лоскута вызывает атрофию сосочков дермы и эпидермиса, а значительная контракция в послеоперационном периоде увеличивает вероятность замедления раневого заживления, эпидермолизиса, фиброза дермы и гиподермы. Мониторинг изменений площади лоскутов позволяет определить показания к терапии, модулирующей про-лиферативную активность эпидермиса и реваскуляризацию сосудистых сплетений кожи.

What this paper adds

Histomorphometric characteristics of the epidermis and vascularization of skin layers of surgical flaps with the axial blood supply have been studied depending on the direction and size of changes in their area at the time of replantation and in the postoperative period. It has been established that lengthening and widening of the flap causes atrophy of the papillae of the dermis and epidermis, and significant contraction in the postoperative period increases the probability of retardation of wound healing, epidermolysis, fibrosis of the dermis and hypodermis. Monitoring changes in the area of flaps allow determining the indications for the therapy modulating proliferative activity of the epidermis and revascularization of the vascular plexuses of the skin.

Введение

Контракция кожных трансплантатов и лоскутов нередко ухудшает эстетические и функциональные результаты операций по замещению дефектов покровных тканей, но остается малоизученной [1]. Первичная контракция происходит в момент иссечения лоскута. Если его длинная ось параллельна линиям натяжения кожи, площадь сокращается на 30%, при перпендикулярном расположении лоскут может удлиниться [2]. Применение новых технологий определения линий натяжения показало, что их расположение индивидуально варьирует и меняется в зависимости от положения тела [3], что может создавать трудности при проектировании и выкраивании лоскутов. Вторичная контракция развивается по мере формирования рубца в зоне контакта с раневым ложем. На модели васкуляризованного лоскута крыс установлено, что при контракции, превышающей 20% от проектируемой площади (шаблона), увеличиваются выраженность фиброза гиподермы и некротические изменения эпидермиса [4]. Взаимосвязь контракции лоскута с изменениями васкуляризации и других гистоморфометриче-ских характеристик не изучена.

Цель. Провести сопоставительный анализ гистоморфометрических характеристик кожи васкуляризованного кожно-фасциального лоскута при разной степени его первичной и вторичной контракции.

Материал и методы

Эксперименты проведены на 28 крысах линии Вистар (вес от 380 до 560 г, возраст 8-12 месяцев) в соответствии с требованиями Приказа МЗ РФ № 267 от 19.06.2003. Все манипуляции с животными проводились в соответствии с Европейской конвенцией по защите позвоночных животных, используемых для экспериментов и других научных целей,

межгосударственным стандартом ГОСТ 33217 — 2014 Руководство по содержанию и уходу за лабораторными животными и СП 2.2.1.3218-14 «Санитарно-эпидемиологические требования к устройству, оборудованию и содержанию экспериментально-биологических клиник (вивариев)». Исследование одобрено этическим комитетом учреждения (протокол 5-55 от 21.12.17). С использованием шаблона 3*6 см под общим обезболиванием в условиях операционной сформирован кожно-фасциальный лоскут на основе a. epigastrica inferior superficialis (SIEA): медиальная граница — 0,5 см латеральнее белой линии живота, верхняя — нижний край реберной дуги, нижняя — параллельная линия на уровне гребня подвздошной кости, латеральная — параллельна медиальной. С целью моделирования соответствующего клиническим операциям по пересадке и транспозиции лоскутов периода ишемии артерию клипировали в течение 90 минут, затем лоскут был реперфу-зирован и реплантирован. Краниальная часть лоскута относилась к ангиосому a. thoracica lateralis и после формирования лоскута не пер-фузировалась ею (рис. 1). площадь лоскута после реплантации варьировала от 11,8 до 21,3 см2 (15,9+8,35 см2 (M±g)).

Через 12 дней после операции крыс эвтана-зировали. Мазки крови, взятой до операции и в конце опыта из хвостовых вен, фиксировали и

Рис. 1. Схема экспериментальной модели: А — элева-ция продленного SIEA-лоскута и копирование кро-воснабжающей артерии, Б — репозиция после 90-минутного клипирования.

окрашивали по Романовскому. Подсчитывали лейкоцитарную формулу, индекс напряженности адаптации (ИНА) и индекс иммуноре-активности (ИИР) [5]. В масштабированных цифровых изображениях методом компьютерной планиметрии и колориметрического анализа определены степень контракции лоскутов (в процентах от шаблона), индекс дефектов эпидермиса (их суммарная площадь в зонах некроза и неполного раневого заживления в процентах от площади лоскута), доля экстрава-заций (участков измененного околососудистого фона во внутренней поверхности лоскутов). Для гистологического исследования иссекали стандартные фрагменты лоскутов. С учетом известной из литературы [6] и анализа собственного материала значительной межиндивидуальной вариативности гистоморфометрических параметров кожи интактных крыс использовали условную норму — контрлатеральные участки кожи в опытах с наименьшими отклонениями площади лоскутов от шаблона (-1+5%). Парафиновые срезы толщиной 5-7 мкм окрашивали гематоксилином-эозином по Вейгерту и по Ван-Гизону, часть помещали на стекла с адгезивным покрытием (поли-Ь-лизин), определяли экспрессию белков ki-67 (маркера пролиферации) и vWF (маркера эндотелиоцитов) по протоколу фирмы-производителя с использованием систем визуализации Novolink Polymer (Novo-castra, Великобритания). Препараты изучали с помощью стереомикроскопа «AxioScope.Al» с цифровой камерой «AxioCam» (Carl Zeiss Micro-Imaging GmbH, Германия). Гистоморфометрия выполнена в программе «ВидеоТесТ Мастер-Морфология, 4.0». В выборках из 25-30 полей зрения с каждого тканевого образца определены толщина эпидермиса, дермы и гиподермы, количество сосочков дермы в 1 мм длины среза,

толщина, объемные плотности коллагеновых и эластических волокон дермы и гиподермы, а также адипоцитов гиподермы, численные плотности придатков кожи, капилляров дермы и гиподермы.

Статистика

Статистическая обработка проведена в компьютерной программе Attestat (разработчик — И.П. Гайдышев), версия 9.3.1. С учетом объема выборок проведена проверка данных на нормальность распределения с помощью W-критерия Шапиро-Уилка. Поскольку для некоторых выборок гипотеза о нормальности отклонена, количественные характеристики выборочных совокупностей представлены в таблицах в виде медиан и квартилей (Me (Q1; Q3)), гипотезы о различиях проверяли с помощью непараметрических критериев Вилкоксона и Манна-Уитни, уровень значимости 0,05.

Результаты

после реплантации площадь лоскута увеличилась у четырех крыс, у остальных 24 уменьшилась на 9-34% (таблица 1). Через 12 дней лоскуты распределились по отклонениям площади от шаблона на четыре группы:

1 — остаточное увеличение площади лоскута,

2 — незначительная остаточная контракция, 3 — значительная остаточная контракция, 4 — выраженная вторичная контракция. Схематично эти изменения представлены на рис. 2. индекс дефектов эпидермиса (таблица 1) в группе 1 достоверно (p<0,05) меньше, чем в группах 2-4. В группах 1-2 дефекты эпидермиса выявлены только в зонах неполного раневого заживления, в группе 3 отмечены также участки краевого не-

Таблица 1

Клинико-анатомические характеристики лоскутов через 12 дней после операции

Группа /параметр 1 (n=4) 2 (n=11) 3 (n=8) 4 (n=5)

Отклонения площади После репозиции лоскута

лоскута от шаблона (тш-тах, %) (+6) - (+30) (-9) - (-27) (-22) - (-34) Через 12 дней после операции (-9) - (-34)

(+5) - (+19) (-1) - (-14) (-20) - (-25) (-30) - (-59)

Индекс дефектов эпидермиса (Ме (01; 03), % от площади лоскута) 0,08 (0; 0,20) 0,48х (0,19; 0,48) 0,59х (0,15; 0,68) 38,10х'2'3 (12,17; 27,08)

Доля экстравазаций (Ме (01; 03), % от площади 9,5 (0; 28,0) 10,0 (5,0; 30,0) 16,001.2 (16,5; 29,5) 29,01А3 (28,0; 29,0)

внутренней поверхности лоскута)

Площадь выжившей кожи (Ме (01; 03)), см2 20,4 (19,1; 21,5) 16,3' (15,7; 16,3) 13,7х'2 (13,3; 14,3) 9,81А3 (8,3; 9,5)

Примечание: надстрочные индексы — статистически значимые отличия групп 2-4 от групп меньшего порядкового номера (р<0,05).

Рис. 2. Схема отклонений площади лоскута от шаблона: группа 1 — первичное и остаточное увеличение площади лоскута, группы 2 и 3 — первичная и остаточная контракция, группа 4 — первичная и вторичная контракция. 0 — контур шаблона, 1 — контур лоскута после репозиции, 2 — контур лоскута через 12 дней после операции.

кроза лоскутов, в группе 4, кроме того, выражен некроз межангиосомной зоны. Доля экстрава-заций во внутренней поверхности лоскутов в группах 1 и 2 сопоставима, в группах 3-4 — значимо (р<0,05) увеличена. Площадь выжившей кожи в группе 1 составила 112,8% шаблона, в группах 2, 3, 4 - 90,6%, 76,4% и 56,7%.

Показатели лейкоцитарной формулы через 12 дней после операции не выходили за пределы референсного диапазона. Значимое снижение ИНА (таблица 2) относительно дооперационных значений выявлено в группе 4 (р<0,05). ИИР в группе 2 не отличался от дооперационного (р>0,05), в остальных группах — снижение на уровне статистической тенденции (р<0,1).

При гистологическом исследовании установлено, что состояние эпидермиса в разных участках лоскутов отличалось. Так, в зонах атрофии сосочков дермы при истончении (гипоплазии) эпидермиса частота встречаемости пролифери-рующих клеток в базальном слое снижалась, и появлялись пикнотические ядра (рис. 3 А).

для нормопластического эпидермиса характерен однорядный базальный слой; наличие одного-двух слоев шиповатых и до трех слоев зернистых клеток (рис. 3 Б); фигуры митоза и к1-67-позитивные ядра встречаются в основном в базальном слое. В участках фиброзного постнекротического замещения дермы выражен постпролиферативный акантоз - утолщение шиповатого слоя с повышением частоты встречаемости в нем митозов и к1-67-позитивных ядер, который нередко сочетался с гипергранулезом (рис. 3 В и 3 Г).

Гистограммы частотного распределения

промеров толщины эпидермиса (рис. 4) показывают, что в группе 1 преобладает гипо-пластичный эпидермис (46% — первый класс), максимальная доля нормопластичного эпидермиса была в группах 2 и 3 (по 54% — второй класс). В группе 4 преобладал гиперпластичный эпидермис (67% в классах 3-7).

толщина эпидермиса (таблица 3) в группе 2 не имела статистически значимых отличий от условной нормы, в группах 1 и 3 уменьшалась, а в группе 4 значительно превышала ее. Количество сосочков дермы на 1 мм длины среза в группе 1 уменьшено, а в группе 3 увеличено (р<0,05). В группах 1, 3 и 4 выражено утолщение дермы. Во всех группах повышена ее клеточ-ность за счет увеличения количества фибро-бластов и фиброцитов (максимально в группе 4). Объемная плотность коллагеновых волокон дермы в группах 2, 3, 4 уменьшена на уровне статистической тенденции (р<0,1). Объемная плотность эластических волокон дермы увеличена во всех группах; но наиболее значительно — в группе 4, наименее — в группе 3. Численная плотность придатков кожи по сравнению с условной нормой уменьшена во всех экспериментальных группах. Численная плотность капилляров дермы в группах 1 и 2 увеличена за счет дифференцированных и новообразующихся капилляров. Во всех экспериментальных группах толщина гиподермы достоверно уменьшена, а численная плотность капилляров увеличена, но наиболее значительно — в группах 1 и 4. Численная плотность капилляров гиподермы в группах 1 и 2 увеличена (р<0,05). Объемная плотность адипоцитов гиподермы уменьшена,

таблица 2

Срок опыта — группа / До Через 12 суток после операции

параметр операции Группа 1 Группа 2 Группа 3 Группа 4

ИНА 3,31 4,33 4,00 3,31 1,59*

(3,31; 4,40) (2,44; 6,55) (1,98; 4,06) (2,64; 3,03) (0,73; 1,67)

ИИР 4,69 3,50 4,27 2,45 2,00

(3,35; 6,00) (2,13; 4,50) (2,40; 5,22) (2,24; 2,44) (1,31; 9,38)

Примечание: * — статистически значимое отличие от дооперационного значения (р<0,05).

что связано не только с уменьшением их размеров, но и с постнекротическим замещением жировой ткани созревающей грануляционной. Это сопровождалось увеличением содержания коллагена и эластина в гиподерме и было более выражено в группе 3 и особенно — в группе 4.

Обсуждение

Лоскуты с осевым кровоснабжением характеризуются высоким процентом приживления, но остаются нерешенными проблемы частичного некроза и замедленного раневого заживления

Рис. 3. Типичные изменения эпидермиса кожи лоскутов через 12 дней после операции: А — в группе 1, Б — в группе 2, В — в группе 3, Г — в группе 4. Фрагменты парафиновых срезов. Окраска — гематоксилин-эозин. Ув. *500.

Рис. 4. Частотное распределение промеров толщины эпидермиса: абсциссы — размерные диапазоны (мкм), ординаты -частота диапазонов в процентах.

[7, 8], особенно если необходимая для закрытия дефекта покровных тканей площадь лоскута превышает территорию кровоснабжающей артерии. Неотъемлемые составляющие раневого заживления — ретракция краев раны, вызывающая наибольшие смещения поверхностных структур кожи, и последующая контракция, смещающая в большей степени глубокие структуры [9]. Лоскут меняет свою площадь в силу собственных упруго-эластических свойств и под действием натяжения раны. Вторичная контракция полнослойных кожных трансплантатов у людей увеличивается при развитии инфекционных осложнений [10], что ставит вопрос о ее взаимосвязи с реваскуляризацией, поскольку сокращение или увеличение площади неизбежно конфигурирует сосудистые сети.

трехуровневый план строения сосудистой системы кожи определяется наличием папиллярного, субпапиллярного и субдермального

сплетений. Выполненное исследование показало, что интенсивность реваскуляризации слоев кожи существенно зависит от направленности и величины изменений площади лоскута. В данной экспериментальной модели в момент репозиции лоскута у 14,3% животных выявлена его экстензия и элонгация, у остальных 85,7% — первичная контракция. В послеоперационном периоде у 82,1% животных площадь лоскута менялась в направлении приближения к шаблону (в группе 1 уменьшались первичные экстензия и элонгация, а в группах 2 и 3 — контракция). Только в группе 4 (17,9% опытов) развилась вторичная контракция, основным причинным фактором которой явились более выраженные реперфузионные повреждения сосудистого русла лоскута, о чем свидетельствует более чем двукратное (по сравнению с группой 1) увеличение доли экстравазаций. Наилучшие клинические показатели приживления лоскута (наименьший

Таблица 3

Гистоморфометрические характеристики кожи лоскутов (Ме (01; 03))_

Группа /параметр 0 условная норма 1 2 3 4

Толщина эпидермиса (мкм) 19,85 12,890 17,28* 11,96012 27,020123

(15,50; (8,88; (13,38; (11,96; (19,51;

25,15) 19,19) 24,22) 21,02) 50,70)

Количество сосочков дермы 15,88 12,740 15,9301* 19,11012 15,920123*

(в 1 мм длины среза) (7,94; (9,56; (9,56; (15,93; (6,37;

15,89) 15,93) 22,30) 25,49) 19,12)

Толщина дермы (мкм) 526,42 549,630 492,501* 549,64012 570,34023

(481,11; (432,82; (380,22; (496,97; (476,34;

728,25 767,12) 691,61) 648,11) 662,03)

Число ядросодержащих профилей 1159,47 1743,590 1538,460 1333,330 1846,150123

клеток дермы (мм2) (8002,22; (1230,77; (1128,21; (1128,21; (1435,90;

1434,36) 2461,54) 2153,85) 1743,59) 2461,54)

Объемная плотность коллагеновых 61 63* 5901 62 6001

волокон дермы (%) (57; 67) (58; 67) (51; 64) (55; 65) (51; 65)

Объемная плотность эластических 3 50 60 4012 8013

волокон дермы (%) (1; 5) (3; 8) (3; 10) (2; 5) (4; 10)

Численная плотность 36,44 19,500 21,2201 19,0001 14,500123

придатков кожи (1 мм2) (22,36; (17,00; (12,06; (19,00; (11,00;

56,47) 31,50) 27,00) 24,00) 18,50)

Численная плотность капилляров 30,64 56,410 41,030 26,6712* 34,0012*

дермы (1 мм2) (15,24; (37,74; (33,85; (12,31; (19,49;

46,25) 66,67) 64,62) 51,28) 57,13)

Толщина гиподермы (мкм) 361,95 240,500 201,5301 229,31012 166,100123

(288,59; (107,65; (146,73; (167,74; (121,46;

iНе можете найти то, что вам нужно? Попробуйте сервис подбора литературы.

430,22) 309,24) 270,85) 302,43) 352,17)

Объемная плотность 58 420 3301 29012 210123

адипоцитов гиподермы (%) (40; 61) (33; 49) (26; 43) (18; 44) (9; 31)

Объемная плотность 18 250 260 36012 340123

коллагена гиподермы (%) (11; 27) (20; 35) (20; 35) (26; 42) (27; 43)

Объемная плотность 2 30 41* 4012 100123

эластина гиподермы (%) (2; 3) (2; 4) (2; 6) (2; 7) (7; 11)

Численная плотность 100,46 164,350 117,9501 107,6912 152,100123

капилляров гиподермы (1 мм2) (80,75; (146,15; (102,56; (82,05; (107,69;

128,56) 205,64) 189,74) 143,59) 201,49)

Примечание: надстрочный индекс порядкового номера; * — отсутствие

— статистически значимые отличия групп 1-4 от групп меньшего статистически значимых отличий от нормальной кожи.

индекс дефектов эпидермиса и наибольшая площадь выжившей кожи) отмечены в группе с увеличением площади лоскута, что обусловлено наибольшими показателями реваскуляризации субпапиллярного и субдермального сосудистых сплетений, однако гистоморфометрическая оценка свидетельствует о выраженной атрофии капилляров папиллярного сплетения и гипоплазии эпидермиса, что указывает на снижение его жизнеспособности. В группе с выраженной первичной и незначительной остаточной контракцией отмечены незначительные дефекты эпидермиса в зонах замедленного раневого заживления, гистоморфометрическая оценка свидетельствовала об оптимальном состоянии поверхностных слоев кожи, однако в гиподерме отмечено снижение объемной плотности ади-поцитов в результате атрофии и постишемиче-ского некроза. Последнее явление усугубляется в группе со значительной остаточной контракцией и особенно в группе с вторичной контракцией. Поскольку показатели лейкоформулы не выходили за границы референсного диапазона, можно предположить, что в данных экспериментах некроз подкожной жировой клетчатки протекал как саморазрешающееся осложнение, хотя в клинике он может сопровождаться развитием септического состояния [11]. ИНА в конце опыта был снижен до характерного для белых крыс критического предстрессового уровня [5] в группе с вторичной контракцией. ИИР, отражающий соотношение лимфокино-вых и монокиновых регуляторных влияний [5], не имел значимых отличий от дооперационных значений ни в одной из групп.

Заключение

При первичном и остаточном увеличении по сравнению с шаблоном площади васку-ляризованного кожно-фасциального лоскута развивается атрофия капилляров папиллярного сплетения и гипоплазия эпидермиса, однако гиперваскуляризация гиподермы и дермы предопределяет наилучшие показатели приживления, раневого заживления и относительную сохранность глубоких структур кожи. Уменьшение первичной контракции лоскута в послеоперационном периоде способствует гиперваскуляризации дермы и поддержанию нормопластического состояния эпидермиса. Значительная остаточная контракция (20% и более) увеличивает вероятность замедленного раневого заживления и краевого некроза, а также выраженность фиброза и эластоза гиподермы. выраженная вторичная контракция (30% и более) сопровождается частичным

некрозом васкуляризованных лоскутов, ги-перваскуляризация гиподермы обусловлена ее постнекротическим замещением созревающей грануляционной тканью. Полученные результаты обосновывают необходимость мониторинга изменений площади васкуляризованных кож-но-фасциальных лоскутов с целью разработки индивидуально ориентированных протоколов терапии, модулирующей пролиферативную активность эпидермиса и реваскуляризацию сосудистых сплетений кожи.

Финансирование

Работа поддержана программой Министерства здравоохранения россии в рамках государственного задания Российского научного центра «Восстановительная травматология и ортопедия» им. акад. Г.А. Илизарова для выполнения НИР на 2015-2017 гг.

Конфликт интересов

Авторы заявляют, что конфликт интересов отсутствует.

Одобрение комитета по этике

Исследование одобрено Локальным Этическим Комитетом Российского научного центра «Восстановительная травматология и ортопедия» им. акад. Г.А. Илизарова.

ЛИТЕРАТУРА

1. Harrison CA, MacNeil S. The mechanism of skin graft contraction: an update on current research and potential future therapies. Burns. 2008 Mar;34(2):153-63. doi: 10.1016/j.burns.2007.08.011

2. Stell PM. Retraction of skin flaps. Clin Otolaryngol Allied Sci. 1982 Feb;7(1):45-49. doi: 10.1111/j.1365-2273.1982.tb01560.x

3. Seo H, Kim S, Cordier F, Choi J, Hong K. Estimating dynamic skin tension lines in vivo using 3D scans. Computer Aided Design. 2013 Feb;45(Is 2):551-55. doi: 10.1016/j.cad.2012.10.044

4. Щудло НА, Щудло ММ, Сбродова ЛИ, Варсегова ТН. Взаимосвязь степени контракции васкуляри-зованного кожно-фасциально-жирового лоскута с качеством его приживления после полуторачасовой ишемии и реперфузии. Успехи Соврем Естествознания. 2015;(6):86-90. https://www.natural-sciences.ru/ru/ article/view?id=35461

5. Пахрова ОА, Криштоп ВВ, Курчанинова МГ, Румянцева ТА. Лейкоцитарные показатели крови при адаптации к острой экспериментальной гипоксии головного мозга в зависимости от уровня стрессо-устойчивости. Соврем Проблемы Науки и Образования. 2016;(6): 231. https://www.science-education.ru/ru/ article/view?id=25925

6. Гонохова МН, Ланичева АХ, Степанов СС, Сем-ченко ВВ. Структурно-функциональные изменения

эпидермиса и дермы кожи белых крыс после высококинетического механического повреждения. Вестн Омск Гос Аграр Ун-та. 2011;(2):41-45. https:// cyberleninka.ru/article/v/strukturno-funktsionalnye-izmeneniya-epidermisa-i-dermy-kozhi-belyh-krys-posle-vysokokineticheskogo-mehanicheskogo-povrezhdeniya

7. Arner M, Möller K. Morbidity of the pedicled groin flap. A retrospective study of 44 cases. Scand J Plast Re-constr Surg Hand Surg. 1994 Jun;28(2):143-46. https:// doi.org/10.3109/02844319409071192

8. Lie KH, Barker AS, Ashton MW. A classification system for partial and complete DIEP flap necrosis based on a review of 17,096 DIEP flaps in 693 articles including analysis of 152 total flap failures. Plast Re-constr Surg. 2013 Dec;132(6):1401-8. doi: 10.1097/01. prs.0000434402.06564.bd

9. Luccioli GM, Kahn DS, Robertson HR. Histologic study of wound contraction in the rabbit. Ann Surg. 1964 Dec;160(6):1030-40. https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/ articles/PMC1408875/?page=1

10. Stephenson AJ, Griffiths RW, La Hausse-Brown TP. Patterns of contraction in human full thickness skin grafts. Br J Plast Surg. 2000 Jul;53(5):397-402. doi: 10.1054/ bjps.2000.3335

11. Coban YK, Kurutas EB, Ciralik H. Ischemia-reper-fusion injury of adipofascial tissue: an experimental study evaluating early histologic and biochemical alterations in rats. Mediators Inflamm. 2005 Oct 24;2005(5):304-308. doi: 10.1155/MI.2005.304

REFERENCES

1. Harrison CA, MacNeil S. The mechanism of skin graft contraction: an update on current research and potential future therapies. Burns. 2008 Mar;34(2):153-63. doi: 10.1016/j.burns.2007.08.011

2. Stell PM. Retraction of skin flaps. Clin Otolaryngol Allied Sci. 1982 Feb;7(1):45-49. doi: 10.1111/j.1365-2273.1982.tb01560.x

3. Seo H, Kim S, Cordier F, Choi J, Hong K. Estimating dynamic skin tension lines in vivo using 3D scans. Computer Aided Design. 2013 Feb;45(Is 2):551-55. doi: 10.1016/j.cad.2012.10.044

Адрес для корреспонденции

640014, Российская Федерация, г. Курган, ул. М. Ульяновой, д. 6., Российский научный центр

«Восстановительная травматология и ортопедия» им. акад. Г.А. Илизарова, клинико-экспериментальная лаборатория реконструктивно-пластической микрохирургии и хирургии кисти, тел. раб.: +7-3522 45-18-12, e-mail: nshchudlo@mail.ru, Щудло Наталья Анатольевна

Сведения об авторах

Щудло Наталья Анатольевна, д.м.н., главный научный сотрудник первого научно-клинического отдела, Российский научный центр «Восстановительная травматология и ортопедия» им. акад. Г.А. Илизарова, г. Курган, Российская Федерация. http://orcid.org/0000-0001-9914-8563 Варсегова Татьяна Николаевна, к.б.н., старший

4. Schudlo NA, Schudlo MM, Sbrodova LI, Varsegova TN. Correlation of the degree of contraction of a fas-ciocutaneous fat flap with its engraftment quality after 1,5-hour ischemia and reperfusion. Uspekhi Sovrem Estest-voznaniia. 2015;(6):86-90. https://www.natural-sciences. ru/ru/article/view?id=35461 (in Russ.)

5. Pakhrova OA, Krishtop VV, Kurchaninova MG, Rumyantseva TA. Changes of blood leukocyte indices under acute experimental cerebral hypoxia in rats with different levels of stress resistance. Sovrem Proble-my Nauki i Obrazovaniia. 2016;(6): 231. https://www. science-education.ru/ru/article/view?id=25925 (in Russ.)

6. Gonohova MN, Lanicheva AH, Stepanov SS, Semchenko VV. Structurally functional changes of white rats skin epidermis and derma after high kinetic mechanical damage. Vestn Omsk Gos Agrar Un-ta. 2011;(2):41-45. https://cyberleninka.ru/article/v/ strukturno-funktsionalnye-izmeneniya-epidermisa-i-dermy-kozhi-belyh-krys-posle-vysokokineticheskogo-mehanicheskogo-povrezhdeniya (in Russ.)

7. Arner M, Möller K. Morbidity of the pedicled groin flap. A retrospective study of 44 cases. Scand J Plast Re-constr Surg Hand Surg. 1994 Jun;28(2):143-46. https:// doi.org/10.3109/02844319409071192

8. Lie KH, Barker AS, Ashton MW. A classification system for partial and complete DIEP flap necrosis based on a review of 17,096 DIEP flaps in 693 articles including analysis of 152 total flap failures. Plast Re-constr Surg. 2013 Dec;132(6):1401-8. doi: 10.1097/01. prs.0000434402.06564.bd

9. Luccioli GM, Kahn DS, Robertson HR. Histologic study of wound contraction in the rabbit. Ann Surg. 1964 Dec;160(6):1030-40. https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/ articles/PMC1408875/?page=1

10. Stephenson AJ, Griffiths RW, La Hausse-Brown TP. Patterns of contraction in human full thickness skin grafts. Br J Plast Surg. 2000 Jul;53(5):397-402. doi: 10.1054/ bjps.2000.3335

11. Coban YK, Kurutas EB, Ciralik H. Ischemia-reper-fusion injury of adipofascial tissue: an experimental study evaluating early histologic and biochemical alterations in rats. Mediators Inflamm. 2005 Oct 24;2005(5):304-308. doi: 10.1155/MI.2005.304

Address for correspondence

640014, The Russian Federation,

Kurgan, M. Ulyanova Str., 6,

Russian Ilizarov Scientific Center

of Restorative Traumatology and Orthopedics,

Clinical and Experimental

Laboratory of Reconstructive-Plastic

Microsurgery and Hand Surgery,

Tel. office: +7-3522 45-18-12

e-mail: nshchudlo@mail.ru,

Natal'ya A. Shchdlo

Information about the authors

Shchdlo Natal'ya A., MD, Chief Researcher of the First Scientific and Clinical Department, Russian Ilizarov Scientific Center of Restorative Traumatology and Orthopedics, Kurgan, Russian Federation. http://orcid.org/0000-0001-9914-8563 Varsegova Tatiana N., PhD, Senior Researcher of the Morphology Laboratory, Russian Ilizarov Scientific

научный сотрудник лаборатории морфологии, Российский научный центр «Восстановительная травматология и ортопедия» им. акад. Г.А. Илизарова, г. Курган, Российская Федерация. http://orcid.org/0000-0001-5430-2045 Щудло Михаил Моисеевич, д.м.н., ведущий научный сотрудник первого научно-клинического отдела, Российский научный центр «Восстановительная травматология и ортопедия» им. акад. Г.А. Илизарова, г. Курган, Российская Федерация. http://orcid.org/0000-0003-0661-6685 Сбродова Людмила Ивановна, к.б.н., научный сотрудник научно-клинической лаборатории микробиологии и иммунологии, Российский научный центр «Восстановительная травматология и ортопедия» им. акад. Г.А. Илизарова, г. Курган, Российская Федерация. http://orcid.org/0000-0002-7407-6791 Ступина Татьяна Анатольевна, д.б.н., старший научный сотрудник лаборатории морфологии, Российский научный центр «Восстановительная травматология и ортопедия» им. акад. Г.А. Илиза-рова, г. Курган, Российская Федерация. http://orcid.org/0000-0003-3434-0372

Информация о статье

Поступила 7 июля 2017 г. Принята в печать 22 января 2018 г. Доступна на сайте 15 июня 2018 г.

Center of Restorative Traumatology and Orthopedics, Kurgan, Russian Federation. http://orcid.org/0000-0001-5430-2045 Shhudlo Mixail M., MD, Leading Researcher of the First Scientific and Clinical Department, Russian Il-izarov Scientific Center of Restorative Traumatology and Orthopedics, Kurgan, Russian Federation. http://orcid.org/0000-0003-0661-6685 Sbrodova Lyudmila I., PhD, Researcher of the Scientific and Clinical Laboratory of Microbiology and Immunology, Russian Ilizarov Scientific Center of Restorative Traumatology and Orthopedics, Kurgan, Russian Federation. http://orcid.org/0000-0002-7407-6791 Stupina Tatyana A., DS, Senior Researcher of the Morphology Laboratory, Russian Ilizarov Scientific Center of Restorative Traumatology and Orthopedics, Kurgan, Russian Federation. http://orcid.org/0000-0003-3434-0372

Article history

Arrived 07 July 2017

Accepted for publication 22 January 2018

Available online 15 June 2018

i Надоели баннеры? Вы всегда можете отключить рекламу.